人β－干扰素在杆状病毒载体与Sf细胞体系中的表达

采用苜蓿尺蠖核多角休病毒（Ａｕｔｏｇｒａｐｈａｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａｎｕｃｌｅａｒｐｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓｖｉｒｕｓ，ＡｃＮＰＶ）ＤＮＡ中多角体蛋白基因启动子及其前后序列作为转移载体，将人β－干扰素（ＨｕＩＦＮ－β基因插入转移载体ｐＵＡｃ－５，构建成ｐＡｃ－ＩＦＮ－β载体。该质粒ＤＮＡ与野生型ＡｃＮＰＶＤＮＡ经ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ共转染秋粘虫（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）传代细胞（Ｓｆ９细胞），利用重组病毒不产生多角体蛋白的特征，进行病毒空斑筛选。用核酸杂交方法鉴定出携带ＨｕＩＦＮ－β基因的主组病毒。用重组病毒感染Ｓｆ９细胞，可表达ｒＨｕＩＦＮ－β。在１．０×１０￣６细胞／ｍｌ感染上清中测定ｒＨｕＩＦＮ－β最高活性为３．０×１０￣６ＩＵ／ｍｌ，抗天然ＨｕＩＦＮ－β抗体能完全中和ｒＨｕＩＦＮ－β的抗病毒活性。     

全心外右心旁路手术

经过３０多年的心脏外科实践，Ｆｏｎｔａｎ类手术已成为治疗多种复杂先天性心脏病（先心病）常用的术式。随着人们对各种复杂先心病的认识的深入，相应产生了各种改良的Ｆｏｎｔａｎ手术。１９９０年，Ｍａｒｃｅｌｌｅｔｔｉ等人［１］根据Ｆｏｎｔａｎ手术存在的问题，设计了一个新的术式—全心外右心旁路手术（Ｔｏｔａｌｅｘｔｒａｃａｒｄｉａｃｒｉｇｈｔｈｅａｒｔｂｙｐａｓｓ），现称全心外腔静脉肺动脉连接术（Ｔｏ－ｔａｌｅｘｔｒａｃａ－ｒｄｉａｃｃａｖｏｐｕｌｍｏｎａｒｙｃｏｎｎｅｃｔｉｏｎ）又称心外Ｆｏｎｔａｎ手术…     

人β—干扰素在杆状病毒载体与Sf细胞体系中的表达

采用苜蓿尺蠖核多角体病毒ＤＮＡ中多角体蛋白基因启动子及其前后序列作为转移载体，将人β－干扰素（ＨｕＩＦＮ－β）基因插入转移载体ｐＵＡｃ－５，构建成ｐＡｃ－ＩＦＮ－β载体。该质粒ＤＮＡ与野生型ＡｃＮＰＶ ＤＮＡ经ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ共转染秋粘虫传代细胞（Ｓｆ９细胞），利用重组病毒不产生多角体蛋白的特征，进行病毒空斑筛选。用核酸杂交方法鉴定出携带ＨｕＩＦＮ－β基因的重组病毒。用重组病毒感染Ｓｆ９细胞，     

人放射性皮肤溃疡c-erbB-2、EGFR蛋白高表达病理研究

我们应用ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＥＧＦＲ蛋白抗体和微波炉抗原修复法对２５例人放射性皮肤溃进行免疫组织化学研究。结果发现ｃ－ｅｒｂＢ－２癌蛋白高表达阳性率为９２．０％（２３／２５），ＥＧＦＲ蛋白高表达阳性率为７３．７％（１４／１４）；二者阳性部位一致，主要见于鳞状上皮细胞膜、间质纤维母细胞、血管内皮细胞以及小动脉中层平滑肌细胞和外层纤维细胞胞质，提示ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＥＧＦＲ蛋白的高表达可能与放射性皮肤溃     

人表皮细胞生长因子基因真核表达质粒pcDNA3—hEGF的构建

目的：构建人表皮细胞生长因子（ｈＥＧＦ）基因真核表达质粒，为深入研究ｈＥＧＦ在组织修复中的分子调节机制及临床应用提供物质基础。方法：含ｈＥＧＦ ｃＤＮＡ的ｐＵＣ１８－ｈＥＧＦ质粒于大肠杆菌ＪＭ１０９内扩增；提纯及纯化ｐＵＣ１８－ｈＥＧＦ质粒；经ＤＮＡ序列分析其所含ｈＥＧＦ ｃＤＮＡ；限制性酶切ｈＥＧＦ ｃＤＮＡ片段，连接酶连接到真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ｎｅｏ内，克隆出真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ｈ     

