骨痛贴皮肤变态反应试验研究

1 材料和动物 1.1 受试样品骨痛贴,棕褐色膏贴,样品批号为2006.10.8,受试样品为产品原形. 1.2 动物英格兰短毛豚鼠40只,雌雄各半,体重200～300g,由黑龙江中医药大学动物室提供,合格证号:黑动字第P00102004,饲养环境为I级动物房,温度:22±2℃,湿度:45±5%.     

不同单位生产的二氧化氯消毒剂急性经口毒性比较

目的对同一剂型不同单位生产的二氧化氯消毒剂急性经口毒性进行比较,为其安全使用提供科学依据。方法剂量设计采用霍恩氏法和一次最大限度试验,按要求对KM小鼠进行随机分组,将受试样品给各组动物一次灌胃,观察动物的中毒症状和死亡情况,根据试验结果计算LD50,并确定急性毒性分级。结果 3个单位生产的二氧化氯消毒剂急性经口毒性雌性动物分别为:3 160mg/kg.bw,>5 000 mg/kg.bw,3 690mg/kg.bw;雄性动物分别为:3 160mg/kg.bw,4 300 mg/kg.bw,3 690mg/kg.bw。结论按照《消毒技术规范》2002版毒性分级评价,A、C2种受试样品及B受试样品对雄性动物均属低毒物,B受试样品对雌性动物属实际无毒物。     

巴斯德杆菌属CODEHOP PCR检测方法的建立与初步应用

目的建立巴斯德杆菌的CODEHOP PCR快速检测方法,为实验动物的呼吸道细菌的控制提供参考。方法应用CODEHOP在线简并引物设计工具,比对Genbank中13株巴斯德杆菌的RNA聚合酶β亚基(rpo B)氨基酸序列设计简并引物。对建立CODEHOP PCR方法用21株参考菌株进行特异性和敏感性评价,并应用于实验动物中的巴斯德杆菌检测。结果简并引物Past F6/PastR5扩增标准菌株的目的片段为200 bp左右。能够区分受试的巴斯德杆菌和主要的实验动物呼吸道病原菌。敏感性为0.2 pg/μL~2 pg/μL。在受试的609只实验动物中呼吸道样品中检测出巴斯德杆菌阳性率为19.1%。样品阳性片段经测序验证,准确率为100%。结论所建立的方法具有良好的特异性和敏感性,可用于动物样品中巴斯德杆菌的检测。     

基于THP-1细胞的皮肤致敏体外检测方法

目的建立基于人细胞系的替代皮肤致敏动物实验的体外检测方法(h-CLAT),并对化学品、日用化学产品和化妆品植物原料进行皮肤致敏性检测。方法体外培养人急性单核细胞白血病细胞(THP-1),不同浓度受试物与细胞共孵育24 h,通过流式细胞仪检测细胞表面标志物CD86和CD54活化的差异,并对11种已知皮肤致敏化学物质和9种未知样品进行皮肤致敏性预测。同时对未知样品进行豚鼠局部封闭涂皮法验证。结果使用h-CLAT方法准确区分了11种参考物质的皮肤致敏性,9种受试样品中,7种样品被判断为阴性皮肤致敏物质,2种植物提取物被确认为皮肤致敏疑似物质。9种样品的预测结果与动物实验一致。结论 h-CLAT体外检测方法可以代替部分动物测试,用于可溶性皮肤致敏物质的预测。     

