血清学、核酸检测在乙型肝炎病毒血液筛查中的应用评估

目的对温州地区无偿献血者血液标本进行乙型肝炎病毒血清学、核酸联合检测,全面评估两者在降低输血相关传染性疾病中的作用。方法采集无偿献血者血液标本60 758份,用2种不同厂家ELISA试剂检测乙肝表面抗原,2种试剂均阳性采用单人份NAT检测HBV-DNA,2种试剂均阴性或单试剂阳性进行6人份混样检测,混样阳性再进行单人份拆分检测,比较2种检测方法检出率的符合性。结果 60 758份无偿献血者血液标本中,血清学和核酸检测均阴性为60 505份,血清学与核酸检测均阳性为103份,血清学阳性核酸阴性为70份,血清学阴性核酸阳性为80份。HBs Ag双试剂阳性、单试剂阳性与核酸阳性符合率分别为79.3%、19.3%。结论血清学、核酸检测在输血相关传染病检测中是一种互补关系,任何一种方法减少均带来了血液漏检风险的增加。     

血清学和核酸检测在无偿献血者乙肝筛查中的应用

目的探究血清学、核酸检测在无偿献血者乙肝筛查中的应用价值。方法收集2017年3月—2018年5月无偿献血者血液样本,用ELISA法检测乙肝表面抗原(HBsAg),同时用罗氏核酸检测系统检测乙肝病毒核酸(HBV-DNA),比较两种方式的检测结果。结果 5 032份血液样本中,HBsAg及HBV-DNA检测均为阳性10份(0.20%),均阴性5016份(99.52%),HBsAg阳性而HBV-DNA阴性6份(0.12%),HBsAg阴性而HBV-DNA阳性8份(0.16%)。HBsAg检测的单试剂及双试剂阳性与HBV-DNA检测结果的符合率分别为72.73%和40.00%。结论血清学、核酸检测在无偿献血者乙肝筛查中联合应用能有效增加检测准确性,降低漏检风险。     

实时荧光PCR检测HBsAg阴性、抗HBc阳性献血者血液中HBV DNA研究

目的对乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阴性、乙型肝炎核心抗体（抗HBc）阳性的献血者血液进行经输血传播乙型肝炎病毒（HBV）的风险评估,为完善HBV血液筛查模式及确保临床用血安全提供依据。方法对献血者血液常规检测阴性的标本进行8×45 μL汇集,应用实时荧光聚合酶链反应(PCR)进行混样核酸检测HBV DNA。对血液常规筛查和混样核酸检测合格的标本,进行随机乙型肝炎血清学5项标志物的酶联免疫吸附试验(ELISA)。对获得的HBsAg阴性、混样HBV DNA阴性、抗HBc阳性的标本,进一步采用单份样本（720 μL）实时荧光PCR法检测并定量分析。结果混样标本共检测12 552份,检出HBsAg阴性、HBV DNA阳性标本2份,阳性率为0.02%。随机筛查混样核酸检测阴性标本614份,检出抗HBc阳性标本320份,对此320份标本进行单份核酸检测,检出阳性标本1份,阳性率为0.31%。结论HBsAg阴性、抗HBc阳性献血者血液存在输血传播HBV的风险,应用核酸扩增技术检测血液HBV DNA能大大提高血液安全性。     

血清学检测与核酸检测在献血者血液筛查中的相关性研究

目的评价血清学检测与核酸检测在降低输血相关风险中的相关性。方法对大连市血液中心2012年12月1日-2013年5月31日共计33 708份献血者标本同时进行血清学检测(HBsAg、HCV抗体、HIV抗原/抗体、梅毒特异性抗体、谷丙转氨酶)和HBV/HCV/HIV三联核酸定性检测。单纯核酸检测反应性的标本需进行鉴别试验,对鉴别阴性的献血者进行跟踪检测。将HBsAg、HCV抗体、HIV抗原/抗体三项酶联免疫检测与核酸检测结果对比分析。结果酶联免疫检测单试剂不合格率为1.38%。酶联免疫检测双试剂反应性而核酸检测无反应性的不合格标本有40份,其中HBsAg反应性12份,HCV抗体反应性28份。单纯核酸检测反应性标本有46份,经鉴别和追踪确认HBV感染献血者15例,HIV窗口期感染1例,无HCV RNA的检出。结论核酸检测对于血清学阴性的HBV感染检出效果明显;但对于感染了HBV但病毒载量极低的献血者,核酸检测存在漏检的可能;血液筛查中核酸检测不能代替血清学检测;慎重对待核酸检测的假阳性结果,制定合理的献血者评估策略以减少献血者流失。     

