系统性红斑狼疮患者外周血Th1和Th2平衡的研究

目的 通过检测系统性红斑狼疮（SLE）患外周血中CD4^ 和CD8^ T淋巴3细胞分泌细胞因子的情况以及γ干扰素（IFN-γ)和白介素－4（IL－4）的水平，探讨T淋巴细胞亚群与SLE发病的关系。方法 采用流式细胞术分析SLE患和正常健康人外周血中淋巴细胞内细胞因子（IFNγ、IL－4）和表面抗原（CD4、CD8），用Dot blot法检测IFN－γ和IL－4mRNA的表达。以ELISA法测定血清中IFN－γ和IL－4的水平。结果 与对照组相比，SLE患外周血中1类辅助T细胞（Th1)、Th1/Th2比率、IFN－γmRNA的表达和IFN－γ水平和IFN－γ／IL－4比值均明显降低（P＜0．01），而Th2细胞、Th0细胞和IL－4 mRNA表达的水平及其外周血中IL－4的水平则无明显改变（P＞0．05）。结论 在SLE患外周血中，Th1细胞的数量及其分泌的细胞因子的水平均明显下调，提示Th1/Th2细胞的失衡在SLE发病中有着重要的作用。     

口服抑毒高干产液对慢性乙型肝炎患者Th1／Th2细胞因子的调节作用

目的：研究抑毒调平液对慢性乙型肝患者Th1/Th2细胞因子的影响。方法：60例慢性乙型肝炎（中度）患者按随机双盲原则分为治疗组、对照组（每组30例）。两组分别口服抑素调平液或安慰剂。收集治疗前，治疗后停药时及停药3月末空腹血清标本，用酶联免疫吸附法检测细胞因子白细胞介素－2、白细胞介素－4、白细胞介素IL－2、IFN－γ、IL－12的水平及IFN－γ／IL－4明显低于正常人（P＜0．05），IL－4的含明明显于正常人（P＜0．05），治疗组与对照组患者间上述各项指标比较均无明显差异（P＞0．05）；治疗后停药时，停药3月末治疗组IL－2、IL－12、IFN－γ、IFN－γ／IL－4的值持续增加（P＜0．05），IL－4持续下降（P＜0．05），而对照组无明显变化（P＞0．05）。结论：抑毒调平流上调血清中IL－2、IL－12、IFN－γ的含量及IFN－γ／IL－4的比值，调IL－4的代名词，促使Th1/Th2分泌的细胞因子比值恢复平衡，至少维持治疗结后3个月。     

白细胞介素10在系统性红斑狼疮中的异常表达及其意义的初步研究

目的：分析Th2型 细胞因子白细胞介素（IL）－10在系统性红斑狼疮（SLE）发生发展中的变化及其意义。方法：以37例符合美国风湿病学会（ARA）诊断标准的SLE患者为研究对象，与相匹配的正常人26名相对照，以ABC－ELISA法检测血清及细胞培养上清的IL－10水平，其中部分标本同时以荧光定量RT－PCR分析IL－10mRNA的表达。结果：SLE患者血清IL－10水平显著高于正常人（P＜0．01），伴狼疮性肾炎者和抗双链DNA抗体阳性者其IL－10水平更高，活动期与缓解期患者相比，IL－10水平有所升高，但在统计学上差异无显著性；血清IL－10水平与外周血单个核细胞（PBMCs）中mRNA水平呈正相关性，相对于正常人而言，SLE患者的IL－10 mRNA亦呈高表达。体外培养结果显示，SLE患者PBMCs自发分泌或植物血凝素（PHA）诱生IL－10的水平均显著高于正常人（P＜0．05）。结论：细胞因子IL－10的蛋白水平和mRNA转录水平，在SLE患者均明显升高，高水平的IL－10可能与狼疮性肾炎的姓有关。SLE患者PBMCs产生IL－10的能力异常增高。     

