MRL/lpr小鼠肾组织MCP-l表达及MMF对其表达的影响和相关机制研究

目的:检测MRL/lpr狼疮小鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达及探讨霉酚酸酯(MMF)对其影响和相关机制,研究MMF对MRL/lpr狼疮小鼠的治疗作用.方法:MRL/lpr狼疮小鼠分为对照组和治疗组两组.观察肾组织病理学改变及其MCP-1、CD14和蛋白激酶C(PKC)等的表达以及尿蛋白、抗ds-DNA抗体水平的变化.结果:对照组小鼠肾小球基底膜增厚,系膜基质增多,肾组织MCP-1表达上调,CD14+细胞数明显增多,伴尿蛋白及抗ds-DNA抗体水平增加.治疗组小鼠肾组织MCP-1表达减少,CD14+细胞数减少,尿蛋白和抗ds-DNA抗体水平减少,且肾小球MCP-1与其PKC表达水平及肾小球CD14+细胞数、尿蛋白水平呈直线相关关系.结论:MMF对MRL/lpr小鼠自发狼疮肾炎具有治疗作用,其机制可能通过抑制PKC通道激活减少小鼠肾组织MCP-1的表达,从而减少肾组织单核细胞的浸润,减轻肾脏损害.     

雷公藤内酯醇对MRL/lpr狼疮鼠血清IL-2、IL-4、IFN-γ水平的影响

目的观察雷公藤内酯醇对MRL/lpr狼疮鼠外周血清IL-2、IL-4、IFN-γ水平的影响。探讨雷公藤内酯醇治疗红斑狼疮的可能机制。方法选择30只MRL/lpr狼疮鼠和10只野生对照型MRL/MPJ小鼠,分为4组,狼疮鼠雷公藤内酯醇组、生理盐水组、未干预组、野生对照组,分别予以尾静脉注射雷公藤内酯醇（100μg/kg/d）和等量的生理盐水5d后24h后常规分离血清后,采用双抗体夹心法（ELISA）测定各组小鼠血清IL-2、IL-4、IFN-γ水平的变化。结果与野生对照型MRL/MPJ小鼠相比,MRL/lpr狼疮鼠血清中IFN-γ、IL-4含量升高（P〈0.05,P〈0.05）,IL-2水平降低（P〈0.05）,经过雷公藤内酯醇治疗后,血清IFN-γ、IL-4水平降低（P〈0.01,P〈0.05）,IL-2水平升高（P〈0.01）。结论通过调节Th1/Th2细胞因子的失衡可能是雷公藤内酯醇治疗红斑狼疮的机制之一。     

对苯二胺与H2O2混合物诱导小鼠狼疮样改变的作用

目的 了解对苯二胺(PPD)与H2O2混合物诱导BALB/c小鼠产生狼疮样改变的作用.方法 将21只6周龄雌性BALB/c小鼠随机分为高PPD组(n=7,800 mg/kg)、低PPD组(n=7,400mg/kg)和对照组(n=7,生理盐水),经皮染毒.检测小鼠血清抗核抗体(ANA)与抗双链DNA抗体(抗dsDNA抗体)及尿蛋白含量,染毒12周取肾脏组织做病理学检杳,观察HE、PAS染色及电镜下变化.结果 第12周高PPD组ANA(220.89±6.16)和抗dsDNA抗体浓度(34.30±1.29)分别高于低PPD组ANA(169.24±16.12)、抗dsDNA抗体浓度(30.78±0.64)和对照组ANA(92.22±7.94)、抗dsDNA抗体浓度(23.77±0.54),差异均有显著性(P＜0.01).第12周高、低PPD组ANA和抗dsDNA抗体浓度均分别高于染毒前两组ANA和抗dsDNA抗体浓度,差异均有显著性(P＜0.01).自6周开始,各组小鼠尿蛋白差异均有显著性(P＜0.05).光镜下可见肾小球肾炎表现(肾小球系膜细胞增生、系膜区增宽,肾间质炎性细胞浸润;肾小管管腔内有大量分泌物),电镜示足突融合和皮下电子致密物沉积.结论 PPD和H2O2混合物在诱导小鼠产生狼疮样改变中有一定的作用.     

