PPARγ在脂多糖刺激牙周膜细胞中调控NF-κB信号通路的作用研究

目的:探讨PPARγ在牙周炎中调控作用机制。方法:组织块法培养健康人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells, hPDLCs)并鉴定。细胞处理分为以下4组,A组:对照组;B组:脂多糖(lipopolysaccharide,LPS )刺激组;C组:罗格列酮对照组,即二甲基亚砜(dimethylsulfoxide, DMSO)处理组;D组:罗格列酮处理组。免疫印迹法检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor γ,PPARγ)和核因子κB(nuclear factor κB, NF-κB) p65胞核、胞浆及总蛋白含量,细胞免疫荧光检测NF-κB p65表达部位。实时定量PCR和酶联免疫法检测白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)RNA和蛋白表达。结果:LPS刺激下,胞核PPARγ表达降低NF-κB p65表达升高,相应的IL-1β和TNF-α RNA及蛋白表达量均升高。同时加入罗格列酮后,胞核PPARγ表达升高NF-κB p65表达降低,且IL-1β和TNF-α RNA及蛋白表达量均降低。差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:PPARγ通过下调NF-κB信号通路抑制脂多糖刺激下牙周膜细胞炎症因子RNA表达和蛋白分泌,进而调节牙周炎症反应。     

miR-140-5p通过NF-κB信号通路调控LPS诱导牙髓细胞炎症因子分泌的机制研究

目的:研究miR-140-5p对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导牙髓细胞炎症因子分泌的影响和机制。方法:分离培养人牙髓细胞,分为对照组、LPS组、miR-NC+LPS组、miR-140-5p+LPS组,Realtime PCR检测细胞中miR-140-5p表达水平,ELISA法检测细胞培养上清液中IL-6、IL-1β和TNF-α含量,Western Blot检测细胞中p-IκBα、IκBα、NF-κBp65蛋白表达水平。用NF-κB信号通路激活剂处理LPS条件下转染miR-140-5p mimics的人牙髓细胞,ELISA法检测培养液上清中IL-6、IL-1β、TNF-α含量,Western Blot检测细胞中p-IκBα、IκBα、NF-κBp65蛋白表达。结果:与对照组比较,LPS组细胞中miR-140-5p水平下降,细胞培养液上清中IL-6、IL-1β、TNF-α含量升高,细胞中p-IκBα、NF-κBp65蛋白表达增多,IκBα蛋白表达没有变化。与miR-NC+LPS组比较,miR-140-5p+LPS组细胞中miR-140-5p水平升高,细胞培养液...     

NF-κB(p65)蛋白核转位与唾液腺腺样囊性癌侵袭和转移关系的研究

目的检测NF-κB p65蛋白在唾液腺腺样囊性癌（adenoid cystic carcinoma,ACC）临床组织标本中的表达水平和转位情况,分析其与ACC侵袭和转移之间的关系。方法应用免疫组织化学法,检测58例唾液腺腺样囊性癌石蜡标本中p65蛋白的表达和细胞定位,分析p65蛋白的表达、转位与ACC转移和其他临床病理参数的关系。结果在转移和非转移的ACC组,p65细胞表达阳性率无显著差异（P=0.2641）;而p65蛋白的核阳性表达率ACC转移组明显高于非转移组（P=0.0261）,并且与ACC神经浸润相关（P=0.0244）。结论 NF-κB通路的激活可能在唾液腺腺样囊性癌侵袭和转移中发挥重要作用。     

核转录因子NF-κB与口腔鳞癌关系的研究进展

NFK-κB是一种重要的核转录因子,由一个复杂的体系组成。近年来的研究表明,NF-κB在肿瘤的抗凋亡机制中起着至关重要的作用。目前研究发现NF-κB与口腔鳞癌的发生、发展和侵袭密切相关。NF-κB的激活是肿瘤细胞抵抗TNF介导的细胞凋亡的重要机制,而抑制NF-κB的激活可以导致肿瘤细胞的大量凋亡。通过基因治疗来抑制NF-κB的活性,再辅以常规的化疗将有望成为一种治疗口腔鳞癌的有效方法。     