乙型病毒性肝炎患者外周血T辅助细胞1，2型细胞因子含量的测定及临床意义

目的：探讨Th1,Th2细胞因子在乙型肝炎发病中的作用。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测10例急性乙肝患者,35例慢性乙肝患者及12例正常对照者外周血单个核细胞（PBMC）在植物凝血素（PHA）和脂多糖（LPS）刺激下,产生白细胞介素－10（IL－10）,γ-干扰素（IFN－γ）及白细胞介素－12（IL－12）的水平。结果：（1）所有患者在PBMC培养上清液中,3种细胞因子的水平均显著高于正常对照（P均＜0．05）,与慢性乙肝组相比,急性乙肝组IL－10较低（P＜0．01）,而IFN－γ,IL－12较高（P＜0．05）,慢性乙肝轻,中,重度3组间呈现重度＞中度＞轻度,但是差异无显著性（P均＞0．05）,（2）IL－12,IFN－γ水平与血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）及总胆红素（TBIL）呈正相关（r=0.6,0.7,p均＜0．01,r=0.6,0.6,P均＜0．05）;而与病毒含量呈负相关（r=-0.75,-0.73,P均＜0．05）,IL－10与ALT,TBIL无相关性（r=0.03,0.05,P均＞0．05）,（3）Th2/Th1比值,与正常相比,慢性患者较高,急性患者较低,差异均有显著性（P＜9．0．05）;急性患者明显低于慢性患者（P＜0．05）,慢性轻度组高于慢性中,重度组（P＜0．05）,而后二组间无明显差别（P＞0．1）。结论。Th2细胞因子与HBV感染的慢性化有关,当Th1型细胞因子占优势时,则倾向于发生急性自限性乙型肝炎,Th1细胞因子与肝组织的炎症活动相关。并且有利于病毒清除。     

初发SLE患者Th1/Th2及其调控因子基因的研究

目的：探讨未经药物治疗初发狼疮病人Th1/Th2细胞亚群分布及其调控细胞因子基因表达的差异。方法：运用三色荧光标记流式细胞术检测35例初发狼疮病人细胞亚群分布，并以10例正常人作对照；ABI 7700real-time PCR法同时检测38例病人和28例正常人IL－10、IL－12P40、IL18mPNA表达水平的差异。结果：1、初发狼疮病人Th1较正常人明显减低（P＜0．05），但Th1/Th2无显著性改变。2、与正常组相比，SLE组病人IL－12P35、IL－12P40、IL－18mRNA及其受体表达较正常人明显降低（P均＜0．05）；3、面部红斑组病人Th1/Th2、IL－12P35较正常组降低（P均＜0．05）；4、RNP阳性组病人IL－12P40较正常组升高，IL－12P35、IL－18较正常组降低（P均＜0．05）；5、有关节炎较无关节炎患者IL－18RmRNA表达升高（P＜0．05）。结论：SLE是一种以Th1细胞下降，Th2细胞相对占优势的自身免疫性疾病，源于诱导向Th1细胞分化的一系列细胞因子及其受体减少和细胞因子间失衡所致。     

正常人及系统性红斑狼疮患者T细胞亚群流式细胞术初步分析

目的：研究正常人及系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血（PBMCs)T淋巴细胞亚群的平衡状态，方法：采用微量全血法在样本中标记多种荧光抗体，利用三色流式细胞技术对正常人及SLE患者外周血各T细胞亚群百分率进行检测和分析。结果：与正常人相比，在未经刺激的自然状态下，SLE患者PBMCs中表达白细胞介素（IL）-10的Th2细胞及Tc2细胞的百分率均显著增高；如经植物血凝素（PHA）和佛波醇乙酯（PMA）联合刺激，正常人表达干扰素-γ（IFN-γ）的Tcl细胞百分率显著升高，而SLE患者则仍表现为Th2和Tc2细胞百分率的明显增高。结论：SLE患者体内存在高IL-10应答，低IFN-γ应答状态，从而形成T细胞亚群平衡向Th2/Tc2偏移的态势。     

