博落回总碱对肝癌细胞的毒性作用和体内抗肿瘤作用

目的 观察博落回总碱(TAPP)的体内外抗肿瘤活性作用。方法 MTT法检测TAPP体外对人肝癌Hep3B细胞、小鼠H22肝癌细胞的抑瘤作用;用小鼠移植性肿瘤法检测TAPP对小鼠H22肝癌细胞、S180肿瘤细胞的体内抑瘤作用。测3次重复实验结果。结果 (1)TAPP在体外有明显的细胞毒性作用,可抑制Hep3B、H22细胞增殖,且呈剂量依赖性:其对Hep3B细胞的半数抑制浓度(IC₅₀) 3次重复实验结果分别为3.04、3.98、2.98µg/ml,对H22细胞则分别为2.89、2.21、2.34µg/ml。(2)体内实验表明,TAPP可抑制H22细胞皮下移植瘤的生长,在剂量为每天1、2、4 mg/kg·b.w.时,3次腹腔注射给药实验测得抑瘤率分别为18.6%、35.1%、44.9%,而以每天4 mg/kg·b.w.时口服给药抑瘤率则为7.9%;另外,TAPP可明显延长S180腹水瘤小鼠存活时间,剂量为每天1、2、4 mg/kg·b.w. 时静脉注射给药生命延长率3次重复结果平均分别为24.8%、48.9%、52.7%。结论 TAPP在体内外均有明显的抗肿瘤活性。     

广西甜茶提取物体内抗肿瘤实验研究初探

目的探讨广西甜茶对小鼠肉瘤S180与肝癌H22移植性肿瘤的作用。方法广西甜茶以50%的乙醇提取制得提取物。分别考察提取物对小鼠肉瘤S180和小鼠肝癌H22移植瘤的作用。取肉瘤S180细胞/肝癌H22细胞分别接种于小鼠右前肢腋皮下,随机分为模型对照组、环磷酰胺(CTX)组及甜茶提取物低、中、高(1、3、9 g.kg-1.d-1)3个剂量组。CTX组按20 mg.kg-1.d-1腹腔注射给药,其余各组均灌胃给药,连续给药10 d后,剥离瘤体并称质量,计算抑瘤率,观察体质量、脾脏及胸腺的变化。结果甜茶提取物低、中、高剂量组均对小鼠肉瘤S180或肝癌H22移植瘤有不同程度的抑制作用,其中高剂量组对2种瘤体的抑制作用均显著(P<0.01),且对小鼠体质量、脾脏及胸腺质量均无明显影响。结论广西甜茶提取物对小鼠肉瘤S180与肝癌H22有较明显的体内抑制作用。     

薤白挥发油抗肿瘤作用的实验研究

目的 对从中药薤白中分离提取的挥发油进行抗肿瘤活性研究。方法 用细胞计数法绘制加药后瘤细胞的生长曲线图，用MTT法检测薤白挥发油对S180和H22细胞株的体外细胞毒作用；同时在昆明系小鼠异体移植性S180和H22肿瘤模型上观察薤白挥发油的抑瘤作用。结果薤白挥发油能够明显抑制体外培养的瘤细胞生长，对两种瘤细胞有明显的细胞毒效应，其IC50分别是145.97mg/L\153.16mg/L，而且对荷S180和H22小鼠的肿瘤生长有明显的抑制作用，高剂量组抑瘤率分别为60.86%、52.99%。结论 薤白挥发油在体内外对S180和H22均有抑制作用。     

蛇床子素对荷瘤小鼠的抗肿瘤作用

目的 本文研究天然香豆素化合物蛇床子素对多种瘤谱的抗肿瘤活性；并通过对胸腺、脾等多项指标综合考察蛇床子素的高抑瘤活性和低毒性特征。方法选择小鼠宫颈癌（U14）、肉瘤（S180）、肝癌（H22）3种瘤株分别接种于昆明种小鼠，给予灌服蛇床子素。结果3种瘤谱使用蛇床子素均有明显的抑瘤效果，最佳抑瘤率分别为U1460．0％、S18068．2％，如62．1％，并且蛇床子素对小鼠的肝、脾指数和胸腺指数几乎无影响；而阳性对照药顺铂组对小鼠的肝、脾指数、胸腺指数有着明显的损伤。结论蛇床子素有可能研制成为一种低毒、高效的抗肿瘤新药。     