MRL／lpr小鼠肾组织MCP-1表达及MMF对其表达的影响和相关机制研究

目的：检测MRL／lpr狼疮小鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达及探讨霉酚酸酯（MMF）对其影响和相关机制,研究MMF对MRL／lpr狼疮小鼠的治疗作用。方法：MRI/lpr狼疮小鼠分为对照组和治疗组两组。观察肾组织病理学改变及其MCP-1、CD14和蛋白激酶C（PKC）等的表达以及尿蛋白、抗ds—DNA抗体水平的变化。结果：对照组小鼠肾小球基底膜增厚,系膜基质增多,肾组织MCP-1表达上调,CD14^＋细胞数明显增多,伴尿蛋白及抗ds—DNA抗体水平增加。治疗组小鼠肾组织MCP—l表达减少,CD14^＋细胞数减少,尿蛋白和抗ds—DNA抗体水平减少,且肾小球MCP-1与其PKC表达水平及肾小球CD14^＋细胞数、尿蛋白水平呈直线相关关系。结论：MMF对MRL／lpr小鼠自发狼疮肾炎具有治疗作用,其机制可能通过抑制PKC通道激活减少小鼠肾组织MCP-1的表达,从而减少肾组织单核细胞的浸润,减轻肾脏损害。     

白芍总苷对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的影响

目的观察白芍总苷(TGP)对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的影响。方法将MRL/lpr狼疮肾炎小鼠随机分为模型组和TGP组。考马斯亮蓝法检测尿蛋白含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IgG型抗dsDNA抗体、ANA水平,HE染色光镜下观察肾组织病理改变,称脾脏和胸腺湿重,并计算脾脏和胸腺指数。结果①与模型组相比,TGP组用药后15、30 d尿蛋白含量显著下降(P<0.05),用药后30 d抗dsDNA抗体、ANA水平和脾脏质量及其指数均显著下降(P<0.05),肾脏组织病理损害明显减轻。②TGP组用药后15、30 d与用药前相比,尿蛋白含量、抗dsDNA抗体水平、ANA水平显著下降(P<0.05),而模型组抗dsDNA抗体水平显著上升(P<0.05),尿蛋白含量、ANA水平无显著差异;TGP组用药后30d与用药后15d相比尿蛋白含量显著下降(P<0.05),抗体水平无显著差异。结论白芍总苷可以降低尿蛋白含量和血清抗dsDNA抗体、ANA水平,明显改善肾组织病理损害,对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎具有一定疗效。     

青蒿-鳖甲药对配伍对MRL/lpr狼疮小鼠IL-6、IFN-γ分泌及狼疮性肾炎病理改变的影响

目的:观察青蒿-鳖甲药对对MRL/lpr狼疮模型小鼠相关免疫指标及狼疮性肾炎(lupus nephri-tis,LN)病理改变的影响,探索青蒿-鳖甲药对对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)的治疗机理。方法:采用ELISA方法检测小鼠血清中的IL-6、IFN-γ含量,对肾脏组织进行HE常规染色及PAS、Masson特殊染色。结果:灌胃青篙-鳖甲药对水煎液后,低、高剂量组MRL/lpr小鼠血清中的IL-6水平显著低于正常对照组(P0.05或P0.01);高剂量组血清中的IFN-γ水平与模型组相比,显著下降(P0.05);高剂量组肾脏组织HE、PAS、Masson染色病理改变差异显著。结论:青蒿-鳖甲药对能抑制MRL/lpr小鼠血清中IL-6的生成,减少小鼠血清中IFN-γ的分泌,能明显改善小鼠狼疮性肾炎的病理状态。     

两种中药方剂对MRL/lpr狼疮小鼠血浆中B淋巴细胞刺激因子和IL-10表达的影响

目的 探讨两种中药方剂对MRL/lpr狼疮小鼠血浆中的B淋巴细胞刺激因子(Blys)、IL-10的影响,为中药及中西医结合治疗红斑狼疮提供实验和理论基础.方法 将34只MRL/lpr狼疮小鼠随机分为6组.A组:中药方1组(清热凉血、祛风除湿方);B组:中药方2组(养阴清热活血、滋补肝肾方);C组:泼尼松组;D组:中药方1加泼尼松组;E组:中药方2加泼尼松组;F组:空白对照组.ELISA法测小鼠血浆中Blys、IL-10的含量.结果 各药物组治疗后的Blys水平均显著低于F组(P＜0.01).D、E组的Blys水平与A、B、C组、激素组差异有统计学意义(P＜0.01).A、B组与F组比较,IL-10水平差异无统计学意义(P＞0.05).D、E组IL-10水平与F组比较,差异有统计学意义(P＜0.01)、与C组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 中药方剂与糖皮质激素均对MRL/lpr狼疮小鼠有治疗作用,中西医综合治疗疗效优于单纯使用中药或糖皮质激素,能显著降低Blys水平.     

