辅助性T细胞17及其分泌的白细胞介素17在类风湿性关节炎患者的表达

目的 通过检测辅助性T细胞17(Th17)及其分泌的白细胞介素17(1L-17)在类风湿性关节炎(RA)患者的表达,探讨其在RA发病机制中的作用及其临床意义.方法 应用流式细胞术检测39例RA患者和20例健康对照者外周血Th17的比率,同时用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测IL-17的水平.结果 RA患者外周血Th17比率和血清中IL-17的水平均较健康对照组显著增高,(1.86±0,75)％ vs (0.46±0.73)％,(13.42±0.62) ng/L vs(5.38±1.67)ng/L (P＜0.01).RA未治疗组外周血Th17比率和血清中IL-17的水平显著高于治疗后未复发组,(2.42±0.69)％ vs (0.84±0.62)％,(14.63±6.02) ng/L vs (8.86±1.35) ng/L(P＜0.01),但未治疗组与治疗后复发组比较差异无统计学意义(P＞0.05);RA患者关节液中IL-17水平明显高于血清中的水平(13.76±0.49)ng/Lvs (12.38±0.54) ng/L( P＜0.05).结论 RA患者Th17的比率及其IL-17的水平均高,它们可能参与了RA的发病和病情进展.     

重度子痫前期患者外周血Th17和Treg细胞变化及意义

目的探讨重度子痫前期(s PE)患者外周血Th17及CD4~+CD25~+Treg细胞变化及意义。方法选取2011-2013年镇江妇幼保健院40例s PE患者及40名健康对照者。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中Th17及CD4~+CD25~+Treg细胞水平;采用ELISA检测血浆IL-17、IL-22、TGF-β和IL-10水平,并分析其与s PE的相关性。结果 s PE患者组外周血Th17细胞水平为(1.21±0.82)%,显著高于健康对照组的(0.74±0.63)%,差异有统计学意义(t=3.45,P=0.002)。s PE患者组外周血CD4~+CD25~+Treg细胞水平为(1.65±0.49)%,显著低于健康对照组的(2.42±0.91)%,差异有统计学意义(t=-4.25,P=0.001)。s PE患者组IL-17、IL-22水平分别为80.03±31.25、60.22±18.32ng/L,高于健康对照组的32.84±17.23、35.24±14.33ng/L,差异有统计学意义(t值分别为10.74、5.89,P均0.01),IL-10、TGF-β水平为26.29±10.31、25.65±11.81ng/L,低于健康对照组的33.24±11.93、48.261±13.85ng/L,差异有统计学意义(t值分别为3.35、6.78,P均0.01)。s PE患者血浆IL-17、IL-22水平与Th17细胞水平呈显著正相关(r=0.69、0.58,P0.01)。结论 s PE患者Th17细胞数量增高,CD4~+CD25~+Treg细胞数量减少,以及相关细胞因子的紊乱在s PE的发病机制中可能起到重要作用。     

慢性乙型病毒性肝炎患者外周血辅助性T细胞9及白细胞介素9的表达及临床意义

目的 观察慢性乙型病毒性肝炎(乙肝,CHB)患者外周血中辅助性T淋巴细胞9(Th9)、白细胞介素9(IL-9)水平变化,并探讨其临床意义. 方法 选择2012年1月至2013年4月在嘉兴市第二医院就诊的慢性乙肝患者53例作为实验组,同时选择健康体检者32例为对照组.分别检测血清丙氨酸转氨酶(ALT);外周血Th9细胞;血清中细胞因子IL-9的水平.比较两组数据并分析ALT与各指标关系. 结果 CHB患者外周血中Th9比例显著高于健康对照组[分别为(1.020.62)%、(0.330.10)%,P0.05],IL-9水平高于健康对照组[分别为(184.6350.32)pg/ml、(82.7110.55)pg/ml,P0.05], ALT轻度异常组、中度异常组、重度异常组Th9细胞比例分别为[(0.420.17)%,(1.140.33)%,(1.510.89)%],3组间差异有统计学意义(均P0.05);IL-9水平分别为[(104.7612.42) pg/ml,(162.5147.79) pg/ml,(297.1481.56) pg/ml],3组间差异有统计学意义(均P0.05).CHB患者外周血Th9的表达与ALT (r=0.637,P0.05)和IL-9的水平(r=0.817,P0.01)均呈正相关.血清IL-9的水平与ALT也呈正相关(r=0.576,P0.01). 结论 CHB患者外周血Th9细胞比例及lL-9水平显著升高,且与炎症指标ALT明显相关,提示Th9及IL-9参与CHB的发病及病情发展.     