炎症因子通过核因子κB通路促进口腔鳞状细胞癌转移的体外研究

目的 探讨炎症因子与核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号转导通路在口腔鳞状细胞癌转移中的意义.方法 应用口腔鳞状细胞癌低转移细胞系Tca8113和高转移细胞系Tb为研究对象,通过蛋白质印迹法和荧光素酶报告基因法检测口腔鳞状细胞癌细胞系中NF-κB通路活性.用NF-κB抑制因子α(inhibitor of kappa B alpha,IκBa)抑制质粒第32、36位丝氨酸磷酸化位点被丙氨酸替代的质粒(pBabe-SR-IκBa)和NF-κB通路抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrolidinedithiecar bamate,PDTC)抑制信号转导通路活性,并用侵袭小室实验(TransweH)检测口腔鳞状细胞癌高转移系Tb细胞侵袭能力的变化.此外,通过酶联免疫吸附法检测pBabe-SR-IκBα和PDTC抑制信号转导通路后,肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白介素(IL)-1a、IL-6、IL-8和粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)等炎症因子的分泌.结果 蛋白质印迹法检测显示:高转移Tb细胞中磷酸化IκBα和磷酸化p65的表达量明显高于低转移细胞系Tea8113,分别为Tea8113细胞的3.19倍和6.81倍.荧光素酶(luciferase)报告基因结果显示,Tb细胞NF-κB的启动子活性为Tca8113的2.12倍(P<0.01),并对TNF-α更为敏感.转染pBabe-SR-IκBα和应用PDTC抑制NF-κB通路后,对Tb细胞的体外侵袭能力抑制率分别为21.9%和69.3%.此外,酶联免疫吸附试验法显示通路抑制后,TNF-α、IL-1α、IL-6、IL-8和GM-CSF等炎症因子的分泌也明显降低.结论 TNF-α、IL-1α、IL-6、IL-8和GM-CSF等炎症因子可能通过NF-κB通路促进口腔鳞状细胞癌细胞转移.     

理中汤加味对大鼠复发性口腔溃疡黏膜的修复作用及对NF-κB炎症通路的影响

目的:探究理中汤加味对大鼠复发性口腔溃疡(ROU)黏膜的修复作用及机制.方法:60只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(醋酸泼尼松龙,1 mg/mL,20 mL/kg)、理中汤高(40 g/kg)、中(20 g/kg)、低剂量组(10 g/kg),每组10只.除正常组外其余5组建立ROU模型,建模8周后...     

NFκB信号通路在炎症根尖牙乳头干细胞中的作用

目的研究NFκB信号通路在炎症条件下对根尖牙乳头干细胞的作用。方法利用TNFα和Ecoli.LPS刺激人根尖牙乳头干细胞。Western Blot检测IκBα的磷酸化及蛋白降解,采用Real-time PCR在mRNA水平检测IL6及IL8的表达。结果 10 ng/ml TNFα或500ng/ml Ecoli.LPS能诱导IκBα磷酸化及蛋白降解,并且促进NFκB的下游基因IL6及IL8的表达。结论在炎症根尖牙乳头干细胞,TNFα或LPS可以通过IκK复合体激活NFκB信号通路。NFκB信号通路的活化可能是导致炎症状态下根尖牙乳头干细胞功能损害的重要因素。     

抑制核因子-κB受体活化因子及其配体通路治疗牙周炎的研究进展

核因子-κB受体活化因子（RANK）及其配体（RANKL）在牙周炎患者的牙槽骨吸收中具有重要的作用,抑制RANKL／RANK通路,可有效抑制破骨细胞的分化和激活,从而抑制牙槽骨的吸收。骨保护蛋白（OPG）和RANKL结合,干扰RANKL和RANK的结合,从而防止骨组织的过度破坏。本文就RANKL／RANK／OPG轴、RANKL／RANK／OPG与牙周炎、抑制RANKL／RANK通路治疗牙周炎的可行性等研究进展作一综述。     

硒代蛋氨酸通过NF-κB和MAPK通路抑制P.g-LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS和COX-2表达