龙枝提取物对小鼠H22和S180移植瘤的抑制作用

目的：研究龙枝提取物(由龙芽草、半枝莲等组成的中药复方的提取物)对小鼠移植性肝癌H22和肉瘤S180瘤体生长的抑制作用。方法：称取定量的龙枝提取物，用蒸馏水研磨配制成所需浓度的混悬药液。将肿瘤细胞悬液，以0.2ml／只的量接种于小鼠右前肢腋部皮下，24h后将已接种的小鼠随机分组。各组均连续给药7d，停药后1d将小鼠拉颈处死，剥取瘤块称重，计算抑瘤率。结果：龙枝提取物对小鼠移植性肝癌H22和肉瘤S180。均有较明显的抗肿瘤活性，其抑瘤率分别达63％和41％。结论：龙枝提取物有抗肿瘤作用。     

参麦注射液的抗肿瘤作用研究

目的 研究参麦注射液体内外抗肿瘤作用。方法 以小鼠肉瘤S180、肝癌H22、Lewis肺癌实体瘤模型考察参麦注射液的体内抑瘤作用;通过MTT法考察参麦注射液体外对人宫颈癌HeLa细胞和人肝癌HepG 2细胞的增殖抑制作用。结果 参麦注射液在体内对小鼠肉瘤S180、肝癌H22、Lewis肺癌均有显著的抑制作用,且呈剂量相关性,中、高剂量抑瘤率可达35%以上;体外对人宫颈癌HeLa细胞和人肝癌HepG 2细胞亦有增殖抑制作用,且呈浓度–时间相关性,48 h的IC50值分别为0.36、0.72 g /mL,72 h的IC50值分别为0.21、0.29 g /mL。结论 参麦注射液体内外均有显著的抗肿瘤活性。     

骆驼蓬总碱软胶囊对S180肉瘤和H22肝癌细胞体内增殖生长的影响

目的 观察骆驼蓬总碱软胶囊对移植型鼠源S180内瘤和H22肝癌细胞在荷瘤动物体内生长增殖的影响.方法 通过对昆明种受试小鼠右腋皮下接种S180肉瘤和H22肝癌细胞,分别建立体内两种不同移植型肿瘤病理模型,观察骆驼蓬总碱软胶囊在浓度为60 mg/kg、30 mg/kg及15 mg/kg连续ig给药10 d,对荷瘤小鼠体内瘤细胞裂殖生长增重的抑瘤作用及对脾脏指数、胸腺指数的影响.结果 骆驼蓬总碱软胶囊对鼠源移植型S180肉瘤细胞在三批次荷瘤小鼠体内的增殖生长均具有明显的抑制作用,抑瘤率在25.44％～48.81％之间,剂量组30 mg/kg抑瘤作用相对较好;对移植型H22肝癌细胞在三批次荷瘤小鼠体内的抑瘤率在21.91％～28.23％之间,剂量组60mg/kg抗癌作用相对较好;且显示对两种不同荷瘤小鼠的脾脏指数、胸腺指数均未见有显著性异常影响.结论 骆驼蓬总碱软胶囊对鼠源S180内瘤细胞和H22肝癌细胞在荷瘤小鼠体内增殖生长均具有较好的抑瘤作用,且对荷瘤小鼠免疫器官亦未见有明显异常性毒性损伤的影响.     

青蒿琥酯对H_(22)小鼠肝癌的体内抑瘤作用

目的:探讨青蒿琥酯对H22小鼠肝癌的体内抑瘤作用。方法:取雌性KM小鼠40只,将H22小鼠肝癌细胞接种于小鼠右前肢腋皮下,随机分为模型对照组(Control)、环磷酰胺组(CTX)及青蒿琥酯(ASUN)30、90、150mg/kg低、中、高三个剂量组,共5组,每组8只。连续腹腔注射给药8天后,剥取瘤块和脾脏,称重,计算抑瘤率。结果:青蒿琥酯30、90、150mg/kg剂量组的抑瘤率分别为38.9%、31.1%和21.5%,抑瘤率随剂量增大而降低,其中青蒿琥酯30mg/kg剂量组与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);荷瘤小鼠脾质量随青蒿琥酯剂量增加而增大。结论:青蒿琥酯对H22小鼠肝癌具有体内抑瘤作用。     