胸腰段脊柱脊髓损伤的外科治疗进展

随着交通及建筑事业的迅速发展，脊柱骨折（ｓｐｉｎａｌｆｒａｃｔｕｒｅ，ＳＦ）合并脊髓损伤（ｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｉｎｊｕｒｙ，ＳＣＩ）已成为骨科领域中常见的疾患。据统计，发达国家的ＳＣＩ发病率为２８．３～４５人百万人－１年－１，我国发病率虽较低，约６．...     

Alzbeimer病和额叶痴呆病人~（99m）Tc－HMPAo与~（12

Ａｌｚｂｅｉｍｅｒ病和额叶痴呆病人￣（９９ｍ）Ｔｃ－ＨＭＰＡｏ与￣（１２３）Ｉ－ＩＢＺＭＳＰＥｃＴ显像的初步研究结果［英］／ＦｒｉｓｏｎｉＧＢ…ＡｃｔａＮｅｕｒｏｌＳｃａｎｄ．－１９９４，８９（２）．１９９～２０３额叶痴呆（ＤＥＦ）又称非Ａｌｚｂｅｉ...     

利用杆状病毒早期启动子在昆虫细胞中持续表达人β－干扰素

在含苜蓿尺蠖核多角体病毒（ＡｃＮＰＶ）早期基因启动子的载体ｐＡｃＩＥ１中，插入人β－干扰囊（ＨｕＩＦＮ－β）基因，构建成转移载休ｐＩＥ１－ＩＢ；ｐＩＥ１－ＩＢ与含新霉素抗性基因（ＮＥＯ￣ｒ）的质粒ｐＩＥＩ－ＮＥＯ共转染秋粘虫细胞（Ｓｆ９细胞），使ＨｕＩＦＮ－β基因和ＮＥＯ￣ｒ基因整合到细胞基因组上产生转化细胞，含Ｇ４１８的培基分离新霉素抗性克隆，并增殖传代；转化细胞株传至５０代以上，不同传代水平细胞ＤＮＡ的点杂交证实ＨｕＩＦＮ－β基因已整合在细胞ＤＮＡ分子上，同时检测出干扰素（ＩＦＮ）的持续稳定表达，活性为５００—４０００ＩＵ／１０￣６细胞。抗天然ＨｕＩＦＮ－β抗体能完全中和所表达ＩＦＮ的抗病毒活性。     

人放射性皮肤溃疡c－erbB－2、EGFR蛋白高表达病理研究

我们应用ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＥＧＦＲ蛋白抗体和微波炉抗原修复法对２５例人放射性皮肤溃疡进行免疫组织化学研究。结果发现ｃ－ｅｒｂＢ－２癌蛋白高表达阳性率为９２．０％（２３／２５），ＥＧＦＲ蛋白高表达阳性率为７３．７％（１４／１９）；二者阳性部位一致，主要见于鳞状上皮细胞膜、间质纤维母细胞、血管内皮细胞以及小动脉中层平滑肌细胞和外层纤维细胞胞质，提示ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＥＧＦＲ蛋白的高表达可能与放射性皮肤溃疡的癌变和难以愈合有关。     

人胎儿坐骨神经睫状神经营养因子的克隆

人胎儿坐骨神经睫状神经营养因子的克隆江国春袁丽珍军事医学科学院放射医学研究所北京１００８５０睫状神经营养因子（ｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ，ＣＮＴＦ）最初从鸡的睫状体中提取出来，与神经营养因子（ｎｅｕ－ｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔ...     

辐射诱导的人乳癌和鳞状上皮细胞的表皮生长因子受体的自发磷酸化

辐射诱导的人乳癌和鳞状上皮细胞的表皮生长因子受体的自发磷酸化［英］／Ｓｃｈｍｉｄｔ－ＵｌｒｉｃｈＲＫ…∥ＲａｄｉａｔＲｅｓ．－１９９６，１４５（１）．－８１～８５恶性乳癌ＭＣＦ－７细胞和鳞状上皮细胞癌Ａ４３１细胞用治疗剂量范围（１～４Ｇｙ）的单次６０...     

