HPLC同时测定西藏栽培天麻中天麻素和8种核苷及碱基类成分

本实验建立了同时测定天麻药材中天麻素及8种核苷和碱基类成分的高效液相色谱法:Agilent Zorbax BonusRP(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇-(0.04%冰乙酸)水溶液为流动相,梯度洗脱,柱温36℃,流速1.0 m L·min-1,检测波长254 nm,进样量20μL。该方法分离度良好,天麻素、胞嘧啶、胞苷、尿嘧啶、腺嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、鸟苷和腺苷等的质量浓度在2.04~262.00,0.20~24.67,0.18~23.75,0.20~25.83,0.20~26.67,0.16~20.00,0.22~27.71,0.20~24.29,0.24~30.58 mg·L-1内,相关系数r在0.998 9~0.999 9,具有良好的线性。天麻素和8种核苷及碱基平均加标回收率在96.4%~99.6%,RSD均小于2.7%(n=6)。测定了7个西藏栽培天麻药材中上述9种成分的含量。结果表明,7个天麻样品中天麻素的含量均高于2.0 mg·g-1,均含有较高的腺苷、鸟苷、尿苷和胞嘧啶,而胞苷、尿嘧啶、腺嘌呤和胸腺嘧啶含量较低。该方法简便、准确,重复性好,适用于天麻药材中天麻素和腺苷等8种核苷及碱基类成分的含量测定。     

HPLC法同时测定猴头菇提取物中3种核苷

目的:建立高效液相色谱法同时测定猴头菇提取物中尿苷、鸟苷和腺苷的含量。方法:采用Welch Ultimate AQ C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液,梯度洗脱;检测波长为260 nm。结果:尿苷、鸟苷、腺苷的线性范围分别为0.034 43~0.688 6μg(r=1)、0.022 26~0.445 1μg(r=1)、0.026 93~0.538 6μg(r=0.999 9),尿苷、鸟苷、腺苷的平均回收率(n=6)分别为97.6%(RSD=2.0%)、96.3%(RSD=1.0%)、96.3%(RSD=0.8%)。结论:该方法简便、准确、可行,可为猴头菇提取物的生产和使用提供质量评价依据。     

15种重楼属植物中8种甾体皂苷的含量测定

建立了同时测定重楼中8种重楼皂苷(重楼皂苷Ⅶ、H、Ⅵ、Ⅱ、Ⅰ、Ⅴ,薯蓣皂苷和纤细薯蓣皂苷)的分析方法,并对15种重楼属植物根茎中重楼皂苷的含量进行了评价。本研究采用Waters Acquity H-Class~(TM)液相色谱系统,PDA检测器,色谱柱为资生堂CAPCELL PAK ADME色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-水为流动相(0.8 mL·min~(-1))梯度洗脱,柱温21℃;检测波长为203 nm。可知(1)8种重楼皂苷得到良好分离,稳定性和重复性好,且线性良好(R20.999 9),线性范围较宽(0.041 70~3.812 00μg),平均回收率在95.91%~103.8%。(2)不同种重楼中重楼皂苷的含量差异显著,毛重楼、狭叶重楼和金线重楼中含量较低或基本不含重楼皂苷,不适合作为重楼药用;不同产地的七叶一枝花含量差异显著;滇重楼、长柱重楼、大理重楼和五指莲中重楼皂苷含量较高,最高达5.0%,长柱重楼、大理重楼和五指莲可作为潜在的重楼药用资源。     

HPLC同时测定全蝎不同工艺提取物中5种核苷类化合物含量

目的:比较水煎煮、醇提取以及湿法超微粉碎3种提取工艺对全蝎中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、鸟苷、腺苷5种核苷类成分含量的影响.方法:全蝎经不同工艺提取,采用HPLC外标法测定提取物中5种核苷化合物含量.Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.07％冰乙酸-甲醇梯度洗脱,流速1.0 mL· min-,检测波长254 nm,柱温35℃.结果:尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、鸟苷、腺苷5种核苷化合物均在一定质量浓度范围内线性关系良好,r均＞0.999 5,样品中5种核苷化合物的加样回收率98.9％ ～ 103.9％,RSD均＜3％.结论:该HPLC简便快速、灵敏度高、重复性好,可应用于同时测定尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、鸟苷、腺苷5种核苷化合物含量并比较不同全蝎提取物之间的差异.     