白芍总苷对荷瘤小鼠化疗的增效减毒作用研究

目的: 探讨白芍总苷(total glucosides of paeony,TGP)对环磷酰胺(CTX)治疗荷瘤小鼠的增效减毒作用,为寻找有效低毒的抗肿瘤药物及提高肿瘤化疗中的生存率提供有价值的实验资料。方法: 建立鼠S180腹水瘤及实体瘤模型,分别给予生理盐水(NS组)、不同剂量的TGP (TGP组)、CTX (CTX组)及CTX+TGP (TGP+MTX组)处理,连续给药10 d,观察腹水瘤小鼠的生存时间,计算生命延长率;检测实体瘤组瘤重、脾重及胸腺重,计算抑瘤率、脾指数及胸腺指数,并对T-淋巴细胞转化率及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)水平进行检测。结果: 与NS组比较,100 mg/kg和200 mg/kg TGP均可延长荷瘤小鼠的存活时间,差异有统计学意义(P < 0.01),且对S180移植肿瘤均有抑制作用,其抑瘤率分别为18%和30%。TGP组小鼠体重及脏器指数均高于NS组(P < 0.01)。TGP可增加T-淋巴细胞的转化率,升高血清TNF-α水平(P < 0.01)。结论: TGP对小鼠S180腹水瘤及实体瘤的生长具有一定的抑制作用,并可增加荷瘤小鼠的免疫功能,增强CTX的抗肿瘤作用,降低其对机体的毒性作用。     

环磷酰胺在动物模型体内抗肿瘤影响及抑瘤机制的研究

目的探讨环磷酰胺（CTX）在动物模型体内抗肿瘤影响及抑瘤机制。方法建立小鼠实体瘤模型和腹水瘤模型：分别在昆明系小鼠皮下接种S180肉瘤细胞、腹腔接种鼠源性H22肝癌细胞,同时给予环磷酰胺处理小鼠,其后观察各组肿瘤生长大小,小鼠存活率的变化;应用Western blot技术检测凋亡抑制基因（Bcl-2）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）含量、抑癌基因P53及P21的蛋白表达。结果环磷酰胺组肿瘤重量明显低于模型组（P〈0.05）,其抑瘤率为88.55%;小鼠存活天数均较模型组长,其生命延长率为57.73%;环磷酰胺可明显诱导P53的表达,抑制BCL-2的表达,从而促进肿瘤细胞的凋亡,但对P21没有作用;对瘤体组织中VEGF蛋白表达水平亦有抑制作用。结论环磷酰胺可通过激活抑癌基因P53,抑制抗凋亡基因Bcl-2和促血管生成因子VEGF等多种途径,发挥抗肿瘤活性,为抗肿瘤动物模型尤其为调节抗肿瘤相关基因表达方面的阳性药物对照提供重要的实验依据。     

雷公藤甲素对人肝癌细胞株HepG2体内外作用的研究

目的:探讨雷公藤甲素在体内外对人肝癌细胞HepG2的作用及可能的分子机制。方法:应用不同浓度的雷公藤甲素作用于体外培养的HepG2细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR法和Western blot法分别检测热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)mRNA和蛋白表达变化;caspase-3活性检测试剂盒分析其凋亡机制,建立人肝癌细胞HepG2裸鼠皮下种植瘤模型,实验组和对照组分别用雷公藤甲素(0.4mg/kg,每天1次)和相同体积的生理盐水,用药3周后观察肿瘤生长情况。结果:雷公藤甲素可显著抑制体外培养HepG2细胞增殖和诱导细胞发生凋亡(P<0.05),并呈现明显的量-效与时-效关系。应用雷公藤甲素后HepG2细胞中的HSP70的mRNA和蛋白表达明显的降低,呈现浓度依耐性,同时细胞质内caspase-3的活性随着剂量的增加而增加。此外,雷公藤甲素实验组种植瘤体积明显小于对照组(P<0.05)。结论:雷公藤甲素能通过诱导凋亡在体内外发挥对人肝癌细胞HepG2抗肿瘤作用,其机制可能与抑制HSP70蛋白和增加caspase-3的活性有关。     

