橙皮素的大鼠血浆蛋白结合率研究

目的测定橙皮素的大鼠血浆蛋白结合率。方法采用平衡透析法结合高效液相色谱法(HPLC)对橙皮素与大鼠血浆的血浆蛋白结合率进行测定。结果在0.5、2.5和10μg/m L浓度水平橙皮素与大鼠血浆的血浆蛋白结合率分别为(93.5±4.2)%,(94.3±5.6)%和(93.9±3.8)%,三个浓度水平之间的血浆蛋白结合率差异无统计学意义(P≥0.05)。结论橙皮素与大鼠血浆蛋白高度结合。     

五味子甲素4℃条件下血浆蛋白结合率的测定北大核心CSCD

目的:建立HPLC测定五味子甲素与大鼠血浆蛋白结合率的方法。方法:采用HPLC法测定大鼠血浆中五味子甲素的总浓度及游离药物浓度,色谱分离采用Agilent Zorbax SB-C18(3.0 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱,以水-乙腈(40∶60)为流动相,流速0.8 mL.min-1,柱温30℃,检测波长225 nm,进样量5μL;应用平衡透析法测定4℃条件下五味子甲素与大鼠血浆蛋白的结合率。结果:低、中、高3种浓度下,五味子甲素的血浆蛋白结合率分别为(76.0±4.7)%、(87.1±3.2)%、(89.1±1.7)%。结论:在体外,五味子甲素与大鼠血浆蛋白结合率较高,不存在浓度依赖性。     

高效液相色谱法测定芹菜素在不同血浆中的蛋白结合率

目的:建立测定芹菜素在大鼠血浆、人血浆和牛血清白蛋白(BSA)中蛋白结合率的方法,并计算不同介质中的的相关参数。方法:采用高效液相色谱(HPLC)测定不同介质中芹菜素的浓度,并结合平衡透析法测定蛋白结合率。结果:高、中、低浓度下,芹菜素的血浆蛋白结合率分别为:大鼠血浆:(99.4±3.8)%、(99.6±5.6)%、(99.5±4.5)%;人血浆:(96.3±7.2)%、(97.9±10.5)%、(97.8±9.7)%;牛血清白蛋白:(98.7±8.6)%、(99.6±9.4)%、(99.1±8.0)%。结论:本方法快速、简便、可靠,芹菜素与大鼠血浆、人血浆和牛血清白蛋白结合率很高,且与血药浓度无显著相关性。     

LC-MS测定大鼠血浆中五味子的3个木脂素成分及其药动学研究

目的 建立测定大鼠血浆中五味子醇甲、五味子甲素与五味子乙素浓度的LC-MS法,并探讨其在大鼠体内的药代动力学过程.方法 SD大鼠6只,按5 mg·g-1剂量ig给予五味子醇提液,以睾丸酮为内标,血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,采用LC-MS法测定不同时间点大鼠血浆中的五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的浓度,对其血药浓度-时间采用DAS 1.0软件拟合,计算其药动学参数.结果 大鼠血浆样品中,五味子醇甲、五味子甲素与五味子乙素的线性范围分别为0.114～3.66 mg·L-1 (r=0.9994)、0.0299～0.995 mg·L-1 (r=0.9992)和0.0251～0.803 mg·L-1 (r=0.9991),提取回收率为83.12%～103.48%,日内与日间精密度均≤14.00%,Cmax分别为(0.54±0.07)、(0.23±0.07)和(0.40±0.04) mg·L-1,Tmax分别为(4.67±0.26)、(4.33±0.26)和(4.08±0.20) h,T12分别为(1.95±0.26)、(8.30±3.36)和(6.46±3.82) h.结论 本法专属性强,灵敏度高,快速准确,可作为大鼠血浆中五味子醇甲、五味子甲素与五味子乙素的同时检测及其药动学研究.     

2-甲氧基雌二醇大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的建立测定2-甲氧基雌二醇大鼠血浆蛋白结合率的方法。方法采用平衡透析法对2-甲氧基雌二醇大鼠血浆蛋白结合率进行HPLC测定。结果高、中、低3个浓度(2、4、8 mg.L-1)的2-甲氧基雌二醇血浆蛋白结合率分别为(85.2±3.4)%、(82.1±5.3)%、(83.0±5.2)%。结论该方法灵敏度高,重现性好,操作简单,能满足生物样品分析要求。2-甲氧基雌二醇大鼠血浆蛋白结合率不具有浓度依赖性,使其临床用药具备较好的安全性。     