五灵脂中四种核苷、碱基类成分的HPLC法分析研究

<正> 五灵脂为鼯鼠科动物复齿鼯鼠Trogopterus xan thipes Mile—Edwards的干燥粪便。具有活血化瘀、止痛之功效。杨东明及Atushi等人对五灵脂成分进行了研究,从中分离出了次黄嘌呤、尿嘧啶等核苷、碱基类成分,但对此类成分的含量测定未见报道。本文采用高效液相色谱法,以水—甲醇—四氢呋喃(100:0.1:0.05)作流动相,用260nm为检测波长,在反相C_(18)柱上建立了四种核苷、碱基类成分的分离及含量测定方法。方法灵敏、快速、结果可靠。     

HPLC含量测定和DNA分子标记技术对重楼属药用植物的鉴定

目的:通过指标成分含量测定与DNA分子标记技术对重楼属药用植物样品进行鉴定,探讨DNA分子鉴定技术在中草药鉴别领域的应用前景。方法:以重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ为指标成分,利用HPLC测定指标成分含量,并用单因素方差分析对其根茎中甾体皂苷活性成分的差异进行评价;采用基于聚合酶链式反应(PCR)方法的DNA分子标记技术鉴别样品。结果:重楼属10种药用植物根茎中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ及总皂苷的含量具有极显著差异(P0.01),且其主要化学成分种类也存在较大差异;同时ITS2序列与NJ树结果能有效区分重楼属10种药用植物。结论:DNA分子鉴定技术作为含量测定常规方法的补充,具有准确可靠、重复性高等优点,可用于重楼属药用植物的鉴定。     

RP-HPLC同时测定贝母药材中5种核苷类化合物

目的:建立一种同时测定贝母药材中核5种苷类化合物尿苷、腺嘌呤、鸟苷、胸苷、腺苷的高效液相色谱法。方法:采用Welch Materials XB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-5 mmol.L-1乙酸铵-乙酸缓冲盐(pH4.30)作为流动相,以1 mL.min-1的流速进行梯度洗脱(洗脱梯度程序为:0~10 min,0%~1%A;10~20 min,1%~5%A;20~25 min,5%A;25~35 min,5%~30%A;35~37 min,30%~0%A;37~40 min,0%A);进样量20μL;检测波长260 nm。结果:在0.24~13.60 mg.L-1,各核苷类化合物的响应峰面积与其相应的浓度呈现良好的线性关系,r0.998 3;各待测物的日内精密度和日间精密度的RSD均小于2.1%;重复性良好(RSD5.5%);回收率范围在93.55%~101.88%,RSD3.0%。结论:不同种贝母药材中核苷类化合物的含量大致顺序为湖北贝母浙贝川贝≈平贝;本方法简便、可靠、准确,可用于贝母药材中核苷类化合物的含量测定,为全面开发利用贝母药材提供进一步依据。     

HPLC同时测定不同产地滇重楼中的6种重楼皂苷

目的对不同产地滇重楼的质量进行评价研究,摸清目前云南省境内的滇重楼资源情况,为滇重楼资源合理利用和保护提供科学依据。方法收集产自云南省境内13个州(市、地区)的滇重楼样品进行分析,采用HPLC方法测定其6种重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ,PA,H。结果不同产地滇重楼皂苷含量差异较大。结论 重楼皂苷质量受产地、环境因素影响较大,滇重楼品质表现出一定的地域及生境依赖性。     