特异性细胞因子对T辅助17细胞和T调节性细胞表达的调节作用

目的 探讨多种细胞因子包括转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素2(IL-2)对CD+4T淋巴细胞的分化调节作用.方法 将人外周血T淋巴细胞、鼠脾脏T淋巴细胞在不同的刺激条件下进行体外培养,采用流式细胞仪分析活化T淋巴细胞中CD+4IL-17+T辅助17细胞(Th17细胞)、C+4IL-17+T淋巴细胞、CD+4CD+25FOXP+3T调节性细胞(Treg细胞)的表达情况.结果 鼠脾脏T淋巴细胞培养液中有TGF-β存在时可促进Treg细胞、rh17细胞和CD+8;IL-17+T淋巴细胞分化,表达水平分别为(7.8±2.2)%、(12.6±3.1)%、(10.1±2.6)%.无细胞因子培养的同类细胞为实验对照组,表达水平分别为(4.8±0.6)%、(1.7±0.5)%、(1.0±0.4)%,差异均有统计学意义(q=4.09、8.80、9.61,P<0.05或P<0.01).TGF-β与IL-6细胞因子共同存在时可促进Th17和CD+8IL-17+T淋巴细胞分化,表达水平分别为(17.8±5.3)%、(15.0±4.2)%,而分化受抑制的Treg细胞的表达水平为(4.I±1.2)%,与TGF-β组同类细胞表达水平比较差异均有统计学意义(q=5.03、5.17、5.04,P均<0.01).在TGF-β刺激的T淋巴细胞中加入IL-2细胞因子可使Th17细胞、CD+8;IL-17+T淋巴细胞表达减少,同时伴有Treg细胞表达量的增加;在加入抗IL-2后结果相反,即Th17细胞、CD+8IL-17+T淋巴细胞表达水平增加,Treg细胞表达水平减少.人外周血T淋巴细胞上Th17、CD+8IL-17+、Treg细胞表达水平变化趋势与鼠脾脏淋巴细胞相似.结论 不同细胞因子对于调控Th17细胞和Treg细胞之间的平衡起着十分重要的作用.     

原发性胆汁性肝硬化患者树突状细胞中细胞因子及其信号转导抑制分子变化的意义

目的 观察细胞因子信号转导抑制分子(SOCS)在原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者树突状细胞(DC)及其表型和分泌细胞因子的变化,以研究SOCS在PBC发病机制中的作用.方法 对10例PBC患者和8名健康人,用流式细胞术(FCM)分析其DC表型CD83、CD86和人类白细胞抗原DR(HLA-DR),用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测DC培养上清液中细胞因子白细胞介素-10(IL10)、IL-12和干扰素-γ(IFN－γ)含量,用免疫印迹法(WB)测定DC中SOCS1和SOCS3水平；并评价分析这些指标在2组中的变化特征.结果 PBC患者外周血中DC细胞表型CD83、CD86和HLA-DR 的表达率分别为(79.4±4.8)％、(86.5±6.3)％和(90.0±3.5)％,均高于健康对照组的表达率[(68.3±4.1)％、(74.2±6.3)％和(83.6±7.6)％,t值分别为5.340、4.120和2.514,P均＜0.05]；DC分泌的IL-12和IFN-γ含量分别为(53.5±11.1)、(32.0±9.0)ng/L,与健康对照组的细胞因子含量[(32.1±10.7)、(15.4±8.1)ng/L]相比,IL-12和IFN-γ均显著升高(t值分别为4.123和3.818,P均＜0.01)；IL-10含量为(7.0±4.6) ng/L,与健康对照组[(5.8±4.2) ng/L]相比,差异无统计学意义(t=0.563,P＞0.05)；WB检测PBC组DC中SOCS1和SOCS3的表达比健康对照组明显降低.结论 PBC患者体内DC更倾向于成熟状态,其抗原递呈能力明显增强,SOCS的低表达可能与免疫平衡紊乱和免疫耐受破坏有关.     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血T细胞表型及细胞因子的变化及意义

