用噬菌体展示随机7肽库筛选血型A抗原模拟肽

目的:通过血型A单克隆抗体从噬菌体展示随机7肽库中筛选血型A抗原的模拟多肽。方法:通过对噬菌体随机7肽库进行3轮亲和筛选,从第三轮筛选后获得的洗脱物中挑选多个噬菌体克隆,采用ELISA方法鉴定阳性克隆,测序并推导噬菌体展示短肽的氨基酸序列,化学合成短肽、红细胞凝集抑制试验鉴定短肽模拟A抗原的能力。结果:三轮筛选后特异性噬菌体被富集了200多倍,对ELISA鉴定信号较强的16个噬菌体克隆DNA测序并推导氨基酸序列的结果显示两个克隆展示相同的序列FSYLPSH。化学合成肽能抑制A型红细胞与抗A的凝集作用。结论:肽FSYLPSH具有模拟血型A抗原表位的作用,具有代替天然血型A抗原在临床中应用的潜能。     

A抗原表位模拟多肽融合表达载体的构建及鉴定

目的:构建血型A抗原模拟多肽融合表达载体,初步鉴定融合表达蛋白结合抗A抗体的能力.方法:PCR扩增血型A抗原模拟多肽(P17)和谷胱苷肽S-转移酶(GST)编码基因,并连接成P17-GST.双酶切后克隆入原核表达质粒pET 28 b,酶切、测序鉴定.以BL21(DE3)为表达菌,在IPTG诱导下表达P17-GST融合蛋白,Ni-NTA柱纯化蛋白.红细胞凝集抑制实验分析融合蛋白模拟血型A抗原的能力.结果:成功构建P17基因和GST基因融合的原核表达质粒pET28b-P17-GST,目的基因可以高效表达,纯化的融合蛋白以浓度依赖的方式抑制A型红细胞的凝集作用.结论:血型A抗原的模拟多肽序列与GST的融合表达蛋白可特异性结合抗A抗体,具有替代血型A多糖抗原潜能,为发展新型的抗A抗体滤除材料提供了依据.     

择期手术备血发现罕见p血型1例

人类红细胞P血型系统是第3个被发现的血型系统,它由抗-P1和抗-P等几种抗体的反应性确定P血型系统的表型（P1、P2、p、P1k、P2k）。P1指P1＋红细胞,P2指P1-红细胞,P1k指P1＋P-Pk＋,P2k指P1-P-Pk＋细胞。p表型缺失所有P血型抗原（null）[1-3],为P血型系统中的一种罕见表型。目前国内p表型报道较少[4-5],笔者在择期手术备血工作中发现罕见p血型1例,现报告如下。     

22例ABO血型正反定型不符的研究分析

目的：研究分析无偿献血市民ABO血型正反定型不符的原因。方法：应用ABO血型正反定型试验、吸收-放散试验、唾液血型物质检测试验和谱细胞鉴定试验,检测ABO血型正反定型不符的标本。结果：22例无偿献血者ABO血型正反定型不符的标本经检测鉴定,分别为A亚型1例（A2亚型）,B亚型2例（B3型1例,Bm型1例）,抗B减弱2例,抗M抗体12例,冷抗体4例,Le^b抗体1例。结论：当ABO血型正反定型不相符时,必须进行鉴定和确认试验,以确定红细胞上的弱抗原或血清中的弱抗体和不规则抗体,从而确保临床用血安全。     

类孟买血型的鉴定和家系调查1例

本文采用血型血清学方法对本血液中心。型献血者进行稀有血型筛选,约筛18100人中发现1例类孟买血型。该红细胞与筛选用抗-H反应为阴性,与强的抗-H反应为弱凝集。血型为O,D,I,Le（a-b＋）型。抗体筛选结果：献血者血清与自身、新生儿、和成人红细胞在室温下反应均为0;在4℃下反应分别为W＋、0、1＋。抗体鉴定结果：血清中存在弱的抗-H和抗-I抗体。红细胞抗原检查结果：吸收放散试验证实红细胞上存在H和A抗原,但A抗原不与抗-A、抗-B和抗-AB凝集。     