TH1/TH2在慢性丙型肝炎发病机制中的作用

目的 研究Th1/Th2变化在慢性丙型肝炎发病机制中的作用。方法 采用双抗体酶联分析法检测了20例正常人,35例慢性丙型肝炎,30例慢性乙型肝炎患血清中的IFN－γ,IL-2,IL－4和IL－6的水平。结果 慢性丙型肝炎组Th2类细胞因子（IL－4,IL－6）水平明显高于正常对照组（P＜0．05）,Th1类细胞因子水平IL－2也增高（P＜0．05）,然而,Th1类细胞因子IFN－γ水平有增加趋势,但无统计学差异（P＞0．05）。Th2类细胞因子水平比Th1类细胞因子水平高。结论 Th2类细胞因子水平增高以及由此引起的Th1/Th2比值下降可能与慢性丙型肝炎的病程持续有关。     

sICAM-1和Th1／Th2型细胞因子在类风湿关节炎发病中的作用

目的探讨类风湿关节炎（RA）患者外周血血清中人可溶性细胞间黏附分子1（sICAM-1）的浓度和Th1／Th2极性偏移的关系以及与临床的相关性。方法用ELISA法检测32例RA患者和25例正常人外周血血清中sICAM-1、Th1细胞分泌的细胞因子IFN-γ和Th2细胞分泌的细胞因子IL—10的浓度,以IFN-γ／IL-10比值直接反映Th1／Th2极性偏移状态,并作差异性比较,进一步分析sICAM-1与Th1／Th2极性偏移及疾病活动度的相关性。结果（1）RA活动期组血清sICAM-1和IFN-γ浓度水平显著高于RA稳定期组和正常对照组,而IL-10的水平则显著低于RA稳定期组和正常对照组,差异均具有统计学意义（P〈0．05）;（2）RA稳定期组和正常对照组血清中sICAM-1、IFN-γ及IL-10的浓度水平无显著差异性（P〉0．05）;（3）RA活动期组sICAM-1浓度水平与IFN-γ、IL-10浓度水平及INF-γ／IL-10比值之间存在明显的相关性（rl=0．815,r2=0．739,r3=0．681）;（4）RA活动期组血清中sICAM-1浓度水平与DAS28呈明显正相关（相关系数r=0．833,P〈0．01）。结论RA患者外周血血清中存在着高水平的sICAM-1,Th1/Th2细胞因子的表达水平存在明显失衡,并发现其分泌模式是朝着r11｜11细胞偏移,表现为Th1型细胞因子处于相对优势,由此证实RA患者血清中sICAM-1的异常升高与Th1／Th2细胞因子的表达失衡存在一定的相关性,共同参与了RA的发病。     

地塞米松和甲基泼尼松龙对哮喘儿童外周血Th1/Th2类细胞因子平衡的影响

目的：观察支气管哮喘儿童外周血单个核细胞（PBMC）中CD4^4T细胞中两个功能性亚群（Th1/Th2)的功能状态及地塞米松和甲基泼尼松龙对其的影响。方法：15例哮喘及14名健康儿童，取静脉血，密度梯度离心 法分离PBMC，分别用10^-8mol/L地塞米松和甲基泼尼松龙体外干预培养48h后，用ELISA法测定培养上清中的干扰素－γ（IFN－γ）、白细胞介素－4（IL－4）和IL－10的浓度。结果：地塞米松和甲基泼尼松龙均可明显抑制哮喘儿童PBMC分泌-γ(P值分别为0．004和0．002）和IL－4（P值分别为0．002和0．001）；若以IFN－γ／IL－4表示Th1/Th2间的平衡，则甲基泼尼松龙（P＜0．05）可恢复Th1/Th2平衡；地塞米松和甲基泌尼松龙都不曩IL－10的分泌。结论：地塞米松和甲基泼尼松龙均可抑制IFN－γ和IL－4的产生，但甲基泼尼松龙抑制作用更强，从而可恢复哮喘儿童体内Th1/Th2平衡。     