高迁移率族蛋白-1在小鼠狼疮性肾炎中的表达

目的:研究新型细胞因子高迁移率族蛋白-1(HMGB-1)在小鼠狼疮性肾炎中的表达情况,探讨其可能的作用机制。方法:对肾组织进行常规病理检查、免疫病理检查和超微结构检查,以评价小鼠肾脏病理学损害程度;用酶联免疫吸附剂测定法检测鼠血清抗双链DNA(dsDNA)抗体滴度;用逆转录-聚合酶链反应法检测小鼠肾脏高迁移率族蛋白-1和单核细胞趋化因子-1表达水平。结果:MRL/lpr小鼠血清抗dsDNA抗体的滴度随着年龄的增加而上升,明显高于同龄C57BL/6J小鼠;随着年龄的增加,MRL/lpr小鼠肾脏组织病理损害加重,主要表现为急性和亚急性增生性肾小球肾炎;MRL/lpr小鼠肾脏中,HMGB-1 mRNA的表达明显高于同龄C57BL/6J小鼠,和MCP-1mRNA的表达量成正相关。结论:异常升高的HMGB-1可能参与MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎形成。     

三氧化二砷对MRL/lpr狼疮小鼠脾脏CD4~＋T细胞IFN-γ基因启动子甲基化的影响

目的：观察三氧化二砷（ATO）对MRL/lpr狼疮小鼠脾脏CD4＋T细胞IFN-γ基因启动子甲基化的影响。方法：免疫磁珠法分选16～18周MRL/lpr狼疮小鼠和C57BL/6J正常对照小鼠脾脏CD4＋T细胞,PHA-p（20μg/mL）和IL-2（1 000 IU/mL）刺激48 h后分为以下不同药物处理组：①PBS组：空白对照;②ATO组：1μmol/L ATO作用24 h;③ATO＋5-氮杂胞苷（5-AzaC）组：1μmol/L 5-AzaC作用72 h后1μmol/L ATO作用24 h。CD4＋T细胞经过以上处理后抽提基因组DNA,亚硫酸氢盐修饰,PCR扩增IFN-γ基因启动子,产物凝胶回收,克隆入pMD-19T载体,转化入E.coli DH5α,筛选阳性克隆测序,测序结果采用生物信息学软件进行分析。结果：①MRL/lpr小鼠脾脏CD4＋T细胞IFN-γ基因启动子呈低甲基化水平。②1μmol/LATO作用24 h后MRL/lpr小鼠脾脏CD4＋T细胞IFN-γ基因启动子甲基化水平明显增高。③1μmol/L ATO作用24 h能使经过5-AzaC干预后的MRL/lpr小鼠脾脏CD4＋T细胞IFN-γ基因启动子甲基化水平明显增高。结论：1μmol/L ATO作用24 h能在一定程度上有效逆转活化状态下MRL/lpr小鼠脾脏CD4＋T细胞IFN-γ基因启动子低甲基化。     

特异性COX-2抑制剂对小鼠狼疮性肾炎CD14+表达及TNF-α、IL-6的影响

目的:探讨特异性COX-2抑制剂对MRL/lpr自发狼疮小鼠的CD14 表达及TNF-α、IL-6的影响.方法:用特异性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂(Rofecoxib10·kg-1·d-1)治疗12周龄雌性MRL/lpr自发狼疮小鼠,并与未干预组对照.12周后用放射免疫方法检测小鼠血清和尿中肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)及尿血栓索B2(TXB2)的变化;并观察小鼠尿蛋白、血肌酐、肾组织病理改变及CD14 细胞数的变化.结果:治疗12周后,治疗组与对照组比较,小鼠血清和尿中TNF-α、IL-6水平降低(P＜0.05);24h尿蛋白排泄量、血肌酐水平及肾组织CD14 细胞数差异均有显著性意义(P＜0.05);肾小球基底膜(GBM)增厚程度差异有显著性意义(P＜0.05).结论:特异性COX-2抑制剂治疗MRL/lpr自发狼疮小鼠,可能通过抑制单核/巨噬细胞在肾组织中的浸润,降低血清和尿中TNF-α、IL-6水平,从而减轻了MRL/lpr小鼠肾损害,对LN有较好的治疗作用.     