递呈单纯疱疹病毒糖蛋白C模拟短肽的噬菌本免疫效果的初步研究

目的 鉴定含单纯疱疹病毒（Herpes simplex virus,HSV）糖蛋白C（gC）模拟表位（Mimotope）的短肽的免疫原性,确定其作为新型短肽疫苗组分的可能性。方法 将淘筛噬菌体随机肽库获得的递呈全部或部分gC模拟肽的噬菌体分为7组免疫动物,ELISA法检测噬菌体效果及天然抗原免疫鼠阳性血清与噬菌体的反应性,观察诱生抗体持续时间。结果 递呈gC模拟肽的噬菌体可诱导小鼠产生抗gC的抗体,抗体持续时间超过4个月,用HSV天然抗原免疫习获得的血清抗体也能与各组噬菌体结合。结论 噬菌体递呈肽能够模拟天然HSV gC抗原的部分免疫活性且具有一定的免疫原性,可用作HSV亚单位疫苗或表位疫苗的研究。     

天然抗P1引起血型定型困难1例

献血员，男，30岁，无输血史。在本中心无偿献血，对其血样作血型鉴定时发现正反定型不符，为确定血型发现血清中存在天然抗P1。试剂：抗A、抗B由长春博德公司提供，抗D、抗M、抗N和抗P1、抗人球蛋白及谱细胞由上海血液中心提供，A型、B型、O型红细胞和菠萝酶由本室自制。方法：ABO，MN，P1血型及抗体鉴定参照《中国输血技术操作规程》（血站部分）[1]。     

襄樊地区无偿献血人群Rh血型系统因子分布的调查

目的：了解襄樊地区无偿献血人群Rh阴性血型抗原的分布情况,建立Rh阴性稀有血型献血者档案库和稀有血型流动血库。方法：采用爱康全自动血型分析仪对RhD抗原进行初筛检测;初筛阴性者采用间接抗球蛋白法进行确认;确认阴性者采用试管法对Rh因子C、c、E、e进行检测。结果：在38835人中筛出RhD阳性献血者38664人,弱D献血者2人,Du献血者7人,Rh阴性献血者162人,其中O型55人,A型48人,B型48人,AB型11人;Rh阴性献血者中发现抗-D抗体2例;162人的Rh表现型：ccee88人,Ccee58人,CCee5人,ccEe5人,CcEe5人,ccEE1人。结论：襄樊地区地区无偿献血人群RhD阴性分布频率为0.42%;162名RhD阴性献血者中在ABO血型分布频率：O型（33.9%）〉A型（29.6%）=B型（29.6%）〉AB型（6.8%）;162名RhD阴性献血者的表型频率分布率：ccee（54.0%）〉Ccee（35.8%）〉CCee（3.1%）=ccEe（3.1%）=CcEe（3.1%）〉ccEE（0.6%）。     

系列抗心肌多肽自身抗体对扩张型心肌病的诊断价值

目的 :探讨抗人工合成多肽自身抗体在扩张型心肌病 ( DCM)诊断中的价值。方法 :根据计算机预测心肌 ADP/ ATP载体 ( ANT)、β1 受体、M2 受体和肌球蛋白重链 ( MHC)抗原决定簇的氨基酸序列并合成多肽片段 ,以此片段作为抗原 ,同时用天然抗原对比 ,以酶联免疫吸附方法检测 48例 DCM患者 ( DCM组 )和 48例健康献血员 (对照组 )血清中抗心肌多肽自身抗体。结果 :DCM组中抗 ANT抗体、抗 β1 受体抗体、抗 M2 受体抗体和抗MHC抗体阳性分别有 31、2 6、2 0和 2 3例 ,与对照组比较有显著性差异 ( P <0 .0 0 5 ) ,且与天然心肌抗原检测结果高度一致 ( P <0 .0 1)。结论 :人工合成多肽可代替天然心肌抗原用于检测抗心肌自身抗体 ,抗心肌多肽抗体检测可以作为 DCM免疫学诊断方法     