冬凌草甲素在不同种属血浆中蛋白结合率的HPLC法测定

目的:建立冬凌草甲素在大鼠血浆、人血浆和牛血清白蛋白中蛋白结合率的测定方法,并计算不同种属血浆蛋白的相关参数。方法:采用HPLC法测定血浆中药物总浓度及游离药物浓度,应用平衡透析法测定蛋白结合率。结果:大鼠血浆中冬凌草甲素高、中、低3个浓度的血浆蛋白结合率分别为(69.66±12.8)%,(59.62±12.6)%,(57.94±4.1)%;人血浆中冬凌草甲素高、中、低3个浓度的血浆蛋白结合率分别为(78.15±3.6)%,(77.92±8.8)%,(76.72±7.3)%;牛血清白蛋白中冬凌草甲素高、中、低3个浓度的血浆蛋白结合率分别为(35.58±7.2)%,(34.59±10.8)%,(32.03±6.0)%。结论:在体外冬凌草甲素与大鼠血浆、人血浆和牛血清白蛋白属中等结合型药物,且蛋白结合率随着药物血浆浓度的增加无明显的浓度依赖性。     

葡萄内酯大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的:建立大鼠血浆中葡萄内酯的检测方法,测定葡萄内酯与大鼠血浆蛋白的结合率。方法:采用平衡透析法研究葡萄内酯在大鼠体内与血浆蛋白结合率。利用醋酸乙酯萃取富集袋内外样品中的葡萄内酯,并用HPLC法测定其浓度,进而求出血浆蛋白结合率。结果:在低、中、高3种浓度下,葡萄内酯的血浆蛋白结合率分别为100.0%、(99.7±0.6)%、(99.1±0.8)%。结论:葡萄内酯溶液与大鼠血浆蛋白属高度结合。     

HPLC法测定蝙蝠葛碱与大鼠和人血浆蛋白的结合率

目的:建立测定蝙蝠葛碱的高效液相色谱(HPLC)法,并研究蝙蝠葛碱与大鼠和人血浆蛋白的结合率。方法:采用平衡透析法,HPLC法测定蝙蝠葛碱的浓度,计算蝙蝠葛碱大鼠及人血浆蛋白结合率。结果:透析外液中的蝙蝠葛碱检测浓度在0.24～15.10μg.mL-1范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系;大鼠血浆中的蝙蝠葛碱检测浓度在0.24～15.10μg.mL-1范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系;人血浆中的蝙蝠葛碱检测浓度在0.24～15.10μg.mL-1范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系。蝙蝠葛碱在高、中、低浓度下,其大鼠血浆蛋白结合率分别为(69.63±1.30)%、(68.64±1.10)%、(72.54±0.50)%,人血浆蛋白结合率分别为(82.1±1.00)%、(84.96±0.70)%、(78.79±0.60)%。结论:HPLC法用于蝙蝠葛碱生物样品测定具有简便、灵敏与选择性高的特点;蝙蝠葛碱具有较强的血浆蛋白结合率,且大鼠和人血浆蛋白结合率具有种属差异性,人血浆蛋白结合率高于大鼠血浆蛋白结合率(P<0.05)。     

荆芥内酯大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的:研究荆芥内酯与大鼠血浆蛋白的结合情况。方法:采用平衡透析法测定体外荆芥内酯对大鼠血浆蛋白的结合率,以HPLC法测定透析袋两侧溶液中荆芥内酯的质量浓度,计算其血浆蛋白结合率。结果:荆芥内酯与内标完全分离,血浆中其他成分无干扰,在0.05～50.3μg.mL-1浓度范围内线性关系良好。日内、日间精密度及提取回收率均符合方法学要求。低、中、高(0.08,0.63,6.30μg.mL-1)质量浓度下,荆芥内酯在大鼠血浆中的蛋白结合率分别为(62.23±1.25)%,(62.71±0.04)%和(63.99±0.79)%。结论:该方法操作简便、快速、准确,灵敏度高,能满足生物样品的分析要求。荆芥内酯具有中等强度的蛋白结合率,蛋白结合率与透析液的药物浓度无关。     

HPLC法测定大鼠尿液中瑞香素的浓度

目的:建立简单、灵敏、准确的大鼠尿液中瑞香素浓度的HPLC测定方法。方法:尿样经乙酸乙酯萃取,采用HPLC法检测,色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,流动相为甲醇-0.5%醋酸水(22∶78),流速1 mL·min-1,检测波长327 nm。大鼠灌胃不同剂量的瑞香素固体分散体溶液(5,25,125 mg·kg-1),收集0～2,2～6,6～12,12～24,24～48 h的尿液并分析,计算瑞香素在尿液中的累积排泄率。结果:瑞香素尿液的线性范围为0.155～396μg.mL-1(r=0.9991),定量限为0.155μg·mL-1。大鼠灌胃给药瑞香素后2 h即能检测到原型药物,同时发现其代谢产物,24 h内经尿液排泄基本完全,累积排泄率不到6%。结论:所建立的方法准确可靠,可用于大鼠灌胃瑞香素后原型药物尿样浓度的测定及其尿排泄研究。     

