骨髓间充质干细胞在造血干细胞移植中的应用研究

造血干细胞移植(HSCT)后，干细胞的成活、分化、增殖及造血功能的恢复，影响治疗的效果，移植过程中难免会遇到诸多问题。如造血微环境的破坏，干细胞归巢问题及移植后的移植物抗宿主反应(GVHR)均影响移植成败。近年研究发现骨髓间充质干细胞(MSC)为造血微环境的重要组成成分，可分泌多种细胞因子，能够促进造血，加速干细胞归巢，还能参与免疫反应，降低T淋巴细胞反应。而MSC的这些特性恰好可以减少HSC中的以上问题。因此，国内外已将HSC与MSC共移植治疗恶性肿瘤应用于临床，并取得了良好的临床效果。     

骨髓间充质干细胞在造血干细胞移植中的应用研究

造血干细胞移植(HSCT)后,干细胞的成活、分化、增殖及造血功能的恢复,影响治疗的效果,移植过程中难免会遇到诸多问题。如造血微环境的破坏,干细胞归巢问题及移植后的移植物抗宿主反应(GVHR)均影响移植成败。近年研究发现骨髓间充质干细胞(MSC)为造血微环境的重要组成成分,可分泌多种细胞因子,能够促进造血,加速干细胞归巢,还能参与免疫反应,降低T淋巴细胞反应。而MSC的这些特性恰好可以减少HSC中的以上问题。因此,国内外已将HSC与MSC共移植治疗恶性肿瘤应用于临床,并取得了良好的临床效果。     

脂肪来源的间充质干细胞与乳腺癌关系研究进展

脂肪来源的间充质干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）对乳腺癌细胞的影响备受关注。尽管大部分基础实验研究证明ADSCs具有“促肿瘤”的作用,但是临床病例调查分析结果却有所不同。本文系统性回顾了ADSCs的生物学特性,ADSCs在乳腺癌肿瘤微环境中的作用,ADSCs对乳腺癌细胞的影响以及自体脂肪填充或移植的临床现状,对实验室基础研究及临床现状进行综述。     

自体或异体间充质干细胞移植对造血重建的影响

目的 初步探讨自体或异体间充质干细胞(MSC)移植对造血重建的影响.方法 采用含血清培养体系培养扩增自体或供者骨髓以及来自胚胎的MSC,例1为系统性红斑狼疮(SLE);例2为非霍奇金淋巴瘤(NHL),患者在造血干细胞移植(HSCT)前先输注自体MSC,然后进行自体HSCT;例3为阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH),在HSCT前先输注供者MSC,然后进行同基因异体HSCT;例4为慢性粒细胞白血病(CML),行异基因HSCT;例5为淋巴瘤行自体HSCT,在移植后造血恢复缓慢(分别为+129天,+78天)移植来自胚胎的MSC.结果 例1、例2和例3患者MSC和HSCT联合无明显不良反应.中性粒细胞≥0.5×109/L和血小板≥20×109/L的时间分别为移植后1、10、10和1、8、33 d.粒细胞缺乏时间分别为0、7、12 d;输注来自胚胎MSC的患者(例4、例5),1个月内造血仍无恢复,MSC移植失败.结论 MSC移植时机掌握很重要,与HSCT同时进行,可以促进造血重建,而在移植后一些造血重建缓慢的患者再进行MSC移植的疗效还有待进一步研究.