三氧化二砷对MRL/lpr狼疮小鼠脾脏CD4+T细胞 IFN-γ表达及其mRNA的影响

目的:观察三氧化二砷(ATO)对MRL/lpr狼疮小鼠脾脏CD4+T细胞分泌IFN -γ及其mRNA的影响.方法: 免疫磁珠分别分选18～20周MRL/lpr狼疮小鼠和C57BL/6J正常对照小鼠脾脏CD4+T细胞,采用流式细胞术鉴定细胞纯度.PHA-p(20μg/mL)和IL-2(1000IU/mL)常规刺激48h后进行如下实验: (1)不同浓度ATO(0.5、1.0和2.0μmol/L)作用24h;(2)1 μmol/LATO作用不同时间(12、24和48h);(3)不同药物处理组:①PBS组:空白对照;②ATO组:1 μmol/LATO;③5-氮杂胞苷(5-AzaC)组:1μmol/L 5-AzaC;④ATO+5-AzaC组:1μmol/LATO+1μmol/L 5-AzaC.酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清液IFN-γ的表达量;实时荧光定量PCR法检测不同药物处理组中IFN -γmRNA的表达情况.结果:①1.0μmol/LATO作用24h对细胞存活率无明显影响.②1mmol/lATO作用24h能抑制MRL/lpr小鼠脾脏CD4+T细胞 IFN-γ的转录和翻译水平.③经5-AazC处理后MRL/lpr和C57BL/6J小鼠脾脏CD4+T细胞IFN -γ的转录和翻译水平升高,1mmol/LATO作用24h能抑制其异常活化状态.④MRL/lpr小鼠脾脏CD4+T细胞IFN -γ的分泌和表达水平均较C57BL/6J小鼠明显升高.结论: 1mmol/L ATO作用24h能在一定程度上有效抑制活化状态下MRL/lpr小鼠脾脏CD4+T细胞IFN -g的异常分泌,下调其mRNA表达水平而不影响其存活率.     

不同体质MRL/lpr狼疮鼠病情程度及卵巢激素水平的变化

目的:区分MRL/lpr狼疮鼠体质,并观察不同周龄狼疮鼠病情程度及卵巢激素水平变化。方法:将12周龄MRL/lpr小鼠按体质分为寒体组、热体组、常体组,各组分别随机分为A组和B组,每组10只。A组于12周龄时(发病前期)取材;B组于20周龄时(发病高峰期)取材。通过ELISA、放射免疫等检测方法,分别检测24 h尿蛋白、外周血ds-DNA及卵巢激素水平。结果:12周龄时,不同体质MRL/lpr狼疮小鼠24 h蛋白尿程度、外周血抗ds DNA抗体、卵巢孕酮(P)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平差异无统计学意义(P0.05),肾脏病理切片HE染色已显示出轻度损害。20周龄时,寒体组24 h蛋白尿程度、外周血抗ds DNA抗体、卵巢E2水平均低于常体组(P0.05),卵巢T、P、LH、FSH无体质差异(P0.05),肾脏病理切片HE染色显示出较为明显的肾脏病变,且寒体组肾损害表现较常体组及热体组轻微。与12周龄比较,20周龄常体组及热体组小鼠24 h蛋白尿程度、外周血抗ds DNA抗体水平均明显升高(P0.01),寒体组小鼠24 h蛋白尿程度、外周血抗ds DNA抗体水平变化无统计学意义(P0.05),不同体质组卵巢E2、T、LH、FSH均明显升高(P0.01),但P变化差异无统计学意义(P0.05)。结论:MRL/lpr狼疮鼠存在明显的体质差异;在发病高峰期,不同体质小鼠的发病程度及卵巢E2水平存在差别。     

