低氧对小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1表达的影响

目的 探讨低氧环境对小鼠成骨细胞富含半胱氨酸61(Cyr61/CCN1)表达的影响.方法 分别在氧浓度和去铁敏诱导的低氧环境下培养小鼠成骨细胞,Real-time PCR和Western blotting于不同时间点检测成骨细胞低氧诱导因子- 1α(HIF-1α)、Cyr61/CCN1和血管内皮生长因子的表达.分别敲除小鼠成骨细胞中HIF-1α和VHL基因,检测细胞Cyr61/CCN1的表达.结果 两种低氧环境下,小鼠成骨细胞HIF-1α通路被激活,Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著增加(P<0.05或P<0.01).HIF-1α基因敲除小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著减少,VHL基因敲除成骨细胞Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著增加(P<0.05或P<0.01).结论 低氧环境通过激活HIF-1α通路来上调小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1的表达.     

Cyr61基因与慢性粒细胞白血病的相关性研究

目的探讨慢性粒细胞白血病（CML）患者骨髓单个核细胞(BMMNC)中富半胱氨酸61基因（Cyr61）的表达水平及其临床意义。方法应用半定量RT PCR和免疫组化技术分别检测38例CML患者和10例正常对照者（正常对照组）骨髓单个核细胞中Cyr61mRNA和蛋白水平的表达情况,CML患者中慢性期20例（慢性期组）,加速期11例（加速期组）,急变期7例（急变期组）。结果38例CML患者中,慢性期组、加速期组、急变期组Cyr61mRNA的表达明显高于正常对照组(P＜0.05)。Cyr61基因在加速期及急变期的表达高于慢性期(P<0．05),Cyr61基因在加速期和急变期的表达虽升高,但两者差异无统计学意义(P>0．05)。Cyr61蛋白在CML中的表达明显高于正常对照组,CML加速期和急变期中Cyr61蛋白的表达高于慢性期（P均<0．05）。结论Cyr61基因参与了CML的发生、发展过程,且与CML的急变有关,可作为预示CML急变的实验依据。     

低氧对小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1表达的影响

目的 探讨低氧环境对小鼠成骨细胞富含半胱氨酸61（Cyr61/CCN1）表达的影响。 方法 分别在氧浓度和去铁敏诱导的低氧环境下培养小鼠成骨细胞,Real-time PCR和Western blotting于不同时间点检测成骨细胞低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、Cyr61/CCN1和血管内皮生长因子的表达。分别敲除小鼠成骨细胞中HIF-1α和VHL基因,检测细胞Cyr61/CCN1的表达。 结果 两种低氧环境下,小鼠成骨细胞HIF-1α通路被激活,Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著增加（P<0.05或P<0.01）。HIF-1α基因敲除小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著减少,VHL基因敲除成骨细胞Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著增加（P<0.05或P<0.01）。 结论 低氧环境通过激活HIF-1α通路来上调小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1的表达。     

Cyr61与乳腺癌的研究进展

高半胱氨酸蛋白61(cysteine rich61,Cyr61)是富含半胱氨酸的分泌性肝素连接蛋白,具有促进细胞增殖、迁移、黏附、分化和细胞外基质(ECM)合成等作用,在新生血管及肿瘤形成过程中起着重要作用。Cyr61在浸润、转移的乳腺癌中高表达,本文就Cyr61的结构、功能及其与乳腺癌关系的研究进展进行综述。     

Cyr61对急性肾损伤保护作用及其机制研究进展

富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)是一种分泌蛋白,在肾脏发生缺血再灌注损伤后,可在近端小管上皮中检测到Cyr61的表达,Cyr61可能对肾脏细胞具有一定的保护作用。对Cyr61在缺血性急性肾损伤(AKI)中作用及机制进行研究,可为AKI的诊断和治疗提供更多的理论依据。     

