沙氏、T-M培养基在阴道念珠菌检测中的效果分析

目的：探讨T—M，沙氏2种培养基和直接镜检对阴道念珠菌感染的诊断价值。方法：对110例门诊阴道炎患阴道、宫颈分泌物标本进行2种培养基平行培养、其中59例同时涂片直接镜检。结果：对念珠菌的检出，沙氏培养法检出率为44.55％(49／100)，T—M培养为40．00％(44／110)，镜检为23．73％(14／59)。结论:直接镜检受主、客观因素影响，检测敏感性低，作为标准淋球菌培养的T—M培养基，对阴道念珠菌感染有较好的检出。在提高阴道炎念珠菌检出率的同时，需注明检出方法、及直接镜检中假菌丝出现的情况，供临床医生参考临床症状和体征来诊断。     

蒙古沙鼠幽门螺杆菌感染动物模型的建立

目的 :建立稳定、可靠的幽门螺杆菌 (Hp) NCTC11637株和临床分离的 Y0 6株沙鼠感染模型 ,观察感染沙鼠胃粘膜组织的病理改变。方法 :蒙古沙鼠随机分成 6组标准菌株组 (n=6)和 6组临床菌株组 (n=6) ,另设置 6组阴性对照 (n=4 )。用布氏肉汤配制哥伦比亚血琼脂培养的 NCTC11637株和 Y0 6株菌液。标准菌株组和临床菌株组各3组用 2× 10 8CFU/ ml菌液 0 .5 ml1次灌胃。标准菌株组和临床菌株组各 3组分别用 2× 10 9CFU/ ml菌液 0 .5 ml灌胃 ,连续 3次 ,每次间隔 2 4 h。末次感染后的第 2、4、6周处死沙鼠 ,取胃粘膜组织标本进行尿素酶试验、分离培养、常规病理学和 Hp免疫组化检查。结果 :1次感染的标准菌株组和临床菌株组第 2、4、6周的感染率分别为 0 %、0 %、66.7%和 0 %、16.7%、16.7%。 3次感染的标准菌株和临床菌株组第 2、4、6周的感染率分别为 66.7%、10 0 %、10 0 %和 66.7%、66.7%、10 0 %。分离结果阳性的感染动物胃粘膜细胞表面和胃小凹有 Hp定植 ,固有层出现少量慢性炎症细胞的浸润。结论 :高浓度 (1× 10 9CFU) Hp多次经口感染沙鼠可制备稳定、可靠的幽门螺杆菌感染动物模型 ,感染动物胃粘膜组织有 Hp定植并出现轻度的炎症反应。     

Gastric acid secretion in Helicobacter pylori positive and negative dyspeptic Nigerians

The pathological role of Helicobacter pylori is largely unproven in our region of high incidence of infection but very low incidence of serious gastroduodenal lesions. The aim of this study was to investigate the effect of H. pylori infection on gastric acid secretion. One week after gastroduodenoscopy, basal and pentagastrin (8 micrograms/kg) stimulated gastric acid secretion were measured in 39 dyspeptic Nigerians. H. pylori status was determined using urease test, culture, histology and serology, while gastritis was assessed using the Sydney system criteria. The median maximal acid output (MAO) and peak acid output (PAO) in mmol/h were significantly higher in H. pylori positive (29.3, range 7.4-81.6 and 34.4, range 7.6-144.0) than in H. pylori negative (16.6, range 4.2-44.1 and 22.4, range 5.6-48.6) patients, p = 0.019 and p = 0.029, respectively. Stimulated gastric acid secretion was significantly higher in patients with duodenal ulcer (n = 8) than in H. pylori negative (n = 11) patients, but was similar in non-ulcer dyspeptics (n = 20) and H. pylori negative patients. The median basal acid output was not significantly different between the groups of patients. Our patients (median age 32 years) had normal mucosa (12.1%), pangastritis with corpus predominance (12.1%), antrum-only gastritis (24.3%) and pangastritis with antral predominance (51.5%). In the subset of H. pylori positive patients (n = 28, 71.8%), there were no significant correlations between grade of antral chronic inflammation, gastritis index score, anti-H. pylori IgG titre and gastric acid secretion, p > 0.05. H. pylori infection increases MAO and PAO in our relatively young patients with antral predominant chronic gastritis.     