人参皂苷Rg3联合奥沙利铂对肝癌Hep3B细胞株增殖及凋亡的影响

目的探讨人参皂苷Rg3(GS-Rg3)、奥沙利铂(L-OHP)单药及联合作用对肝癌Hep3B细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法培养Hep3B细胞株,采用不同浓度GS-Rg3(12.5、25.0、50.0、100.0μmol/L)(G组)、LOHP(1.25、2.50、5.00、10.00 mg/L)(O组)单药及联合应用(L组)进行干预,并设空白对照组(C组),MTt法观察各组对Hep3B细胞株生长的抑制作用;采用流式细胞仪检测上述药物单独或联合应用对Hep3B细胞株凋亡率的影响。结果GS-Rg3、L-OHP单药及联合采用对Hep3B细胞株的抑制作用均呈明显的时间与浓度依赖关系,O组较G组抑制率高,且与O组、G组比较,L组抑制率更高(P<0.05)。与C组比较,G组、O组、L组细胞凋亡率均增高(P<0.05),O组高于G组,且C组均高于O组、G组(P<0.05)。与GS-Rg3组比较,L-OHP组对Hep3B细胞株的抑制率及诱导凋亡率均较高(P<0.05)。结论 GS-Rg3、L-OHP能够抑制肝癌Hep3B细胞株增殖并诱导凋亡,两药联合有协同作用,且西药L-OHP抗增殖效应和诱导凋亡作用,均比中药GS-Rg3强。     

抗癌平颗粒剂的体内外抗肿瘤作用

目的 探讨抗癌平颗粒的体内外抗肿瘤作用.方法 检测抗癌平灌胃给药对S180移植性肿瘤的抑瘤率,并观察其对小剂量环磷酰胺抗癌作用的影响;通过小鼠生命延长率观察抗癌平颗粒灌胃给药对艾氏腹水瘤(EAC)的作用;观察抗癌平颗粒对大剂量环磷酰胺的影响;扶正试验观察抗癌平对荷瘤S180鼠免疫功能的影响;四甲基偶氮唑盐法(MTT)观...     

丙型肝炎病毒NS5B在Hep3B细胞的表达及活性分析

目的丙型肝炎病毒NS5B基因转染人肝癌细胞系Hep3B细胞,检测NS5B的表达与细胞内RNA聚合酶活性。方法使用脂质体把包含全长丙型肝炎病毒NS5B基因的重组载体pcDNA-5B转染到Hep3B细胞。RT-PCR和Wes-tern blot鉴定NS5B基因的表达,荧光素酶检测NS5B的细胞内RNA依赖的RNA聚合酶活性。结果RT-PCR和Westernblot发现转染NS5B基因的Hep3B细胞产生NS5B mRNA和NS5B蛋白,荧光素酶分析表明Hep3B细胞表达的NS5B蛋白具有细胞内RNA依赖的RNA聚合酶活性。结论人肝癌细胞系Hep3B细胞可以成功表达NS5B基因,且表达的NS5B蛋白具备细胞内RNA依赖的RNA聚合酶活性。     

LAK细胞对直肠腺癌细胞杀伤的观察

采用体外培养方法,在恒温(37℃)和5％CO_2条件下,连续观察LAK细胞对直肠腺癌细胞系(HR8348)的结合率。杀伤活性及杀伤动态。结果表明:HR8348细胞对LAK细胞杀伤较敏感,在相同的效靶比例条件下,4h时效靶细胞结合率为52.0±3.6,LAK细胞杀伤率为49.0±2.3％。效靶细胞结合率及杀伤率呈正相关(P<0.01),LAK细胞的杀伤取决于效靶细胞的稳定结合。LAK细胞杀伤HR8348的动态过程是:效靶细胞主动趋向运动→相互识别→接触与结合→LAK细胞发挥杀伤作用→靶细胞溶解。LAK细胞杀伤作用随效靶共育时间延长乃效靶比例的增高而增强。     

白藜芦醇对恶性黑色素瘤生长抑制作用的体外及体内研究

目的:研究白藜芦醇在体外和体内对恶性黑色素瘤的抗肿瘤效果.方法:采用MTT法测定白藜芦醇对小鼠B16及人A375细胞的增殖抑制率;用Western blot方法检测白藜芦醇对B16细胞中p-Akt蛋白表达的影响;建立B16皮下种植瘤小鼠模型,观察不同剂量的白藜芦醇对小鼠皮下瘤的生长抑制作用.结果:体外实验发现在白藜芦醇对B16及A375细胞均显示了良好的浓度依赖性;Western blot显示了不M浓度的白藜芦醇有效的抑制了p-Akt蛋白的表达,提示其抗肿瘤机制可能与此有关;体内实验证实不同浓度的白藜芦醇对恶性黑色素瘤的生长产生了明显的抑制作用.结论:体外和体内实验证实白藜芦醇有效的抑制了恶性黑色素瘤的生长,并且发现其抗肿瘤机制可能通过抑制p-Akt蛋白的表达来实现.这为白藜芦醇在恶性黑色素瘤的临床治疗的可能应用提供了实验基础,也为我国中草药的抗肿瘤效果的开发提供了具体思路.     

