用多聚酶链反应（PCR）快速诊断白色念珠菌感染

由白色念珠菌引起的院内感染日益增多，应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）体外扩增白色念珠菌ＤＮＡ，为临床敏感，特异，快速诊断白色念珠菌感染提供了有用的工具，本文就ＰＣＲ检测白色念珠菌ＤＮＡ的引物，标本处理，扩增程序，扩增产物分析以及临床应用效果予以介绍。     

白色念珠菌感染现状与实验诊断进展

白色念珠菌（Candida albicans）是人体口腔、咽喉、肠道、阴道粘膜的正常菌群,也是重要的条件致病菌。该菌可引起皮肤感染以及免疫功能明显下降如糖尿病、恶性肿瘤、血液病、严重营养不良症等患者严重的全身感染。随着皮质类固醇、免疫抑制和抗生素的广泛应用,念珠菌感染率呈不断上升趋势,在免疫抑制患者中念珠菌感染率列居第一位,白色念珠菌为主要致病菌1,已引起国内外医学真菌界的重视。本文就白色念珠菌感染现状及实验诊断进展综述如下： 1 感染现状 近20年来白色念珠菌感染增长了20倍以上,已成为医院感染的主要死亡原因之一…     

多聚酶链反应（PCR）技术诊断病毒性心肌炎的临床研究

本研究利用一对肠道病毒引物，对临床怀疑为病毒性心肌炎患者的血清及心肌组织进行ＲＮＡ─ＰＣＲ。同时用ＣｏｘＡ９、ＣｏｘＢ３、及ＥＣＨＯ６、ＥＣＨＯ９、ＥＣＨＯ１１感染的猴肾细胞株做为阳性对照进行检测。所有已知阳性细胞株都获得特异性扩增结果。两例心肌炎致死患者心肌组织的检测均获阳性结果．２１例临床确诊为病毒性心肌炎的成人患者血清检测阳性率为３３％，１２例婴儿患者血清检测阳性率为５８％。临床可疑为病毒性心肌炎的成人患者血清检测阳性率为２５％。     

多聚酶链反应在输血医学中的应用

多聚酶链反应(polymerasechainreaction，PCR)技术最早由美国cetus公司人类遗传研究室KatyMullis及同事于1985年发现并研制成功的，最早的应用报道是由Saiki等于1985年描述，它是体外特异性合成某一特异性DNA片段的遗传学新方法。随着基本方法的不断完善，该技术将成为某些生物技术和临床诊断的标准方法。PCR在输血医学方面的应用日益广泛，特别是对输血引起的感染性疾病的诊断、HLA分型和血液学诊断尤为重要。本文就PCR的基本方法学以及PCR在输血医学中应用的现状和发展前景作一简要综述。     

白色念珠菌实时荧光定量聚合酶链反应检测体系的建立

目的建立白色念珠菌实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测体系,实现白色念珠菌的早期、快速检测,为临床医生对白色念珠菌感染的诊断提供指导。方法使用白色念珠菌及其他真菌标准株,利用Primer Premier 5.0和Beacon Designer 7.7设计引物探针。同时对镁离子(Mg2+)、三磷酸脱氧核糖核苷酸(dNTP)、引物及探针浓度等参数进行优化,选出最佳反应体系,并验证反应体系的特异性、重复性,分析反应体系的最低检测限,对临床分离出的45例白色念珠菌进行检测。结果设计的引物探针仅能对白色念珠菌进行特异性扩增,反应体系不同底物浓度与Ct值之间成良好的线性关系,反应体系的最低检测限为5CFU/mL,且反应体系稳定性、重复性好,对临床分离菌株的检测阳性率为100%。结论成功设计了白色念珠菌特异性的引物探针,并建立了实时荧光定量PCR检测体系,能快速、准确地检出白色念珠菌。     

多聚酶链反应对急性白血病巨细胞病毒感染的观察

多聚酶链反应对急性白血病巨细胞病毒感染的观察石奇珍吕联煌辛碧珍郭瑞官人类巨细胞病毒（ＨｕｍａｎＣｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ，ＨＣＭＶ）是条件致病性病原体，免疫功能低下者极易感染。急性白血病（ＡＬ）患者是免疫功能低下的人群，多聚酶链反应（ＰＣＲ）是检...     