系统性红斑狼疮合并冠状动脉性心脏病患者Th1／Th2失衡的研究

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）合并冠状动脉性心脏病（简称冠心病）患者的 Th1／Th2是否存在失衡状况。方法收集 SLE 患者（SLE 组）、SLE 合并冠心病患者（合并组）及健康对照者（对照组）外周血,real-time PCR 法检测外周血 Th1／Th2细胞转录因子 T-bet／GATA-3的表达;流式细胞术检测 Th1／Th2细胞内 IFN-γ及 IL-4水平;酶联免疫吸附法（ELISA）检测患者外周血清中 IFN-γ及 IL-4水平并与对照组比较。结果 SLE 组患者外周血 Th1细胞转录因子 T-bet 表达水平、CD4＋ T 细胞内 IFN-γ分泌水平及血清 IFN-γ水平均明显低于对照组（P＜0．05）。合并组患者外周血 Th1细胞转录因子 T-bet 表达水平、CD4＋ T 细胞内 IFN-γ分泌水平及血清 IFN-γ水平均明显高于 SLE 组患者及对照组（P＜0．05）;合并组患者外周血 Th2细胞转录因子 GATA-3表达水平、CD4＋ T 细胞胞内 IL-4分泌水平及血清 IL-4水平均明显低于 SLE 组患者及对照组（ P ＜0．05）。结论 SLE合并冠心病患者存在 Th1优势活化的 Th1／Th2失衡状态,这种失衡状态可能与疾病的发生发展有关。     

湿热内蕴与脾肾阳虚型溃疡性结肠炎患者Thl／Th2的状态

目的研究湿热内蕴型和脾肾阳虚型溃疡性结肠炎患者白细胞介素2（IL-2）、IL-4、IL-10和干扰素7（IFN-γ）的变化，以观察不同证型Th1／Th2的状态。方法收集20例溃疡性结肠炎患者（湿热内蕴型和脾肾阳虚型各10例），并与10例正常人对照，用放射免疫法测定患者血清中IL-2和IL-10的浓度，用酶联免疫吸附法（ELISA法）测定患者血清中IL-4和IFN-γ浓度，测定IL-2／IL-10比值和IFN-γ／IL-4比值。结果湿热内蕴组患者IL-2升高明显，其炎症反应属于IL-2诱导的Th1．型免疫反应，而脾肾阳虚组患者IL-10升高明显，属于Th2型免疫反应。结论湿热内蕴型患者主要是以Th1。型免疫反应为主，而脾肾阳虚型患者主要以仉型免疫反应为主。     

溃疡性结肠炎患者Th17和Th1／Th2细胞亚群的研究

目的检测溃疡性结肠炎（Ulcerativecolitis,UC）患者外周血中辅助性T细胞亚群（Th1、Th2和Th17）数量和比例的变化,探讨其在UC发病机制中的作用。方法选择40例UC患者,分离外周血单核细胞（PBMc）,采用流式细胞术（FCM）检测Th1、Th2、Th17细胞的数量及Th1／Th2比值,用ELISA测定培养上清中IFN-γIL-4、IL-17水平,与同期选择的健康对照组比较并与患儿的病情进行相关性分析。结果UC患者PBMC中IFN-γ＋Th1细胞的数量、IL--γ7＋Th17细胞的数量均高于健康对照组[（27．0±2．9）％,（23．2±1．7）％,P〈O．05;（26．61±2．6）,（11．4±1．2）,P〈0．011;Th1／Th2比值高于健康对照组[（12．8±1．6）,（8．60±1．9）,P〈0．01],Th17细胞的数量与疾病程度呈正相关（P〈0．05,r=0．42）。结论IL-17＋Th17细胞与Th1／Th2比值变化可能参与UC患者的免疫学发病机制。     