Abstract：

Objective To investigate the impact of auto and allogenic mesenchymal stem cells (MSC) transplantation on hematopoietic reconstitution. Methods MSC from auto, donor bone marrow or embryonic tissue were cultured and expanded in vitro in the serum culture system. Five patients received hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) were investigated. Case 1 of systemic lupus erythematosus and Case 2 of non-hodgkin' s lymphoma (NHL) received auto MSC transplant before auto-HSCT. Case 3 of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria received HLA-identical allogenic MSC transplant before HLA-identical allo-HSCT.Case 4 of chronic myelocytic leukemia and Case 5 of NHL had delayed hematopoietic reconstitution (129th and 78th day, respectively) after allo- and auto-HSCT, respectively, and received MSC from embryonic tissue.Results Case 1, 2 and 3 had no manifested side effects after MSC transplantation combined with HSCT.Neutrophil count of case 1, 2, and 3 were over 0.5 ×109/L at 1st, 10th and 10th day, respectively, platelet count were over 20 ×109/L at 1st, 8th and 33th day, respectively, and agranulocytosis at Ost, 7th and 12th day, respectively. The treatment of embryonic tissue MSC transplant was confirmed to fail for Case 4 and 5.Conclusion The time of MSC transplant has a great impact on hematopoietic reconstitution. MSC transplantation and HSCT performed simultaneously can improve hematopoietic reconstitution. However, the impact of MSC on patients with delayed hematopoietic reconstitution after HSCT needs further study.     

骨髓间充质干细胞移植后在肝损伤大鼠体内的分布及其治疗作用

目的探讨同种异体骨髓间充质干细胞（MSCs）移植后在大鼠体内的分布及其对肝损伤的治疗作用。方法应用2-乙酰氨基芴（2-AAF）建立大鼠急性肝损伤模型,经门静脉注射进行同种异体骨髓MSCs移植后不同时间,通过4,6-二醚基-2-苯基吲哚盐酸化合物（DAPI）标记、免疫组化Y染色体性别决定区（SRY）检测等方法观察移植细胞分布,并通过肝组织病理改变和丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）和血清白蛋白（ALB）的变化观察MSC移植对肝损伤的治疗作用。结果2-AAF可导致大鼠肝组织弥漫性损伤,移植后1w和3w肝组织病变减轻。移植后1W受体鼠肝、肺及脾脏中均可见DAPI阳性细胞,移植后3w仅在肝损伤大鼠肝内发现DAPI阳性细胞组成的细胞簇,形态与肝实质细胞相近;SRY蛋白检测结果与之一致。干细胞移植后1W,移植组大鼠血清A岍较移植前显著降低,但仍高于对照组;血清AST较移植前显著降低,且与对照组无显著差异;血清ALB较移植前增高,但仍显著低于对照组。干细胞移植后3w,ALT、AST以及ALB均与对照组无显著差异。结论2-AAF可造成大鼠肝组织弥漫性损伤,肝损伤环境有助于经门静脉移植的骨髓MSCs的定植,MSCs移植对大鼠肝损伤具有治疗作用。     

间充质干细胞介导的肿瘤治疗

间充质干细胞（MSC）内在的肿瘤趋向性和固有的低免疫原性,使其可能成为肿瘤靶向治疗的理想载体。MSC 本身可通过释放细胞因子发挥一定的抗肿瘤作用,而通过溶瘤病毒、抗血管生成药物、肿瘤坏死因子诱导凋亡配体、IL、IFN 及前体药物修饰的 MSC 抗肿瘤效果进一步加强。另外,MSC 联合其他治疗也显示出一定的优势。     

我国急性放射病防治的实验研究进展

随着核技术在军用和民用领域的广泛应用,已取得极大的经济效益和社会效益,但战争中的核武器、恐怖分子的核脏弹、核废料与核电站泄漏事故、工业探伤机与工业放射源机器故障和医疗性辐射损伤,使急性放射病（acute radiation syndrome,ARS）患者数量不断增加。ARS的防治是核与辐射事故应急医学处理的重要环节,但截至目前,医务人员对ARS的治疗效果不尽如人意,受照剂量≥6 Gy的受照者的病死率为6.8%,≥6 Gy的受照者的病死率为90.0%,而≥8 Gy的受照者无一例存活,因此还需要加强对ARS防护和救治的研究。相关科学工作者也积极拓展ARS救治和防护的思路并进行了实验研究,本文就我国近年对ARS防治的实验研究情况作一概述。     