眼部白色念珠菌感染的快速诊断方法

目的介绍一种白色念珠菌的快速检测方法。方法以白色念珠菌标准株为阳性对照,普通酵母菌标准株为阴性对照,采用荧光标记的抗白色念珠菌的单克隆抗体直接免疫荧光法进行测定角膜溃疡病人标本涂片。结果阳性对照、及白色念珠菌感染病人标本中有边缘着绿色,中间为暗红色的阳性菌。普通酵母菌及非白色念珠菌感染对照组酵母细胞染红色。结论该方法快速、简便、特异性强,结果判断直观,并可广泛的推广应用。     

用多聚酶链反应诊断早产、死胎及先天畸形儿巨细胞病毒感染

采用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术检测７２例早产、死胎及先天性畸形儿尸解石蜡包埋标本中的巨细胞病毒ＤＮＡ，阳性率６．９４％；５例阳性者中，双胎宫内死亡２例，先天性畸形２例，脑积水１例。结果提示异常妊娠和先天畸形的发生与巨细胞病毒感染有关。文中讨论了多聚酶链反应诊断巨细胞病毒感染的价值。     

胸水多聚酶链反应诊断老年人结核性胸腔积液价值初探

我们检测３０例老年人结核性胸腔积液患者胸水ＰＣＲ－ＴＢ－ＤＮＡ以探讨ＰＣＲ技术对老年人结核性渗出性胸膜炎的诊断价值，以２４例老年人癌性胸腔积液作为对照。     

用多聚酶链反应技术检测多发性骨髓瘤患者免疫球蛋白重链基…

用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了３５例多刀生骨髓瘤（ＭＭ）患的外周血及１例未定性单克隆丙种球蛋白病（ＭＧＵＳ）患的外周血和骨髓的免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排。８例ＭＭ的骨髓标本７例阳性，３５例外周血２３例阳性，阳性率为６５．７％。其中Ⅱ、Ⅲ期阳性率明显高于Ｉ期；ＩｇＧ型阳性率高于ＩｇＡ及ＩｇＤ型，另１例ＭＧＵＳ患的外周血及骨髓均未测出ＩｇＨ基因重排，作认为，ＩｇＨ基因重排的检测对ＭＭ     

白色念珠菌巢式PCR法的建立和临床应用初步评价

目的建立用于临床标本中白色念珠菌快速检测的巢式聚合酶链反应。方法以念珠菌属18SrDNA上一段保守序列为通用引物(外套引物),可扩增出257bp的片段,以白色念珠菌内转录2区中选择种特异性引物(内套引物),目标碱基长度为386bp,建立巢式聚合酶联反应(nestedPCR,nPCR)。结果对白色念珠菌的实验检测表明,nPCR的特异性和重复性均达100%,敏感性为32~64cfu/ml。初步临床标本应用表明,nPCR的检测效果显著高于培养法(χ2=31.52,P<0.001)。结论采用nPCR技术,不但可对分离的白色念珠菌进行鉴定,而且可直接用于临床标本中白色念珠菌的检测。     

院内感染白色念珠菌危险因素的分析

目的回顾性分析院内感染白色念珠菌的危险因素,为有效地控制和减少白色念珠菌院内感染的发生提供依据。方法收集本院2009年1月至2010年10月患者424例,其中30例出现院内感染白色念珠菌,选取同一时期同一病区未发生院内感染患者作为对照组。两组之间计量资料的比较采用t检验,计数资料的比较采用χ2检验,医院内感染白色念珠菌危险因素的分析采用多因素Logistic回归分析法。结果医院内感染白色念珠菌的发生率为7.01%(30/424)。t检验、χ2检验结果提示,年龄、住院时间长短、是否留管、是否联合使用抗生素,用药时间、是否恶性肿瘤为院内感染相关因素。多因素Logistic回归分析结果为:年龄、是否联合使用抗生素、是否恶性肿瘤进入回归方程。结论年龄、是否联合使用抗生素、是否恶性肿瘤为院内感染白色念珠菌的独立危险因素。     

