siRNA沉默S100A4基因表达抑制甲状腺癌细胞侵袭的研究

目的 探讨S100A4基因对甲状腺癌细胞侵袭的影响和可能机制.方法 采用S100A4基因小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）转染处理人甲状腺癌ARO细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和Western blot检测S100A4基因和基质金属蛋白酶-2mRNA和蛋白水平;分别采用软琼脂集落培养试验和Boyden小室模型试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力.结果 siRNA转染组S100A4基因mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度依赖性（P＜0.000 1）.siRNA转染组软琼脂集落形成数和穿过滤膜的细胞数均明显下降,且呈浓度依赖性（P＜0.005;P＜0.005）.S100A4转染组MMP-2基因mRNA和蛋白水平明显下调.结论 采用S100A4 siRNA转染可抑制甲状腺癌细胞侵袭转移,其机制可能与下调MMP-2表达有关.     

S100A4-siRNA体外转染下调MMP-2表达抑制胰腺癌细胞侵袭能力的研究

目的观察S100A4基因沉默后人胰腺癌Bxpc-3细胞株S100A4和MMP-2的表达及肿瘤细胞迁移和侵袭能力的变化,探讨S100A4基因在肿瘤转移中的作用机制。方法采用RNA干扰技术将S100A4-siRNA转染至人胰腺癌Bxpc-3细胞,采用荧光实时定量PCR和Western免疫印迹方法检测转染前后S100A4和MMP-2的mRNA和蛋白表达;以Transwell小室模型检测转染前后癌细胞迁移和侵袭能力变化。结果转染后S100A4和MMP-2的表达均下调;细胞体外迁移和侵袭能力显著降低（P〈0.05）。结论 S100A4基因上调MMP-2的表达是肿瘤细胞具有高侵袭性的机制之一。S100A4基因可以作为胰腺癌基因治疗的一个靶点。     

S100A4基因在不同骨肉瘤细胞和组织中的表达

[目的]检测S100A4基因在人骨肉瘤细胞系MG-63、U-20S以及骨肉瘤组织中的表达情况并分析其临床意义.[方法]应用Real -time PCR方法检测S100A4基因在人骨肉瘤细胞MG -63及U- 20S中的表达,用免疫组织化学SP法检测骨肉瘤S100A4、CD44V6蛋白表达,并分析二者的关系.[结果]人骨...     

S100A9蛋白表达与宫颈鳞癌细胞侵袭、转移的关系研究

目的探讨S100A9蛋白表达与宫颈鳞癌细胞侵袭、转移的关系。方法采用S100A9重组腺病毒转染人宫颈鳞癌C-33A细胞,S100A9siRNA转染人宫颈鳞癌Caski细胞;应用Westernblot检测转染前后2种细胞中S100A9蛋白的表达,Transwell检测细胞侵袭与转移能力的变化。结果转染S100A9重组腺病毒后C-33A细胞中S100A9蛋白的表达明显增强;与未转染组、阴性对照组相比,转染组C-33A细胞的穿膜细胞数、穿过小室的细胞数均明显增多（均P＜0.05）。转染S100A9siRNA后Caski细胞中S100A9蛋白的表达明显降低;siRNA组Caski细胞的穿膜细胞数、穿过小室的细胞数均明显少于阴性对照组（均P＜0.05）。结论S100A9与宫颈鳞癌细胞的侵袭、转移相关。上调S100A9的蛋白表达,可促进C-33A细胞侵袭与转移的能力;下调S100A9的蛋白表达,可抑制Caski细胞侵袭与转移的能力。     

结肠癌组织中S100A4的表达情况及其与淋巴结转移的关系

目的：研究在结肠癌组织中S100A4的表达情况与结肠癌淋巴结转移之间的关系.方法：采用免疫组织化学方法测定S100A4蛋白在正常结肠组织及结肠癌组织中的表达水平,分析S100A4在结肠癌组织中表达的意义及其与结肠癌淋巴结转移之间的关系.结果：1.在结肠癌组织及正常结肠粘膜中均有S100A4的表达,在出现淋巴结转移的结肠癌组织中S100A4的表达增高.结论：在结肠癌组织及正常结肠组织中均有S100A4的表达,S100A4表达增高与淋巴结转移有关.     