液体培养基快速分离结核杆菌的效果评价

目的　评估结核杆菌快速分离液体培养基的分离效果。　方法　采用传统的罗 -琴氏培养基与快速液体分离培养基平行对照分离临床标本 ,比较其分离阳性率 ,以评价其分离效率。　结果　液体培养基对 14 2份临床标本总的分离阳性率为 2 3 94% ( 3 4/14 2 ) ,对 12 5份痰标本的分离阳性率为 2 6 4% ( 3 3 /12 5 )。 3 8份标本用罗 -琴氏培养基和液体培养基进行平行接种 ,结果两者的分离阳性率分别为 10 5 3 % ( 4 /3 8)和 3 1 5 8% ( 12 /3 8) ,后者明显高于前者 (x2 =9 686,P<0 0 1) ;阳性结果出现时间 ,前者最早为 2 2d ,平均 2 5 5d ,后者最早 6d ,平均 12 67d ,两者差异有显著性意义 (t =1 90 3 1,P <0 0 5 )。　结论　应用结核杆菌快速液体分离培养基可以明显提高分离阳性率和缩短培养时间     

球形幽门螺杆菌生物学性状及蛋白产物研究球形Hp系列研究之二

目的：研究球形幽门螺杆菌生物学性状和蛋白产物发生的改变。方法：通过延长培养时间和亚抑菌浓度抗生素－－灭滴灵的作用，分别获得两类球形幽门螺杆菌（Ｈｐ）。结果：两种不利于Ｈｐ生长的环境在引起Ｈｐ发生球变的同时，每毫升菌落形成单位（ＣＦＵ／ｍｌ）减少，尿素酶活性降低。结论：球形Ｈｐ尿素酶活性低下，且在常规培养基上不能生长。抗生素的作用比延期培养更快使Ｈｐ发生球形变异。聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白质条带分析发现抗生素诱变的球形Ｈｐ与正常形态Ｈｐ基本相似，与延期培养的Ｈｐ明显不同。     

幽门螺杆菌丝状体的形成和回复性的研究

目的：探讨幽门螺杆菌在不利环境因素作用下是否可以球形体以外的其他单细胞形式生存。方法：运用幽门螺杆菌于自然界或体内可能遭遇到的胁迫条件，如抗生素、酸性环境和水体为诱导因素作用于幽门螺杆菌，观察其形态学转变和菌体蛋白的表达状况。结果：在亚致死剂量胺曲南和氨苄青霉素作用下，幽门螺杆菌可形成丝状体，当去除抗生素后，幽门螺杆菌丝状体可逐步回复成螺旋状的繁殖体．丝状体经免疫组化法和DNA酶切图谱法进行特异性鉴定呈阳性，幽门螺杆菌丝状体也可见于水体中，与螺旋状幽门螺杆菌相比，丝状体在双向电泳上的菌体蛋白表达谱有改变。结论：丝状体的形成作为幽门螺杆菌生命周期的一个时相，可能是该菌抗逆生存的适应性调节机制，对幽门螺杆菌传播和感染复发的机制尚需进一步研究。     

三种沙门菌分离培养基的性能评价

目的对XLD琼脂、SS琼脂、HE琼脂3种沙门菌分离培养基的性能进行评价。方法选取3个不同批次的待测样品,以生长率、选择性和特异性为测试指标,分别重复测定20次。结果标准菌株鼠伤寒沙门菌CMCC(B)50115和福氏志贺菌CMCC(B)51572在SS琼脂、XLD琼脂、HE琼脂上三批次培养基中的生长率均大于0.5,且三批次间差异无统计学意义(P>0.05);亚利桑那沙门菌CMCC(B)47001在XLD琼脂上三批次培养基中的生长率均在0.9以上,三批次间差异亦无统计学意义(P>0.05)。3株目标菌在受试三批次培养基上均呈现正常的生理生化特性,形成具特征性的菌落。粪肠球菌ATCC29212在3种培养基上生长均受抑制。结论根据ISO/TS11133.2-2003培养基的性能评价标准判断,XLD琼脂、SS琼脂、HE琼脂培养基均符合标准要求,整体性能稳定、一致。     

改良血琼脂的评价与应用

目的 :评价改进配方后的血琼脂平皿细菌分离效果 ,将之应用于临床标本的检测 ,提高苛养菌的检出 ,借以提高总体阳性率。方法 :对 2 9株已知分别来自不同科属的细菌进行GI值的测定和比较 ;采用羊血琼脂和改良血琼脂对2 0 0 0份临床标本 (大便标本除外 )进行测试 ,统计和比较苛养菌的分离率差异及细菌在这两种培养基上的菌落特征一致率。结果 :2 9株已知菌在改良血琼脂培养基上的GI值明显高于传统羊血琼脂培养基 (t =6.72 ,P <0 .0 0 1)。对 2 0 0 0份标本苛养菌的分离率 ,改良血琼脂明显高于羊血琼脂 ( χ2 =394,P <0 .0 5 ) ;细菌菌落特征一致率 96 7%。结论 :改良血琼脂培养基的分离率高且不改变菌落特征。使用该培养基可有效提高分离率 ,大大减少苛养菌的漏检     

