TIM-3在宫颈癌外周血T细胞中的表达及相关性研究

目的检测T细胞免疫球蛋白黏连蛋白-3 (TIM-3)在宫颈癌患者外周血T细胞中的表达,探讨TIM-3与宫颈癌发生发展的相关性。方法应用流式细胞仪检测CD4+T细胞,CD8+细胞及TIM-3在外周血不同类型T细胞表面的表达。收集21例对照组、15例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者和24例子宫颈癌患者样本,进一步分析TIM-3与宫颈癌临床病理参数的关系。结果宫颈癌及CIN患者较非宫颈病变患者外周血的CD4+T及CD8+T细胞明显减少,并且CD4+T及CD8+T细胞表面的TIM-3表达量明显增高,有统计学意义,CIN与宫颈癌相比较差异无统计学意义。与Ⅰ～Ⅱ期比较,TIM-3在宫颈癌Ⅲ～Ⅳ期外周血CD4+T及CD8+T细胞中的表达显著增加,差异有统计学意义(P <0.05)。不同临床因素分析结果显示,TIM-3在外周血T细胞中的表达与年龄、淋巴结阳性、肿瘤大小及鳞状细胞癌抗原高低无相关性(P> 0.05)。结论 TIM-3与宫颈癌的发生发展有关,可能成为宫颈癌的一种新的免疫治疗靶点。     

lncRNA HOTAIR在宫颈癌组织及HeLa细胞中的表达及其生物学功能研究

目的 探讨长链非编码RNA HOTAIR在宫颈癌组织中的表达及其生物学功能.方法 选取简阳市人民医院2014年8月至2016年7月收治并手术治疗的宫颈癌患者47例,采用实时荧光定量PCR检测患者癌组织及癌旁正常宫颈组织中HOTAIR RNA的相对表达量;以人宫颈癌Hela细胞为研究材料,应用小RNA干扰技术下调宫颈癌Hela癌细胞HOTAIR RNA表达,分别应用CCK-8实验、Wound Healing实验检测小干扰RNA下调HOTAIR表达前后Hela细胞增殖和迁移能力变化情况.结果 HOTAIR在宫颈癌患者癌组织与癌旁正常宫颈组织中的相对表达量分别为(6.89±2.12)与(4.02±1.89),癌组织显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组细胞相比,外源性小干扰RNA可显著敲低Hela细胞中HOTAIR的表达并影响其增殖和迁移(P<0.05).结论 宫颈癌患者癌组织中HOTAIR表达水平高于癌旁正常宫颈上皮;HOTAIR可能参与了宫颈癌细胞增殖和迁移等生物学功能.     

Legumain在宫颈癌中的表达及相关危险因素

目的探讨天冬酰胺内肽酶(Legumain)在宫颈癌中的表达及Legumain高表达的相关危险因素。方法纳入行宫颈癌筛查、初筛阳性并行阴道镜下活检的患者187例,根据诊断结果分为正常组(n=84)、癌前病变组(CINⅠ~Ⅲ)(n=62)和宫颈癌组(Ⅰ~Ⅳ,FIGO分期)(n=41),通过免疫组化检测Legumain在不同病变组织中的表达,并进一步分析影响Legumain高表达的相关危险因素。结果宫颈癌组中Legumain表达明显高于正常组和癌前病变组(P0.05),但正常组与癌前病变组间表达差异无统计学意义(P0.05)。肿瘤组织学分型[1.483(1.258~2.950),P=0.019]和宫颈癌FIGO分期[2.072(1.313~3.264),P=0.011]是Legumain在宫颈癌中高表达的相关危险因素。结论Legumain在宫颈癌中呈高表达,与其组织学分型及临床分期存在相关性。     

