DNA修复相关蛋白与肺癌顺铂耐药的关系

目的研究DNA修复相关蛋白ERCC1、BRCA1和hMLH1与肺癌顺铂耐药的关系。方法应用免疫组化链霉素抗生物素蛋白——过氧化物酶连接法检测60例肺癌组织中ERCC1、BRCA1和hMLH1蛋白的表达,分析其与临床病理特征和顺铂耐药的关系及3种DNA修复蛋白的相关性。结果60例肺癌组织ERCC1、BRCA1、hMLH1蛋白的阳性表达率分别为30％、25％、68．3％。顺铂化疗耐药组ERCC1、BRCA1蛋白阳性表达率明显高于化疗敏感组（P〈0．05）。BRCA1和hMLH1蛋白的表达具有相关性（P〈0．05）。结论ERCC1、BRCA1蛋白的表达与肺癌顺铂耐药有关,可能成为预测肺癌顺铂敏感性的指标。     

切除修复交叉互补基因1在非小细胞肺癌中的表达与术后化疗疗效及预后的相关性

目的探讨切除修复交叉互补基因1(ERCC1)的表达与非小细胞肺癌(NSCLC)患者术后化疗疗效及预后的关系。方法用免疫组织化学方法检测50例ⅢA～N2期NSCLC患者病理标本中ERCC1蛋白的表达,回顾性分析ERCC1与术后化疗疗效及预后的关系。结果 ERCC1的阳性表达为46%。ERCC1阳性表达是导致ⅢA～N2期NSCLC患者无瘤生存期及总生存期缩短的主要影响因素(P<0.05)。结论 ERCCl阳性表达是影响ⅢA～N2期NSCLC患者预后的主要危险因素;ERCC1阳性表达者预后差,对铂类化疗药物耐药。     

切除修复交叉互补基因1、生存素与顺铂耐药的研究进展

顺铂耐药有多种复杂机制参与,大量研究表明DNA修复途径的关键基因切除修复交叉互补基因1和参与细胞凋亡和有丝分裂调控的生存素基因与顺铂耐药密切相关.     

非小细胞肺癌ERCC1和Rad51表达与铂类药物化疗疗效的关系

用免疫组化SP法检测53例非小细胞肺癌(NSCLC)患者铂类药物化疗后的核苷酸切除修复交叉互补组1(ERCC1)和DNA损伤修复蛋白(Rad51)的表达情况,分析ERCC1和Rad51的表达与患者中位生存时间(MST)和中位无病生存时间(DFT)的关系.结果:ERCC1和Rad51的阳性表达率分别为42.8%、57.5%,其阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤组织学类型、分期及分化程度无关(P>0.05).单一ERCC1阴性或Rad51阴性的患者MST和DFT均明显长于ERCC1阳性或Rad51阳性的患者(P均<0.05).两种蛋白均阳性表达者的MST、DFT分别短于两蛋白阴性表达者(P均<0.05).认为ERCC1和Rad51的联合检测可以预测NSCLC患者术后铂类药物辅助化疗的疗效.     

MGMT和ERCC1在胃癌及癌前病变中的表达及意义

目的探讨DNA损伤修复基因产物O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）与切除修复交叉互补基因1（ERCC1）的表达,及其与胃癌发生及生物学行为的关系。方法采用免疫组化SP法检测MGMT和ER-CC1的表达情况,并与临床病理特征相比较。结果 MGMT蛋白在轻度异型增生胃黏膜的表达率高于早期胃癌及进展期胃癌,ERCC1在正常胃黏膜的表达率高于早期胃癌及进展期胃癌。MGMT表达与胃癌分化程度、淋巴结转移有关,ERCC1与分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关。胃癌中MGMT表达与ERCC1表达呈正相关。结论 MGMT、ERCC1可能在胃癌发生中起重要作用,有可能成为判断胃癌生物学行为的有用指标。     

非小细胞肺癌核苷酸切除修复交叉互补基因1与顺铂耐药性的研究进展

肺癌已经成为死亡率最高的癌症之一,其中非小细胞肺癌(NSCLC)约占肺癌总数的80％.因为肺癌早期症状不明显且缺少标准的诊断方法,确诊时多为晚期,手术切除率低,化疗是目前治疗晚期NSCLC的主要方法[1].但是肿瘤细胞对化疗药物的耐药性往往导致治疗的失败.相关研究表明,核苷酸切除修复交叉互补基因1(ERCC1)的表达在肺癌细胞对铂类药物的耐药性中起着关键的作用.现就非小细胞肺癌中ERCC1表达对顺铂耐药性的关系作一综述.     

