抗von Willebrand因子单克隆抗体的研究和应用

因子Ⅷ复合物是参与止血和凝血过程的血浆成分之一。它由两部分组成,即因子Ⅷ(FⅧ)和von Willebrand因子(vWf)。vWf在血小板-血管壁和血小板-血小板相互作用中起着重要作用,与初期止血、动脉血     

抗von Willebrand因子单克隆抗体的应用研究(血浆von Willebrand因子的精确定量及其意义)

应用本室的一组SZ-系列抗Von Willebrand因子(vWf)单克隆抗体,建立了免疫放射计量法和酶联免疫吸附法,对正常人及Von Willebrand病(vWd)患者血浆的vWf水平进行了精确的定量分析,探讨了这两种方法在vWd的诊断和分型方面应用的可行性。同时将其各主要指标与常规方法及国外同类方法的相应指标进行了全面对比。结果表明,新方法的各项指标明显好于常规方法,不低于或略高于国外同类方法。为与vWf有关的基础和临床研究提供了新的手段,并有助于vWd新的分型方法的研究。     

抗血管性血友病因子单克隆抗体的制备及其初步鉴定

目的　研制抗人血管性血友病因子 (vWF)单克隆抗体 (McAb) ,鉴定其各种生物学特性。方法　Ⅷ因子浓缩物经Sepharose 4B凝胶柱提纯出vWF蛋白 ,免疫Balb/c小鼠 ,按常规方法融合并经间接ELISA方法筛选 ,制备稳定分泌抗vWFMcAb的细胞株 ,并对McAb的亚型、免疫活性及组织特异性等进行鉴定 ,运用放射免疫方法等与单抗SZ - 2 9,SZ - 34进行比较。结果　分离纯化出vWF ,vWF抗原含量为 12 0IU/mg ,并成功制备了一株抗人血管性血友病因子McAb ,暂命名为 4E10。琼脂糖双扩散鉴定为IgG1类 ,ELISA法测定其腹水效价为 5× 10 -5。放射免疫分析证实McAb4E10能特异的与血浆中vWF蛋白结合 ,应用间接免疫荧光法显示出与人脐静脉内皮细胞内vWF所特有的颗粒型荧光反应。流式细胞仪及免疫组化法测定表明McAb4E10与人脐静脉内皮细胞反应呈阳性 ,与外周血红细胞、白细胞、未活化的血小板不反应 ,而与其他组织细胞没有反应。放射免疫测定证实McAb4E10与SZ - 2 9,SZ - 34识别vWF蛋白上不同的结构。还原条件下Westernblot法证实McAb4E10和SZ -2 9都能识别相对分子量为 2 2 5kD和 180kD左右的单链蛋白多肽。结论　制备出了抗人血管性血友病因子单克隆抗体 4E10 (McAb4E10 ) ,它能特异识别血浆及内皮细胞的vWF ,将对相关血管性疾病的     

抗人甲状腺素单克隆抗体的制备及其初步的临床应用

本文用甲状腺素(T_4)甲酯—BSA抗原免疫BALB/C小鼠,获得4株分泌抗人甲状腺素单克隆抗体的杂交瘤细胞系。亚类鉴定均属IgG_1型。将单克隆抗体应用在放射免疫分析(RIA)中,取代多克隆抗体,证实其在甲状腺疾病诊断中,甲状腺机能亢进的诊断符合率高于多克隆抗体,显示其特异性强、灵敏度高、亲和力好(亲和常数K=1.26x10~(10)L/M)、反应平衡时间短等优点。     

抗肿瘤坏死因子单克隆抗体临床应用新进展

Infliximab是一直接针对肿瘤坏死因子α(TNF-α)的嵌合性单克隆抗体,主要用于治疗克罗恩病及类风湿性关节炎。随着对其研究的加深,Infliximab在临床上的应用越来越广泛。本文就in-fliximab临床应用的进展作一综述。     

癌胚抗原尼龙固相免疫放射分析及其临床应用

为建立癌胚抗原尼龙微球固相免疫放射分析法并应用于临床，采用Ｌｏｄｏｇｅｎ法＾１２５Ｉ标记ＣＥＡ单克隆抗体Ｃ－１７，用单克隆抗体Ｃ－５０、Ｃ－６化学包被尼龙微球制成固相抗体，建立一步法的ＣＥＡＮ－ＳＰＩＲＭＡ，灵敏度２μｇ／Ｌ，工作范围为５－８０μｇ／Ｌ，批内和批间ＣＶ分别为４．６３％和８．３４％，回收率９３．８６－１０４．７３％。结果：６５例正常人ＥＣＡ值为５．２±３．８μｇ；Ｌ，７８例良性病人为     

血浆von Willebrand因子单克隆抗体检测试剂盒研制成功

von Willebrand因子(简称vWf)在初期止血过程中起重要作用。von Willebrand病(原称血管性假血友病,简称vWd)即由vWf的缺陷所致;某些生理或病理状态也可     

抗人hER单克隆抗体的制备及其应用

目的:制备抗人hER单克隆抗体。方法:用原核表达的人雌激素受体(hER)重组蛋白为抗原,免疫BalB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞,进行细胞融合。结果:通过ELISA和免疫组织化学法筛选,有限稀释克隆化,得到一株分泌抗hER单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2B8/1C5/2C3),经鉴定2B8/1C5/2C3分泌的单克隆抗体为IgG2a,利用Western Blot分析,显示在23kU处针对hER重组蛋白位置有一特异性条带;利用乳腺癌组织进行的免疫组织化学染色结果显示该株细胞产生的单克隆抗体与细胞核呈强阳性反应。结论:该单克隆抗体适于乳腺癌组织hER的免疫组化检测。     