Bmi-1在宫颈癌组织中的表达及相关性研究

目的 检测不同宫颈病变中Bmi-1的表达,探讨其与宫颈癌各临床病理因素的关系及意义.方法 以宫颈癌、慢性宫颈炎组织为材料,采用免疫组化染色法检测Bmi-1蛋白表达水平,并用原位杂交法检测Bmi-1 mRNA表达水平.结果 免疫组化结果显示,Bmi-1蛋白在宫颈癌组织中的表达明显高于慢性宫颈炎组织(P<0.05).原位杂交结果显示,宫颈癌组织的Bmi-1 mRNA表达水平明显高于慢性宫颈炎组织(P<0.05).Bmi-1的表达与宫颈癌肿瘤分级、临床分期等密切相关(P<0.05),而与患者的年龄、病理分型等无关(P>0.05).结论 Bmi-1在宫颈癌组织的表达状态与其发生发展关系密切,可作为反映宫颈癌生物学行为的有效指标之一. Abstract： Objective To investigate the expression and its clinicopathologic significance of Bmi-1 in different cervical diseases. Methods Immunocytochemistry was used to examined Bmi-1 protein expression in cervical carcinoma and chronic cervicitis tissue. The mRNA expression of Bmi-1 was examined by in situ hybridzation. Results Immunocytochemistry demonstrated that the levels of Bmi-1 protein in cervical carcinoma samples were significantly higher than those in chronic cervicitis tissues(P<0.05).In situ hybridration results shows that the levels of Bmi-1 mRNA in cervical carcinoma samples were significantly higher than those in chronic cervicitis tissues(P<0.05).Expression of Bmi-1 was correlated with tumor grading and clinical stage(P<0.05). On the other hand, it was not correlated with age or pathological type(P>0.05). Conclusions Overexpression of Bmi-1 in cervical carcinoma enhances carcinogenesis and invasion. It's possible that Bmi-1 serves as a good prognostic factor to indicate biologic behavior of cervical carcinoma.     

TLRs在树突状细胞的表达及相关功能研究进展

Toll样受体(Toll—like receptors，TLRs)是目前发现能识别病原微生物上的高度保守结构基序——病原相关分子模式(pathogen—associated molecular patterns，PAMPs)的一组蛋白，在机体的天然免疫和获得性免疫中发挥重要作用。树突状细胞(denditric cell，DC)是体内功能最强的专职抗原递呈细胞     

TLRs在树突状细胞的表达及相关功能研究进展

Toll样受体(Toll likereceptors ,TLRs)是目前发现能识别病原微生物上的高度保守结构基序———病原相关分子模式(pathogen associatedmolecularpat terns ,PAMPs)的一组蛋白,在机体的天然免疫和获得性免疫中发挥重要作用。树突状细胞(denditriccell,DC)是体内功能最强的专职抗原递呈细胞(antigenprocessingcells ,APCs) ,它是唯一能启动免疫应答又能有效刺激再次免疫应答的APC。关于TLR表达和表达调节已有不少报道。实验已经证实,TLRs不仅在髓样细胞中表达,在单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、γδT细胞、Th1和Th2细胞、小肠上…     

Cx43蛋白在宫颈癌细胞中的表达及其对细胞通讯功能的影响

探讨细胞间隙连接蛋白Ｃｘ４３在人子宫吕细胞系ＨｅＬａ中表达,及其对细胞间隙连接通讯的影响。方法应用流式细胞仪以及ＬｕｃｉｆｅｒＹｅｌｌｏｗ划痕记荧光舆技术,研究维甲酸作用对ＨｅＬａ细胞Ｃｘ４３蛋白表达,以及细胞生长状态和间隙连接通讯功能的调节作用。     

miR-99b在新辅助化疗宫颈癌组织中的表达

目的:研究miRNA-99b(miR-99b)在新辅助化疗宫颈癌组织中的表达。方法:宫颈癌患者55例分别于新辅助化疗前后收集肿瘤组织标本行micRNA的提取、反转录、实时定量PCR检测miR-99b的表达。结果:宫颈癌新辅助化疗后miRNA99b表达显著上升,与治疗前表达比较有统计学差异(P<0.05)。结论:新辅助化疗可通过上调miRNA-99b表达,实现对宫颈癌的抑制。     