硫酸镍斑贴试验前后经皮水分丢失的测定与分析

目的：通过检测硫酸镍斑贴试验受试部位经皮水分丢失（T EWL ）变化情况,探讨T EWL测定在接触性皮炎诊断中应用的可能性。方法对38例健康志愿者进行人体皮肤封闭型硫酸镍斑贴试验。将2．5％硫酸镍斑试器用胶带贴敷在受试者上背部,同时设空白对照组（空白斑试器贴于受试者上背部的不同区域）38例,封包24 h后揭去斑试物。分别于试验前（D0）,揭去斑试物后0．5 h（D1）、24 h（D2）对皮肤反应结果进行临床评估及TEWL测定。结果38例受试者中8例临床评估为阳性。D1时试验组中镍斑贴试验阴性组、阳性组及空白对照组 T EWL值分别为20．04±5．14、18．40±4．46及17．76±4．23,均明显高于D0时的12．35±3．84、13．30±5．12及12．26±4．28（ P＜0．05）。D2时斑贴试验阳性组 T EWL 值为17．01±5．19,较阴性组T EW L值12．75±3．58明显升高（ P＝0．013）,阴性组D2、D0比较差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论硫酸镍斑贴诱发的接触性皮炎模型中,斑贴封包及皮肤的阳性结果对T EWL值有一定程度的影响。     

新疆野蔷薇果汁精子畸形试验

野蔷薇果是我区一种野生植物,广泛分布于南北疆。木次试验样品野蔷薇果汁由乌鲁木齐县饮料厂提供,试验动物为成年雄性杂交小白鼠,由本院动物房提供。受试物分三个剂量组:30、60、90(g/kgbw),另设一个空白对照组和一个阳性物对照组,阳性物为丝裂霉素C(3mg/kgbw)。连续灌胃5d,从给受试物的第一天算起,于第35d以颈椎脱臼法处死动物,剖腹取睾丸,分离     

龙肽免疫胶囊毒理安全性实验研究

目的：检测龙肽免疫胶囊作为保健食品的安全性。方法：急性经口毒性、二项致突变试验（小鼠骨髓微核试验、小鼠精子畸形试验1以及大鼠30天喂养试验。结果：龙肽免疫胶囊对两种性别的SPF级昆明种小鼠急性经口毒性试验，24h两次灌胃量达20g/kgBW（相当于人群推荐日摄入量3．0g／60kgBW的400倍），两周内动物未见明显中毒症状，无动物死亡，按急性毒性分级标准规定，该受试物属无毒级。二项致突变试验结果均为阴性。30天喂养试验结果表明：将受试样品按1．25％、2．50％、5．00％的比例加入基础饲料中（分别相当于人群推荐日摄入量0．05g／kgBW的25、50、100倍），受试样品各剂量组对Wistar大鼠体重、进食量、食物利用率、血液学、血液生化、脏器重量、脏／体比值以及病理组织学等指标与正常对照组比较，均无显著性差异，未发现该受试物有明显的毒性作用。结论：龙肽免疫胶囊作为保健食品是安全的，可以通过一、二阶段的毒理学安全性评价。     

复方灵芝制剂防治化学性肝损伤实验研究

目的 通过实验操作探讨复方灵芝制剂防治化学性肝损伤的作用.方法 分0.33、0.67、2.00 g/kg 3个剂量组对小鼠每日经口进行灌胃,受试样品为复方灵芝制剂,空白对照组和模型对照组给予蒸馏水.30 d后将各组动物禁食16 h,模型对照组及各剂量组动物按0.01 mL/g一次灌胃给予四氯化碳(CCl4)染毒,各受试组染毒4 h后继续给予受试样品.染毒24 h后摘取眼球取血,分离血清,测定ALT、AST,同时处死动物,取肝脏进行组织病理学检查.结果 模型对照组小鼠的ALT、AST含量比空白对照组高(P＜0.05),低、中剂量组的ALT、AST值与模型对照组比较,有下降,差异呈显著性(P＜0.05).结论 复方灵芝制剂具有防治CCl4化学性肝损伤的作用.     