用多聚酶链反应分析干扰素对宫颈人乳头瘤病毒感染的疗效

采用多聚酶链反应检测了正常妇女，慢性宫颈炎妇女中人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）的感染情况，结果表明，ＨＰＶ总阳性率为５８．６％，各型感染率分别为２９．３％、３０．７％、２８．６％、３４．３％、均显著高于正常妇女中的感水平。１６名患者经一个疗程干扰素局部用药治疗后，其中１５人出现不同程度好转，且ＨＰＶ－ＤＮＡ阴转。上述结果表明：（１）ＨＰＶ在宫颈炎的发生、发展中起子一定的作用；（２）ＨＰＶ对干扰素十分敏感，     

P47模拟多肽抗原在诊断侵袭性白色念珠菌感染中的应用

目的利用噬菌体肽库来源的P47模拟抗原建立的ELISA法,探讨该模拟抗原在侵袭性白色念珠菌病血清学诊断中的应用价值。方法收集经培养确诊的各类念珠菌侵袭性感染和浅表感染的病人血清130份,用模拟抗原包被ELISA微孔板,测定抗P47抗体,考察该方法能否区分白色念珠菌侵袭性感染和浅表感染,以及与其他念珠菌感染的交叉反应。结果经细菌培养鉴定确证为白色念珠菌侵袭性感染的病人血清35份,抗P47抗体阳性率为100%,浅表感染者阳性率为4.8%(2/42),热带念珠菌侵袭性感染者抗P47抗体阳性率为16.7%(3/18)。光滑念珠菌、近平滑念珠菌以及未能鉴定到种的念珠菌侵袭性和浅表感染者血清,均未检测到抗P47抗体。结论用白色念珠菌菌丝蛋白P47模拟抗原建立ELISA检测抗P47抗体,虽然与热带念珠菌侵袭性感染有部分交叉反应,但仍可用于白色念珠菌侵袭性感染的血清学诊断。     

几种改良的多聚酶链反应在丙型肝炎病毒检测中的应用

本文综述了近年来几种改良的多聚酶链反应(PCR)在检测丙型肝炎病毒中的应用。包括巢式PCR、半巢式PCR、一步法PCR、定量PCR、链特异性PCR、RNA捕获法PCR及原位PCR。     

快速诊断幽门螺杆菌感染的研究

用4种方法检测131份胃黏膜活检标本，结果：幽门螺杆菌(Hp)阳性率分别为：快速尿素酶试验76．6％，分离培养71％，直接涂片48．1％，聚合酶链反应(PCR)78．5％。提示PCR的敏感性和特异性高于其他方法，可作为Hp感染的可靠的分子诊断方法。快速尿素酶试验特异性较差，但其简便和敏感，可作为常规检查。直接涂片阳性率过低，一般不适合单独诊断方法。     

用逆转录—多聚酶链反应检测白血病患者多药耐药基因的表达

作者应用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测２５例急性白血病患者骨髓细胞中ｍｄｒ１基因的表达。以Ｋ５６２敏感细胞和体外诱导的耐药细胞株Ｋ５６２／Ａ０２分别作为阴性和阳性对照，发现复发和未缓解患者中ｍｄｒ１表达增高者占９０．０％（１０／１１），而初治患者中仅为２１．４％（３／１４），ｍｄｒ１表达增高化疗效果差。应用单克隆抗体ＪＳＢ－１检测Ｐ－１７０结果与ＲＴ－ＰＣＲ一致。此ＲＴ－ＰＣＲ具有高度敏     

用多聚酶链反应快速检出肺炎支原体

本文综述近几年用多聚酶链反应(PCR)快速检出肺炎支原体的进展情况,包括特异性引物设计、模板DNA制备、标本收集与处理和PCR操作。介绍了实验及临床检出情况,证明PCR检出肺炎支原体具有特异、敏感、快速等特点。     

空调病室空气与呼吸道白色念珠菌感染的关系

对采用中央空调前后的１９９５年至１９９７年１月、８月老年病区的住院病例进行了对比分析，并对病室气温、气湿、气流、空气白色念珠菌污染情况进行了检测。结果：用中央空调后的１９９７年１月，老年呼吸道白色念珠菌感染率明显高于其他月份（Ｐ＜０．０５），此时病室空气白色念珠菌污染程度也较重（Ｐ＜０．０５）。可见，老年呼吸道白色念珠菌感染与空调环境污染有关     

煤工尘肺合并肺部白色念珠菌感染36例临床分析

对36例煤工尘肺合并肺白色念珠菌病的临床资料进行分析，总结其临床特点及诊断和治疗方面的经验。