血管紧张素Ⅱ通过上调富含半胱氨酸蛋白61表达诱导HEK293T细胞凋亡

目的探讨富含半胱氨酸蛋白61（Cyr61）在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导HEK293 细胞功能中的改变及作用。方法 HEK293T细胞于体外培养,并应用CRISPR/Cas9技术敲低HEK293T细胞Cyr61基因。将细胞分为四组：（1）对照组;（2）Cyr61 敲低组;（3）AngⅡ组;（4）AngⅡ+Cyr61敲低组,以10-7 mol/L AngⅡ处理细胞,48 h收集细胞用流式细胞仪检测细胞凋亡,通过 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术及蛋白质免疫印迹技术检测细胞Cyr61及Bcl-2的mRNA及蛋白表达量。结果Cyr61敲低 组Cyr61蛋白水平较正常对照组明显下降（P<0.05）,AngⅡ干预48 h 后Cyr61蛋白和mRNA表达水平显著升高（P<0.05）,Bcl-2 蛋白和mRNA表达水平明显下降（P<0.05）,敲低Cyr61 后Bcl-2 蛋白和mRNA表达水平明显升高（P<0.05）,与对照组凋亡率 （11.88±1.46）%相比,Cyr61敲低组凋亡率为（3.87±0. 83）%,AngⅡ干预组HEK293T细胞凋亡率为（26.94±3.73）%（P<0.05）,与 AngⅡ干预组相比,Cyr61 敲低+AngⅡ组凋亡率为（15.76±1.31）%（P<0.05）。结论Cyr61 表达量的上调与AngⅡ诱导的 HEK293T细胞损伤有关,下调Cyr61的表达可以有效地保护AngⅡ诱导的细胞损伤。     

原发性MALT淋巴瘤中Cyr61的表达及临床意义

目的 研究原发性MALT淋巴瘤肿瘤组织中富含半胱氨酸61 (Cyr61)表达的临床意义。 方法 采用免疫组织化学染色法对40例MALT淋巴瘤Cyr61的表达情况进行检测,用细胞核增殖相关抗原(Ki-67) 单克隆抗体标记肿瘤细胞并计算细胞增殖指数,用SPSS1010 软件分析Cyr61 表达与该肿瘤细胞增殖指数、临床特征及预后的关系。 结果 ①40例MALT淋巴瘤病例中,25例（62.5%）肿瘤细胞表达Cyr61蛋白;Cyr61蛋白表达在MALT淋巴瘤和DLBCL中有差异（P ＜ 0.05）;②Cyr61蛋白阳性表达病例细胞增殖指数平均值为26.4%,差异具有显著性（t = 2.078,P = 0.045）;③Cyr61阳性和阴性病例生存率差异无显著性（P = 0.798）,Cox多因素相关分析显示大细胞转化、复发和细胞增殖指数高的病例预后较差（P ＜0.05）。 结论 Cyr61蛋白表达与MALT淋巴瘤细胞转化有关,大细胞转化和复发为MALT淋巴瘤的独立预后因素     

Cyr61与胃癌的研究进展

胃癌的发生、侵袭和转移涉及多条信号传导通路和复杂的分子作用机制,众多的研究集中于激活相关信号通路的上游分子上。Cyr61（cysteine-rich61,高半胱氨酸蛋白61）是即刻早期基因产物之一,为一种富含半胱氨酸的可与肝素、整合素结合的分泌性蛋白,可促进细胞增殖、黏附和分化,参与多种生理、病理过程。Cyr61可以通过NF-κB和PI3K/mTOR及MAPK信号通路促进胃癌细胞的侵袭,通过MAPK/ERK信号通路促进胃癌的腹腔种植转移,通过整合素αvβ3/Src/PI3K/Akt依赖的信号通路促进胃癌细胞的趋化性及跨血管内皮的迁移能力。     

