γ射线照射诱导大鼠肝细胞线粒体自噬与再生的研究

目的 探讨线粒体自噬在细胞损伤后再生中的作用。方法 在体外利用γ射线照射诱导大鼠肝细胞损伤，在亚细胞水平上观察肝细胞的损伤修复情况与线粒体自噬的关系，并利用分子生物学技术进行DNA凋亡片段的分析和线粒体RNA的RT-PCR分析。结果 受损线粒体清除过程存在线粒体自噬，随着修复过程的进行细胞DNA凋亡程度下降，细胞自噬现象减少，细胞凋亡和线粒体自噬同时存在于损伤细胞中，通过RT-PCR分析发现肝组织的损伤修复与线粒体自噬后的线粒体再生有关。结论 线粒体自噬可能为组织的损伤修复提供某种分子信号，促使新的线粒体再生。     

骨骼肌钝挫伤后线粒体自噬相关基因及自噬体变化研究

目的:探讨骨骼肌钝挫伤后线粒体自噬相关基因与自噬体变化的分子机制。方法:Wistar雄性大鼠64只,随机分为对照组、钝挫伤组(按照取材时间分为12 h组、2 d组、5 d组、7 d组、10 d组、15 d组、30 d组)。采用重物下落装置导致右小腿内侧面(其皮下为腓肠肌中段)一次打击伤,建立急性骨骼肌钝挫伤模型,通过Western-Blotting和qRT-PCR技术分别检测钝挫伤后腓肠肌缺氧及自噬相关因子,包括低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、腺苷酸活化蛋白激酶α2亚基(AMPKα2)、Bcl-2腺病毒E1B19ku相关蛋白3(BNIP3)和Bcl-2家族的类NIP3蛋白(NIX)的蛋白和mRNA表达变化情况;透射电镜观察受损部位不同恢复时间的超微结构及自噬体形成情况。结果:(1)钝挫伤后,HIF-1α、AMPKα2蛋白表达在12 h、2 d达到峰值,至伤后10 d,HIF-1α表达均明显高于对照组(P<0.05);AMPKα2表达在伤后5 d仍显著高于对照组(P<0.05),至10 d回落至正常水平;BNIP3持续高表达至5 d后开始回落,但至10 d仍高于对照组;NIX表达峰值出现在伤后12 h、2 d,持续高表达至7 d。(2)钝挫伤后,相关基因表达水平,Hif-1α与Ampkα2mRNA在2 d显著高于对照组(P<0.01),至5 d表达下降但仍高于对照组(P<0.05),随后回落至正常水平;Bnip3、Nix的mRNA变化情况与其蛋白表现基本一致。损伤后12 h在单个网孔视野中即可见到多个自噬体,至2～7 d自噬体数量逐渐增多,10 d后自噬体数量比钝挫伤后12 h～7 d组相比呈现减少趋势,至15 d后自噬体数量逐渐减少。结论:骨骼肌钝挫伤发生后,损伤早期代谢调控因子AMPKα2、缺氧敏感因子HIF-1α表达变化情况表明损伤后受损骨骼肌内部出现能量危机并形成缺氧环境;线粒体自噬、细胞凋亡相关因子BNIP3、NIX表达变化表明损伤后线粒体自噬被启动,缺氧诱导了骨骼肌钝挫伤早期的线粒体自噬;缺氧诱导的线粒体自噬可及时清除受损线粒体,维持线粒体质量、为新生线粒体提供原料,从而减小损伤程度,以利于受损骨骼肌的快速恢复,这可能是损伤发生后机体的一种代偿性机制。     