遗传因素对脐血Th1/Th2平衡的影响

目的:探讨遗传影响因素(父母有无过敏性疾病(Allergic diseases,AD)史)对新生儿脐血单个核细胞Thl/Th2平衡的影响.方法:取正常足月新生儿脐血为研究对象,其中20例父母有过敏性疾病史(AD组)和20例无过敏性疾病史(对照组).收集脐血浆并分离单个核细胞(CBMC),体外经植物血凝素(PHA)刺激,MTT比色法检测细胞增殖活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养48h后细胞培养上清液中IL-2、IL-4、IFN-r、GM-CSF的水平.结果:数据显示:AD组与对照组相比:(1)脐血血浆中IL-2、IL-4、GM-CSF有显著性差异(P<0.05),IFN-r无显著性差异;(2)PHA干预培养48h后细胞培养上清夜中IL-2、IL-4、IFN-r,GM-CSF均有显著性差异(P相似文献   

流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群

目的建立人和小鼠Th1和Th2细胞的检测方法,探讨两者在流式细胞仪检测方面的不同.方法采用PMA和离子霉素共同刺激外周血单个核细胞,观察在不同时间和不同剂量的PMA刺激下外周血T淋巴细胞CD3、CD4、CD8表达的变化;采用多色荧光共同标记分析技术检测外周血单个核细胞IL-4和IFN-γ的表达.结果在PMA和离子霉素共同刺激后4 h,人外周血T淋巴细胞表面CD4表达迅速下降,而小鼠T淋巴细胞表面CD4表达仅轻度下降;采用多色分析技术可以有效的检测Th1细胞和Th2细胞;采用CD3、CD8设门分析可以有效的区分人Th细胞;采用CD4设门可以有效区分小鼠Th细胞.结论人Th细胞检测宜采用4色染色分析技术,小鼠Th细胞检测采用3色染色技术即可.     

慢性乙型肝炎Th1/Th2失衡分析

目的:探讨慢性乙型肝炎发病过程中Th1/Th2细胞平衡失调的原因. 方法:用CD3和CD28 mAb, LPS分别体外刺激慢性HBV感染者和健康对照者的PBMC,ELISA法检测培养上清液中IL-10, IL-12及IFN-γ的水平. 结果:用mAb诱导刺激PBMC后,慢性HBV感染组IFN-γ和IL-10水平与健康对照组无差异;LPS诱导刺激后,慢性HBV感染组IL-12水平显著低于健康对照组(34±8 vs 77±9, P<0.05),且HBV阳性者IL-10分泌水平显著高于阴性者(975±101 vs 895±97, P<0.05). 结论:慢性HBV感染时Th1/Th2失衡并非T细胞本身缺陷所致,APC功能缺陷可能为Th1/Th2失衡的原因. APC功能缺陷可能与HBV侵犯APC有关.     

哮喘小鼠Th1/Th2细胞偏移及卡介苗干预的影响

目的研究哮喘小鼠Th1/Th2细胞偏移情况,同时观察卡介苗（BCG）对Th1/Th2偏移的影响。方法将雄性昆明小鼠随机分成哮喘组、BCG干预组和对照组。用卵清蛋白（OVA）致敏、激发建立哮喘模型。ELISA法测定肺泡灌洗液、脾细胞培养上清液中IFN-γ、IL-4的水平。结果肺泡灌洗液、脾细胞培养上清液中IFN-γ/IL-4比值在OVA致敏后均明显降低,初次激发后进一步降低,多次激发后继续降低,与对照组相比,差异均有统计学意义（均P〈0.05）。BCG干预后IFN-γ/IL-4比值较哮喘组增高,但仍低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论致敏状态下Th1/Th2比例发生偏移,随着抗原激发,Th1/Th2偏移愈加明显,在哮喘气道炎症中,以Th2亢进为主,而代表全身性炎症的脾脏中,则以Th1分泌减少为主。BCG干预后可以部分纠正Th1/Th2偏移,但BCG作用有时限性。     

Th1/Th2漂移与宫颈HPV感染及宫颈癌关系的研究进展

近年来关于Th1/Th2漂移与恶性肿瘤的关系成为各个肿瘤学科研究的焦点。然而,关于Th1/Th2漂移与妇科肿瘤关系的研究却并不多见。在此,仅就Th1/Th2漂移与宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染及宫颈癌的关系、宫颈癌治疗疫苗的研究进展简要综述。为宫颈癌的诊治及监测提供新的方法。     