HPLC比较醇提重楼及其颗粒中重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ的含量

目的:建立一种测定重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ的含量测定方法,用于比较重楼乙醇提物与重楼配方颗粒中皂苷的含量.方法:采用C18色谱柱,以乙腈-水(42:58)为流动相,检测波长210 nm,流速1 mL· min -1,柱温室温.结果:在0.043 5～0.870 0g·L-1,重楼皂苷Ⅰ的峰面积与浓度有良好的线性,r =0.999 1;在0.038 ～0.760 0 g·L-1,重楼皂苷Ⅱ的峰面积与浓度有良好的线性,r=0.999 7,重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ的平均回收率为99.90％,100.2％,RSD分别为1.7％,1.7％.醇提物与配方颗粒中皂苷Ⅰ,Ⅱ的总含量分别为34.7％,3.1％.结论:该法操作简单,出峰时间短,两峰分离度好,测得的醇提物中皂苷Ⅰ,Ⅱ含量明显高于重楼配方颗粒.     

UFLC-QTRAP-MS-MS同时测定蚁巢伞属3种鸡中氨基酸核苷含量及PCA分析

建立高分离度快速液相色谱质谱联用（UFLC-QTRAP-MS-MS）同时测定蚁巢伞属3种鸡中15种氨基酸和12种核苷类成分的方法。采用Waters XBridge Amide色谱柱（2.1 mm×100 mm,3.5 μm）,流动相为0.2%甲酸水-0.2%甲酸乙腈,梯度洗脱,柱温30℃,流速0.6 mL·min^-1,采用电喷雾正离子源（ESI+）,多反应离子监测（MRM）模式进行检测。采用PCA主成分分析法对不同品种的蚁巢伞属鸡进行综合评价。结果15种氨基酸成分和12种核苷成分在一定浓度范围内均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.997 3,精密度,重复性和稳定性良好;加样回收率在95.14%~105.0%,RSD均小于5.0%。PCA分析显示在氨基酸中,鸡综合评价指数分最高;在核苷中,黄鸡综合评价指数最高。所建立的方法准确、重复性好,可用于蚁巢伞属3种鸡中15种氨基酸和12种核苷类成分的同时测定,为蚁巢伞属鸡资源内在质量的综合评价、全面控制以及合理开发应用提供新的方法参考。     

HPLC法测定不同产地重楼属植物中7种甾体皂苷成分

目的 研究不同产地重楼属植物主要活性成分甾体皂苷量的差异性,为探讨品种及产地对重楼属植物活性成分的影响提供参考依据.方法 采用HPLC法测定不同产地的重楼属6种药材中偏诺皂苷-3-O-α-L-Rha(1→2)[α-L-Rha(1→4)]-β-D-Glc (PGRR),重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ、H及纤细薯蓣皂苷的量.结果 不同重楼属植物中的皂苷种类及其量存在较大差异,滇重楼、巴山重楼以及长药隔重楼的皂苷种类及其量较多;同一品种不同产地的重楼药材,其皂苷的种类及其量亦不同,湖北恩施的金线重楼较重庆巫溪产的皂苷量高,贵州安顺的长药隔重楼皂苷量明显高于湖北来凤产.结论 重楼属植物的品种及产地对其活性成分的量及类型有很大的影响.     

重楼属植物化学成分及药理活性研究进展

重楼属Paris隶属于百合科(Liliaceae),全世界共有24个种,我国有19个种,分布于云南、贵州、四川等西南地区。其主要化学成分有甾体皂苷类、黄酮类、三萜类、脂肪酸类等,具有抗肿瘤、抗菌、止血、驱虫等药理作用。总结了重楼属植物系统分类、化学成分和药理作用的研究现状,以期为该属植物的进一步研究提供参考。     

重楼属植物的药用价值及其化学物质基础

该文综述了延龄草科重楼属植物的传统利用及其化学物质基础。重楼属包括40个种及变种,作为药用植物使用的有18个,这些药用植物在传统利用上有相似性。目前已对14个种及变种重楼的化学成分进行了研究,报道了207个化合物,其中甾体皂苷121个。甾体皂苷是重楼属植物的主要活性成分,很好地解释了其在治疗癌症、疔、疮、出血、胃炎等疾病上的利用。由于它们在药用功能、化学成分等方面的相似性,重楼属植物在资源相互替代上具有可行性。在重楼属化学成分、药理活性、生物学特性、毒理学等方面,还值得深入研究。     