高住低练通过SIRT3调节心肌线粒体生物合成和自噬

目的：观察高住低练对心肌线粒体生物合成及线粒体自噬的影响,探讨去乙酰化酶Sirtuin 3(SIRT3)是否在其中发挥关键作用。方法：将24只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组（C组）、高住低练组（E组）、SIRT3抑制组（T组）,高住低练+SIRT3抑制组（TE）组,每组6只。C组正常饲养,不进行任何干预;E组白天在氧浓度为13.8%的低氧环境下居住8小时,晚上在常氧下进行跑台训练;T组腹腔注射SIRT3抑制剂3-TYP(50 mg/kg/2 d);TE组结合E组和T组的干预方法。高住低练干预为1次/天、6天/周,3-TYP干预为每两天注射1次、3次/周,共6周。干预结束后称量小鼠体重和心脏重量。采用HE染色观察心肌细胞状态,Masson染色观察心肌纤维化程度,Western blot检测心肌线粒体生物合成和线粒体自噬相关蛋白的表达水平,免疫组织化学观察SIRT3、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子α(PGC-1α)、E3泛素连接酶（Parkin）的定位和表达情况。结果：与C组相比,E组的心肌细胞大小正常,排列有序,血管周围胶原纤维含量正常,SIRT3蛋白表达增强（P<0...     

电离辐射诱导结肠癌细胞自噬以及自噬在辐射中的作用

目的 观察辐射诱导结肠癌SW480细胞发生自噬的情况,以及自噬在辐射中的作用。方法 采用透射电镜观察细胞超微结构,免疫荧光观察自噬泡,蛋白质免疫印迹法检测LC3水平,MTT检测细胞增殖情况,Tanswell小室观察细胞的侵袭,划痕实验观察细胞迁移。结果 重离子与X射线辐射能够诱导SW480细胞发生自噬,且自噬水平随辐射剂量的增加而增加(F=458.526,P<0.05);雷帕霉素(rapamycin, RAPM)能够诱导SW480细胞发生自噬,联合照射时,具有协同作用(F=189.393,P<0.05);氯喹(chloroquine,CQ)能够抑制辐射所诱导的SW480细胞发生的自噬;单纯照射组、照射联合RAPM组细胞的侵袭力、迁移力及活性减弱(F=194.692、629.917、302.903,P<0.05);辐射与CQ联合处理组细胞的侵袭力、迁移力及活性增强(F=194.692、629.917、302.903,P<0.05)。结论 电离辐射可诱导结肠癌SW480细胞发生自噬,自噬对细胞有杀伤作用。     

运动诱导线粒体自噬与受体蛋白FUNDC1研究进展

<正>FUN14 domain containing 1(FUNDC1)作为哺乳动物细胞内的线粒体受体蛋白,在低氧条件下已被证实能够引起线粒体自噬。线粒体自噬对机体内环境稳态和细胞正常代谢至关重要,可调节多种疾病状态。运动作为一种应激干预能够激活AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)并在丝氨酸317(Ser-317)位点磷酸化自噬     

细胞自噬在病原体感染过程中的作用研究进展

细胞自噬是一种通过降解蛋白质和细胞器维持细胞内平衡的细胞机制。细胞自噬具有很多重要的生理功能,包括清除病原体的感染。但是由于细胞自噬在进化过程中具有高度的保守性,某些病原体通过进化,具有逃避细胞自噬的能力,甚至利用细胞自噬为病原体复制和发育提供有利条件。本文综述了细胞自噬与病原体相互作用的研究进展。     

免疫细胞自噬在动脉粥样硬化中的作用研究进展

 心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)已成为世界范围内严重危害人类健康与生命的重大疾病,病死率居全球首位,因此防治CVD已成为全球公共卫生专家所关注的热点^[1]。动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一种以脂质蓄积和炎性细胞浸润为主要特征的动脉血管壁慢性炎性反应,通常伴有大量免疫细胞参与,是众多CVD的病理基础^[2]。近期众多学者研究发现自噬(autophagy)与AS的形成、发生和发展密切相关^[3]。笔者就不同免疫细胞自噬对AS的影响进行综述,为下一步揭示AS的发生机制提供参考。     