紫金狼疮解毒丸GVHR狼疮样小鼠作用的实验研究

目的观察紫金狼疮解毒丸对系统性红斑狼疮动物模型的效果并探讨其作用机理。方法采用同种异体淋巴细胞复制诱导型移植物抗宿主反应（GVHR）狼疮样小鼠模型，研究紫金狼疮解毒丸对GVHR狼疮样小鼠模型的作用。结果显示同种异体淋巴细胞的输入能诱导出dsDNA和抗组蛋白抗体的持续升高。尿蛋白异常并发生免疫复合物介导的肾小球肾炎等SLE样病变；用紫金狼疮解毒丸能显著地控制模型小鼠血清中抗dsDNA和组蛋白抗体的升高（P〈0．05，P〈0．01，P〈0．001）降低尿蛋白的阳转率（P〈0．05）；非常显著地减轻肾小球病理改变。结论紫金狼疮解毒丸能控制SLE样小鼠相关病变的发展。     

雄黄对MRL/lpr狼疮小鼠抗ds-DNA抗体和T细胞表面分子CD69、CD25表达的影响

目的:初步观察雄黄对MRL/lpr狼疮小鼠SLE动物模型抗双链DNA抗体及T细胞表面分子CD69、CD25表达及其生存时间的影响。方法:将MRL/lpr狼疮小鼠随机分为空白(蒸馏水)对照组、纳米雄黄低中高剂量组,每天灌胃一次,分别在不同时间点采集血清和称重;在实验结束后,取外周淋巴结分离T细胞并体外培养;放射免疫法测定血清抗ds-DNA抗体效价,流式细胞仪检测T细胞表面活化分子CD69、CD25表达水平;并计算各个观察点的小鼠死亡率。结果:雄黄治疗各组MRL/lpr小鼠生存时间比对照组明显延长,差异有统计学意义(P0.05);雄黄低、中、高各组血清抗ds-DNA抗体总平均值显著低于对照组,其中高剂量与低剂量比较,差异也有统计学意义(P0.05)。雄黄各剂量组T细胞表面的CD69和CD25表达水平较空白对照组有明显的降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:雄黄可能通过抑制MRL/lpr小鼠T细胞表面的CD69和CD25表达以减少T细胞的活化,从而减少抗ds-DNA抗体的分泌,减轻小鼠自身免疫反应损伤,延缓SLE疾病发展进程。     

信号传导和转录激活因子3及其蛋白抑制剂在狼疮小鼠肾组织中的表达

目的探讨信号传导和转录激活因子3(STAT3)及其蛋白抑制剂(PIAS3)在MRL/lpr狼疮小鼠肾组织中的表达。方法以18周龄雌性MRL/lpr小鼠作为狼疮肾炎组,相同周龄的BALB/C小鼠作为正常对照组。分别取两组小鼠肾组织,应用荧光定量RT-PCR法检测STAT3和PIAS3 mRNA的表达,采用Western blot和免疫组织化学方法检测磷酸化STAT3(p-STAT3)和STAT3的蛋白表达,同时检测小鼠实验室指标以及肾脏组织病理的表现。结果 MRL/lpr小鼠尿蛋白、血尿素氮、血肌酐均高于BALB/C小鼠(P<0.05)。MRL/lpr小鼠肾脏组织病理主要表现为肾小球系膜细胞增生,肾小管间质炎症细胞浸润,而BALB/C小鼠肾小球、肾小管无异常。MRL/lpr小鼠肾组织STAT3 mRNA和p-STAT3蛋白的表达均较BALB/C小鼠升高(P<0.05),其PIAS3mRNA表达则较BALB/C小鼠明显降低(P<0.01),而两组小鼠STAT3总蛋白的表达无明显差别。结论 MRL/lpr小鼠肾组织STAT3 mRNA和p-STAT3蛋白的表达均高于对照组,而其PIAS3 mRNA表达低于对照组。     