成年人脂肪源间充质干细胞治疗急性移植物抗宿主病后CD+8 T细胞亚群的变化

  目的 初步探讨成年人脂肪源间充质干细胞（AMSC）治疗急性移植物抗宿主病（aGVHD）的分子机制。方法 3例行异基因造血干细胞移植术后发生aGVHD的患者,以每1 kg体重2×106个细胞剂量静脉输注AMSC;首先应用尼龙毛柱分离外周血T淋巴细胞,再经CD8磁珠分选出CD+8 T淋巴细胞,应用流式细胞术检测发生aGVHD患者使用AMSC前后外周血CD+8 T细胞亚群的变化。结果 与输注AMSC前相比,输注AMSC后,CD+8 T细胞中的CD+8 CD-28亚群显著上调,同时,患者的aGVHD得以有效控制。结论 AMSC治疗aGVHD的作用机制可能与其上调CD+8 CD-28 T细胞亚群有关,CD+8 T细胞可能是AMSC作用的靶细胞。     

间充质干细胞与造血调控

人骨髓存在两类向不同系列分化的干细胞:造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSC)和间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC).     

骨髓间充质干细胞移植治疗再生障碍性贫血22例临床观察

 【摘要】　目的　探讨骨髓间充质干细胞（BMSC）移植治疗再生障碍性贫血（AA）患者的疗效和安全性。方法　22例AA患者,中位年龄31岁（12～70岁）,包括重型AA 11例,非重型AA 11例;12例曾接受免疫抑制治疗,均无效。从健康供者骨髓中分离培养BMSC,静脉输注给患者,每次输注细胞数为1×106／kg,每周输注1～2次。观察治疗前后患者外周血细胞计数、骨髓细胞学、骨髓活检、外周血CD+3 CD+4、CD+3 CD+8 T淋巴细胞亚群比例及临床症状等,观察治疗相关不良反应。结果　22例患者接受BMSC输注的中位次数为16次（5～83次）,中位治疗时间13个月（2～33个月）,中位随访23个月（2～34个月）。其中1例患者基本治愈,9例缓解,3例明显进步,3例患者贫血和出血症状好转、输血间隔延长,6例无效;总有效率72.7 %（16／22）。3例曾接受标准方案免疫抑制治疗无效的患者中,2例缓解。14例患者在治疗前外周血CD+4／CD+8细胞比值倒置,治疗后10例恢复正常。所有患者均未出现明显的治疗相关不良反应。结论　BMSC治疗有助于改善AA患者的骨髓造血功能,短期观察未发现不良反应,值得进一步深入及扩大研究。     

间充质干细胞在移植中的作用

 间充质干细胞（MSC）是一类具有高度自我更新及多向分化潜能的组织干细胞,易于在体外扩增,在造血干细胞移植（HSCT）及其他系统的移植中发挥重要的作用。详细阐述了MSC支持造血、促进植入,调节免疫及减轻移植后的移植物抗宿主病（GVHD）等方面的功能及机制,并对其在临床上的进一步应用提出建议与展望。     

间充质干细胞在造血干细胞移植中的应用

 间充质干细胞是一种能够从各种人成体组织分离出来的非造血多能干细胞,近年来,许多研究表明间充质干细胞具有免疫调节能力及促进组织重建等功能。就其在造血干细胞移植中的应用,如急慢性移植物抗宿主病（GVHD）、GVHD造成的移植失败、纯红细胞再生障碍性贫血及免疫性血小板减少性紫癜、出血性膀胱炎作以综述。     

异基因造血干细胞移植治疗急性髓系白血病的现状

 异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）是治疗急性髓系白血病（AML）的有效方法之一。allo-HSCT的治疗作用来自于预处理中的放疗和（或）化疗,以及供者免疫系统的移植物抗白血病（GVL）效应。近十年来,随着对白血病细胞生物学特性研究的不断深入,根据细胞遗传学和分子标志对AML进行危险程度分级,使我们能够挑选出哪些AML患者可以从allo-HSCT中获益。allo-HSCT治疗AML的临床疗效已有明显提高,并且适用范围也较前扩大,但在AML中的应用还存在一定差异。现对allo-HSCT治疗AML的机制、时机、疗效、供者选择及预处理方案进行讨论。     