小儿咳喘贴局部毒性的实验研究

目的：观察小儿咳喘贴对实验动物的局部毒性作用。方法：将小儿咳喘贴药饼敷贴于实验动物去毛皮肤处,观察其皮肤用药的急性毒性、局部刺激和过敏反应,并与正常对照组比较。结果：小儿咳喘贴皮肤用药的急性毒性、局部刺激和过敏反应与正常对照组比较无明显差异。结论：小儿咳喘贴对大鼠皮肤无毒性,无局部刺激性,无致敏性,为临床用药提供了实验依据。     

富马酸酮替芬分散片健康人体药代动力学特征及其生物等效性分析

目的：探讨富马酸酮替芬分散片健康人体药代动力学特征及其生物等效性。方法：选择16名健康志愿受试者,采用双周期自身交叉试验设计方法,分别给予单剂量口服富马酸酮替芬分散片（受试品）或富马酸酮替芬片（参比品）2mg,观察服药后口服受试品及参比品主要药动学参数[tmax、cmax、t1/2、AUC（0～36h）]及受试品的相对生物利用度。结果：口服受试品[tmax、cmax、t1/2、AUC（0～36h）]分别为（2．8±1．1）h、（403±151）ng／L、（5．6±1．7）h、（2852±1021）ng／（h·L）,参比品[tmax、cmax、t1/2、AUC（0～36h）]分别为（3．2±1．2）h、（388±166）ng／L、（5．8±2．4）h、（2761±962）ng／（h·L）,受试品与参比品人体药代动力学参数比较差异无统计学意义,P〉0．05,且受试品相对生物利用度为（110±41）％。结论：富马酸酮替芬分散片人体吸收快,且生物利用度高,与富马酸酮替芬片具有相同生物等效性。     

多潘立酮片人体药代动力学和生物等效性

目的研究多潘立酮片（湖南威特）在健康人体内的相对生物利用度和生物等效性,为新药报批及其临床应用提供依据。方法18名健康受试者采用随机双交叉试验方法,单剂量口服受试及参比制剂20mg,用HPLC法测定给药后不同时间的血药浓度,计算主要药代动力学参数。结果受试制剂多潘立酮片（湖南威特）的T1／2：（9．31±1．60）h、Cmax：（27．2±25）μg／L、Tmax：（0．76±0．20）h、LUC0-4：（142.5±24．4）μg·h／L;参比制剂多潘立酮片（西安杨森）T1／2：（8,72±1．39）h、Cmax：（28．1±3．9）μg／L、Tmax：（0．78±021）h、AUC0-4：（140．9±27．3）μg·h／L。以AUC0-4计算,与参比制剂相比受试制剂中多潘立酮的平均相对生物利用度为（101．6％±5．1％）。结论两制剂生物等效。     

褪黑激素（melatonin）对家兔皮肤影响的研究

连续４周用ＭＴ护肤品对家兔皮肤涂药试验，观察其作用及不良反应，取家兔１２只，分为药物实验组和赋型剂对照组，每组６只，每只家兔右肩无毛区为受试区，左肩无毛区为空白对照区。结果显示：１．受试过程中，动物全身状况良好，局部未出现红斑，水肿 、脱毛、脱屑避部刺激症状；２光镜下，未见受试区表皮增厚、细胞变性等病理改变，实验组动物受试区皮肤全局结构及附属器结构良好，３．电镜下，实验组受试区皮肤表皮基底细胞分泌     