人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体酶联分析法及其初步应用

两种含有抗人绒毛膜促性腺激素不同抗原决定簇的McAb,其中一种作为固相抗体,另一种用辣根过氧化物酶标记,建立了血清及尿中hcG一步双位酶联免疫分析法。此法简单快速,可在1～2小时内用肉眼判断结果,灵敏度高,能检测含量只有25min/ml的hcG;特异性强,与含量高达10iu/mlhLH未见有交叉反应。经临床初步应用,结果满意     

乙型肝炎抗原免疫放射测定的临床应用

我们于1975年下半年,采用免疫放射对流电泳自显影法(以下简称“本法”)检测乙型肝炎抗原(HBAg),经过798例临床病人、72名健康医务人员、1080名献血员的血清标本和16份脐带血的检查,认为本法比目前使用的琼脂双扩散法、对流免疫电泳法具有较好的敏感性和一定的特异性,步骤较简便,适合医院及血库大量人群定性筛选用。     

抗CD3单克隆抗体的作用机制及其在临床上的应用

CD3分子是T细胞表面的标记性分子,与T细胞受体（TCR）组成TCR-CD3复合体,在抗原识别和免疫信号传导过程中具有重要作用。利用抗CD3单克隆抗体激发或阻断T细胞活化信号转导,清除效应T细胞或诱导调节T细胞产生,为治疗器官移植排斥和自身免疫性疾病提供新的方法和手段。目前,抗CD3单克隆抗体已广泛应用于临床治疗器官移植后排斥反应,疗效显著,而将其用于治疗自身免疫性疾病的研究处于起步阶段,确切的疗效及其可能的机制有待深入的探讨。     

免疫放射与放射免疫分析法测定癌胚抗原的比较

目的 探讨免疫放射法(IRMA)与放射免疫法(RIA)检测癌胚抗原的结果可比性与试验方法的优越性.方法 采用免疫放射法与放射免疫法两种方法测定188份标本中癌胚抗原的含量.结果 免疫放射法与放射免疫法之间无显著差异(P>0.05),相关性好.结论 免疫放射法是一种较好的试验方法.     

抗幽门螺旋菌单克隆抗体的制备和临床应用

用幽门螺旋菌(HP)109免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,得到3株分泌高效价抗HP单克隆抗体(HP-MAbs)的杂交瘤细胞SOH_7、SCH_(10)和SCH_(10)。3株HP-MAbs主要与HP58000菌体蛋白条带反应。HF-MAbs SCH_9免疫过氧化物酶染色,与18株HP反应均阳性,与空肠弯曲菌、结     

抗人胃腺癌单克隆抗体的制备及其在临床应用中的探讨

本文应用杂交瘤技术制备出4株抗胃腺癌细胞株SGC-7901单克隆抗体,4株单克隆抗体的相应抗原与CEA、HLA、ABO抗原无关。免疫酶组织化学染色法证明,相应抗原位于细胞膜及细胞浆,因癌腺腔内也可见到阳性染色,说明相应抗原是分泌性抗原。临床应用结果表明,4株单克隆抗体与胃癌组织有较强的特异性,值得进一步推广应用。     

抗胆固醇酯转运蛋白单克隆抗体的制备及其应用

目的：自行制备胆固醇酯转运蛋白（ＣＥＴＰ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ），建立人血清ＣＥＴＰ的酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ），调查中国人群ＣＥＴＰ参考值及临床意义。方法：应用杂交瘤技术制备ＣＥＴＰＭｃＡｂ。用棋盘试验确定ＥＬＩＳＡ法的反应条件；进行灵敏度、精密度、回收率、特异性试验。结果：制备出一株特异性好、反应性强的ＣＥＴＰＭｃＡｂ。筛选出ＥＬＩＳＡ法最佳反应条件，样本稀释２０００倍，可检测０．２８～４．５２ｍｇ／Ｌ的血清ＣＥＴＰ水平；平均批内ＣＶ为４．９％，平均批间ＣＶ为１０．２％；平均回收率为９２．５％～９７．２％；特异性高。检测结果同国外实验室ＥＬＩＳＡ法高度相关。１１２８例参考人群血清ＣＥＴＰ浓度为１．８４±１．５５ｍｇ／Ｌ，女性高于男性；随着年龄增高，ＣＥＴＰ浓度降低。冠心病患者ＣＥＴＰ浓度为２．６６±２．０８ｍｇ／Ｌ，较相应对照组显著升高（Ｐ＜０．０１）。结论：该法具有方便、快速、准确、特异等优点，对了解ＣＥＴＰ在动脉粥样硬化发生中的作用有着十分重要的意义。     

肿瘤标志CA-50免疫放射分析法及其试剂盒的研制与推广

CA—50是80年代国际上发展的最有应用价值的肿瘤标志物之一。本组利用国际协作渠道引进了CA—50单克隆抗体并建立成功了CA-50免疫放射分析法(IRMA),研制成的商品试剂盒已在国内推广。该方法采取三元夹心的非竞争模式,~(125)I-C-50抗体比度为3～5μCi/μg,非特异结合小于1％,80U/Ou放射性计数比率达67.8倍,显示了很高的曲线梯度。80U B/T达到47.8％,高于国际规定值38.3％。各项技术指标达到了国际先进水平。经过恶性肿瘤1089例、良性病变189例和正常人163例的检测结果表明,它对胰腺及胆囊癌的阳性检出率达90％以上,其它肿瘤检出率在60％～80％者依次为肝癌、肺癌、泌尿生殖道癌、结直肠癌,卵巢及子宫癌。可见CA-50对肿瘤的检测具有较高的灵敏度。它对肿瘤的特异性也很高,9类肿瘤平均达