目的 观察原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者不同时期的T淋巴细胞表型及细胞因子变化,探讨其在PBC诊治中的价值及意义.方法 研究分为PBC组(32例),正常对照组(对照组,20例).以流式细胞仅检测外周血CD4 、CD8 、CD4 /CD8 、CD4 CD25 、CD4 CD28-、CD8 CD95 T淋巴细胞;以双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测外周血细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α水平.结果 PBC患者活动期CD4 、CD4 /CD8 、CD4 CD28-、CD8 CD95 T细胞与对照组比较明显升高(39.71±7.62)vs(27.81±3.21)、(2.31±0.23)vs(1.53±0.71)、(1.54±0.98)vs(4.15±1.89)、(9.46±4.48)vs(22.72±7.67),而CD4 CD25 与对照组比较明显降低(1.68±1.32)vs(3.99±1.21)(P<0.05).治疗后CD4 CD25 T细胞比治疗前明显升高(P<0.05),CD4 、CD4 /CD8 的比值、CD4 CD28-和CD8 CD95 T细胞比治疗前均明显降低(P<0.05).肝功严重损伤组外周血:CD4 CD25 T细胞明显低于肝功能轻度损伤组(1.52±0.74 vs 1.89±0.91,P<0.05),而CD4 CD28-和CD8 CD95 T细胞比例明显高于肝功能轻度损伤者(4.34±1.92 vs 2.98±1.73,23.19±7.86 vs 20.16±7.48,均P<0.05);且CD4 CD25 T细胞数量与肝功能损伤指标碱性磷酸酶(ALP)、谷丙转肽酶(GGT)呈负相关(R分别为-0.328,-0.337,均P<0.05),CD4 CD28-和CD8 CD95 T细胞数量与肝功能损伤指标ALP、GGT呈正相关(R分别为0.326,0.318,0.459,0.512,均P<0.05).PBC活动期细胞因子IL-2、TNF-a与对照组比较明显升高(166.54±9.05)ng/L vs(25.03±4.14)ng/L、(137.13±13.49)ng/L vs(47.66±9.73)ng/L(P<0.05).治疗后IL-10和IL-4明显升高,而IL-2和TNF-α明显降低(P<0.05).肝功严重损伤者IL-2和TNF-α水平明显高于肝功能轻度损伤者(P<0.05);且IL-2和TNF-α水平与肝功能损伤指标ALP和0GT呈正相关(R分别为0.426、0.436、0.514、0.512,P<0.05).结论 PBC患者活动期外周血以CD4 、CD4 CD28-和CD8 CD95 T细胞升高、CD4 CD25 降低和辅助T细胞亚群1(Th1)细胞因子占优势,治疗后以CD4 CD25 升高和辅助T细胞亚群2(Th2)细胞因子占优势,提示细胞免疫和细胞因子的免疫调节在PBC发病机制中发挥重要作用.     