346例肿瘤患者红细胞血型不规则抗体检测结果分析

目的：分析346例肿瘤患者红细胞血型不规则抗体的检测结果。方法选取346例肿瘤患者,采用微柱凝胶抗球蛋白法筛查红细胞抗体,对抗体阳性者进行抗体特异性检测。结果346例患者红细胞血型不规则抗体检测阳性率为5．20％（18/346）,其中男性肿瘤患者阳性率为2．72％（5/184）,女性肿瘤患者阳性率为8．02％（13/162）,男性与女性红细胞血型不规则抗体阳性率相比,P＜0．05。其中抗-Lea者6例、抗-Pl者5例、抗-M者7例、Rh抗体者0例。特异性抗体7例,非特异性抗体11例。5例患者发生自身红细胞致敏。18例红细胞血型不规则抗体阳性者中13例伴输血史或妊娠史,Rh抗体8例。结论女性肿瘤患者红细胞血型不规则抗体阳性率高于男性,且多伴输血史或妊娠史,红细胞血型不规则抗体检测有助于肿瘤患者输血安全评估。     

孕妇产前抗体效价预测新生儿溶血病

目的：探讨O型及Rh阴性孕妇血清中抗体效价来预测新生儿溶血病的关系。方法：采用血型血清学方法,对1256对夫妇血型不合的O型及Rh阴性孕妇检测ABO、RhD血型、抗体筛选、抗体效价。效价≥64的建议服中药治疗,定期检测抗体效价。对新生儿（出生0～7d）发生黄疸后,抽静脉血检测溶血3项。结果：1244名O型孕妇血清中IgG抗-A（B）效价≥64者564例,占45.3%;对12名Rh阴性孕妇血清中产生抗D抗体5例,效价均≥64,占41.6%,7例抗体筛选阴性。IgG抗-A（B）效价≥64并发生ABO-HDN占49.5%。ABO-HDN占产前的比例（279/1244）为22.4%。结论：动态监测夫妇血型免疫抗体效价,及时采取措施以降低孕妇体内IgG抗体效价,降低新生儿发病率,减少并发症,提高人口素质。     

母婴血型不合导致的新生儿溶血病实验室分析

目的:对母婴血型不合导致新生儿发生溶血的实验室数据进行分析,为新生儿溶血病(HDN)的诊断提供早期数据。方法:共纳入97例HDN患者,清晨空腹抽取160例新生儿脐血及其母亲肘静脉血液,进行ABO、Rh血型鉴定及新生儿脐血直接抗人球蛋白试验、游离抗体试验、抗体释放试验。结果:160份临床疑为HDN的标本中,患儿全部为Rh阳性,1例母亲为Rh阴性,其中A型者60例,B型80例,O型18例。血型血清学检测证实的血型抗原不合引起的HDN例数为97例,总阳性率为60.6%,其中ABO-HDN 96例,Rh-HDN 1例。在被证实为ABO-HDN的96例患儿中,A型41例,占25.6%,B型55例,占34.4%。在18例O型血患儿中,直接抗人球蛋白试验和游离抗体试验检测筛查均为阴性。1例母亲为Rh阴性患儿ABO血型与其母亲同为A型,直接抗人球蛋白实验结果阳性。结论:血型抗原不合引起的HDN中,ABO-HDN明显比Rh-HDN多见,其中又以母亲为O型的B型新生儿多见。抗体释放试验比直接抗人球蛋白试验及游离抗体试验诊断HDN的准确率高。为临床上早期诊断HDN提供重要的依据,对防止胆红素脑病的发生具有重要意义。     