富含半胱氨酸蛋白61在寻常型银屑病患者皮损中的表达与作用机制

【摘要】 目的 探讨富含半胱氨酸蛋白61 (Cyr61)在寻常型银屑病患者皮损中的表达及作用机制。方法 收集 38例寻常型银屑病患者的皮损组织和18例正常人的皮肤分别作为银屑病组和对照组,分别使用qRT-PCR和Western blot检测皮肤组织中Cyr61 mRNA和蛋白的表达。在TNF-a刺激HaCaT皮肤细胞的银屑病体外细胞模型中,使用 RNA干扰技术将Cyr61基因沉默(siCyr61),设计无关序列作为对照(siControl),依次使用CCK-8、qRT-PCR、Western blot、Elisa检测细胞增殖、炎性因子分泌和NLRP3炎症小体的表达。结果 银屑病患?者皮损组织中Cyr61 mRNA和蛋 白质的表达量显著高于对照组皮肤(P＜0.001)。与TNF-a + siContro 1组细胞相比较,TNF-a + siCyr61组细胞的增殖 在干预48h和72h时抑制效应显著(P＜0.001),细胞中IL-1β、JL-17、 JL-22、CXCL1 mRNA的表达量和细胞上清液中 IL-1β、JL-17、JL-22、CXCL1的含量均不同程度的降低(P＜0.05),细胞中NLRP3和maturvCaspaso 1蛋白的表达量显 著降低(P＜0.001)。结论 Cyr61在寻常型银屑病患者皮损中呈高表达,使用RNA干扰将Cyr61基因沉默后可降低 TNF-a诱导的HaCaT皮肤细胞增殖和炎性因子分泌,可能与抑制NLRP3炎症小体过度活化有关。     

Cyr61基因在非特指外周T细胞淋巴瘤中的表达及意义

目的探讨富含半胱氨酸61(Cyr61)在非特指外周T细胞淋巴瘤中的表达及意义。方法应用实时荧光定量PCR和免疫组织化学技术分别检测非特指外周T细胞淋巴瘤中Cyr61mRNA及其蛋白水平的表达情况,用细胞核增殖相关抗原(Ki-67)单克隆抗体标记肿瘤细胞并计算细胞增殖指数,用SPSS10.0软件分析Cyr61表达与该肿瘤细胞增殖指数、临床特征及预后的关系。结果①20例非特指外周T细胞淋巴瘤中有17例(85.0%)Cyr61mRNA表达上调,15例(75.0%)肿瘤细胞CYR61蛋白表达阳性;②Cyr61表达与该肿瘤细胞增殖指数呈正相关(r=0.8,P=0.008);③Cyr61表达与该肿瘤的临床分期、B症状及血清乳酸脱氢酶(LDH)有关(P=0.026,P=0.006,P=0.010);④Cox多因素相关分析显示,年龄>60岁和Cyr61表达上调为预后不良因素(P=0.020和P=0.021)。结论Cyr61在非特指外周T细胞淋巴瘤中广泛表达,可能与该肿瘤的临床特征和预后有关。     

胃癌组织中Cyr61、VEGF表达的意义

目的研究胃癌组织中Cyr61和VEGF的表达与临床病理学特征的关系。方法应用免疫组织化学方法检测70例胃癌组织以及20例胃癌癌旁组织中Cyr61和VEGF的表达。结果Cyr61和VEGF的在胃癌组织中表达均显著高于癌旁组织（P〈0．05）;胃癌组织中Cyr61和VEGF表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期密切相关（P〈0．05）;Cyr61和VEGF表达呈正相关性（P〈0．05）。结论Cyr61和VEGF在胃癌组织中高表达,两者在胃癌的生成和进展中起重要作用。     

Cyr61基因的生物学功能及在肿瘤发生发展过程中的作用

Cyr61（cysteine-rich 61）是CCN家族第一个被克隆出来的、由生长因子诱导产生的富含半胱氨酸的即刻早期基因产物。作为一种重要的细胞基质调节因子,Cyr61在胚胎发育、伤口修复、血管性疾病及肿瘤的发生发展过程中均发挥重要的生物学作用。研究发现Cyr61在肿瘤组织中广泛表达,并且与肿瘤新生血管形成及肿瘤细胞的增殖与凋亡、转移密切相关。Cyr61在不同细胞中的表达受多种信号通路的调控,可与多种整联蛋白结合激活不同的下游通路,可能通过参与Wnt、NF-kB、Tyrosine Kinase（酪氨酸激酶）、Akt等信号转导通路调控其它癌基因、抑癌基因或凋亡调控因子的表达。     