PCR技术在鉴定阳性重组子中的应用

介绍了采用ＰＣＲ技术在人粒细胞集落刺激因子（ｈＧ－ＣＳＦ）、人促红细胞生成素及中国人γ－干扰素（ｈＩＦＮ－γ）ｃＤＮＡ重组质粒的构建过程中快速鉴定阳性重组子的方法。经ＰＣＲ扩增鉴定为阳性的重组子，提取质粒ＤＮＡ经重组位点相应的ＤＮＡ内切酶双酶切鉴定表明，全部含有插入片段。     

丙型肝炎病毒核心蛋白可溶性单链可变区抗体在大肠杆菌中的表达

利用分子生物学技术,构建表达丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白的人源单链可变区抗体（ＳｃＦｖ）的原核表达载体,并在大肠杆菌ＪＭ１０９中表达可溶性的ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ。以重组的ＨＣＶ核心蛋白为包被抗原,利用噬菌体抗体库的表面展示技术,筛选到含有ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ基因的噬菌体克隆。从噬菌体抗体阳性克隆中提取质粒,经ＮｃｏⅠ／Ｎｏｔ Ⅰ酶切鉴定,该ＳｃＦｖ基因由７５０ｂｐ组成。将其亚克隆到ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ表达载体中,转化大肠杆菌ＪＭ１０９,提取质粒进行ＤＮＡ序列测定,符合ＳｃＦｖ的重链可变区和轻链可变区基因结构特点。ＩＰＴＧ诱导转化的大肠杆菌ＪＭ１０９,在其培养上清中获得了可溶性ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ的表达。酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）证实表达的ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ进行聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡ     

用于生产rHuEPO的无血清培养基的研究

观察和筛选了适合工程细胞（Ｃ２细胞）生产重组人促红细胞生成素（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｈｕｍａｎ ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ，ｒＨｕＥＰＯ）的无血清生产培养基（ＳＦＭ－ｐ）的添加成分。在ＤＭＥＭ：Ｆ１２（１：１）培养在中添加了Ｓｅ、乙醇胺、多种维生素、蛋白胨、胰岛素、转铁蛋白和一些细胞因子，构成了这种ＳＦＭ－ｐ。ＳＦＭ－ｐ不含牛血清白蛋白而能维持细胞生长和ｒＨｕＥＰＯ生产。在滚动瓶使用ＳＦＭ－ｐ     

利用杆状病毒早期启动子在昆虫细胞中持续表达人β—干扰素

在含苜蓿尺蠖核多角体病毒（ＡｃＮＰＶ）早期基因启动子的载体ｐＡｃＩＥ１中，插入人β－干扰素（ＨｕＩＦＮ－β）基因，构建成转移载体ｐＩＥ１－ＩＢ；ｐＩＥ１－ＩＢ与含新霉素抗性基因（ＮＥＯ＾ｒ）的质粒ｐＩＥ１－ＮＥＯ共转染秋粘虫细胞（Ｓｆ９细胞），使ＨｕＩＦＮ－β基因和ＮＥＯ＾ｒ基因整合到细胞基因组上产生转化细胞，含Ｇ４１８的培基分离新霉素抗性克隆，并增殖传代；转化细胞株传至５０代以上，不同传代水平细     

头颈部癌肿（18）~F－FDG和（11）~C－蛋氨酸PET显像的对比研

１１９头颈部癌肿（１８）￣Ｆ－ＦＤＧ和（１１）￣Ｃ－蛋氨酸ＰＥＴ显像的对比研究〔英〕／Ｌｉｎｄｈｏｌｍｐ…ＪＮｕｃｌＭｅｄ．－１９９３，３４（１０）．－１７１１～１７１６用ＰＥＴ对比了头颈部癌肿摄取１８Ｆ－ＦＤＧ和１１Ｃ－蛋氨酸状况，并与组织学活检级...     