白藜芦醇衍生物RT-B与大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的建立测定白藜芦醇衍生物RT—B与大鼠血浆蛋白结合率的方法。方法采用平衡透析法对RT-B与大鼠血浆蛋白结合率进行HPLC测定。结果低、中、高3种浓度下,RT-B的血浆蛋白结合率分别为(79.2±s 0.7)%,(80.1±0.9)%和(80.2±0.9)%。结论本方法灵敏度高,重现性好,操作简单,能满足分析要求。RT-B与大鼠血浆蛋白的结合率较高。     

萝芙木中育亨宾大鼠体内药物动力学

目的建立育亨宾在大鼠体内的高效液相色谱测定方法,测定萝芙木中育亨宾在静脉注射后大鼠体内的药物动力学行为。方法采用大连中汇达Hypersil-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-体积分数为0.05%的三乙胺水溶液(体积比为75:25)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为280 nm。大鼠静脉注射育亨宾1 mg.kg-1后,于不同时间点眼眶采血,HPLC法测定其血药浓度,经DAS2.1.1版药动学软件处理得到药动学参数。结果大鼠血浆中育亨宾的线性范围为0.10～3.00 mg.L-1(r=0.995 2),定量下限为0.10 mg.L-1。tmax为0.083 h,ρmax为(2.095±0.302)mg.L-1,AUC0-t为(2.423±0.417)g.h.L-1,AUC0-∞为(2.634±0.412)g.h.L-1。Cl为(0.389±0.072)L.h-.1kg-1。结论建立的大鼠血浆中育亨宾含量的HPLC测定方法适合萝芙木中育亨宾大鼠体内的药物动力学研究;育亨宾静脉注射后消除较快。     

碳酸酐酶抑制剂甲苯磺烷唑胺血浆蛋白结合的特征

目的研究甲苯磺烷唑胺与血浆蛋白结合的特征。方法采用平衡透析法对甲苯磺烷唑胺大鼠和人血浆蛋白结合率进行了测定。结果甲苯磺烷唑胺与大鼠和人的血浆蛋白结合率分别为(96.03±0.10)%和(94.24±0.52)%。结论甲苯磺烷唑胺具有较强的血浆蛋白结合率,无浓度依赖性;大鼠和人血浆蛋白结合率具有种属差异性,大鼠血浆蛋白结合率高于人血浆蛋白结合率。     

HPLC法测定大鼠血浆中DX-11的质量浓度

目的建立测定大鼠血浆中DX-11[N(β榄香烯13基)色氨酸]质量浓度的HPLC方法,并应用该法研究DX-11在大鼠体内的药动学。方法色谱柱:Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇体积分数为0.2%的甲酸水溶液(体积比为75∶25),流速:1.0 mL.min-1,检测波长:220 nm,己烯雌酚作为内标物。结果 DX-11线性:0.2～20.0 mg.L-1,回归方程:Y=1.869×10-1ρ+9.830×10-2(r=0.998 1),定量下限:0.2 mg.L-1,回收率:84.1%～88.9%,日内和日间精密度均不大于10.2%。18只大鼠分别灌胃给予低、中、高3个剂量DX 12后,血浆中DX-11的tmax分别为(1.4±0.2)、(1.8±0.7)、(1.3±0.3)h,ρmax分别为(2.3±0.3)、(3.5±0.6)、(6.4±3.0)mg.L-1,t1/2分别为(1.7±0.7)、(2.3±1.0)、(1.4±0.8)h,AUC(0-∞)分别为(5.4±1.8)、(10.6±1.8)、(21.0±13.1)mg.h.L-1。结论建立并验证的HPLC法适用于DX-11在大鼠体内的药动学研究。     

超滤法测定喜树碱的血浆蛋白结合率

目的：测定喜树碱的血浆蛋白结合率。方法：采用超滤法结合高效液相色谱法对喜树碱与大鼠血浆以及健康人血浆蛋白结合率进行测定。结果：在1,4,8 μg·mL^-1质量浓度下喜树碱与大鼠血浆的蛋白结合率分别为（96.68±0.45）%,（96.41±0.13）%,（96.09±0.44）%;与健康人血浆的蛋白结合率分别为（95.47±0.27）%,（94.92±0.42）%,（94.72±0.48）%。结论：喜树碱与大鼠和健康人血浆蛋白均有很强的结合,并且在考察浓度范围内喜树碱的血浆蛋白结合率无浓度依赖性,但是存在种属差异。     