2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化患者外周血T淋巴细胞和相关细胞因子的变化及研究

目的探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)合并颈动脉粥样硬化(carotid atherosclerosis, CAS)患者外周血T淋巴细胞比率、相关细胞因子表达及其与颈动脉内膜中层厚度(intima-media thickness, IMT)和糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin, HbA_1c)的相关性。方法 80例T2DM患者,其中有CAS斑块者40例为CAS组,无CAS斑块者40例为无CAS组;体检健康者40例为对照组。3组采用流式细胞仪测定外周血Th1、Th2、Th17及Treg细胞比例,采用ELISA法检测血清白细胞介素(interleukin, IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、干扰素(interferon, IFN)-γ水平,并测量IMT和HbA_1c水平,分析外周血T淋巴细胞与IMT和HbA_1c的相关性。结果 CAS组Th1细胞和Th17细胞百分率[(19.47±2.45)%、(2.34±0.33)%]及IL-2[(211.24±31.49)ng/L]、IL-17[(19.54±3.27)ng/L]、IFN-γ[(19.72±3.21)ng/L]水平、HbA_1c[(11.28±1.56)%]、IMT[(1.45±0.40)mm]明显高于无CAS组[(15.24±1.62)%、(1.50±0.28)%、(184.32±25.74)ng/L、(15.76±2.08)ng/L、(15.68±2.07)ng/L、(8.92±1.09)%、(1.01±0.27)mm]和对照组[(10.02±1.14)%、(0.96±0.25)%、(128.46±17.49)ng/L、(7.32±0.99)ng/L、(10.43±1.21)ng/L、(5.22±0.84)%、(0.76±0.13)mm](P0.05),无CAS组高于对照组(P0.05);CAS组Th2细胞和Treg细胞百分率[(2.25±0.49)%、(4.03±0.75)%]及IL-4[(4.72±0.32)ng/L]、IL-6[(11.21±1.04)ng/L]、IL-10[(11.07±1.27)ng/L]水平低于无CAS组[(2.97±0.67)%、(5.67±1.33)%、(5.36±0.61)ng/L、(13.24±1.96)ng/L、(14.77±1.93)ng/L]和对照组[(3.36±0.83)%、(6.57±1.52)%、(7.32±0.95)ng/L、(17.75±2.36)ng/L、(22.72±2.59)ng/L](P0.05),无CAS组低于对照组(P0.05);CAS组患者IMT与Th1、Th17细胞水平呈正相关(r=0.809,P0.001;r=0.648,P0.001),与Th2、Treg细胞水平呈负相关(r=-0.580,P0.001;r=-0.643,P0.001),HbA_1c与Th1、Th17细胞水平呈正相关(r=0.601,P0.001;r=0.528,P0.001),与Th2、Treg细胞水平呈负相关(r=-0.844,P0.001;r=-0.602,P0.001)。结论糖尿病合并CAS患者存在Th1、Th17细胞比率上调,Th2、Treg细胞比率下调,IL-2、IL-17、IFN-γ分泌增多,IL-4、-6、-10分泌减少,且与患者疾病进展程度相关。     

系统性红斑狼疮患者外周血Th17和CD4+CDhigh25Treg细胞及相关细胞因子的检测及意义

目的 探讨SLE患者外周血Th17及CD4+ CDhigh25Treg细胞及相关细胞因子IL-17、IL-21、TGF-β和IL-10的水平变化及意义.方法 选取2009-2010年河南省人民医院56例SLE患者(非活动期26例、活动期30例)及28名健康对照者.采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中Th17及CD4+ CDhigh25 Treg细胞水平;采用QRT-PCR检测RORγt mRNA和Foxp3 mRNA的表达水平;采用ELISA检测血浆IL-17、IL-21、TGF-β和IL-10水平,并分析其与SLE的相关性.结果 SLE患者组外周血Th17细胞水平为(3.44±0.96)％,显著高于健康对照组的(2.42±0.52)％,差异有统计学意义(t=5.38,P=0.000).SLE患者组外周血CD4+CDhigh25Treg细胞水平为(1.32±0.57)％,显著低于健康对照组的(2.07±0.67)％,差异有统计学意义(t=3.28,P=0.034).SLE患者的RORγt mRNA表达水平为(0.219±0.063),高于健康对照组的(0.087±0.045),差异有统计学意义(t=6.41,P=0.000);而SLE患者的Foxp3+ mRNA表达水平为(0.063±0.045),低于健康对照组的(0.128±0.056),差异有统计学意义(t=5.28,P=0.000).SLE患者组IL-17、IL-21、IL-10水平分别为122.4(60.5～188.3)、167.2(128.7 ～871.4)、51.3(20.9 ～123.7)ng/L,高于健康对照组的27.1(18.1 ～86.2)、31.0(31.0～424.5)、33.5(16.4～54.1) ng/L,差异有统计学意义(Z值分别为3.83、4.54、1.87,P均＜0.05),TGF-β水平为31.0(31.0 ～168.6) ng/L,低于健康对照组的159.8(63.4～389.7)ng/L,差异有统计学意义(Z=4.87,P＜0.05).SLE患者血浆IL-17水平与Th17细胞水平、SLEDAI积分、抗dsDNA抗体水平呈显著正相关(r=0.621、0.581、0.512,P＜0.05),与补体C3水平呈负相关(r=-0.543,P＜0.05).CD4+ CDhigh25Treg细胞与SLEDAI积分呈负相关(r=- 0.423,P＜0.05),与补体C3水平呈正相关(r=0.511,P＜0.05).结论 SLE患者Th17细胞数量增高,CD4+ CDhigh25 Treg细胞数量减少,以及相关细胞因子的紊乱在SLE的发病机制中可能起到重要作用.     