幽门螺杆菌L型及其致病性

目的：对幽门螺杆菌L型的生物学特性与致病性进行研究。方法：在体外用羧苄西林诱导幽门螺杆菌形成L型以研究其生物学特性，分别取幽门螺杆菌原菌与L型感染实验小鼠以测定其生物学特性与致病性。取136份胃癌与30份慢性胃炎患者标本进行组织学检查和细菌分离。结果：体外诱导的L型与原菌在特性上差别很大，但仍能以免疫酶染色与PCR法识别，实验动物感染，在体内的L型呈圆球体，大多在胃与十二指肠黏膜引起间质性炎症，一只腺脏并见有恶性病变，临床胃癌标本检查见L型亦呈圆球体状，77.3%患者幽门螺杆菌抗原阳性。慢性胃炎胃液分离，除见有幽门螺杆菌外，并有多种细菌和L型存在。结论：幽门螺杆菌L型形态多变，其中以圆球体多见于病原部位。且导致间质性和肿瘤的形成。但与慢性胃炎的关系尚有待进一步研究。     

大蒜油抑制幽门螺杆菌感染BALB/c小鼠实验研究

目的：研究大蒜油对BALB／c小鼠感染H．pylori根除治疗作用，探索新的理想的抗H．pylori药物。方法：将建立H．pylori感染BALB／c小鼠模型60只分成3组，阴性药物对照组（20只）、大蒜油治疗组（20只）和感染模型对照组（20只）；另取无H．pylori感染BAIB／c小鼠20只为正常对照组，治疗1、4周后分别抽取10只剖杀，取其胃粘膜组织进行快速尿素酶实验、细菌学培养和组织病理学Warthin-Starry银染，观察小鼠H．pylori感染率、根除率和胃内定植情况。结果：大蒜油治疗组1周后有6只小鼠胃内的H．pylori被根除，根除率为60％（6／10），1个月后有7只小鼠胃内的H．pylori被根除，根除率为70％（7／10），两批小鼠总的根除率为65％（13／20），阴性药物对照组及感染模型对照组的小鼠胃内均有H．pylori生长；而无H．pylori感染的正常对照组未见H．pylori生长。结论：大蒜油治疗H．pylori感染小鼠疗效显著（根除率为65％）。无明显毒副反应。     

兰索拉唑用药前后幽门螺杆菌在胃内分布的变化

目的: 探讨抑酸药兰索拉唑对幽门螺杆菌Helicobacter pylori(简称H.pylori)在胃内分布的影响.方法: 检查43例有H.pylori感染的十二指肠溃疡患者在服用兰索拉唑前后的胃镜活检组织切片,活检部位分别为窦小弯及体大弯,对活检组织切片做HE及Warthin-Starry嗜银染色,观察窦体两部位H.pylori检出率、密度及胃炎活动程度的变化.结果: (1)窦小弯用药前、用药后4周及3个月H.pylori的检出率分别为93.02%,58.14%和86.05%,用药后4周H.pylori检出率及密度明显低于用药前及用药后3个月(均P<0.01).(2)体大弯用药后4周和3个月H.pylori的密度较用药前增加.(3)窦小弯用药后4周胃炎活动性的检出率明显低于用药前及用药后3个月,胃炎活动程度也轻于后两者.(4)体大弯用药后4周和3个月胃炎活动性检出率较用药前增加,胃炎活动程度也加重.(5)窦小弯及体大弯用药前后胃炎活动性与H.pylori检出率之间变化呈正相关(分别为r=0.995 1,r=0.960 8).结论: 兰索拉唑可使幽门螺杆菌在胃内的定植部位发生改变,窦小弯H.pylori检出率下降、密度减少,而体大弯密度增加,此种影响在用药后1个月左右最为明显,胃炎活动性与H.pylori检出率的变化关系密切.     