siRNA沉默ERCC1基因表达对结肠癌细胞奥沙利铂耐药的影响和机制

目的 采用小干扰RNA(siRNA)技术作用于人结肠癌细胞HCT116中的ERCC1,探讨其对结肠癌铂类耐药细胞株增殖、凋亡的影响。方法 体外培养结肠癌奥沙利铂耐药细胞株HCT116/L-OHP并验证其耐药性;qRT-PCR和蛋白印迹技术检测细胞和组织中ERCC1表达量的变化;采用siRNA-NC和siRNA-ERCC1转染细胞,CCK-8法检测耐药细胞的增殖能力,流式细胞术检测耐药细胞的凋亡变化。结果 结肠癌耐药组织和人结肠癌耐药细胞HCT116/L-OHP ERCC1的表达水平明显升高(P<0.05);转染siRNA ERCC1后,HCT116/L-OHP细胞中的ERCC1 mRNA和蛋白水平明显降低(P<0.05);奥沙利铂联合处理后,siRNA ERCC1转染使HCT116/L-OHP细胞的增殖活性下降、凋亡率升高。结论 siRNA能有效下调ERCC1基因表达,抑制细胞增殖,增加细胞凋亡,增强奥沙利铂对耐药细胞株HCT116/L-OHP的杀伤作用。     

RRM1和ERCC1在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨DNA修复基因家族成员ERCCl、RRM1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义。方法应用免疫组织化学PV-9000法对30例NSCLC患者肿瘤组织中的ERCC1、RRM1蛋白表达进行检测。用χ2检验、相关分析、Kaplan-Meier生存曲线进行统计分析。结果 NSCLC患者肿瘤组织中,ERCC1和RRM1表达与患者性别、年龄、分期、病理类型、是否吸烟等参数无明显相关;ERCC1和RRM1的表达呈正相关(r=0.439,P=0.027);ERCC1阴性组的总生存期和无疾病进展生存期均明显长于ERCC1阳性组,RRM1阴性组的总生存期和无疾病进展生存期均明显长于RRM1阳性组(P<0.05或<0.01)。结论 ERCC1和RRM1在NSCLC肿瘤组织中的表达具有相关性,ERCC1和RRM1低表达提示NSCLC患者生存期长、生活质量高,RRM1和ERCC1高表达者对吉西他滨+顺铂化疗耐药,可作为判断其预后的指标,指导临床个体化用药。     

胡桃醌对胃癌细胞耐药性及细胞中ANXA2、ERCC1表达和AKT/mTOR信号通路的影响

目的研究胡桃醌对胃癌细胞顺铂耐药性及细胞中膜联蛋白A2(ANXA2)和切除修复交叉互补基因1(ERCC1)表达,及对AKT/mTOR信号通路的影响。方法将BGC-823/DDP细胞株随机分为5组:对照组、胡桃醌组、顺铂组、胡桃醌联合顺铂组、LY294002(AKT抑制剂)联合顺铂组。采用MTT法和流式细胞术检测细胞活性和凋亡率,Western blotting检测细胞中相关蛋白表达。结果与对照组比较,顺铂组细胞凋亡率及细胞中Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平升高(P<0.05),而ANXA2、ERCC1、p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平降低(P<0.05);与顺铂组比较,胡桃醌不同浓度组细胞中P-gp、MRP1蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞增殖抑制率、细胞凋亡率及细胞中Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平升高(P<0.05),ANXA2、ERCC1、p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平降低(P<0.05);与顺铂组比较,LY294002处理后,细胞增殖抑制率和凋亡率升高(P<0.05)。结论胡桃醌增强胃癌细胞对顺铂的敏感性,抑制细胞中ANXA2和ERCC1表达,抑制AKT/mTOR信号通路。     