类风湿性关节炎患者外周血Th1/Th2细胞平衡变化的研究

目的 探讨T细胞亚群及Th1/Th2细胞平衡变化在RA发生发展中的作用.方法 采用流式细胞术、酶联免疫吸附试验法(ELISA)对40例RA患者和8例健康人外周血T淋巴细胞亚群及CD4+T细胞功能亚型Th1、Th2的代表细胞因子γ-IFN、IL-4进行检测.结果 RA患者外周血CD8+含量活动期较缓解期下降(P＜0.05),且较对照组均明显下降(P＜0.01);CD4+/CD8+比值明显升高(P＜0.01),而CD3+CD4+的含量在两两组间差异无统计学意义(P＞0.05).RA患者外周血γ-IFN水平活动期较缓解期明显升高(P＜0.01),且较对照组均明显升高(p＜0.01);而IL-4水平明显降低(P＜0.01);γ-IFM/IL-4比值明显升高(P＜0.01).结论 类风湿关节炎Th1/Th2平衡改变与疾病活动程度有关,处于活动期Th1反应增强,缓解期Th1/Th2趋于平衡.通过调节Th1/Th2介导的平衡,有可能抑制和改善RA的症状.     

地塞米松对系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中细胞因子分泌及T细胞亚群表达的影响

目的 探讨地塞米松对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中白细胞介素(IL)-17、干扰素(IFN)-γ分泌水平和Th17、Tc17、Th1、Tc1等T细胞亚群表达的影响.方法 SLE患者和健康对照者的PBMCs分空白孔、佛波酯(PMA)/离子霉素(Ionomycin)孔、PMA/Ionomycin+地塞米松(DEX)孔行体外培养,运用四色流式细胞术检测PBMCs表达Th17、Tc17、Th1、Tc1等T细胞亚群的百分比,采用酶联免疫吸附法测定SLE患者和健康对照者血浆及PBMCs培养上清中IL-17、IFN-γ的表达水平.结果 SLE组患者血浆IL-17[138.98(84.82～187.04)ng/L]、IFN-γ[21.92(15.95～27.09)ng/L]含量均高于正常对照组[57.21(47.78～72.12)ng/L,13.43(7.04～17.37)ng/L].无PMA刺激条件下,SLE患者PBMCs培养上清中细胞因子水平、PBMCs中各T细胞亚群的百分比与正常对照组相比差异均无统计学意义(P均＞0.05);加入PMA刺激后,SLE患者PBMCs上清中IL-17的水平[(26.43±10.04)ng/L]和外周血Th17[(2.49±1.49)%]、Tc1[(44.89±16.43)%]细胞的比例均显著高于正常对照组[(18.06±5.42)ng/L,(1.47±0.73)%,(31.41±9.05)%)(P均＜0.05),SLE患者Th1、Tc17细胞百分比与正常对照组相比,差异均无统计学意义(P均＞0.05);地塞米松能明显抑制活化状态下的PBMCs分泌IL-17的水平[(16.72±6.09)ng/L](P＜0.01),且显著下调Th17(1. 34±0.76)%、Tc1(34.62±17.25)%细胞百分比(P均＜0.05),而地塞米松对IL-17的抑制作用更强.结论 SLE患者体内T细胞亚群及其相应细胞因子的表达水平存在明显异常,地塞米松能干扰SLE患者体内细胞因子网络失衡的免疫病理过程,且对IL-17有明显的抑制作用,为临床使用糖皮质激素治疗SLE提供新的理论依据和实验室基础.     