Cyr61在单纯及放创复合伤愈合过程中的表达及其临床意义

目的研究Cyr61在单纯和放创复合伤愈合过程中的表达变化,对伤口愈合和组织改建的影响,及其在创伤实验室诊断中的意义。方法制备单纯及放创复合伤动物模型,采用光镜、免疫组化、RT-PCR等方法,动态观察伤口愈合过程中Cyr61mRNA及蛋白表达变化规律。结果5Gy(γ射线)全身照射后对伤口愈合有明显的损害作用。在伤后第3、6、9、15天,Cyr61表达量均随创伤愈合时间延长而增加;但在同一时间点,放创复合伤组Cyr61蛋白和mRNA的表达量均低于单纯创伤组,第21天放创复合伤组表达继续升高,而单纯创伤组表达下降。Cyr61表达时相拖后与辐射所致伤口愈合延迟一致。结论Cyr61在放创复合伤肉芽组织中表达较单纯创伤组明显降低,影响细胞迁移、新生血管形成和组织改建等重要过程,这可能是辐射所致伤口难愈的重要原因之一,认识Cyr61在创伤愈合过程的表达规律有助于创伤的预后判断和治疗。     

大鼠即刻早期基因产物Cyr61短发夹环 RNA质粒的构建与鉴定

目的构建Cyr61短发夹环RNA(shRNA),探讨即刻早期基因产物Cyr61RNAi对Cyr61功能的影响,以期为进行这方面研究提供基础。方法在Gene Bank中查到鼠Cyr61的mRNA基因序列并输入到相应设计软件中,以此设计引物序列。经PCR扩增、酶切后,克隆于Pgenesil-1载体并行酶切鉴定。结果构建的鼠即刻早期基因产物Cyr61shRNA质粒经测序鉴定验证与预期相符。结论该研究结果为研究Cyr61shRNA质粒的RNAi功能及其对Cyr61功能影响的研究奠定了基础。     

Cyr61、CTGF、NOV、WISP-1基因在肾癌中的表达

目的〓〖HTK〗探讨肾癌组织CCN蛋白中Cyr61、CTGF、NOV和WISP-1 基因的蛋白表达水平及意义。〖HTW〗方法〓〖HTK〗采用Western blot半定量方法检测31例肾癌组织和18例癌旁正常肾组织中Cyr61、CTGF、NOV、WISP-1基因的蛋白表达。 〖HTW〗结果〓〖HTK〗Cyr61、CTGF、NOV、WISP-1蛋白在肾癌组织中的表达水平均低于癌旁正常组织(P<0.05)，其中乳头状肾癌的NOV和WISP-1 表达水平高于透明细胞癌(P<0.05)，G1级肿瘤NOV表达水平高于G2，3肿瘤(P<0.05)。 〖HTW〗结论〓〖HTK〗Cyr61、CTGF、NOV和WISP-1在肾癌中低表达， CCN基因在肾癌的发生和发展中可能起抑制作用。     

Cyr61在人肿瘤组织中的表达

目的观察分析富含半胱氨酸61(cysteine-rich61,Cyr61)在人类肿瘤组织中的表达情况。方法采用HE染色、免疫组化的方法检测多组织肿瘤组织芯片和30例肿瘤组织标本(包括食管癌、胃癌、直肠癌、肺癌、乳腺癌和肝癌组织标本各5例)中Cyr61的表达。结果组织芯片中79%(38/48)的肿瘤组织Cyr61表达阳性,93%(28/30)肿瘤组织标本中Cyr61表达阳性。其中神经、食管和甲状腺等肿瘤组织中呈强阳性表达,胃、肝、结肠、直肠、肺、肾、子宫、皮肤、卵巢、乳腺等组织的肿瘤呈阳性表达,在膀胱、前列腺和胰腺等肿瘤组织中表达较弱。结论Cyr61在多数肿瘤组织中均过表达,在不同肿瘤组织中表达程度不同,Cyr61可能成为新的肿瘤标志物应用于多种肿瘤的诊断。