晚期非小细胞肺癌ERCC1 XRCC1基因多态性与铂类化疗疗效研究

以铂类为基础的两药化疗是晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的主要治疗手段,有效率约为30%。然而不同个体对化疗疗效和耐受性的差异巨大。机体的损伤修复系统可以修复铂类药物引起的DNA损伤,影响化疗疗效,DNA修复基因的单核苷酸构象多态性(SNP)是导致这种差异的重要原因和分子基础,ERCC1和XRCC1分别在核苷酸切     

去氢骆驼蓬碱致细粒棘球蚴DNA损伤修复相关基因表达量的检测

目的观察去氢骆驼蓬碱(HM)对细粒棘球蚴不同类型DNA损伤修复基因表达量的影响。方法以细粒棘球蚴为实验材料,以HM为药物,以虫体不同类型DNA损伤修复方式(同源重组修复、非同源末端连接修复、碱基切除修复)及核苷酸切除修复通路的关键修复基因为目的基因设计引物,筛选确定qRT-PCR反应体系,采用该体系检测基因的差异表达水平,分析HM对细粒棘球蚴不同类型DNA损伤修复相关基因的影响。结果筛选的细粒棘球蚴DNA损伤修复类型代表基因BRCA1引物F:5’-TGATTGCGACCTAAGAGAC-3’,R:5’-TTCCATACACAAGCCATCC-3’);KU70引物F:5’-TGATTGCGACCTAAGA GAC-3’,R:5’-GTCGCCATCTCAACTTCA-3’);OGG1引物5’-CGCTATGGTAAGAAGATGTG-3’,R:5’-CGTGAAGATGGATGGAGAA-3’);ERCC1引物F:5’-TCGTGCTCATTGTGTTAGT-3’,R:5’-CTCCTCTGGTGGCTTATTC-3’)。各基因扩增曲线Ct值可用,溶解曲线特异性良好。qRT-PCR检测各样品组BRCA1,KU70,OGG1基因表达均有不同程度上调,DOX组分别为26.05倍,323.44倍,29.63倍,HM组分别为7.24倍,55.65倍,3.22倍,以KU70和BRCA1基因上调尤为明显。ERCC1基因表达量DOX组显著上调(上调倍数25.24),HM组无显著变化。结论 HM对DNA双链断裂修复类型代表基因BRCA1,KU70,OGG1表达量有较大影响,而对ERCC1基因表达无显著影响。     

DNA切除修复酶的表达及与肺癌预后的关系

目的　探讨DNA切除修复鼠缺陷交叉互补基因 2 (ERCC2 )蛋白、尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)、增殖细胞核抗原 (PCNA)在不同肺组织中的表达及与肺癌预后的关系。方法　免疫组化法测ERCC2、UDG、PCNA在良性病变、癌周组织、肿瘤组织中的表达水平 ,并与临床、病理资料进行Ridit分析。结果　肿瘤组织、癌周组织ERCC2、UDG、PCNA表达与良性病变组织相比 ,差异有显著性 (P值均<0 0 5 ) ,其中ERCC2、UDG表达低于后者 ,PCNA表达高于后者 (P <0 0 0 1) ;但癌周组织中UDG的差异未达显著界值 (P >0 0 5 )。肿瘤组织与癌周组织相比 ,ERCC2、UDG、PCNA表达差异无显著性 (P值均 >0 0 5 )。年龄、吸烟、肺癌组织分型、肿瘤转移对ERCC2、UDG、PCNA的表达无显著影响 (P值均 >0 0 5 ) ,但UDG在低分化癌和肿瘤 >3cm的表达水平显著降低 (P <0 0 5 ) ,而PCNA则相反 (P <0 0 5 )。结论　UDG、PCNA的表达水平与肺癌分化、大小有关 ,可作为肺癌预后的指标。     

Impact of SNP-SNP interactions of DNA repair gene ERCC5 and metabolic gene GSTP1 on gastric cancer/atrophic gastritis risk in a Chinese population