白藜芦醇对低分化肝癌细胞Hep3B增殖凋亡的影响

目的:探讨白藜芦醇(Resveratrol,Res)对低分化肝癌细胞Hep3B增殖凋亡的影响。方法:分别用不同浓度的Res(0、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L)处理Hep3B细胞,利用CCK-8法、PI染色、Annexin V-FITC/PI染色实验分别检测不同浓度的Res对低分化肝癌细胞Hep3B增殖、周期、凋亡的影响。结果:不同浓度的Res处理低分化肝癌细胞Hep3B后,Hep3B细胞的增殖能力下降,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05,P<0.01);低分化肝癌细胞Hep3B细胞周期被阻滞在G_2/M期,而细胞凋亡率显著增强(P<0.05)。结论:Res可抑制低分化肝癌细胞Hep3B的增殖并促进其凋亡,对细胞周期具有阻滞效应,为肝癌的临床治疗提供了新思路与新方向。。     

VEGF启动子介导双自杀基因重组腺病毒对LoVo细胞的体外杀伤作用

目的 探讨VEGF启动子驱动的CD／TK双自杀基因重组腺病毒(Ad-VEGFp-CDglyTK)对大肠癌LoVo细胞的体外杀伤作用。方法 分别用重组腺病毒Ad-VEGFp-CDglyTK、Ad-CMV-CD、Ad-CMV-TK、Ad-CMV-CDglyTK转染大肠癌LoVo细胞，给予前药5-FC、GCV，测定LoVo细胞的集落形成、细胞存活率及该治疗系统的旁观者效应。结果 与Ad-CMV-CD、Ad-CMV-TK相比，Ad-VEGFp-CDglyTK系统对LoVo细胞的集落形成、细胞生长均具有更强抑制作用，并可见较明显的旁观者效应：而与CMV启动子的双自杀基因相比，其作用无显著性差异。结论 VEGF启动子驱动的双自杀基因治疗系统对大肠癌LoVo细胞有确切的杀伤作用，其作用强度与强启动子CMV驱动的双自杀基因治疗系统似。     

补骨脂酚通过线粒体自噬抑制人肝癌Hep3B细胞生长的机制研究

[目的] 探讨中药补骨脂活性成分补骨脂酚（BAK）诱导人肝癌Hep3B细胞生长抑制的机制。[方法] 采用噻唑蓝法（MTT法）检测BAK对人肝癌Hep3B细胞生长抑制作用;相差显微镜观察BAK处理后Hep3B细胞形态变化;Hoechst/Mitotracker/Rhodamine荧光探针染色结合高内涵细胞成像系统分析BAK对线粒体功能的影响;免疫印迹法（Western blot法）考察BAK处理后自噬标志性蛋白溶酶体相关蛋白1（LAMP1）、微管相关蛋白1轻链3（LC3）、SQSTM1蛋白（p62）以及线粒体自噬标志性蛋白PTEN诱导假定激酶1（PINK1）、帕金蛋白（Parkin）、线粒体融合蛋白2（MFN2）、线粒体膜蛋白（Tom20）的表达情况;MTT法考察线粒体自噬抑制剂氯喹（CQ）、巴弗洛霉素A1（Baf-A1）对BAK诱导的肝癌细胞生长抑制的影响。[结果] BAK时间剂量依赖性抑制Hep3B细胞生长;高内涵实验结果表明BAK能够升高线粒体质量,降低线粒体膜电位;BAK可以上调LAMP1、LC3、PINK1、Parkin表达量,下调p62、 MFN2及Tom20蛋白表达;加入线粒体自噬抑制剂可显著逆转BAK诱导的Hep3B细胞生长抑制。[结论] 补骨脂酚通过线粒体自噬抑制人肝癌Hep3B细胞生长。