感染性休克患者外周血T淋巴细胞凋亡和影响因素分析

目的观察感染性休克患者的外周血T淋巴细胞的凋亡情况,并对可能诱导T淋巴细胞凋亡的原因进行探讨。方法采集南京市第一医院ICU自2006年1月至2009年1月收治的32例感染性休克患者的外周血,用Annexin-V法和流式细胞仪测定其中的T淋巴细胞的凋亡情况,同时用酶联免疫法（ELISA）测定血浆中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素10（IL-10）、白细胞介素1β（IL-1β）的浓度,用化学发光法检测血浆中的游离皮质醇浓度,将上述的结果和脓毒血症病患者及健康对照（n=22）相比。结果在初始状态下,外周血T淋巴细胞CD4＋亚群在健康对照组、脓毒血症组及感染性休克组分别为（4.41±1.45）%、（7.87±3.82）%及（11.01±4.52）%,感染性休克患者的外周血T淋巴细胞CD4＋亚群的凋亡比例高于脓毒血症患者（P〈0.05）,脓毒血症患者高于健康对照组（P〈0.05）;而初始状态下健康对照组、脓毒血症组及感染性休克组患者外周血T淋巴细胞CD8＋亚群的凋亡为（9.62±8.32）%、（13.09±15.84）%及（11.33±19.62）%,3组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。在基础状态下TNF-α的浓度在健康对照组,脓毒血症组及感染性休克组中分别为（16.44±9.55）ng/L、（29.58±13.6）ng/L及（47.99±25.63）ng/L,感染性休克组TNF-α的浓度高于脓毒血症组（P〈0.05）,脓毒血症组高于健康对照组（P〈0.05）,持续72小时;IL-10的浓度在健康对照组,脓毒血症组及感染性休克组中分别为（6.38±7.5）ng/L、（9.67±4.88）ng/L及（15.01±5.36）ng/L,感染性休克组中的IL-10的浓度高于脓毒血症组（P〈0.05）,脓毒血症组高于健康对照组（P〈0.05）,持续72小时;游离皮质醇的浓度在健康对照组,脓毒血症组及感染性休克组中分别为（0.45±0.42）μmol/L、（0.87±0.49）μmol/L及（1.39±0.84）μmol/L,感染性休克组中的游离皮质醇浓度高于脓毒血症组（P〈0.05）,脓毒血症组高于健康对照组（P〈0.05）,持续72小时;IL-1β在健康对照组、脓毒血症组及感染性休克组中分别为（13.12±5.07）ng/L、（25.21±14.76）ng/L及（22.94±22.01）ng/L,感染性休克组和脓毒血症组的浓度高于健康对照组（P〈0.05）,但是感染性休克组和脓毒血症组的浓度差异无统计学意义（P〉0.05）。结论感染性休克患者的外周血T淋巴细胞中CD4＋亚群可发生明显的凋亡,TNF-α、IL-10及皮质醇可能参与了诱导CD4＋亚群的凋亡。     

调节性T细胞在乙型肝炎慢性化中的免疫调控作用

目的 探讨乙型肝炎慢性化的免疫调控机制.方法 用酶联免疫吸附实验测定慢性乙型肝炎患者(CHB)的辅助性T淋巴细胞(Th1/Th2)细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的血清浓度;同时用流式细胞术检测CHB的调节性.T细胞(Treg)在外周血中的分布频率.结果 与健康对照组相比,CHB组血清IL-2明显减低...     

树突状细胞疫苗调节慢性乙型肝炎患者细胞因子诱导的杀伤细胞相关免疫功能的研究

目的研究树突状细胞（DC）疫苗对培养的慢性乙型肝炎（CHB）患者细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）免疫功能的调节作用。方法采用体外细胞培养的方法培养30例CHB患者CIK细胞,分为DC疫苗组和无DC疫苗组,培养14d后用流式细胞术检测各组ClK中CD3’CIM’、CD3’CD8’及CD3’CD56’T细胞的所占比例,ELISA方法检测培养上清中自细胞介素-12（IL-12）、γ干扰素（IFN-1）及白细胞介素-4（IL4）的浓度。结果DC疫苗组CD3^＋CIM^＋、CD3^＋CD8^＋及CD3^＋CD56^＋T细胞所占比例分别为18．27％、64．36％和20．00％,无DC疫苗组则分别为17．79％（P〉0．05）、54．69％（t=4．130,P〈0．01）和13．39％（t=5．601,P〈0．01）。DC疫苗组的CIK培养上清中IL．12、IL4及IFN-1的浓度分别为（177．82±130．06）、（31．774-9．52）、（86．99±56．30）ng/L,无DC疫苗组分别为（80．83±50．15）n∥L（t=3．811,P〈0．01）、（40．33±19．74）ng／L（t=2．141,P〈0．05）和（42．07±19．68）ng／L（t=4．125,P〈0．01）。结论CIK细胞培养中加入DC疫苗进行诱导,增强了所培养CIK细胞的杀伤活性。     