Cyr61、Survivin在宫颈癌组织中的表达及相关性研究

目的研究Cyr61和Survivin在宫颈癌组织中表达的相关性。方法应．用免疫组织化学MaxVisionTM法检测Cyr61、Survivin在20例正常宫颈组织、48例宫颈癌组织中的表达情况。结果Cyr61、Survivin在宫颈癌组织中阳性表达率分别为4t．67％、79．17％。在宫颈癌中,Cyr61的表达与Survivin的表达呈负相关（rs-0．501,P=0．000）。结论在宫颈癌中,Cyr61表达与Survivin表达呈负相关。提示Cyr61表达可能通过诱导肿瘤细胞的凋亡,起到类似抑癌基因的作用。     

浸润性树突状细胞在宫颈癌中的表达及其临床意义

树突状细胞（Dendritic cell，DC）是机体内功能最强的抗原呈递细胞，具有独特的抗原呈递和激发功能，在肿瘤细胞和T淋巴细胞的相互作用中起桥梁和枢纽作用。对肿瘤微环境中浸润树突状细胞功能状态的研究有助于揭示宿主局部抗肿瘤免疫状态。判断预后。本文探讨了浸润性树突状细胞在子宫颈癌中的表达及意义，现报告如下。[第一段]     

集聚蛋白基因在不同宫颈癌细胞中的表达

目的探讨集聚蛋白(Agrin)基因在人乳头瘤病毒(HPV)阳性和阴性宫颈癌细胞中表达的差异。方法以人乳头瘤病毒16(HPV16)阳性的宫颈癌Caski细胞和Si Ha细胞、HPV18阳性的宫颈癌He La细胞、HPV阴性的宫颈癌C33-A细胞为研究对象。通过Western blot和实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)等方法分别检测Agrin mRNA和蛋白在不同宫颈癌细胞中的表达。结果实时荧光定量PCR和Western blot结果均显示,与HPV阴性的宫颈癌C33-A细胞比较,HPV16阳性的宫颈癌Caski和Si Ha细胞、HPV18阳性的宫颈癌He La细胞中的Agrin mRNA和蛋白表达均显著增加(P<0.01或0.05),Agrin mRNA和蛋白在4种宫颈癌细胞中表达的顺序为:C33-A细胞相似文献   

MMP-9、TIMP-1及VEGF在宫颈癌中的表达及相关性研究

目的 研究基质金属蛋白酶9(MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)及血管内皮生长因子(VEGF)在宫颈癌组织中的表达与临床病理和预后的关系.方法 采用免疫组化SP法检测35例宫颈癌、31例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和12例正常宫颈组织中MMP-9、TIMP-1及VEGF的表达情况,探讨三者的表达与临床病理和预后的关系.结果 宫颈癌中MMP-9、TIMP-1和VEGF的阳性率较正常宫颈组与CIN组均增高.MMP-9与VEGF的阳性表达与组织分化高低和是否有淋巴结转移有显著相关性,与临床分期、病理类型之间无显著相关性,而TIMP-1的阳性率仅与是否有淋巴结转移有相关性.结论 MMP-9和VEGF表达增强而TIMP-1的相对增强不明显可能使宫颈癌更易发生侵袭转移.     

PTEN与HIF-1α在宫颈癌组织中的表达及相关性研究

目的 检测宫颈癌组织中第10号染色体丢失的张力蛋白同源的磷酸酶基因(PTEN)与缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学方法检测宫颈癌中PTEN、HIF-1α蛋白的表达,分析其表达与宫颈癌临床病理参数的关系以及两者之间的相关性.结果 正常宫颈组、原位癌组、浸润癌组PTEN蛋白阳性表达率分...     