应用Rh血型抗原鉴定实现临床输血个体化

目的：应用Rh血型抗原鉴定,对Rh阴性患者中存在不规则抗体的输血患者选择相合性输注。方法：对2007年1月-2008年12月检出的RhD阴性输血患者进行D抗原复检、抗体筛查,及对其他Rh血型抗原进行鉴定。结果：在79例RhD阴性的输血患者中抗体筛查阳性的共25例;抗-D抗体3例,抗-E8例,抗-c4例,抗-c、E7例,抗-C1例,抗-e3例,对存在不规则抗体的患者均选择Rh因子相合的血液输注,其中,有7例患者采用O型的ccdEE和CCdee表型红细胞输注。结论：应用抗体筛查及Rh抗原鉴定的结果,选择Rh因子相合的血液输注及对有抗c和抗e抗体的阴性患者在血源困难的情况下选择O型的ccdEE和CCdee表型红细胞输注,保证了特殊血型的用血需求,既可以避免不规则抗体的产生,同时也减少了输血不良反应的发生。     

孕产妇血型抗体效价测定在产前诊断中的意义

目的：通过对孕产妇血清中血型抗体效价的测定,旨在了解异常IgG抗-A（B）或抗-D水平在孕妇中的分布情况,探讨孕妇血清中IgG类血型抗体效价与新生儿溶血病（HDN）之间的关系,为预防及治疗HDN提供重要的实验依据。方法：采用凝聚胺法分别对1316例0型血孕妇和64例Rh（D）阴性血孕妇血清中IgG抗-A（B）和抗-D水平做出测定。对新生儿运用微柱凝胶法做HDN溶血3项检测。结果：①在所检测的1316例0型血孕妇中,IgG抗-A测定有802例,效价≥64为129例,异常检出率占总抗-A的16．1％;IgG抗-B测定有744例,效价≥64为135例,异常检出率占总抗B的18．1％。其中89例IgG抗A（B）≥64O型血孕妇所生新生儿中,有22例患HDN,阳性率占24．7％;②64例Rh（D）阴性血受检孕妇中,5例检测出IgG抗-D抗体,抗体检出率占7．8％,新生儿中有3例患Rh—HDN。结论：①HDN的发病率随着母体内的IgG类血型抗体水平增高而增大;②对于Rh（D）阴性的孕妇,IgG抗-D效价与孕次成正相关。     

30例临床疑难配血原因分析

目的：分析总结临床输血中遇到的疑难配血病例,使临床输血更加的科学、安全、有效。方法：回顾性分析本院2007年9月—2009年10月共30例疑难配血病例。结果：在30例疑难配血病例中,不规则抗体阳性11例（包括10位患者以及1位献血员）,自身抗体阳性8例（包括高效价冷凝集素5例）,ABO亚型3例,ABO血型抗原减弱5例,肝素影响2例,ABO非同型骨髓移植患者1例。结论：受血者输血前血型的正确鉴定、不规则抗体的筛查、正确的交叉配血试验是为患者选择合适血液进行有效输注的保证,是降低或避免溶血性输血反应的发生、保证临床输血安全的重要前提。     

恶性肿瘤与Rh血型系统各表型的相关性分析

目的：分析恶性肿瘤患者Rh血型表型的分布特点,并与正常对照组进行比较,查找恶性肿瘤与Rh血型表型相关性。方法：对120例恶性肿瘤患者（患者组）及100例正常健康人群（对照组）进行Rh血型表型测定,对其表型分布进行统计分析,采用χ2检验和相对危险度OR值来估计相对危险性。结果：恶性肿瘤患者组与对照组Rh血型表型CcDEe分布之间的差异有统计学意义（χ2=4.51,P〈0.05）。恶性肿瘤患者组Rh血型表型分布从高到低分别是CcDEe54例（45.00%）,CCDee39例（32.50%）,CcDee14例（11.67%）,ccDEE9例（7.50%）,ccDEe3例（2.50%）,CCDEe1例（0.83%）;对照组Rh血型表型分布从高到低分别是CCDee47例（47.00%）,CcDEe32例（32.00%）,ccDEE9例（9.00%）,CcDee6例（6.00%）,ccDEe5例（5.00%）,CCDEe1例（1.00%）;结论：恶性肿瘤的发生与Rh血型表型的分布有关,CcDEe（OR=1.82）、CcDee（OR=2.07）表型发病率明显高于其他表型。     