2,3-吲哚醌在大鼠体内的药代动力学研究

目的考察单次静脉注射和口服给予大鼠2,3-吲哚醌后的药代动力学,为该药的新药开发提供依据。方法大鼠给药后经眼眶静脉采大约0.25 ml血液,采集时间点为：给予受试物前（0hr）和给予受试物后5 min,15min,30 min,1 h,2 h,4 h,6 h,8 h和24 h。血液样本采集后置于冰上,并立即取出50μl全血采用甲醇蛋白沉淀进行预处理,奎硫平作为内标。预处理后样品采用LC/MS/MS法进行测定,并用药动学处理软件WinNonlin 5.2采用非房室模型计算相关药代动力学参数。结果 Sprague Dawley大鼠静脉注射和口服两种制剂的药动学参数（平均值±标准偏差）如下。静脉注射：Tmax为0.83±0.29 hr,Cmax为141.53±10.99μg/L,T1/2为1.68±0.84 hr,AUC0-t为1068.15±389.06μg.hr/L,AUC0-∞为1211.19±469.18μg.hr/L,Vz为4.13±1.41 L/kg,CLz为1.89±0.94 L/hr/kg;口服：Tmax为0.05±0.00 hr,Cmax为1725.53±469.70 ng/ml,t 1/2为4.21±2.78 hr,AUC0-t为7711.21±2533.12μg.hr/L,AUC0-∞为7986.07±2623.38μg.hr/L,以AUC0-t计算,生物利用度平均为57.75±18.97%。结论 2,3-吲哚醌大鼠体内消除较快,可能存在非线性消除,口服吸收较好。     

阿魏酸钠胶囊与片剂在健康人体的生物等效性研究

目的：研究阿魏酸钠胶囊和阿魏酸钠片在健康志愿受试者中的药动学和人体生物等效性。方法：20名健康志愿者随机交叉单次口服受试制剂阿魏酸钠胶囊和参比制剂阿魏酸钠片,均100 mg,采用HPLC-UV检测方法,测定血浆中阿魏酸钠浓度,采用Das2.1程序计算其药动学参数,评价两种制剂的人体生物等效性。结果：受试制剂及参比制剂主要药动学参数分别为：Cmax（1.021±0.286）μg/ml和（1.066±0.397）μg/ml,tmax（0.388±0.078）h和（0.371±0.083）h,t1/2（0.887±0.431）h和（0.824±0.404）h,AUC（0~t）（0.613±0.172）μg.h/ml和（0.614±0.235）μg.h/ml。结论：受试制剂阿魏酸钠胶囊和参比制剂阿魏酸钠片具有生物等效性。     

注射贴药效学及临床研究

研究注射贴找经效学及临床效果。方法：用动物及健康人体试验注射局贴局部扩血管及镇痛作用。结果：药效学实验效果显著。临床验证有效率为９９％和８４％。结论：本贴可用于静脉注射时局部扩张血管及减除疼痛，值得临床推广使用。     

头孢拉定胶囊人体药代动力学和生物等效性

目的研究头孢拉定胶囊在健康人体内的相对生物利用度和生物等效性,为新药报批及其临床应用提供依据。方法20名健康受试者随机双交叉试验方法,单剂量口服受试及参比制剂500 mg,用HPLC法测定给药后不同时间的血药浓度,计算主要药代动力学参数。结果口服头孢拉定胶囊受试制剂和参比制剂后的主要药动学参数：T1/2分别为0.841±0.165和0.842±0.213 h;Cm ax分别为（15.922±2.584）和（15.922±2.584）mg/L;Tm ax分别为（1.225±0.197）和（1.225±0.242）h;AUC0-t分别为（25.399±5.806）和（26.159±5.989）mg/（L·h）。以AUC0-t计算,与参比制剂相比受试制剂中头孢拉定的平均相对生物利用度为（97.4±7.0）%。结论两制剂生物等效。     

阿奇霉素片的人体相对生物利用度及药代动力学

目的研究阿奇霉素片受试制剂与参比制剂人体相对生物利用度及药代动力学。方法18名健康受试者自身交叉单剂量口服阿奇霉素受试制剂和参比制剂各500 mg,定时取血,用微生物法测定血药浓度。结果阿奇霉素片受试制剂与参比制剂的血药浓度时间曲线基本一致,符合一级吸收二房室模型。受试制剂与参比制剂的主要药动学参数分别为:消除半衰期t1/2β:(36.48±9.45)h,(38.10±9.39)h;Tmax:(2.39±0.61)h,(2.44±0.61)h;Cmax:(509.10±106.08)μg/L,(505.20±89.91)μg/L。药代动力学参数经配对t检验,差异均无显著性意义(P>0.05)。两种制剂的药时曲线下面积(AUC0-t)平均值分别为:受试制剂(9 080±1 339)(μg.h)/L,参比制剂:(9 308±1 390)(μg.h)/L;受试制剂的相对生物利用度为(98.0±10.1)%。结论受试制剂阿奇霉素与参比制剂生物等效。     