目的:探讨硒代蛋氨酸(Selenomethionine, SeMet)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,P.g-LPS)诱导的RAW264.7细胞的作用和机制。方法:使用P.g-LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7体外构建炎症细胞模型,CCK-8法检测不同浓度SeMet对RAW264.7细胞活性的影响。以不同浓度的SeMet(10、25、50μmol/L)干预细胞1 h后,再使用P.g-LPS诱导细胞24 h。RT-PCR法检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)和环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)相关基因表达,ELISA法检测iNOS和COX-2相关蛋白分泌情况。Western blot检测NF-κB和MAPK信号通路相关蛋白表达情况。结果:浓度低于50μmol/L的SeMet对RAW264.7细胞活性没有显著影响。对RAW264.7使用SeMet预处理后,SeMet明显抑制P.g-LPS诱导的iNOS和COX-2相关基因...     

������Ϯת�����źŴ�������Rho���о���չ

恶性肿瘤导致死亡的主要原因之一是肿瘤细胞向周围组织的浸润及远处转移。因此,对肿瘤侵袭能力和转移机制的研究将为预防肿瘤侵袭转移提供新的思路。肿瘤的浸润、转移是一个相当复杂的多步骤过程,主要包括细胞黏附、基质分解及远处侵袭三个环节。Rho全称Ras相似物     

大鼠颅底软骨联合细胞凋亡信号传导途径的研究

目的研究大鼠生长发育过程中颅底细胞的凋亡活动,探讨软骨联合细胞凋亡途径相关信号因子iNOS、Fas的表达及分布规律。方法选用出生后4、8、16、32、48、64、128 d的SD大鼠的颅底软骨联合组织。通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL),iNOS及Fas的免疫组化法来检测颅底软骨联合细胞凋亡途径的时空特征,和各途径之间的相关性。结果各期标本均可见黄色荧光TUNEL凋亡软骨细胞,出生后4、8 d大鼠软骨联合的肥大区、交界区发现少量细胞凋亡现象;随时间推移细胞凋亡主要出现在肥大区、交界区和两侧的骨小梁,且细胞数逐渐增多。iNOS主要在出生后4、8、16 d的大鼠颅底软骨联合中间静止区、增殖区表达。Fas则存在于几乎各个时期的软骨联合各层,以肥大区、交界区表达为多。结论颅底软骨联合的生长发育与软骨细胞凋亡密切相关并存在Fas和NO两种凋亡途径。Fas途径发挥主要作用,NO途径对静止区和增殖区的生长意义更大。     

Examination of the signal transduction pathways involved in matrix metalloproteinases-2 in human pulp cells

OBJECTIVES: Matrix metalloproteinases (MMPs) play an important role in pulp tissue destruction. However, the mechanisms and signal transduction pathways involved in the production of MMPs in human pulp cells are not fully understood. The purpose of this study was to investigate the gelatinolytic activity in human pulp cells stimulated with various pharmacological agents. STUDY DESIGN: Human dental pulp cells were cultured using an explant technique obtained from impacted third molars with informed consent of the patients. The effects of p38 inhibitor SB203580, MEK inhibitor U0126, extracellular signal-regulated kinase (ERK) inhibitor PD098059, phosphatidylinositaol 3-kinase (PI3K) inhibitor LY294002, cyclooxygenase-2 (COX-2) inhibitor NS-398, nuclear factor kappa B (NF-kappaB) inhibitor dexamethasone, and tyrosine kinase inhibitor herbimycin A on the production and secretion of MMPs by human pulp cells were determined by gelatin zymography. RESULTS: The main gelatinase secreted by human pulp cells migrated at 72 kd and represented MMP-2. Minor gelatinolytic bands were also observed at 92 kd regions that correspond to MMP-9. After a 4-day culture period, NS-398, dexamethasone, and herbimycin A were found to depress MMP-2 production (P<.05). The inhibition decreased in an order of dexamethasone >NS-398>herbimycin A. Human pulp cells, however, treated with various pharmacological agents had no effect on the pattern of MMP-9 produced or secreted in either cell extracts or conditioned medium fractions (P>.05). CONCLUSION: These observations suggest that NS-398, dexamethasone, and herbimycin A can regulate MMP-2 produced by human pulp cells. The signal transduction pathways COX-2, NF-kappaB, and tyrosine kinase may be involved in the production of MMPs.     