间充质干细胞外泌体miRNA在放射性损伤中的研究进展北大核心

放射性损伤(RI)是恶性肿瘤放射治疗的常见并发症。随着精确放疗技术的发展,RI的发生率虽明显降低,但仍不能完全避免,严重的RI会影响患者生存质量和预后。目前临床上的治疗手段十分有限。间充质干细胞外泌体(MSC-exo)是间充质干细胞(MSC)分泌的囊泡样物质,其携带的miRNA、特异性蛋白和脂质等活性物质参与细胞间的信息交流。近年有研究表明,MSC-exo释放的miRNA可通过抗细胞凋亡、调节免疫反应和促进血管生成来减轻和修复受损组织。本文将从MSC-exo携带的miRNA生物学特征、作用机制以及在放射性损伤中的相关研究进展进行综述。     

脂肪间充质干细胞分泌的Exosome促进结肠癌细胞系上皮间质转化

目的：研究间充质干细胞（mesenchymal stem cell,MSC）来源的Exosome对结肠癌细胞系HCT8上皮间质转化（epithelial mesenchymal transition,EMT）的影响。方法从人脂肪组织中分离出MSC后,对MSC进行培养并传代,并对MSC的分化能力进行鉴定。在人脂肪来源的MSC中提取Exosome后,用透射电子显微镜观察并拍照,并用蛋白质印迹法检测其抗原表达情况。在HCT8培养体系中加入人脂肪来源的MSC分泌的Exosome ,定量PCR和蛋白质印迹法检测上皮和间质转化相关标志物的表达,细胞侵袭和迁移实验检测人脂肪来源的MSC分泌的Exosome对HCT8迁移和侵袭的影响。结果人脂肪来源的MSC具有多系分化能力,人脂肪来源的Exosome直径为40～100 nm ,表达CD63、HSP70和HSP90,下调HCT8上皮相关标志E-cadherin和ZO-1的表达,上调间质相关标志Fibronectin的表达,促进HCT8的迁移和侵袭。结论人脂肪来源的MSC分泌的Exosome可促进结肠癌细胞系HCT8的EMT。     

外周血干细胞移植治疗11例急性白血病和恶性实体瘤

目的:观察外周血干细胞移植(PBSCT)治疗急性白血病和恶性实体瘤的临床疗效观察。方法:自1999年11月至2004年3月,用PBSCT治疗急性白血病和恶性实体瘤11例,其中:急性淋巴细胞白血病(ALL)1例;急性非淋巴细胞白血病(ANLL)3例;非霍奇金淋巴瘤(NHL)4例;霍奇金淋巴瘤(HD)1例;乳腺癌1例;恶性黑色素瘤1例。除1例异基因外周血干细胞移植患者采用重组人粒细胞集落刺激因子(rhGCSF,惠尔血)对供者进行动员外,其他患者均为自体外周血干细胞移植,动员方案为化疗 rhGCSF。经2次采集,获得MNC为(5.91±2.34)×108/kg,CD34 细胞为(14.05±6.65)×106/kg,CFUGM(4.80±2.80)×105/kg。预处理方案3例患者采用FTBI加化疗,8例患者采用高剂量化疗方案。结果:所有患者移植后均重建造血。外周血WBC于移植后(6±1)天降至0。PLT于(7±1)天降至30×109/L以下。WBC>1.0×109/L、中性粒细胞>0.5×109/L、PLT>50×109/L,分别为(11±2)天、(11±2)天、(13±3)天。3例患者于移植后1～12个月死于肝功能衰竭或病情复发,2例患者带瘤生存3～5个月,其余患者均无瘤存活3～46个月,疗效仍在近一步随访中。结论:PBSCT对急性白血病和恶性实体瘤是一种安全有效的治疗方法。     

异基因造血干细胞移植治疗白血病

目的探讨异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)治疗白血病的疗效、造血重建及生存情况.方法白血病患者10例,其中同胞间HLA相合的异基因外周血干细胞移植(Allo-PBSCT)7例,无亲缘关系HLA不全相合脐血移植(UCBT)3例.结果9/10例受者获造血重建,UCBT患者造血重建速度较HLA相合的同胞PBSCT慢,1例UCBT移植后35天造血未重建,回输自体外周血干细胞后,仍未能重建造血,于72天死亡.其余至今均无病生存.结论Allo-HSCT是目前治愈白血病的有效方法,对于无同胞HLA相合的供者,选择细胞数量较高、HLA 1～2个位点不合的UCBT仍然有效可行.     