洛阳地区献血员人类血小板抗原1～10频率分布调查

目的:研究洛阳地区献血员人类血小板抗原(HPA)1~10基因多态性,为患者提供HPA相配合的血小板。方法:随机收集250例无偿献血员样本,应用聚合酶链式反应-序列特异引物(PCR-SSP)技术检测HPA-1~10基因型及等位基因频率。结果:HPA-1aa、-1ab所占百分比分别为98.80%和1.20%,HPA-2aa、-2ab所占百分比分别为90.80%和9.20%,HPA-4aa、-4ab所占百分比分别为98.00%和2.00%,HPA-5aa、-5ab所占百分比分别为96.40%和3.60%,HPA-aa、-ab、-bb三种基因型在HPA-3和HPA-6中的比例分别为29.20%、46.00%、24.80%和91.60%、6.80%、1.60%,在HPA-7、-8、-9、-10中仅检测到HPA-aa纯合子。结论:洛阳地区HPA-1~HPA-10基因分布与文献报道相似,HPA-3特异性抗体是引起本地区HPA同种免疫性疾病的首要原因。     

输血前血型和抗体筛检与医疗风险的相关性探讨

目的：探讨输血前血型和抗体筛检工作的重要性及其与医疗风险的相关性。方法：对2814例备血患者,特别是外科患者ABO血型、Rh血型、不规则抗体检查结果和用血情况进行统计分析。结果：2814例备血患者中A型895例（31．81％）,B型736例（26．15％）,O型881例（31．31％）,AB型302例（10．73％）;Rh阴性17例（0．60％）,其中2例因手术前未备血而引发了医疗纠纷,5例患者因备血不及时而延期手术;检出不规则抗阳性者6例（0．21％）,其中2例患者未能及时找到相合的血液,不能及时进行输血治疗而引起患者不满;外科备血2092例,有1097例（52．44％）只进行了检查而没有输血。结论：对外科手术患者术前常规进行血型鉴定和抗体筛检是安全输血的重要保证,它关系到能否及时为患者提供合适的血液制品进行输血治疗,必须引起高度重视,避免潜在的医疗风险和由此引发的医疗纠纷。     

用噬菌体肽库筛选SjC-TPI的模拟抗原表位

目的　筛选日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶 (SjC TPI)分子的模拟抗原表位 ,研究其免疫学特性。方法　用纯化的抗重组SjC TPI抗体 (IgG)筛选 12肽库 ,获取SjC TPI的模拟抗原表位 ,并研究其抗原特性。结果　获得SjC TPI分子的两个模拟抗原表位M1和M2 ,Westernblotting分析结果表明由这两个模拟抗原表位免疫小鼠产生的免疫血清能识别SjC TPI分子和含此两抗原表位的噬菌体外壳蛋白。DNA测序结果显示这两个模拟抗原表位的氨基酸序列与SjC TPI无同源性。结论　本研究获得的模拟抗原表位M1及M2为SjC TPI的空间构型抗原的模拟表位 ,具有较好的抗原性     

微柱凝胶法与试管法检测新生儿溶血病免疫性抗体的比较

目的：比较微柱凝胶法与试管法对母婴血型不合新生儿溶血病（HDN）免疫性抗体的检出率。方法：对临床表现为高胆红素血症、疑似HDN的患儿血标本同时用微柱凝胶法和试管法进行直接抗人球蛋白试验、抗体游离试验及抗体放散试验,并对患儿阳性血标本进行血型不规则抗体特异性鉴定及其效价测定。结果：在275例临床表现为高胆红素血症、疑似HDN的患儿血标本中,用试管法检出直接抗人球蛋白试验阳性180例（65.5%）,抗体游离试验阳性197例（71.6%）,抗体放散试验阳性210例（76.4%）;用微柱凝胶法检出直接抗人球蛋白试验阳性224例（81.5%）,抗体游离试验阳性238例（86.5%）,抗体放散试验阳性251例（91.3%）。微柱凝胶法比试管法的凝集强度高1＋～2＋。结论：微柱凝胶法的敏感性略高于试管法,具有操作简便,影响因素少,易于标准化,结果客观及保存时间长等优点。