肿瘤转移相关基因S100A4的研究进展

肿瘤的发生发展受多种基因的调控。S100A4基因是近几年发现的一种具有促肿瘤作用的基因,该基因编码一种钙离子结合调节蛋白,通过与钙离子结合在肿瘤发生发展中发挥重要作用。本文就S100A4基因的结构、促肿瘤的作用及机制作一综述。     

沉默S100A4基因对人食管鳞癌EC-1细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制研究

目的 观察S100A4siRNA对人食管鳞癌EC-1细胞裸鼠移植瘤的抑制作用并探讨其体内抗肿瘤机制.方法 建立裸鼠荷瘤模型,将化学合成的S100A4siRNA转染荷瘤裸鼠,监测肿瘤生长变化,采用RT-PCR及免疫组化检测转染前后瘤体内S100A4、MMP-2和E-cadherin表达的变化.结果 S100A4siRNA转染荷瘤裸鼠后,与无义siRNA组和空白对照组相比:S100A4siRNA组荷瘤裸鼠肿瘤体积下降(P<0.05),且抑瘤率高于无义siRNA组(P<0.05);S100A4、MMP-2 mRNA和蛋白表达下词(P<0.05),而E-cadherin mRNA和蛋白表达上调(P<0.05).结论 S100A4siRNA能有效抑制人食管鳞癌EC-1细胞裸鼠移植瘤的生长,并降低S100A4和MMP-2的表达,升高E-cadherin的表达,为食管鳞癌的分子治疗提供了理论依据.     

S100A4真核表达载体构建及对鼻咽癌细胞侵袭转移的影响

目的  构建S100A4稳定高表达的鼻咽癌细胞株,研究S100A4与鼻咽癌侵袭转移关系。方法  PCR方法扩增S100A4片段,将产物插入pCMV载体,将重组质粒及其空白质粒分别转染到鼻咽癌细胞CNE2;MTT法绘制细胞生长曲线,Western blot检测S100A4、E-cadherin、Fibronectin、基质金属蛋白酶2（MMP2）、基质金属蛋白酶9（MMP9）的表达;Transwell实验检测细胞侵袭转移能力变化。结果  成功构建了S100A4稳定高表达的重组细胞株;细胞生长曲线表明S100A4稳定高表达的重组细胞株生长较快;S100A4稳定高表达的重组细胞株中E-cadherin、Fibronectin低表达而MMP2、MMP9高表达;Transwell实验发现S100A4稳定高表达的重组细胞株的侵袭细胞计数明显高于空白载体转染组和未转染组（P >0.01）。结论  S100A4能调控鼻咽癌上皮-间质转化（EMT）过程,并上调MMP2、MMP9表达而促进鼻咽癌细胞侵袭和转移。

     

S100A4蛋白与膀胱癌

膀胱癌是我国常见的恶性肿瘤,占全部恶性肿瘤1%～2%,在国内无论其发病率和死亡率均占泌尿系肿瘤的首位,且近年有增加的趋势.     