核酸扩增与酶联免疫法联合在血液筛查中的初步应用

目的:在酶联免疫法(enzyme immunoassay,EIA)检测的基础上,探讨HBV核酸扩增检测(nucleicacid amplification testing NAT)技术应用于血液筛查的意义。方法:分别使用两种模式(单检或混检)NAT与EIA两遍检测方式同时进行血液筛查,对NAT阳性标本作进一步做鉴别试验和病毒血清标志物。结果:20925份EIA(-)标本共发现28份核酸三项(HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA)呈反应性,均为HBV-DNA,即EIA两遍检测合格后的HBV-DNA阳性率0.13%,检测其中11份血清,乙肝标志物均呈阳性。结论:EIA阴性献血者中仍有极少数的HBV感染者,核酸扩增检测和酶联免疫检测互补能够检测出EIA漏检的HBV携带者,对提高HBsAg阴性血液标本中HBV感染检出率具有重要价值。     

超敏HBsAg ELISA检测试剂在常规检测合格的献血者中应用的意义

目的:探讨在无偿献血HBsAg筛查中使用超敏HBsAg ELISA的意义。方法:使用一种进口超敏HBsAg试剂和两种国产HBsAg试剂对8692例无偿献血标本进行平行检测,并使用不同区域的三套巢式PCR和检测乙肝三系其他指标对HBsAg结果进行验证。结果:8692例标本中共检测出HBsAg阳性48例,其中HepanostikaHBsAg ELISA试剂32例,英科新创HBsAg ELISA试剂22例,科华HBsAg ELISA试剂14例,对8692例标本进行HBV-DNA测定,有40例获得a表位基因,其中13例为三种HBsAg ELISA试剂检测均阳性8,例为三种HBsAg ELISA试剂检测均阴性8,例为Hepanos-tikaHBsAg ELISA试剂检测阳性。结论:HBsAg超敏试剂的应用能够有效降低HBV输血风险,但也存在一定漏检风险,现有的检测策略需要提高目前使用的ELISA试剂的检测能力,并通过核酸检测技术的推广应用,探索建立酶免技术与核酸诊断相结合的新的血液检测模式,切实提高血液安全。     

核酸检测在献血筛查中的应用

目的分析单人份核酸检测方法 (NAT)在无偿献血者血液筛查中的应用。方法采用Procleix TIGRIS全自动核酸检测系统,结合血站常规的血清学检测,平行检测无偿献血者血液标本。对部分仅核酸检测阳性的献血者,特别是仅HIV核酸单阳性献血者和非重复反应性献血者进行追踪检测,并进行人群特性的描述性分析。结果在304 103份标本中,ELISA阴性NAT初始反应性标本608份(0.20%)。经鉴别实验检出HBV-DNA阳性标本232份,鉴别阴性复试阳性标本74份,非重复反应性阳性标本301份。追踪分析17名非重复反应性献血者,发现4人有HBV-DNA可鉴别的阳性。结论核酸检测技术用于献血者的常规血液筛查能进一步保障输血安全。非重复反应性的标本存在着真阳性的可能,应重视核酸检测非重复性的标本。     

乙型肝炎病毒核酸检测试剂临床应用的分析

目的 了解HBV/HCV/HIV联合核酸检测的临床应用.方法 使用Abbott Architecti2000化学发光检测盒对534份血浆样品进行血清学检测,Roche COBAS AmpliPrep/COBAS TaqManHBV Test试剂定量检测分别与2种联合核酸检测结果 进行比较分析.结果 81份HBsAg、HBeAg、抗-HBc 3项均阳性样品联合核酸检测均为HBV阳性,200份HBsAg阴性的样品中联合核酸检测试剂分别有11、19份检测为HBV阳性.HBV DNA定量检测>500 IU/ml的193份样品联合核酸检测试剂阳性符合率分别为96.9%、94.3%,117份样品<500 IU/ml阳性符合率分别为40.2%、45.3%,151份HBV DNA阴性样品联合试剂阴性符合率为99.3%、96.0%.结论 中国人群中存在一定比例低载量HBV携带者,联合核酸试剂作为献血员筛查的补充方法 在提高血液及其制品使用的安全性方面具有一定的临床使用意义.     

乙肝表面抗原阳性反应血清的乙肝病毒核酸检测分析

[目的]探讨HBsAg血清学阳性反应标本的HBV核酸检测状况. [方法]留取血站6个月志愿者标本6 000例,酶联免疫检测(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)HBsAg阳性标本70例,将阳性标本分组:国产进口两种酶免试剂检测同时强阳性反应标本30例(S/CO≥5);国产进口两种酶免试剂检测同时弱阳性反应标本22例(S/CO<5);单一进口酶免试剂检测阳性反应标本17例;单一国产酶免试剂检测阳性反应标本1例.采用核酸检测技术(Nucleic Acid Test,NAT)对70例酶联免疫检测阳性反应标本进行HBV核酸检测. [结果]两种酶免试剂检测同时强阳性标本(S/CO≥5)组NAT检测结果30例均为阳性;两种酶免试剂检测同时弱阳性标本(S/CO<5)组NAT检测结果20例阳性,2例阴性;单一进口试剂检测阳性标本NAT检测结果10例阳性,7例阴性;单一国产试剂检测阳性标本,1例NAT检测结果为阴性. [结论]HBsAg阳性反应血清的HBV核酸检出率与S/CO值的高低和两种酶联免疫试剂检测结果符合度有一定关联,核酸扩增技术对现行血筛试剂有一定补充作用.     