热疗与肿瘤局部淋巴结转移关系的研究进展

随着淋巴管特异性因子血管内皮生长因子-C的发现,学者们相继发现了多种促进肿瘤局部淋巴结转移的因子。近年来,虽然热疗与肿瘤转移关系的研究主要还是停留在临床方面,但是随着基础研究的深入,学者们发现,热疗能抑制促进肿瘤局部淋巴结转移因子的生成。本文就促进肿瘤局部淋巴结转移的相关因子及其与热疗关系的研究进展作一综述。     

口腔鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)和血管生成与淋巴结转移的关系

目的 了解口腔鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞（TAMs)和血管生成与淋巴结转移的关系。方法 采用免疫组织化学方法观察巨噬细胞侵入及血管生成。结果 巨噬细胞记数及微血管记数在淋巴结转移组较无转移组增多（P＜0.05)；随病理分级的增加，巨噬细胞的侵入增加（P＜0.05)，微血管记数虽稍有增加但无统计学意义（P＞0.05)。结论 本研究表明在口腔鳞癌中TAMs在淋巴结转移中可能起重要的作用。     

釉基质蛋白对细胞信号传导的影响

在牙周术区局部应用生长因子等生物调解剂以促进再生的疗法,已经得到了牙周病学界的相当重视。目前的临床研究已经证实了釉基质蛋白(EMPs)与牙周再生治疗联合应用的良好效果。但关于EMPs生物学作用的分子机制仍未阐明。EMPs和生长因子等各种刺激使细胞产生增殖分化等应答反应,这些反应通过应答分子的表达和/或激活来调节,构成了信号传导通路。本文将釉基质蛋白对细胞信号传导影响的研究现状作一综述。     

口腔鳞癌淋巴结转移与丝裂原活化蛋白激酶 激酶4基因表达的关系及其临床意义

目的 研究丝裂原活化蛋白激酶激酶4 (MKK4)在口腔鳞癌(OSCC)中的表达及其与浸润转移的关系.方法 应用免疫组织化学技术及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测口腔鳞癌原发灶及淋巴结转移灶中MKK4蛋白和mRNA的表达.结果 75例石蜡包埋口腔鳞癌组织中,MKK4蛋白的表达在48例转移组高于27例无淋巴结转移组...     

早期舌癌浸润深度与颈淋巴结转移的关系

目的:观察早期舌癌浸润深度与颈淋巴结转移的关系。方法:收集行颈淋巴清扫术的早期(T1、T2期)舌癌病例54例,测量原发灶肿瘤浸润深度,同时行颈淋巴结的细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)AE1／AE3免疫组化染色,观察颈淋巴结转移与肿瘤浸润深度等临床病理因素的关系。结果:舌癌肿瘤浸润深度为1.0-11.0mm,平均为5.2mm。54例病例中发生颈淋巴转移者22例(40.74％)。Fisher's精确概率检验表明,早期舌癌颈淋巴结转移与肿瘤浸润深度及病理分级密切相关;单因素Logistic回归表明,早期舌癌淋巴结转移与肿瘤浸润深度及病理分级相关;多因素Logistic回归表明早期舌癌淋巴结转移仅与肿瘤浸润深度相关(P<0.01)。T1、T2期舌癌肿瘤浸润深度>4mm者,颈淋巴结转移率(60％)显著高于≤4mm者(5.3％)(P<0.01)。结论:肿瘤浸润深度对评估早期舌癌颈淋巴结转移有重要意义。     

遍在蛋白-蛋白连接酶对骨形态发生蛋白/Smad通路的调节

Smad通路是转化生长因子(TGF)-β超家族包括骨形态发生蛋白(BMP)信号转导的经典通路.Smad复合物的积聚导致其基因转录的过度活化,因此Smad的降解对Smad通路的调控至关重要.遍在蛋白-蛋白水解酶复合体通路降解Smad,对调控TGF-β信号转导发挥重要的调节作用.遍在蛋白-蛋白连接酶(Smurf)作为这一系...