S100A4在食管鳞癌中的表达及与浸润转移的关系

目的 探讨S100A4在食管鳞癌发生发展及浸润转移中的作用.方法 采用免疫组化检测100例食管鳞癌组织中S100A4、MMP-2及E-cadherin蛋白的表达,采用RT-PCR及Western blot检测食管鳞癌细胞系EC-1和TE-1中S100A4基因的表达并采用Boyden小室检测EC-1和TE-1细胞的体外侵袭能力.结果 100例食管鳞癌组织中S100A4蛋白的表达(52.0%)明显高于食管正常黏膜(26.0%)(P<0.01),与肿瘤分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05),且与MMP-2表达呈正相关(P<0.01),与E-cadherin表达呈负相关(P<0.05).食管鳞癌细胞EC-1中S100A4mRNA(0.894±0.021)、蛋白(0.897+0.053)表达及体外侵袭力(91.00+17.44)明显高于TE-1细胞(S100A4 mRNA:0.812±0.040,蛋白:0.645±0.089,体外侵袭力:61.80±11.10)(P<0.01).结论 S100A4基因在食管鳞癌组织以及高侵袭性食管鳞癌细胞EC-1中的高表达提示其可能参与了食管鳞癌的发生发展及浸润转移.     

S100A4基因差异表达与肾癌细胞分化、转移的关系

目的 探讨S100A4基因mRNA表达与肾癌细胞分化、转移的关系。方法 提取31例肾癌及正常组织配对标本的总RNA,用RT-PCR方法测定S100A4基因表达,并结合临床资料,对S100A4基因差异表达与肾癌病人临床表现的相关性进行分析研究。结果 31例配对标本采用RT-PCR方法分别进行S100A4mRNA荧光检测比较,29例标本肿瘤组织中S100A4基因mRNA表达明显高于癌旁正常肾组织。其中低分化肿瘤组病人的S100A4指数高于高分化组(7.94vs5.06,P<0.001);发生转移(包括淋巴结转移和远处转移)者高于无转移者(9.61vs5.53,P<0.001);低年龄组病人(≤50岁)S100A4指数与高年龄组无明显差异(6.31vs6.66,P>0.05);肾颗粒细胞癌组与透明细胞癌组无明显差异(6.98vs6.02,P>0.05);肿瘤直径≤5cm组与>5cm组无明显差异(5.95vs6.93,P>0.05)。结论 肾癌组织中S100A4基因mRNA可望作为肾细胞癌的病情发展及指导临床治疗的标记物之一;S100A4基因表达与肾细胞癌分化有关,癌组织S100A4mRNA测定有助于判定肿瘤的预后;S100A4基因差异表达与肾细胞癌转移明显相关。     

S100A4基因差异表达与肾癌细胞分化、转移关系的研究

目的 探讨S100A4基因mRNA表达与肾癌细胞分化、转移的关系。方法 提取31对肾癌及正常组织配对标本的总RNA，用RT—PCR方法测定S100A4基因的表达，并结合临床资料，对S100A4基因差异表达与肾癌病人临床表现的相关性进行研究分析。结果 29例标本肿瘤组织中S100A4基因mRNA表达明显高于癌旁正常肾组织；其中低分化肿瘤组病人的阳性表达率高于高分化组（7．94vs5．06，P〈0．001）；发生转移（包括淋巴结转移和远处转移）者高于无转移者（9．61vs5．53，P〈0．001）；低年龄组病人（≤50岁）阳性表达率与高年龄组（〉50岁）差异无显著性（6．31vs6．66，P〉0．05）；肾颗粒细胞癌组与透明细胞癌组差异无显著性（6．98vs6．02，P〉0．05）；肿瘤直径≤5cm组与〉5cm组差异无显著性（5．95vs6．93，P〉0．05）。结论 S100A4基因表达与肾细胞癌分化有关，癌组织S100A4mRNA测定有助于判定肿瘤的预后；S100A4基因差异表达与肾细胞癌转移明显相关，肾癌组织中S100A4基因mRNA可望作为肾细胞癌的病情发展及指导临床治疗的标记物之一。     