高效液相色谱法测定吡美拉唑血药浓度及其药代动力学

目的 建立测定吡美拉唑血药浓度的高效液相色谱(HPLC)方法,并初步考察其在人体内的药代动力学特性。方法 受试者口服吡美拉唑10 mg后,分别于给药前,给药后0.5, 1, 1.5, 2, 4, 8, 12, 21, 36, 48, 60和72 h采集血样,通过HPLC吡美拉唑的血药浓度,并应用3P87软件拟合并计算药代动力学参数。结果 吡美拉唑的线性范围为25~4000 μg·L^-1,最低检测浓度为25 μg·L^-1,回收率95.2%~107.7%,日内精密度均<6.9%,日间精密度<10.2%。吡美拉唑的主要药代动力学参数:t_1/2为(22.58±1.59)h, AUC_0-72为(29 089±8886)μg·h·L^-1, Cl/F为(338.9±114.0)L·h^-1, t_max为(2.67±1.54)h, c_max为(1585±469)μg·L^-1。结论 吡美拉唑在人体内吸收快,半衰期较长,有效作用时间长,疗效好。     

粉防己碱对大鼠缺血心脏左室发展压,顺应性及（+）［3H］伊拉地平结合位点的影响

目的 研究粉防己碱（Tet）对大鼠缺血再灌注心脏的左室发展压、左室顺应性和对二氢吡啶拮抗剂(+)［³H］伊拉地平结合位点的影响。以硝苯地平（Nif）作为已知药对照。方法 建立离体大鼠心脏缺血(30 min)再灌注(15 min)模型。大鼠预先ip Tet 30 mg·kg^-1, 每日2次，连续3 d，然后离体心脏给予Tet 0.18 mmol·L^-1灌流, 缺血前灌流5 min，缺血后再灌流15 min。通过连 接于压力传感器的乳胶气囊测定左室发展压（LVDP）和左室顺应性；放射配基结合法测定心脏细胞膜上的(+)［³H］伊拉地平结合位点。结果 与正常对照组相比，缺血再灌注使LVDP降低(42±6)%, 而经Tet处理的心脏只降低(8.6±0.2)%；缺血再灌注后左室顺应性显著受损, 左室舒张末压-容积曲线左移，Tet处理的心脏顺应性改变很小, 接近正常组。Scatchard作图分析, 正常组大鼠心脏细胞膜与(+)［³H］伊拉地平有高度结合位点，K_D为(0.16±0.03)nmol·L^-1，B_max为(0.93±0.30)nmol·g^-1蛋白, 缺血再灌组心脏结合位点的密度减少〔B_max为(0.48±0.14)nmol·g^-1蛋白〕, Tet组的B_max较缺血再灌组明显升高〔(0.68±0.12)nmol·g^-1蛋白〕。各组的K_D值均无明显差别。结论 Tet与Nif相似, 保护离体大鼠心脏的收缩功能和左室顺应性, 减轻缺血所致的二氢吡啶结合位点密度降低。这些效应伴随能量需求的下降因而阻止胞内钙超载, 改善缺血。     

长期饮用普萘洛尔对大鼠心脏和血淋巴细胞β肾上腺素受体效应及亚型的影响

采用放射配体结合实验，离体左心房收缩功能实验，逆转录聚合酶链反应及高效液相色谱等方法研究长期饮用普萘洛尔(70 mg·kg^-1·d^-1，8 wk)对大鼠心脏β肾上腺素受体(β-AR)及其亚型，外周血淋巴细胞β₂-AR和血浆儿茶酚胺水平的影响. 结果表明长期饮用普萘洛尔后：(1)心脏β- AR密度从对照组的41±8 pmol·g^-1蛋白上调到61±9 pmol·g^-1蛋白，CGP20712A竞争抑制曲线2位点分析结果显示为β₁和β₂-AR同等程度上调；(2)心脏β₁-AR mRNA水平不变而β₂-AR mRNA水平显著增加；(3)β-AR及其亚型介导的离体左心房正性变力效应增强，以β₂-AR的功能改变更为显著；(4)血淋巴细胞β₂-AR数目从对照组的19±7 pmol·g^-1蛋白上调至32±8 pmol·g^-1蛋白；(5)血浆去甲肾上腺素水平(0.21±0.12 μg·L^-1)明显低于对照组(0.38±0.15 μg·L^-1).