系统性红斑狼疮MRL/lpr小鼠的免疫作用机制

目的探讨不同月龄系统性红斑狼疮MRL/lpr小鼠免疫作用机制,为其发病机制的研究提供依据。方法本研究随机选取SPF级3月龄、4月龄、5月龄及6月龄MRL/lpr雌性小鼠各10只,以及SPF级3月龄野生型C57雌性小鼠10只,测定脏器质量计算脏器系数、运用ELISA方法检测血清抗双链DNA抗体(dsDNA)、脾组织白介素IL-2、IL-4、IL-17和肿瘤坏死因子TNF-α,运用流式细胞技术检测脾淋巴细胞CD3细胞含量和CD4/CD8细胞比率。结果与3月龄野生型C57小鼠相比,3~6月龄MRL/lpr小鼠脾脏系数、血液中dsDNA抗体浓度、IL-2和TNF-α浓度均显著升高(P0.05);白介素IL-4浓度差异无显著性(P0.05);与3月龄MRL/lpr小鼠比较,5、6月龄的MRL/lpr小鼠血液中IL-17浓度显著降低(P0.05或P0.01);其余各项指标MRL/lpr小鼠不同月龄间差异无显著性。与3月龄C57小鼠相比,6月龄MRL/lpr小鼠脾淋巴细胞CD3浓度显著降低(P0.01),随着月龄增大,MRL/lpr小鼠的CD3和D4/CD8比率都有下降趋势,但差异无显著性。结论在本实验条件下,各指标变化均显示3月龄红斑狼疮MRL/lpr小鼠出现免疫损伤,并且损伤程度随小鼠月龄的增长呈一定的递增趋势。     

解毒祛瘀滋阴方调节肠道菌群治疗狼疮小鼠的研究

[目的] 探究肠道菌群在解毒祛瘀滋阴方治疗MRL/lpr狼疮小鼠过程中的作用。[方法] 将12周龄MRL/lpr小鼠随机分为模型组(0.9%氯化钠水溶液灌胃)、中药组(0.156 g·10 g-1解毒祛瘀滋阴方灌胃)和粪菌移植组(移植中药组小鼠的粪菌液)，以12周龄C57BL/6小鼠作为空白组。饲养6周后采集小鼠血清样本，采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)检测小鼠血清抗双链DNA抗体(anti-double stranded DNA antibody，anti-dsDNA)、抗核抗体(antinuclear antibody，ANA)和白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)表达水平；称量脾脏质量，计算脾脏指数；采用流式细胞术检测脾脏生发中心B细胞和浆细胞百分比；采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin，HE)染色分析肾脏病理变化。[结果] 与模型组比较，中药组和粪菌移植组的菌属Bacteroides和Sutterella丰度均显著上调(P＜0.05)，菌属Prevotella、Oscillospira、Ruminococcus、Odoribacter和Rikenella丰度均显著下调(P＜0.05)。此外，解毒祛瘀滋阴方和粪菌移植均能显著降低MRL/lpr小鼠血清anti-dsDNA、ANA和IL-6水平(P＜0.05，P＜0.01)，降低脾脏指数(P＜0.05)和脾脏浆细胞百分比(P＜0.05)，减少肾脏炎性细胞浸润。[结论] 解毒祛瘀滋阴方可通过调控肠道菌群，发挥治疗系统性红斑狼疮的作用。     

抗核小体抗体检测对系统性红斑狼疮诊断的意义

目的 探讨抗核小体抗体(AnuA)的检测对系统性红斑狼疮(SLE)诊断的敏感性和特异性,并探讨AnuA与其他自身抗体和SLE活动性的关系.方法 选择SLE患者65例(SLE组)、疾病对照组(包括类风湿性关节炎、混合性结缔组织病、原发性干燥综合征、多发性肌炎、系统性硬化症患者)38例和正常对照组30例,采用免疫印迹法测定血清中的AnuA,同时检测并分析抗dsDNA抗体、抗Sm抗体和抗组蛋白抗体及其他实验室指标.结果 AnuA、抗dsDNA抗体、抗Sm抗体的阳性率在SLE组中分别为58.5%、52.3%、30.7%,均显著高于疾病对照组(5.3%、0、7.9%)和正常对照组(0、0、0)(均P＜0.05).AnuA对SLE患者诊断的敏感性为58.5%,与抗dsDNA抗体和抗组蛋白抗体差异无统计学意义(均P＞0.05),特异性为97.1%,与抗dsDNA抗体、抗Sm抗体差异无统计学意义(均P＞0.05),但与抗组蛋白抗体差异有统计学意义(P＜0.05).AnuA 与抗Sm抗体之间无关(P＞0.05),而与抗dsDNA抗体相关(P＜0.05).AnuA与抗dsDNA抗体、抗Sm抗体联合检测诊断SLE的敏感性达83.1%.SLE组中AnuA阳性者的Hb、C3、C4水平低于AnuA阴性者(P＜0.05).结论 AnuA对SLE诊断敏感性高、特异性强,是对SLE诊断有价值的实验室指标之一,并与SLE疾病活动性有关,与抗dsDNA抗体、抗Sm抗体联合检测可提高诊断敏感性.     