硫代葡萄糖苷对X射线辐射所致小鼠损伤的保护作用

辐射能引起机体组织和器官的损伤，甚至能诱发细胞发生突变、癌变或死亡。芸芥（Eruca Sativa Mull）是十字花科芝麻菜属的一种油料作物，含有一种叫硫代葡萄糖苷（glucosinolate，简称硫苷）的次生代谢物，据报道，该物质具有一定的化学保护功能。为了研究硫苷对辐射损伤的保护作用，本实验利用从芸芥发状根中提取的硫苷粗提物，对小鼠进行灌胃两周后再用X射线全身辐照，然后分析该物质对小鼠脑、肝、肺及血清中超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的影响，为进一步证实硫苷的保护作用以及临床上放疗时减轻辐射损伤并分析其可能的作用机制，提供一定的实验依据。     

白藜芦醇通过Akt/mTOR通路上调自噬改善辐射诱导小肠损伤

目的探讨白藜芦醇是否能够通过调节Akt/mTOR通路改善辐射诱导小肠损伤并研究其机制。方法将24只C57BL/6小鼠随机分为对照组、照射组和照射给药组(每组8只)。照射组和照射给药组小鼠接受9.0 Gy剂量的6MV-X射线全身照射,照射给药组小鼠在照射前3 d至照射后3 d每日腹腔注射白藜芦醇(50 mg·kg~(-1)·d~(-1)),对照组、单纯照射组予等量生理盐水。照射后3.5 d获取小肠组织并制作石蜡块后切片,采用HE染色及免疫组织化学染色行组织学分析;行Western blot试验检测p-Akt/Akt、p-S6RP/S6RP、LC3-Ⅱ、Beclin-1表达。采用ANOVA方差分析进行3组间比较。结果照射给药组小鼠小肠绒毛长度、小肠横断面隐窝数、单个小肠隐窝细胞总数、隐窝细胞Ki67阳性率均高于照射组(均P0.05);照射给药组较照射组小肠组织p-Akt/Akt、p-S6RP/S6RP蛋白表达下降(均P0.001),LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达升高(均P0.001)。结论白藜芦醇可能通过抑制Akt/mTOR通路促进受辐射小鼠小肠隐窝细胞自噬从而改善辐射诱导小肠损伤。     

Enhanced autophagy protects hepatic cells from radiation injury

Objective To study the influence of radiation on autophagy and its protective effect on radiation injury of hepatic cells. Methods Autophagy in mouse liver tissues was examined by GFP-LC3 staining and Western blot. Radiation-induced hepatic injury was evaluated by ALT and AST in mouse serum, protein expressions, and H & E and TUNEL staining of liver tissue. L02 cells were used for in vitro study. Chloroquine and rapamycin were used to manipulate the level of autophagy. Results Total body irradiation (TBI) of 8 Gy caused an increase of autophagy in mouse liver tissue and AST level in serum(t=-7.47, P<0.05) at 12 h after irradiation. Irradiation significantly increased the apoptotic level in liver tissue as well. Inhibition of autophagy by chloroquine caused a further increases of AST[IR:(345.42±35.25)U/L vs. IR+CQ:(433.42±40.07)U/L, t=-2.86, P<0.05] and ALT[IR:(35.67±8.08)U/L vs. IR+CQ:(98.5±26.67)U/L, t=-3.09, P<0.05] in the serum, and it also promoted apoptosis in live tissue. However, rapamycin as an autophagy promoter showed protective effect for radiation-induced hepatic injury[AST:IR:(345.42±35.25)U/L vs. IR+Rap:(278.42±20.09)U/L, t=-2.86, P<0.05]. Similar changes of autophagy and apoptosis in L02 cells were also observed in the cells treated with chloroquine and rapamycin. Inhibition of autophagy by CQ caused an increase of ROS in vitro and in vivo and further increased ALT and AST levels in serum, reduced L02 cell viability. Activation of autophagy by Rap effectively reversed those changes. Conclusions Autophagy protects hepatic cells from radiation injury by decreasing ROS induction, which provides a potential target for the development of new clinical regimens against radiation induced liver injury.     