联合分析S100A4和S100A6在胃癌中的表达情况

目的联合分析S100A4和S100A6与胃癌临床病理因素的相关性。方法利用免疫组织化学验证S100A4和S100A6在78例胃癌组织中的表达情况。结果在肿瘤组织中S100A4主要定位于细胞质,在42%(33/78)的胃癌组织中高表达。S100A4高表达与TNM分期(P=0.031)相关。S100A6在肿瘤细胞核和(或)细胞质中高表达(69%,54/78)。S100A6高表达与肿瘤大小、浸润深度和TNM分期相关。联合分析S100A6与S100A4在胃癌组织中的表达情况,进一步对临床资料分析结果表明,S100A4+/S100A6+者浸润深度越深,淋巴结发生转移,TNM分期越晚。结论联合分析S100A4和S100A6有助于分析胃癌的生物学行为。     

Relationship between the Expression of MTA-1 Gene and the Metastasis and Invasion in Human Osteosarcoma

Summary：To compare the expression level of metastasis associated-1 （MTA 1 ） gene in high and low metastatic： human osteosarcoma cell lines and examine the relationship of MTA 1 expression and the metastasis potentiality of osteosarcoma cells, the expression of MTA 1 in MC-63 osteosarcoma cell lines with high and low metastasis potential was detected by semiquantitative TR-PCR. Boyden chamber invasion assay was used to evaluate the invasive capacity in vitro in two osteosarcoma cell lines, The low metastasis MG-63 cells were transfected with MTA 1 full-length cDNA expression plasmid by lipofectamine and the changes of MTA 1 expression and in vitro invasion potential were examined after the transfection. Our results showed that MG63 cell line with high metastasis potential expressed significantly higher MTA 1 than that of MG63 cells with low metastasis as reavealed by RT-PCR The invasion potential of low metastasis MG63 cell line was increased after MTA 1 gene transfection. It is concluded that there may be a relationship between MTA 1 and invasive potentiality of human osteosarcoma cells, and the mechanism of MTA 1 in osteosarcoma metastasis and its possible role in associated gene therapy deserve further study.     

S100A4上调表达对HBL-100和MCF-7细胞增殖和侵袭的影响

目的 探讨S100A4对人乳腺上皮细胞HBL-100和人乳腺癌细胞MCF-7的增殖、迁移、侵袭和凋亡以及对这两种细胞中的Wnt/β-catenin及Wnt/JNK信号途径的影响.方法 用表达S100A4的重组腺病毒(AdS100A4)感染细胞,采用MTT、划痕愈合实验、Transwell侵袭实验和Hoechst染色分别检测细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡活性的变化;同时通过PCR和Western blot检测S100A4对两种细胞中Wnt/β-catenin及Wnt/JNK信号途径的影响.结果 (1)HBL-100和MCF-7细胞在第4天的增殖分别增加53.3％和59.1％ (P ＜0.05);24 h的划痕愈合率分别增加73.6％和64.8％(P＜0.05);S100A4对HBL-100的穿膜细胞数无明显影响(P＞0.05),但使MCF-7的穿膜细胞数增加1倍(P＜0.05);HBL-100和MCF-7细胞在48 h的凋亡率分别减少约30％和36％(P＜0.05);(2)感染AdS100A4后的HBL-100和MCF-7细胞中β-catenin较GFP组分别增加49％和55％(P＜0.05);尽管两种细胞中t-GSK3β无显著改变,但是其p-GSK3β却较GFP组分别增加73％和55％(P＜0.05),c-Myc的表达量分别增加38％和30％ (P ＜0.05);(3) S100A4对HBL-100中的t-JNK、p-JNK和c-Fos的mRNA以及MCF-7细胞的t-JNK的水平均无影响,但是,却致MCF-7中的p-JNK增加39％(P＜0.05),c-Fos的mRNA增加32.3％ (P ＜0.05).结论 S100A4可促进HBL-100和MCF-7细胞的增殖、迁移,并抑制这两种细胞的凋亡;增强MCF-7细胞的侵袭能力.S100A4可增强HBL-100和MCF-7细胞中的Wnt/β-catenin信号途径活性以及MCF-7细胞中的Wnt/JNK信号途径活性.