IL-18基因的克隆及其在宫颈癌细胞中的表达研究

目的：研究白细胞介素18(Interleukin-18，IL18)基因能否在宫颈癌细胞(Hela细胞)中表达。方法：从人胎脑RNA中RT-PCR扩增IL-18基因，构建真核基因表达载体pcDNA3．1( )-IL18，并转染到宫颈癌细胞中，收集细胞转染后24-48h上清，Western-Blotting检测IL18基因在宫颈癌细胞中的短暂表达。G418筛选稳定表达IL18基因的单克隆宫颈癌细胞，利用RT-PCR、Western—Blotting检测IL18基因在宫颈癌细胞中的稳定表达。研究为三组：1．空白Hela细胞组；2．空载体pcDNA3．1( )转染Hela细胞组；3．pcDNA3．1( )-IL18传染Hela细胞组。结果：1．成功克隆IL18基因。2．成功构建真核基因表达载体pcDNA3．1( )-IL18。3．短暂表达结果：Western—Blotting检测pcDNA3．1( )-IL18组在14．4至20．1KDa之间有一特异性条带(18．3KDa)，空白Hela细胞组和空载体pcDNA3．1( )组均没有任何条带。4．稳定表达检测结果：(1)RT—PCR结果：pcDNA3．1( )-IL18组扩增到一特异性DNA条带，位于750至1000bp之间，空白Hela细胞组和空载体pcDNA3．1( )组均没有扩增到任何条带。(2)Western-Blotting结果：pcDNA3．1( )-IL18组在14．4至20．1KD之间有一特异性条带(18．3KDa)，空白Hela细胞组和空载体pcDNA3．1( )组均没有任何条带。结论：1．成功克隆ILl8基因并构建真核基因表达载体pcDNA3．1( )-IL18。2．IL18基因成功导入到宫颈癌细胞Hela细胞中，并且有表达。     

Hes-6在宫颈癌中的表达和功能鉴定

目的:研究人宫颈癌组织中Hes-6(Hairy and enhancer of split 6)的mRNA变化以及Hes-6对宫颈癌Hela细胞的生长以及侵袭性的影响。方法:收集临床获得的宫颈癌组织标本,研究正常组织和宫颈癌组织中Hes-6mRNA表达差异;构建含有Hes-6基因片断的真核表达质粒,转染Hela细胞后,检测Hes-6的mRNA和蛋白表达;通过MTT实验检测过表达Hes-6后,Hela细胞的生长;并通过小室迁移实验检测质粒转染后Hela细胞的迁移功能的改变。结果:本研究发现,与正常组织相比较,Hes-6mRNA高表达于宫颈癌组织。将pcDNA3.1-Hes-6转染Hela细胞后,MTT实验结果显示,Hes-6过表达组Hela细胞570nm吸光值显著高于对照组细胞(转染组0.923±0.154,对照组0.695±0.117;小室迁移实验结果显示,Hes-6过表达组Hela细胞迁移能力显著高于对照组细胞(转染组153.5±21.2,对照组98.8±17.6。结论:Hes-6mRNA在宫颈癌组织中表达上调,且该蛋白不仅可促进Hela细胞的生长,还可以增加其侵袭性。     

Brn-3a、PPAR-γ在宫颈癌及癌前病变中的表达

目的 探讨Bm-3α、PPAR-γ在宫颈癌和癌前病变中的表达及其作为宫颈癌和癌前病变生物标志物的可行性和临床意义.方法 利用SP免疫组化法检测110例蜡块不同地理标本中Brn-3α、PPAR-γ的表达.结果 Brn-3a的表达阳性率对照组10.0%,CIN Ⅰ组45.0%,CINⅡ组50.0%,CINⅢ组55.0%,SCC组76.7%,宫颈癌及癌前病变各组的阳性率均高于对照组,有统计学意义(P＜0.05);PPAR-γ的表达阳性率对照组5.0%,CIN Ⅰ组25.0%CIN Ⅱ组40.0%,CINⅢ组45.0%,SCC组56.7%;SCC组及CINⅢ组的阳性率均高于对照组,有统计学意义(P＜0.05),SCC组与CIN Ⅰ组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);Bm-3α、PPAR-γ在各临床分期及组织学分级中的阳性表达无统计学意义(P＞0.05);Brn-3a蛋白阳性表达和PPAR-γ蛋白阳性表达之间无相关关系(P＞0.05).结论 Brn-3a、PPAR-γ在宫颈癌及癌前病变组织呈高表达,可作为宫颈癌前病变的生物标志物.     