系统性红斑狼疮中Th17细胞相关细胞因子的变化

目的探讨系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）血浆中T辅助17（Th17）细胞相关的细胞因子白细胞介素（interleukin,IL）-17、IL-6、IL-23、IL-27和转化生长因子β（transforming growth factor-beta,TGF-β）水平的变化。方法 SLE组43例;健康对照组20例。采用酶联免疫吸附测定法测定血浆中IL-17、IL-6、IL-23、IL-27和TGF-β水平,分析它们的相关性。结果 SLE组与健康对照组比较,血浆中IL-17（74.32±22.76）ng/L vs（32.12±5.68）ng/L,IL-6（62.06±9.92）ng/L vs（37.98±15.41）ng/L,IL-23（30.29±12.59）ng/L vs（15.10±12.31）ng/L和IL-27（27.61±11.16）ng/L vs（16.17±8.35）ng/L的浓度都明显升高（P〈0.01）,TGF-β的血浆浓度则明显降低（35.80±11.65）ng/L vs（69.08±28.76）ng/L（P〈0.01）。IL-17与IL-6,IL-23和IL-27之间呈正相关（r=0.542、0.887、0.757,均P〈0.05）,与TGF-β之间则呈负相关（r=-0.268,P〈0.05）。结论 IL-17及其相关的细胞因子在SLE表达异常,IL-17在SLE发病中具有重要作用。     

白介素6对人Th17细胞的免疫调节作用

本研究旨在探讨白介素6(IL-6)对人Th17细胞的调节作用.应用免疫磁珠分离正常人CD4+ T细胞并培养.实验分为2组,实验组(IL-6+):CD4+ T细胞(1×106/ml)经重组人IL-6(20ng/ml)刺激4天;对照组(IL-6-):不经IL-6刺激.应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中IL-17蛋白水平,流式细胞术(FCM)检测Th17细胞数量.结果发现,与对照组相比,经IL-6刺激后的CD4+ T细胞上清中IL-17蛋白水平明显升高(337.05±189.09pg/ml vs 15.07±12.70 pg/ml)(p<0.05);进一步FCM发现,IL-6剌激组Th17细胞数量明显高于对照组[(4.05± 0.30)% vs(2.81±0.44)]%,(p<0.01).结论:IL-6促进人Th17细胞的增殖.     

慢性乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒基因型与细胞免疫功能的关系

目的探讨慢性乙型肝炎（cHB）患者的乙型肝炎病毒（HBV）基因型与细胞免疫功能的关系及其临床意义。方法对108例CHB患者用聚合酶链反应（PCR）微板核酸杂交-酶联免疫吸附测定（ELISA）技术进行HBV基因分型,用流式细胞仪检测T细胞亚群、非特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）、辅助性T细胞（Th）1、Th2、自然杀伤（NK）细胞,对其中55例人白细胞抗原（HLA）-A2阳性CHB患者检测HBV特异性CTL。结果108例CHB患者中,B基因型59例（54．6％）,C基因型48例（44．4％）,B、C混合型1例（0．9％）,HLA—A2阳性55例（51．4％）中,C基因型感染者27例,B基因型感染者28例;乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）阳性率高于B基因型感染者（75．0％VS49．2％）（P〈0．01）,C基因型的HBVDNA水平高于B基因型感染者（6．12±0．81）log10copies／mlvs（5．02±0．61）log10 copies／ml（P〈0．01）,HBV特异性CTL低于B基因型感染者（0．21±0．06）％vs（0．39士o．12）％（P〈0．01）。非特异性CTL高于B基因型感染者（19．84±6．17）％vs（16．81±3．56）％（P〈0．01）,丙氨酸转氨酶（ATL）高于B基因型感染者（505．12±312．91）U／Lvs（222．11±205．16）U／L（P〈0．01）,血清总胆红素（TBIL）高于B基因型感染者（45．71±41．12）μmol／Lvs（28．18±15．12）μmol／L（P〈0．05）。结论与CHBB基因型感染者相比,C基因型感染者的HBV特异性CTL较低,导致HBVDNA水平高于B基因型感染者,HBeAg阳性率也高于B基因型感染者,因此C基因型感染者的肝功能损害比B基因型感染者重,C基因型感染者的肝功能损害比B基因型感染者重,可能也与C基因型感染者的非特异性CTL比B基因型感染者高有关。     