头孢克洛胶囊健康人体药动学及生物等效性研究

目的:研究头孢克洛受试制剂和参比制剂的人体药动学和生物等效性.方法:20名健康受试者随机交叉口服受试制剂与参比制剂,剂量均为500 mg/人.采用HPLC法测定血中头孢克洛的浓度.结果:受试制剂与参比制剂的主要药动学参数Cmax分别为(13.31±3.57) mg/L、(12.81±3.02) mg/L; tmax 分别为(1.01±0.37) h、(0.96±0.31) h;t1/2分别为(0.47±0.25) h、(0.42±0.18) h;AUC0→tn分别为(19.63±3.21) mg·h/L-1、(20.06±2.89) mg·h/L-1.2种制剂的药动学参数相近,以AUC0→tn 计算的受试制剂的相对生物利用度为 (98.68±14.34)% .结论:受试制剂和参比制剂生物等效.     

一种小动物湿热环境试验箱的研制

目的 研制一种小型湿热环境动物试验箱.方法 采用有机玻璃制作湿热环境试验箱箱体,敷设加温、加湿装置和电子温度调节仪.利用电子温度、湿度计测定试验箱内环境温度变化规律.将SD大鼠12只置于试验箱内,分别测量受试前及受热30、60、90 min和120 min后的体质量及肛温变化,用于检测模拟效果.结果 当箱内空气温度为(37.9±0.2)℃、相对湿度为(60.4±0.9)％时,受试动物活动增多,30 min肛温平均升高2.7℃,60 min后体质量减轻3.16％ (P＜0.01),120 min后体质量减轻5.52％ (P ＜0.01).结论 该试验箱内温、湿度在一定范围内可控,试验结果精确、稳定、可靠,可作为湿热环境相关科学研究的实验模型.     

盐酸二甲双胍缓释片人体药代动力学和相对生物利用度研究

目的:研究盐酸二甲双胍缓释片(受试制剂)和普通片(参比制剂)在健康受试者体内的药代动力学过程和相对生物利用度.方法:20名男性志愿者随机自身交叉口服受试制剂和参比制剂,单剂量两制剂各服用1 000 mg,多剂量受试制剂服用1 000 mg×1次/天,参比制剂服用500 mg×2次/天.血浆中二甲双胍浓度使用HPLC-UV法测定.采用二房室模型进行血药浓度-时间数据分析,并计算药动学参数和相对生物利用度.结果:受试制剂和参比制剂单剂量口服后二甲双胍的Cmax分别为(1.61±0.37)μg/ml和(2.47±0.74)μg/ml;Tmax分别为(3.1±0.6)h和(1.5±0.7)h;T1/2分别为(5.1±1.9)h 和(2.7±0.3)h;AUC0→1分别为(11.08±2.88)h·μg/ml和(12.03±2.63)h·μg/ml;受试制剂相对于参比制剂的生物利用度F为(92.6±14.7)%.受试制剂和参比制剂多剂量口服后二甲双胍的Cmax分别为(1.60±0.25)mg/ml和(1.57±0.40)μg/ml;Tmax分别为(3.2±0.4)h和(1.1±0.5)h;T1/2分别为(5.5±3.1)h和(3.0±0.6)h;AUCss分别为(13.24±3.08)h·μg/ml和(6.99±1.50)h·μg/ml.受试制剂的相对生物利用度F为(95.3±17.5)%.结论:受试制剂和参比制剂生物等效,且具有缓释特性.