Th22细胞联合Th17细胞在宫颈癌外周血中的表达及意义

目的 探讨宫颈癌外周血中Th22细胞和Th17细胞的表达及其在宫颈癌发生发展中的作用。方法 取34例宫颈癌患者外周血为宫颈癌组、21例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者的外周血为CIN组、19例健康志愿者外周血为对照组, 采用流式细胞术检测外周血中Th22、Th17细胞的表达比例。酶联免疫吸附试验(ELISA) 方法检测血浆中相关细胞因子白细胞介素-22(IL-22)的水平。结果 与对照组比较, Th22、Th17细胞比例(占淋巴细胞百分比)CIN组(P<0.01, P<0.05) 及宫颈癌组(P<0.01, P<0.01)均明显升高。Th22细胞比例宫颈癌组又明显高于CIN组(P<0.01)。CIN组中Th22细胞与Th17细胞呈正相关(r=0.41, P<0.05 ), 宫颈癌组Th22细胞与Th17细胞呈正相关(r=0.49, P<0.01)。与对照组相比, IL-22在宫颈癌组外周血中明显升高(P<0.05)。结论 Th22、Th17细胞在宫颈癌患者外周血中比例增高, 在宫颈癌的发生发展中可能起着重要作用。     

miR-29a在宫颈癌组织中的表达及其上调后对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响

目的检测微小RNA（miR）-29a 在宫颈癌组织和不同种类宫颈癌细胞系中的表达情况及其上调后对宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移等恶性生物学行为的影响。方法①组织标本检测：收集2014 年7 月-2016 年7 月西南医科大学附属医院活检或手术切除的宫颈组织标本160 例,采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-29a 的表达情况,并分析宫颈癌组织中miR-29a 的表达与临床病理特征的关系。②细胞学实验：采用qRT-PCR检测miR-29a在不同种类的人宫颈癌细胞系（SiHa、HeLa、Caski及C33a）和人正常宫颈细胞系Ect1/E6E7中的表达水平,选取miR-29a表达最低的宫颈癌细胞系SiHa进行后续研究,使用miR-29a mimics转染SiHa细胞,qRT-PCR检测转染后细胞miR-29a 的表达变化,CCK-8 法检测转染后细胞增殖活力的变化,流式细胞仪检测转染后细胞凋亡率的变化,Transwell实验检测转染后细胞迁移和侵袭能力的变化。结果宫颈鳞癌组织中miR-29a 表达低于HSIL、LSIL及正常宫颈组织（p <0.05）;HSIL组织中miR-29a表达低于LSIL及正常宫颈组织（p <0.05）,LSIL与正常宫颈组织间miR-29a的表达差异无统计学意义（p >0.05）。宫颈鳞癌组织中miR-29a的表达与患者临床分期和淋巴结转移密切相关（p <0.05）。miR-29a在人宫颈癌细胞系（SiHa、HeLa、Caski和C33a）中的表达低于人正常宫颈细胞系Ect1/E6E7（p <0.05）。SiHa细胞转染miR-29a mimics后,miR-29a表达水平增高（p <0.05）,细胞增殖活力降低（p <0.05）,细胞凋亡率增高（p <0.05）,细胞迁移和侵袭能力下降（p <0.05）。结论miR-29a在宫颈癌组织和细胞中均呈低表达,上调miR-29a的表达能够抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖及侵袭迁移能力,促进细胞的凋亡。