胶原蛋白特异性氨基酸测定方法的改进

目的　建立一种快速、准确、可靠的胶原蛋白定量检测方法。方法　采用 6 3 0 0黄金系统氨基酸分析仪 ,在钠柱 90min程序蛋白质水解分析方法基础上 ,根据羟脯氨酸 (HYP)和羟赖氨酸 (HYL)的特性 ,分别建立了HYP和HYL的快速测定方法 ,并用此方法检测了大白兔尺骨中段骨缺损处再生组织内HYP和HYL的含量。结果　用此方法完成HYP和HYL分析的时间均为 1 8min ,比原方法缩短了 72min,且有较好的重现性 (HYPCV :日内 0 .89% ,日间 1 .2 8% ;HYLCV :日内 2 .6 6 % ,日间 3 .48% )、回收率高 (HYP :97.5 % ;HYL :96 .0 9% )。结论　本方法是一种快速、准确、可靠的胶原蛋白定量检测方法 ,并利于大批量样品的快速测定     

自配氨基酸分析用的茚三酮试剂

自Ruhemann在1911年证明茚三酮可与氨基酸反应而呈深紫色后,茚三酮试剂已成为用离子交换层析进行氨基酸特异性检测的基础。用于氨基酸分析的茚三酮试剂的配方及其茚三酮的浓度、有机溶剂、缓冲液以及还原茚三酮的类型均不同。我室前所采用的茚三酮试剂系Beckman公司生产、每年需用外汇进口,近来,我们根据MOORE and STEIN制备还原茚三酮的方法和MOORE的配方配制了茚三酮试剂。自制的茚三酮试剂不仅达到上述进口试剂的效果,且灵敏度有所提高。     

氨基酸薄层层析茚三酮显色改良

薄层分析是在分析氨基酸、脂类、药物等物质中常用的方法之一。由于吸附剂或支持剂在喷雾显色时，常将层析表面破坏，造成分析的困难。本文采用氨基酸薄层层忻茚三酮显色方法，较好地解决了这一问题，可得到满意效果。     

氨基酸自动分析仪茚三酮柱后显色剂的研制

本文介绍了氨基酸自动分析仪柱后显色剂茚三酮试剂的制备,以及在平行条件下,用进口和自制茚三酮试剂测定标准氨基酸的图谱,并进行比较.结果两者灵敏度和稳定性方面的主要指标基本一致.同时,用自制试剂测得不同保留时间的氨基酸峰面积的日间平均变异系数为6.1%.故作者认为可用自制茚三酮试剂代替进口试剂.     

不同pH对氨基酸与茚三酮呈色反应的影响

茚三酮反应能定性和定量测定氨基酸,该反应受 pH 影响很大。为了提高检测灵敏度和准确性,我们观察了21种氨基酸与茚三酮在不同 pH(pH 3～12)条件下的呈色反应和吸收光谱,确立了氨基酸与茚三酮反应的最适 pH。     

茚三酮比色法测乙肝宁水提物中总游离氨基酸含量

目的:建立乙肝宁复方水提物中总游离氨基酸含量测定的方法。方法:以乙肝宁复方水提物中总游离氨基酸含量和蛋白质含量为指标,对总游离氨基酸含量测定最佳除蛋白的乙醇浓度和药液比进行筛选;采用茚三酮比色分光光度法,于568 nm,测定乙肝宁复方中总游离氨基酸的含量。结果:醇浓度为70%,生药浓度为1 g/mL(生药比1∶6)可较好除去蛋白质等大分子物质,减少测定干扰;采用茚三酮比色法,标准曲线方程为:A=0.055 9C-0.225 3(r=0.999 1),平均回收率为98.8%,RSD为2.07%(n=9),线性关系良好。该法测得乙肝宁复方药材中总游离氨基酸的含量为1.47%,乙肝宁浸膏中含量为5.65%。结论:该方法简便、快速准确,可用于测定乙肝宁复方中游离氨基酸的含量测定。     

氧含量测定方法的改进

氧用于缺氧的预防和治疗被许多国家药典收载 ,其含量测定方法均采用铜氨溶液吸收 ,称汉普仪测定法。由于氧含量高 ,所以在取样、吸收等操作过程中都得十分小心 ,测定也较麻烦 ,仪器的清洗和铜氨溶液的更换也很费时 ,笔者经反复对比试验 ,采用二氧化碳快速测定仪代替中国药典氧含量测定仪器装置 ,它集取样、吸收、计量为一体 ,方法简便、快速 ,结果准确 ,适用于生产和实验室应用。1　仪器与试剂1.1　测定仪器　如图 1所示。　　 A、B-两通旋塞 ;C-刻度精确至 0 .1m L容量为 10 0 m L的氧定量吸收管 ;D-滴液漏斗 ,容量为 12 0 m L图 1　二…     

CPKMB测定方法的改进

在临床诊断急性心肌梗塞(AMI)的许多指标中,以CPKMB的特异性最强(100％),且敏感性最高(96—98％)。但由于目前测定方法繁琐,免疫法需要纯抗体,电泳法需要光密度计扫描定量同功酶谱,而且试剂昂贵,来源困难,故难以推广。离子交换柱层析法较为简单易行,三种同功酶谱的分离效果     

出血时间测定方法的改进

出血时间的传统测定方法有ＤＵＫＥ法和ＩＶＹ法 ,目前国家卫生部推荐使用国际标准化出血时间测定器法 (ｔｅｍｐｌａｔｅｂｌｅｅｄｉｎｇｔｉｍｅ ,ＴＢＴ)。我院通过ＤＵＫＥ法、ＩＶＹ法和ＴＢＴ法3种出血时间测定方法的比较 ,认为ＴＢＴ法是目前测定出血时间较为理想的方法 ,本文就改进的测定方法报告如下。1　资料与方法1.1对象　 2 5例血小板减少性紫癜 (ＩＴＰ)患者和 2 0例血管性血友病 (ＶＷＤ)患者 ,均系我院确诊收治的住院患者 ,男 2 3例 ,女 2 2例 ,年龄 2 0～ 80岁。1.2　方法1.2 .1　ＤＵＫＥ法和ＩＶＹ法　严格按照规程操作…     

甲胎蛋白快速测定方法的改进

AFP-RIA快速法操作程序为了缩短甲胎蛋白放免分析（双抗体法）（以下简称AFP-RIA（DA）流程简化操作程序，我们对常规法作了小改进，简称