间充质干细胞来源的外泌体治疗放射性肠炎的疗效与安全性

目的：探讨间充质干细胞来源的外泌体（MSC-Exo）对人结肠癌CT26细胞体外增殖、迁移的影响及对放射性肠炎（RE）荷瘤小鼠模型的治疗效果及其安全性。方法：利用商品化含MSC-Exo的液体敷料产品（MSC-Exo产品）,通过纳米颗粒追踪分析、透射电镜、WB法对其中的MSC-Exo进行鉴定。采用CCK-8法和Transwell小室法检测MSC-Exo产品对结肠癌CT26细胞增殖、迁移的影响。构建CT26细胞荷瘤小鼠模型,连续7 d分别给予400μL MSC-Exo产品、MSC培养基或生理盐水灌胃,评估MSC-Exo产品在体内对肿瘤生长和小鼠生存的影响。构建RE荷瘤小鼠模型,连续7 d分别给予400μL MSC-Exo产品、MSC培养基、生理盐水灌胃治疗,通过小肠组织H-E染色法评估MSC-Exo产品治疗RE的有效性与安全性。结果：纳米颗粒追踪分析、透射电镜、WB法的鉴定结果确证了商品化的液体敷料中含有MSC-Exo有效成分。体外研究表明,MSC-Exo产品成分不会促进结肠癌CT26细胞的增殖和迁移,具有安全性。体内研究结果发现,MSC-Exo产品的灌胃给药并不影响荷瘤小鼠的肿瘤生长和生存...     

造血干细胞移植前全身照射急性放射性反应与照射剂量的关系

目的探讨造血干细胞移植前全身照射急性放射性反应与照射不同总剂量及分次剂量的关系。方法回顾性分析2015年5月至2019年12月于石家庄平安医院造血干细胞移植前接受6 MV X线全身照射预处理的48例患者的临床资料。将患者按照射总剂量分为8 Gy组(12例)、10 Gy组(31例)和12 Gy组(5例),按分次照射剂量分为4 Gy/次组(17例)和5 Gy/次组(31例),总结比较各组患者放疗后的口腔黏膜、咽部、涎腺、上消化道、下消化道及肺的急性放射性反应发生情况。结果照射总剂量8 Gy组咽部急性放射性反应0级11例(91.7%),1级1例(8.3%);10 Gy组0级10例(32.3%),1级13例(41.9%),2级4例(12.9%),3级3例(9.7%),4级1例(3.2%);12 Gy组0级2例(40.0%),1级、2级、3级各1例(20.0%);照射总剂量8 Gy组咽部急性放射性反应较10 Gy组和12 Gy组轻,差异有统计学意义(χ2=11.338,P=0.003);其他部位急性放射性反应发生率差异均无统计学意义(均P>0.05)。分次照射剂量4 Gy/次组咽部急性放射性反应0级13例(76.5%),1级2例(11.8%),2级、3级各1例(5.9%);5 Gy/次组0级10例(32.3%),1级13例(41.9%),2级4例(12.9%),3级3例(9.7%),4级1例(3.2%);分次照射剂量4 Gy/次组咽部急性放射性反应较5 Gy/次组轻,差异有统计学意义(Z=-2.606,P=0.009);其他部位急性放射性反应发生率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论造血干细胞移植前全身照射总剂量8 Gy及分次剂量4 Gy/次能减轻咽部急性放射性反应。     

造血干细胞移植在原发性骨髓纤维化治疗中的应用

药物及对症支持治疗仍然是原发性骨髓纤维化(PMF)的主要治疗方法,但是其仅能改善患者症状而无法改变PMF的自然病程,而造血干细胞移植是目前治愈PMF唯一有效的手段.然而,严重的移植相关并发症限制了其在PMF患者中的广泛开展.文章就PMF患者造血干细胞移植过程中供者的选择、预处理方式、影响移植成功的因素等作一综述.