空肠弯曲菌亚单位脂质体佐剂疫苗诱导的Th1/Th2应答机制研究

目的探讨空肠弯曲菌(Campylobacter jejun i,CJ)亚单位脂质体佐剂疫苗免疫新西兰兔后Th1/Th2应答机制。方法制备CJ亚单位阳离子和阴离子脂质体佐剂疫苗,用不同剂量(按蛋白质含量计算,0.25mg/kg、0.5mg/kg、0.75mg/kg)的疫苗免疫新西兰兔,于末次免疫后10d采集血清,ELISA(双抗体夹心法)检测各组动物血清中IL-2、IFN-γ、TNF-β、IL-4、IL-6、IL-10的水平,同时设有CJ完全福氏佐剂免疫原对照组和生理盐水(NS)对照组。结果免疫组与CJ完全福氏佐剂免疫原对照组和NS对照组相比较,IL-4、IL-10水平与对照组相比有显著性升高(P<0.01),其中同一剂量(0.5mg/kg)不同佐剂组以CJ亚单位阳离子脂质体佐剂疫苗组升高明显(P<0.05),不同剂量同一佐剂疫苗组以0.5mg/kg组升高较明显(P<0.01),IL-2、IFNγ-、TNF-β水平各免疫组与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。结论CJ亚单位脂质体佐剂疫苗诱导了以Th2应答为主的免疫应答类型。     

卡介苗多糖核酸对变应性鼻炎病人Th1/Th2失衡状态的调节

目的观察卡介苗多糖核酸(BCG-PSN)治疗变应性鼻炎的机制及其疗效.方法将60例变应性鼻炎病人随机分为BCG-PSN治疗组和息斯敏对照组,治疗前后分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定患者外周血单个核细胞(PBMCs)培养上清液中的白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-5(IL-5),干扰素γ(IFN-γ),粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF).同时于治疗后1周、治疗后2个月进行疗效评定.结果病人组PBMCs上清液中IL-4、IL-5、GM-CSF含量显著增高,而IFN-γ含量显著减少.BCG-PSN治疗后病人组上清液IL-4、IL-5、GM-CSF水平明显降低,而IFN-γ含量显著升高,差异有显著性(P<0.01).息斯敏对照组治疗前后,上述指标变化差异无显著性.治疗2个月后疗效评定,BCG-PSN治疗组显效率为66.7%,优于息斯敏对照组(40%) (P<0.05).结论 BCG-PSN能纠正变应性鼻炎病人体内Th1和Th2细胞因子的失平衡状态,为治疗变应性鼻炎提供了理论依据,临床疗效也表明BCG-PSN治疗变应性鼻炎疗效可靠.     

特应性皮炎患儿外周血Th17、Th1/Th2细胞亚群的研究

目的检测特应性皮炎(AD)患儿外周血中辅助性T细胞亚群(Th1、Th2和Th17)数量和比例的变化,探讨其在AD发病机制中的作用。方法选择40例AD患儿,分离外周血单核细胞(PBMC),采用流式细胞术(FCM)检测Th1、Th2、Th17细胞的数量及Th1/Th2比值,用ELISA测定培养上清中IFN-γ、IL-4、IL-17水平,与同期选择的健康对照组比较并进行相关分析。结果AD患儿PBMC中CD4+IL-4(+Th2)细胞的数量、CD4+IL-17(+Th17)细胞的数量均高于健康对照组([19.56±4.9)%vs(12.91±1.7)%,P0.05;(26.61±2.6)vs(11.4±1.2),P0.05],Th1/Th2细胞的比值低于健康对照组([0.98±0.13)vs(1.84±1.6),P0.05]。结论IL-17+Th17细胞与Th1/Th2比值变化可能参与AD患儿的免疫学发病机制。