^99mTc标记抗人肝癌单抗Fab片段修饰物在荷人肝癌裸鼠模型中…

研究抗人肝细胞癌单克隆抗体Ｆａｂ片段修饰物的＾９９ｍＴｃ标记方法，用２－亚氨基噻吩盐（ＩＴ）修饰ＨＡｂ１８Ｆａｂ片段，用＾９９ｍＴｃ－ＧＨ转络合法标记ＩＴ－Ｆａｂ测定标主物的放化纯度及生物活性，进行荷人肝癌裸鼠模型的放射免疫显像。结果：纸层析法测得标记物为５０％～８０％，体外细胞结合法测定免疫活性为３０％～４０％，荷人肝癌裸鼠模型尾静脉注入＾９９ｍＴｃ－ＩＴ－Ｆａｂ后４～８小时，肿瘤区放射性有浓工     

前列腺癌中Fas、FasL、Bcl-2及Bax的表达及意义

采用免疫组化染色方法检测４０例前列腺癌、２２例前列腺增生症（ＢＰＨ）及１４例正常前列腺（ＮＰ）组织中Ｆａｓ、ＦａｓＬ、Ｂｃｌ－２及Ｂａｘ的表达。结果表明：①Ｆａｓ、ＦａｓＬ、Ｂａｘ表达于所有被检测的组织中；Ｂｃｌ－２表达于７５．０％Ｐｃａ组织、５４．５％ＢＰＨ组织、３５．７％ＮＰ组。Ｆａｓ在Ｐｃａ中表达强度最弱（Ｐ〈０．０５）。Ｐｃａ与ＢＰＨ及ＮＰ组织比较，Ｂｃｌ－２表达差异有显著性意义（Ｐ〈０．     

低能量氦－氖激光血管内照射循环血液治疗脑梗塞临床研究

应用低能量氦－氖激光血管内照射循环血液（ＩｎｔｒａｖａｓｃｕｌａｒＬａｓｅｒＩｒｒａｄｉａｔｉｏｎｏｆＢｌｏｏｄ，ＩＬＩＢ）治疗３４例脑梗塞病人，并与３０例非ＩＬＩＢ治疗的脑梗塞病人作对照。结果有效率达９７％，明显高于对照组，ＩＬＩＢ治疗后能降低血粘度，其中红细胞压积和纤维蛋白原水平明显降低（Ｐ＜０．０１）；能够对抗氧自由基，３种超氧化物歧化酶（ＳｕｐｅｒｏｘｉｄｅＤｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）：含铁超氧化物歧化酶（Ｆｅｒｒｕｍ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇＳＯＤ，ＦｅＳＯＤ）、含锰超氧化物歧化酶（Ｍａｎｇｏｍｅｓｅ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇＳＯＤ，ＭｎＳＯＤ）、含铜锌超氧化物歧化酶（Ｃｏｐｐｅｒ－ａｎｄＺｉｎｃ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇＳＯＤ，ＣｕＺｎＳＯＤ）水平均较治疗前明显升高（Ｐ＜０．０１），其中ＦｅＳＯＤ及ＣｕＺｎＳＯＤ高于对照组（Ｐ＜０．０５）；还能降低具有神经毒性的血浆中分子物质（ＭｉｄｄｌｅＭｏｌｅｃｕｌａｒＳｕｂｓｔａｎｃｅｓ，ＭＭＳ）水平（Ｐ＜０．０１），且低于对照组。表明ＩＬＩＢ对防治脑梗塞有较好的临床使用价值。     

^99mTc—DTPA肾显像在早期诊断SLE肾损害和观察早期治疗效果中的应用

本文报道了４５例ＳＬＥ患者~（９９ｍ）Ｔｃ－ＤＴＰＡ肾显像结果，并通过分析ＧＦＲ及~（９９ｍ）Ｔｃ－ＤＴＰＡ肾图定量指标且与血ＣＲ、血ＢＵＮ、血、尿β２－ｍ和尿旦白等生化指标的比较显示，~（９９ｍ）Ｔｃ－ＤＴＰＡ肾显像及其肾图分析在早期诊断ＳＬＥ肾损方面具有显著意义。以Ｃ段下降半排时间（Ｃ＿（１／２））最敏感。ＧＦＲ在判定肾损害程序以及治疗效果方面较有意义。我们认为，~（９９ｍ）Ｔｃ－ＤＴＰＡ肾显像及其肾图分析比单纯ＧＦＲ检查及其它生化检查优越，值得临床推广。