对比性评价三种分离小肠结肠炎耶氏菌培养基

目的：寻找一种分离小肠叶肠炎耶氏菌的高效选择鉴别培养基。方法：收集７０份猪粪便标本进行小肠结肠炎耶氏菌的分离;将这７０份标本用划线法种入三种选择鉴别培养基;Ｓ．Ｓ琼脂平板、麦康凯琼脂平板、ＣＩＮ琼旨平板。分离出５株小肠发火 耶氏菌,血清型０３,生物型３,ＶＰ阴性变异株。然后比较这三种培养基的分离率。结果：ＣＩＮ琼 分离率最高（１００％）,麦康凯琼脂的分离率最低（１６％）。结论：分离小肠结肠炎耶氏菌     

幽门螺杆菌粪便抗原检测在儿童中的应用价值研究

目的：幽门螺杆菌粪便抗原（Helicobacter pylori stool antigen，HpSA）检测诊断儿童Hp感染的应用价值进行探讨。方法：以快速尿素酶、组织学和细菌培养作为诊断的Hp的金标准（快速尿素酶试验、组织学和细菌培养其中2项阳性判定为Hp阳性，细菌培养1项为阳性也判定为Bp阳性），采用ELISA法检测40例因上消化道症状接受胃镜检查患儿的HpSA，评价HpSA检测诊断儿童Hp感染的敏感性、特异性。同时在29例患儿中以^13C-UBT作对照，评价HpSA检测诊断Hp感染的准确性。结果：在40例患儿中，HpSA检测的敏感性、特异性和准确性分别94.44%，90.91%和92.50%；在29例患儿中以^13C-UBT作标准，HpSA检测诊断Hp感染敏感性、特异性和准确性分别为91.67%，88.23%和89.66%。结论：HpSA检测是一种方便、简单、准确的诊断儿童Hp感染的方法。     

反流性食管炎患者的幽门螺杆菌感染

目的探讨幽门螺杆菌在反流性食管炎发病中的作用.方法选择有典型反流症状的患者并经胃镜检查诊断为反流性食管炎53例作为病例组,无典型反流症状的患者并经胃镜检查诊断为慢性胃炎25例作为对照组,分别取食管下端黏膜及胃窦黏膜各3块,并分别行快速尿素酶试验、病理Hp检查和Hp培养,食管及胃窦黏膜Hp菌株应用PCR方法行cagA基因、vacA基因检测.结果病例组、对照组中食管黏膜的Hp阳性率分别为14/53（26.4%）、8/25（32%）,两者差异无显著性（P＞0.05）;胃窦黏膜的Hp阳性率分别为20/53（37.8%）、16/25（64%）,两者差异有显著性（P＜0.05）;病例组中胃窦黏膜Hp的cagA＋检出率（6/20,30%）明显低于对照组（10/16,62.5%）（P＜0.05）,而vacA＋检出率分别为6/20（30%）、7/16（43.8%）,两者差异无显著性（P＞0.05）.不同程度食管炎中食管黏膜Hp阳性率差异无显著性（P＞0.05）,胃窦黏膜Hp阳性率差异有显著性（P＜0.01）,而cagA＋及vacA＋的Hp菌株的差异无显著性（P＞0.05）,但cagA＋菌株多见于程度轻的食管炎.结论食管黏膜中检测到的Hp可能来源于胃窦黏膜的Hp,胃窦Hp感染、尤其是cagA＋的Hp感染可能在RE的发生中有一定的保护作用.     

幽门螺杆菌刺激胃癌细胞株SGC-7901分泌白细胞介素-8过程中核因子κB的作用

目的　探讨胃上皮细胞在幽门螺杆菌 (Hp)刺激下分泌白细胞介素 8(IL 8)的过程中 ,核因子 κB(NF κB)的作用。方法　电穿孔法将I κBαM(NF κB抑制蛋白 )基因转染入SGC 790 1中 ,β半乳糖苷酶分析转染效率 ,Western印迹分析I κB基因的表达。将不同浓度的Hp活菌、灭活菌及液体培养上清分别与稳定转染I κB的胃癌细胞株SGC 790 1及其空白质粒对照共同孵育 ,凝胶电泳迁移率变迁分析 (EMSA)和NF κB荧光素酶报告基因分析检测不同时间细胞内NF κB的激活 ,ELISA法检测不同时间细胞上清中IL 8的水平。结果　得到了稳定表达I κB的SGC 790 1细胞 ,命名为SGC790 1 I κB细胞 ,其空白质粒对照命名为SGC790 1 neo。Hp活菌刺激的SGC790 1 neo在 2h和 4h时可检测到明显的NF κB激活 ,灭活菌和液体培养上清刺激下无激活 ;Hp活菌、灭活菌和培养上清刺激下SGC 790 1 I κB内均无NF κB激活。 4h时 ,2× 10 7Hp/ml的Hp活菌刺激下即可检测到SGC790 1 neo内明显的IL 8分泌 ,并有时间 剂量依赖效应 ;灭活菌和液体培养上清无此作用。Hp活菌、灭活菌和液体培养上清均不能刺激SGC790 1 I κB产生IL 8。结论　Hp诱导胃上皮细胞分泌IL 8依赖于NF κB的激活。     