X射线对人肺腺癌A549细胞Pokemon基因表达的影响

目的 研究不同剂量X射线照射及照射后不同时间点对人肺腺癌A549细胞Pokemon基因表达的影响.方法 用吸收剂量分别为2、4、6和8 Gy的X射线照射体外堵养的人肺腺癌A549细胞,2、4、8、12、24、48和72 ha,用实时定量PCR技术检测其中的Pokemon mRNA表达水平,以未照射组为对照.结果 在2、4、6、8 Gy X射线照射后的早期(除2 Gy照射后的2和4 h外)Pokemon mRNA的表达降低,但在晚期(48 h以后)呈升高趋势,在大部分时间点实验组与对照组的差异有统计学意义(t=3.40～154.76,P<0.05).结论 较大剂量的X射线在早期可下调A549细胞Pokemon基因mRNA的表达,诱导肿瘤细胞凋亡;但在晚期又可诱导A549细胞高表达PokemonmRNA,这可能与辐射所致A549细胞的DNA损伤修复和细胞周期调控有关.

Abstract：

Objective To study the dose-and time-effects of X-ray irradiation on the expression of Pokemon gene in A549 cells of human lung adenocarcinoma.Methods A549 cells were cultured in vitro and exposed to X-rays with the doses of 2,4,6 and 8 Gy,respectively.Untreated A549 cells were used as control group.The relative levels of Pokemon mRNA expression in the cells were detected by using quantitative real-time PCR at 2,4,8,12,24,48 and 72 h after irradiation.Results The Pokemon mRNA expression levels decreased in the early period after irradiation(except 2 and 4 h after irradiation in 2 Gy group)and then increased in the later stage(48 h after irradiation)with significant statistical differences at the most time points in comparison with the control group(t=3.40-154.76,P<0.05).Conclusions Higher doses of X-rays may degrade the expression of Pokemon mRNA in the human A549 cells and induce apoptosis in the early period,hut also may upgrade its expression in the later period, which might be correlated with the cell cycle regulation and DNA damage repair in the A549 cells.     

电离辐射诱导乳腺癌细胞自噬相关基因DRAM表达的研究

目的 研究电离辐射对乳腺癌细胞株MCF-7自噬相关基因DRAM表达变化的影响.方法 采用GFP-LC3转染法检测自噬泡,实时荧光定量PCR方法检测DRAM基因表达,Western blot方法检测LC3和DRAM蛋白的表达,采用磷酸钙共转染法构建DRAM沉默细胞模型.结果 与假照组相比,8 GyX射线照射后细胞中GFP-LC3表达升高;时间-效应关系表明,在8 Gy照射后,自噬溶酶体蛋白LC3表达在2、4、8、16、24和32 h上升变化显著,各组均高于假照组(F=5.38、8.72、10.63、15.23、20.78和55.23,P＜0.05);DRAM蛋白表达在8 Gy照射后以时间依赖性增加,从2h开始上升,32 h达至最高值(F=116.34,P＜0.05).DRAM沉默细胞模型组中LC3和DRAM蛋白的表达明显低于假照组(F=20.36和40.35,P＜0.05);对DRAM沉默细胞模型组进行8 Gy照射后,DRAM蛋白表达与假照组相比虽有所增加,但仍低于8 Gy照射组;DRAM沉默细胞模型组LC3蛋白的表达也低于照射组,沉默前后差异均有统计学意义(F=50.34,P＜0.05).结论 X射线可能通过激活DRAM基因来促进乳腺癌细胞株MCF-7发生自噬.     