HPLC法测定不同采收期香青兰中田蓟苷和藿香苷

目的建立一种测定香青兰中田蓟苷和藿香苷的方法,并比较不同采收时期香青兰中田蓟苷和藿香苷的差异。方法采用HPLC法测定香青兰中田蓟苷和藿香苷的量,色谱柱为Phenomenex C18(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈–0.5%甲酸水,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;检测波长为330 nm;柱温为25℃;进样量为10μL。结果田蓟苷和藿香苷获得良好分离,在5.09～101.82、4.99～99.83μg/mL与峰面积积分值呈良好线性关系,平均加样回收率分别为99.53%、100.65%,RSD分别为1.08%、1.39%,重现性试验的RSD分别为0.29%、0.56%。结论本方法操作简便、准确,精密度、分离度良好,为香青兰药材的合理应用及其质量控制提供了依据。     

HPLC同时测定了哥王中4种黄酮的含量

采用高效液相色谱(HPLC)的方法,以Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-体积分数为0.15%的磷酸水,梯度洗脱,流速为1.0 m L·min-1,柱温为30℃,检测波长365 nm的色谱条件同时测定了哥王中杨梅素、木犀草素、芹菜素和山柰酚含量。各成分之间分离度良好,杨梅素、木犀草素、芹菜素、山柰酚的质量浓度分别在0.100 8~1.008(r=0.999 2),0.484 8~4.848(r=0.999 0),1.354~13.54(r=0.999 6),0.316 8~3.168 mg·L-1(r=0.999 0)内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.5%(RSD=1.2%),100.9%(RSD=1.7%),99.7%(RSD=0.81%),98.9%(RSD=1.6%)。表明所建立的方法快速简便、具有较好的重复性和稳定性,为了哥王药材的质量控制提供参考。     

HPLC同时测定白花蛇舌草注射液中5种成分的含量

目的:利用HPLC同时测定白花蛇舌草注射液中5种成分的含量。这5种成分包括环烯醚萜苷类(10-乙酰鸡矢藤苷、鸡矢藤苷甲酯、去乙酰车叶草苷酸甲酯)和黄酮苷类{槲皮素-3-O-[2-O-(6-O-E-阿魏酰基)-D-吡喃葡糖基]-β-D-吡喃半乳糖苷、山柰酚-3-O-[2-O-(6-O-E-阿魏酰基)-β-D-吡喃葡糖基]-β-D-吡喃半乳糖苷}。方法:采用Sun FireTMC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水(含0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0 m L·min-1。结果:各对照品在线性范围内线性关系良好,相关系数均≥0.999 5;加样回收率为98.1%~101.2%,RSD均≤3.3%。结论:该方法操作简便,结果可靠,重复性好,可作为白花蛇舌草注射液质量评价的参考依据。     

高效液相色谱定量分析比较4种虫草药材的核苷类成分

为比较4种常见虫草类药材(冬虫夏草、蛹虫草、虫草菌丝体和蝉花)中核苷类成分的差异,该研究以0.5%磷酸溶液提取样本,色谱柱为Zorbax SB-Aq(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为0.04 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(A)和乙腈(B),梯度洗脱,流速为0.8 m L·min-1,检测波长260 nm,柱温30℃,对4类药材产品进行分析。已知核苷以外标一点法进行计算,未知成分以腺苷为对照进行计算,并对测定结果进行聚类分析,同时利用指纹图谱相似度软件对不同样本进行了比较。结果显示,冬虫夏草、蛹虫草、虫草菌丝体、蝉花4种药材中的核苷类成分差异较大,聚类分析和指纹图谱分析均可有效区分冬虫夏草和其他3种虫草药材。该研究建立的核苷测定方法准确可靠,可用于虫草类产品的品质评价。