几种增菌液对志贺菌增菌效果的研究

目的：筛选对志贺菌高效果增菌的增菌液。方法：应用6种增菌液对30株志贺氏菌增菌，分离培养并计数。结果：增菌6h以SS、HE增菌液增菌效果最佳，检出率皆为100％；增菌22h以SS、肠道增菌液和亚硒酸盐增菌液增菌效果最好，检出率为60％。结论：若增菌时间为6h，以HE和SS增菌液增菌效果最好；长时间增菌22-24h，以肠道增菌液，亚硒酸盐增菌液效果好。     

幽门螺杆菌对胃癌上皮细胞株AGS细胞的生长抑制作用及其分子机理探讨

目的 观察体外实验中幽门螺杆菌(Hp)对胃癌上皮细胞株AGS细胞生长的影响,探讨Hp致病的分子机理。方法 胃癌细胞系AGS细胞体外培养,加入Hp活菌后,通过形态观察、细胞计数了解细胞生长情况;通过细胞核荧光染色、细胞DNA电泳检测细胞凋亡;通过流式细胞技术观察Hp对AGS细胞周期的影响,并进一步检测相应的细胞周期素。结果 Hp对AGS细胞生长有抑制作用。加入Hp后细胞凋亡增加,并导致G1／S细胞周期阻滞,伴有细胞周期素D1表达上调。结论 Hp急性感染可抑制AGS细胞生长,此作用可能与其诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞有关。提示Hp感染能够破坏正常细胞周期调节。     

幽门螺杆菌的培养与尿素酶试验的比较

采用细菌培养法和尿素酶法分别检测了 10 2例消化道疾病患者幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori ,H .pylori)感染情况。标本经输送培养基运送、匀浆后 ,分别涂布于 3种选择性培养基和非选择性培养基上 ,38℃微需氧环境 (85 %N2 ,10 %CO2 ,5 %O2 )培养。标本同时采用尿素酶法进行检测。结果表明 ,3种细菌培养法与尿素酶法检测阳性率接近 ,分别为 4 3 1% ,39 2 % ,4 3 1%和 37 2 % ;非选择性培养基不适于H .pylori的培养检测     

Profile of Culture Positive Enteric Fever from Bangalore

Background

Enteric fever is endemic in India. The aim of this study was to analyse the clinical, laboratory, antibiotic sensitivity profile and response to antibiotics of culture positive enteric fever patients from Bangalore.

Methods

In this retrospective study only culture positive enteric fever patients were taken and their clinical, laboratory, antibiotic sensitivity profile and the clinical response to antibiotics studied.

Result

Eighty one culture positive enteric fever patients were taken into the study. Presenting symptoms included fever, pain abdomen (18.5%), loose stools (25%), vomiting (33%) and headache (30%). Absolute bradycardia at admission was not found in any of our patients. Normal or low total leucocyte count was seen in 97.5%. Typhoid hepatitis was seen in 8.5%. Salmonella enterica subspecies enterica serovar typhi (S typhi) were isolated in 80% of cases; 83% of all cases showed nalidixic acid resistance. All isolates were sensitive to chloramphenicol and third generation cephalosporins. Ciprofloxacin resistance was found in 19% cases. The time to defervescence in patients treated with ceftriaxone was 4.3 days. There was no statistical difference in time to defervescence in nalidixic acid resistant and sensitive strains. Complications included gastro intestinal bleed and encephalopathy. Conclusion: Prevalence of nalidixic acid resistance is high, while clinical resistance to quinolones may be higher than that found in the laboratory which requires detailed study. Chloramphenicol sensitivity has returned and nalidixic acid resistant and sensitive isolates are uniformly sensitive to third generation cephalosporins with no difference in time to defervescence.Key Words: Enteric fever, Nalidixic acid resistance, Ciprofloxacin resistance, Time to defervescence     

幽门螺杆菌分离培养技术的改进

探讨自制的改良布氏活性炭巧克力培养基,置厌氧罐蜡烛培养环境分离临床粘膜标本幽门螺杆菌(Hp)的检出率.结果表明66例粘膜标本中分离出Hp54株(81.8%),44株Hp滤液有24株(54.5%)具有细胞毒活性,其中26例消化性溃疡患者有18例(69.2%),18例慢性胃炎患者有6例(33.3%)为Hp(Toxin+)感染.结果提示通过对Hp生物学性状和毒素的检测结果证实,该法可用于临床粘膜标本Hp的常规分离培养.