一起介入治疗意外照射导致背部大面积放射性皮肤损伤患者的生物剂量估算

目的 对疑似因介入治疗致背部大面积皮肤损伤的患者进行生物剂量估算与重建。方法 术后约7个月（2020年7月22日）,采集患者外周血进行染色体畸变分析并用不同方法构建的剂量曲线估算剂量,用剂量估算的修正系数、Dolphin''s模型和Qdr方法重建患者术后短期内的受照剂量。结果 基于dic半自动与dic+r人工分析及4条剂量曲线估算患者的全身平均吸收剂量为0.68~0.95 Gy,泊松分布检验结果显示u值均>1.96,患者受到局部不均匀照射,且半自动分析可明显提高剂量估算的效率。3种重建剂量方法修正后估算患者术后短期内的全身平均吸收剂量为1.80~2.86 Gy。估算的生物剂量与该患者存在放射损伤和临床诊断为局部放射性皮肤损伤Ⅳ度的结果基本一致。结论 通过染色体畸变分析和生物剂量估算,确诊了1例因介入治疗致背部大面积放射性皮肤损伤的患者,非稳定性染色体畸变分析对局部不均匀照射受照者回顾性生物剂量的估算与重建有可行性。     

闭合性胸部创伤致心脏大血管损伤的诊断与治疗

目的探讨胸部闭合性创伤致心脏大血管损伤的诊断和治疗。方法总结我科1983年9月～2003年9月治疗的12例胸部闭合性创伤致心脏大血管损伤的临床诊治经验。本组心脏损伤7例,大血管损伤5例。结果11例经手术治疗痊愈出院,1例假性动脉瘤术中出血死亡。11例随访均显示良好疗效。结论心脏超声对创伤性心脏损伤的诊断是安全而有效的;MRI、CT可对大血管损伤的诊断及手术方法的选择提供重要资料。对心脏及大血管损伤早期或择期手术可取得良好效果。     

自噬对肿瘤放射治疗疗效的影响

自噬是一种重要的分解代谢过程,细胞消化和再循环自身的细胞质内容物以维持细胞稳态。自噬可以通过各种信号通路在肿瘤的发生发展中起到促进和抑制的双重作用。作为研究热点,自噬正被学者们从各个方面进行探索。然而,目前缺乏关于自噬与放疗关系的系统性总结。因此,笔者将从自噬对不同类型肿瘤放射敏感性和对放疗疗效的影响及自噬修饰用于改善肿瘤放疗疗效和预后的未来发展作一综述。     

胸部钝性伤致心脏破裂的救治

目的 探讨胸部钝性伤导致心脏破裂的外科救治方法。方法 回顾性总结20例胸部钝性伤致心脏破裂的外科治疗经验。结果 本组存活16例,均痊愈出院,随访3个月,心脏功能正常;死亡4例,其中术中死亡2例,术后死亡2例。结论 胸部钝性伤引起心脏破裂病例并不少见,抢救成功的关键是争取手术时间。心脏破裂部位以右心为多见,手术进路以胸骨正中切口为佳。应强调术中控制出血的有效措施及可靠的心脏破裂修补方法。     

X射线胸部照射对小鼠精子发生的影响

目的:探讨X射线胸部照射对雄性成年小鼠精子发生的影响。方法:将24只健康雄性成年C57BL/6小鼠(6~8周龄)按照随机数表法分为X射线照射组(Radiation)和假照射组(Sham),每组12只。胸部照射面积为1.5 cm × 2 cm,剂量率3.04 Gy/min,8 Gy/d,连续照射3 d,总剂量24 Gy,...     

Treg与放射性肺损伤

放射性肺损伤（RILI）是胸部肿瘤放疗后常见的不良反应之一,在数月后往往发展成为放射性肺纤维化。近年来,研究者对RILI的发生发展机制开展了大量探索,其中调节性T细胞（Treg）在RILI进展中的免疫学机制尤其受到国内外学者的重视。本期重点号刊登了几篇Treg与RILI方面的文章,这些文章从Treg在肺组织内的数量改变和免疫调节机制等方面报道了Treg参与RILI发生发展的研究成果,为RILI的预防和治疗提供了重要的科学基础。