骨髓间充质干细胞输注对MRL/lpr狼疮鼠B淋巴细胞CXCR4表达的影响

目的：研究骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs）输注对狼疮鼠血浆C3、IgG浓度及B细胞、浆细胞表面CXCR4表达的影响,分析BMMSCs改善系统性红斑狼疮疾病活动的机制。方法：分离培养C57BL/6小鼠的BMMSCs,并对MRL/lpr 狼疮鼠进行尾静脉输注。实验分为C57BL/6组（C57BL/6小鼠未进行尾静脉输注）、MRL/lpr组（MRL/lpr鼠未进行尾静脉输注）、BMMSCs组（MRL/lpr鼠12周龄注射BMMSCs）和PBS 组（MRL/lpr鼠12周龄注射PBS）。在20周末取小鼠的外周血、骨髓、脾脏进行流式细胞分析,检测B细胞、浆细胞表面CXCR4表达;同时取4组血浆,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测C3、 IgG浓度。取小鼠肾脏组织行苏木精伊红（HE）染色。结果：① MRL/lpr组较C57BL/6组小鼠血浆C3浓度明显降低、IgG浓度明显增高（P均<0.01）;MRL/lpr组较C57BL/6组小鼠B细胞表面CXCR4的表达在外周血明显下降,在骨髓和脾脏明显升高（P均<0.01）;MRL/lpr组小鼠骨髓（P<0.05）及脾脏（P＜0.01）浆细胞表面CXCR4表达明显高于C57BL/6小鼠。② BMMSCs组较PBS组、MRL/lpr组C3浓度明显升高、IgG浓度明显降低（P均<0.01）; BMMSCs组较PBS组B细胞表面CXCR4表达在外周血明显增加（P<0.01）,在骨髓（P<0.01）和脾脏（P<0.05）明显下降, 较MRL/lpr组在骨髓和脾脏均明显下降（P均<0.01）。③ BMMSCs组较PBS组、MRL/lpr组浆细胞表面CXCR4表达在骨髓和脾脏均明显降低（P均<0.05）。④ 肾脏HE染色提示输注BMMSCs后狼疮鼠肾脏炎症改善。结论：BMMSCs输注可调节B细胞、浆细胞表面CXCR4的表达,改善MRL/lpr鼠病情活动指标。     

MRL-lpr狼疮小鼠B细胞表面FcγRⅡB的表达及其意义

目的：探讨MRL-lpr狼疮小鼠模型中B细胞表面Fcγ受体ⅡB（FcγRⅡB）的表达情况及其病理意义。方法：构建MRL-lpr狼疮小鼠模型,在4、8、12、20周龄时检测外周血总IgG、抗dsDNA抗体、抗ribosomal P0抗体、抗smRNP抗体含量,分析狼疮小鼠的疾病活动度;流式检测20周龄的MRL-lpr狼疮小鼠外周血及脾脏B细胞表面FcγRⅡB及CD69表达情况,分析FcγRⅡB的表达情况与B细胞活化的关系。结果：随着周龄的增加,MRL-lpr狼疮小鼠外周血总IgG及抗dsDNA抗体、抗ribosomal P0抗体、抗smRNP抗体含量逐渐升高;MRL-lpr狼疮小鼠外周血及脾脏B细胞表面FcγRⅡB表达丰度明显降低（均有P＜0.05）,CD69表达水平明显升高（P＜0.05）,且正常C57BL/6小鼠脾脏CD69+的活化B细胞FcγRⅡB表达上调,但MRL-lpr狼疮小鼠脾脏CD69+的活化B细胞FcγRⅡB表达无明显变化。结论：MRL-lpr狼疮小鼠B细胞表面FcγRⅡB的表达与B细胞的活化有关,FcγRⅡB的表达异常可能是MRL-lpr狼疮小鼠B细胞异常活化的分子机制之一。