乳腺癌手术前后辅助性T淋巴细胞1、2型细胞因子的表达及意义

目的 观察手术前后乳腺癌患者体内辅助性T淋巴细胞(helper Tlymphocyte,Th)1、2型细胞因子的表达及意义.方法 2009年11月-2010年12月,采用酶联免疫吸附试验检测40例乳腺癌患者(乳腺癌组)手术前、后和15例健康妇女(正常对照组)外周血单个核细胞培养上清液中Thl型细胞因子[白细胞介素(in...     

Th17细胞及其分泌的IL-17在特发性血小板减少性紫癜患者中的变化及临床意义

目的探讨辅助性T17细胞（Th17）及其分泌的细胞因子白细胞介素（IL）-17在特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者中的变化及临床意义。方法选择2010年11月至2012年1月于大连医科大学附属第-医院就诊的门诊和住院ITP患者38例为研究对象,纳入研究组;随机选取同期于本院体检的健康成年人30例纳入对照组。两组-般情况,如年龄、性别等比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。应用流式细胞术（FCM）检测研究组治疗前、糖皮质激素治疗后及对照组外周血中Th17细胞的比率,同时用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组血清中IL-17的水平（本研究遵循的程序符合大连医科大学附属第-医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该伦理会批准,分组征得受试对象本人的知情同意,并与之签订临床研究知情同意书）。结果研究组治疗前外周血中Th17细胞比率和血清中IL-17的水平分别为（1．384-0．42）％和（25．52±6．83）ng／L,与对照组的（0．71±0．29）％和（8．23±3．15）ng／L比较,差异有统计学意义（P〈0．05）,研究组患者外周血中Th17细胞比率和血清中IL-17的水平较对照组显著增高。研究组经糖皮质激素治疗后,外周血中Th17细胞比率和血清中IL-17的水平分别为（1．05±0．31）％和（17．46±5．14）ng／L,较治疗前显著降低（P〈0．05）。结论ITP患者外周血中Th17细胞的比率及其IL-17的水平均升高,经糖皮质激素治疗后可下调Th17细胞的比率和IL-17的水平,有效地缓解ITP。     

白介素21对树突状细胞诱导的CTL抗白血病作用的影响

本研究探讨白介素21（IL-21）对树突状细胞（DC）诱导的CTL抗白血病的体外作用。以不同细胞因子诱导培养急性白血病（AL）患者缓解期外周血单个核细胞产生DC，自体AL细胞RNA作为抗原负载DC，与自体T淋巴细胞共培养诱导白血病特异性CTL产生；用LDH释放法检测CTL杀伤自体AL细胞的作用，并检测CTL产生IFN-γ和TNF-α的变化。实验共分2组：实验组，在DC—CTL共培养过程中加用IL-21（200ng／ml）；对照组，不加IL-21。同时对IL-21单独作用培养后成熟DC，检测其表面抗原表达变化以及诱导同种混合淋巴细胞反应能力。结果表明：对照组和实验组的CTL产生率分别为：（56．73±10．21）％，（73．43±18．01）％（P〈0．01）；培养上清中IFN-γ和TNF-α分别为：（154．91±67．20）ng／L，（310．62±141．15）ng／L（p〈0．01）和（8．77±5．09）μg/L，（15．25±6．56）μg／L（p〈0．01）。在效靶比为20：1时，两组对自体AL细胞的杀伤作用分别为（50．22±5．07）％，（75．38±9．47）％（P〈0．01）；IL-21作用后的成熟DC的CD1a、CD83、CD86、CD80和HLA—DR表达没有明显变化；诱导同种混合淋巴细胞反应能力亦没有明显不同。结论：IL-21可促进DC诱导的CTL增殖、增加IFN--γ和TNF—α产生从而增强其抗白血病作用；IL-21对成熟DC表面抗原表达及其免疫功能无明显影响；提示IL-21在白血病免疫治疗中发挥一定的作用，具有潜在的临床应用价值。