AIM To investigate the interactions of the DNA repair gene excision repair cross complementing group 5(ERCC5) and the metabolic gene glutathione S-transferase pi 1(GSTP1) and their effects on atrophic gastritis(AG) and gastric cancer(GC) risk.METHODS Seven ERCC5 single nucleotide polymorphisms(SNPs)(rs1047768, rs2094258, rs2228959, rs4150291, rs4150383, rs751402, and rs873601) and GSTP1 SNP rs1695 were detected using the Sequenom MassA RRAY platform in 450 GC patients, 634 AG cases, and 621 healthy control subjects in a Chinese population.RESULTS Two pairwise combinations(ERCC5 rs2094258 and rs873601 with GSTP1 rs1695) influenced AG risk(P_(interaction) = 0.008 and 0.043, respectively), and the ERCC5 rs2094258-GSTP1 rs1695 SNP pair demonstrated an antagonistic effect, while ERCC5 rs873601-GSTP1 rs1695 showed a synergistic effect on AG risk OR = 0.51 and 1.79, respectively). No pairwise combinations were observed in relation to GC risk. There were no cumulative effects among the pairwise interactions(ERCC5 rs2094258 and rs873601 with GSTP1 rs1695) on AG susceptibility(P_(trend) 0.05). When the modification effect of Helicobacter pylori(H. pylori) infection was evaluated, the cumulative effect of one of the aforementioned pairwise interactions(ERCC5 rs873601-GSTP1 rs1695) was associated with an increased AG risk in the case of negative H. pylori status(P_(trend)= 0.043).CONCLUSION There is a multifarious interaction between the DNA repair gene ERCC5 SNPs(rs2094258 and rs873601) and the metabolic gene GSTP1 rs1695, which may form the basis for various inter-individual susceptibilities to AG.     

核苷酸切除修复基因表达水平与肺癌易感性关系的研究

目的 研究核苷酸切除修复基因表达水平与肺癌易感性关系,在分子水平探讨肺癌发病的相关危险因素.方法 采用病例-对照研究方法,应用实时荧光定量PCR技术检测50例原发性肺癌患者和32名健康者外周血淋巴细胞核苷酸切除修复基因(XPA、XPB、XPC、XPG、ERCC1)表达水平,分析这些基因表达水平与肺癌易感性的关系.结果 肺癌组XPB mRNA表达水平低于健康对照组(P＜0.05),XPB低表达的人群患肺癌的相对危险度是高表达人群的2.57倍.结论 XPB低表达的人群肺癌发病风险增高.     

Emodin regulating excision repair cross-complementation group 1 through fibroblast growth factor receptor 2 signaling

AIM: To investigate the molecular mechanisms underlying the reversal effect of emodin on platinum resistance in hepatocellular carcinoma. METHODS: After the addition of 10 μmol/L emodin to HepG2/oxaliplatin (OXA) cells, the inhibition rate (IR), 50% inhibitory concentration (IC 50 ) and reversal index (IC 50 in experimental group/IC 50 in control group) were calculated. For HepG2, HepG2/OXA, HepG2/OXA/T, each cell line was divided into a control group, OXA group, OXA + fibroblast growth factor 7 (FGF7) group and OXA + emodin group, and the final concentrations of FGF7, emodin and OXA in each group were 5 ng/mL, 10 μg/mL and 10 μmol/L, respectively. Single-cell gel electrophoresis was conducted to detect DNA damage, and the fibroblast growth factor receptor 2 (FGFR2), phosphorylated extracellular signal-regulated kinase 1/2 (p-ERK1/2) and excision repair cross-complementing gene 1 (ERCC1) protein expression levels in each group were examined by Western blotting. RESULTS: Compared with the IC50 of 120.78 μmol/L in HepG2/OXA cells, the IC 50 decreased to 39.65 μmol/L after treatment with 10 μmol/L emodin; thus, the reversal index was 3.05. Compared with the control group, the tail length and Olive tail length in the OXA group, OXA + FGF7 group and OXA + emodin group were significantly increased, and the differences were statistically significant (P < 0.01). The tail length and Olive tail length were lower in the OXA + FGF7 group than in the OXA group, and this difference was also statistically significant. Compared with the OXA + FGF7 group, the tail extent, the Olive tail moment and the percentage of tail DNA were significantly increased in the OXA + emodin group, and these differences were statistically significant (P < 0.01). In comparison with its parental cell line HepG2, the HepG2/OXA cells demonstrated significantly increased FGFR2, p-ERK1/2 and ERCC1 expression levels, whereas the expression of all three molecules was significantly inhibited in HepG2/ OXA/T cells, in which FGFR2 was silenced by