43425名无偿献血者HBsAg检测结果分析

目的提高献血者血液检测准确度,降低HBsAg漏检率,最大限度减少人为因素造成因输血感染HBV的发生,提高血液安全性。方法使用两种不同ELISA试剂按规定对献血者血液进行双检,并对结果进行统计及分析。结果检测无偿献血者标本43425份,共检出HBsAg阳性403份,阳性率为0.93%,其中国产试剂阳性269份,检出率为66.75%;进口试剂阳性375份,检出率为93.05%。结论两种试剂检测结果存在差异,单独使用任何一种试剂都会存在漏检,应用不同ELISA试剂对献血者HBsAg实施重复检测对降低HBsAg漏检率具有很重要的意义。     

探究血清学联合核酸检测在献血者血液检测中的互补性

目的:研究血清学联合核酸检测在献血者血液检测中的互补性。方法:选取2015年8月~2016年8月收治的100例无偿献血者的血液标本作为研究对象,对其TP、HIV、HCV、HBsAg采用ELISA法进行检测,对其ALT采用速率法进行检测,与此同时,要采用核酸检测技术对乙肝病毒HIV RNA、HCV RNA、DNA进行六人份三项目联合检测,分析其检测结果。结果:合格标本有80份,不合格标本20份。其中有1份标本为TP抗体不合格,1份为ALT不合格,所有标本中除去TP抗体、ALT不合格之外,其它标本中,有10例血清学检测有反应性,核酸检测无反应性,3例血清学为无反应性,核酸检测为有反应性,5例为血清学和核酸检测同时为有反应性。ELISA联合核酸检测单试剂阳性1例,双试剂阴性3例。结论:核酸检测能够将输血疾病传播率有效降低,但是也有可能漏检,不能够对血清血检测进行完全替代,为了将检测准确率提高,要联合应用以上两种方式。     

3种荧光定量PCR试剂检测HBV-DNA阴性结果的比较

目的：为了解实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）不同试剂间的假阴性差异,分析其原因,寻找消除办法。方法：用深圳匹基基因诊断技术有限公司的FQ-PCR试剂（A方法）检测2 333份血清病毒学标志为HBsAg阳性、HBeAg阳性、抗HBc阳性病人血清中的HBV-DNA,对HBV-DNA阴性标本,用2种试剂盒进行复核。结果：2 333份HBeAg阳性标本A方法检出48份HBV-DNA阴性标本,阴性率为2.06%,经广州中山大学达安基因股份有限公司试剂（B方法）复核,有28份转为HBV-DNA阳性;上海申友基因技术诊断公司试剂（C方法）复核,有31份转为HBV-DNA阳性。结论：FQ-PCR不同试剂检测HBV-DNA存在假阴性,且假阴性率较高,其原因可能与试剂引物设计保守序列与HBV某些变异造成不相匹配有关,可以采用多种试剂进行复核的方法弥补。当FQ-PCR检测HBV-DNA低于检测值时,应用其他试剂进行复核,以减少假阴性错误的发生,为临床诊断提供可靠的依据。     

定西市无偿献血者乙型肝炎病毒酶免检测和核酸检测的结果研究

目的:探究乙型肝炎病毒酶免检测和核酸检测在定西市无偿献血者筛查中的应用价值。方法:选取2019年1月~2019年12月于定西市无偿献血并接受乙型肝炎病毒初筛的1286份血液样本为研究对象,每例献血者均采集2管血液,分别采用乙型肝炎病毒酶免检测及核酸检测,比较检测结果。结果:1286份血液标本乙型肝炎病毒检测结果显示:酶免与核酸检验均阳性的39份,酶免与核酸检验均阴性的1194份;将S/CO值以5为分界点,划分检测结果发现,酶免与核酸检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论:无偿献血者血液筛查中采用酶免检测联合核酸检测,有助于降低漏检率,提高检测准确性,单独采用任一种检测方法,均有一定漏检风险。     

呼和浩特地区56684份无偿献血者血液标本的筛查结果分析

目的:呼和浩特地区56684份无偿献血者血液标本的筛查结果。方法:84份标本采用ELISA检测,同时使用全自动核酸检测系统进行单人份核酸检测,结果:56684份常规检测标本中共检出核酸有反应性的标本104份,阳性检出率为0.18%。其中血清学合格,而核酸联检有反应性的标本58份,占全部检测标本的0.1%。结论:ELISA检测存在病毒窗口期漏检风险,通过病毒核酸检测能减少这种风险,提高血液安全水平。     

24例血清学筛查阴性核酸检测阳性献血者乙型肝炎病毒感染特征分析

目的探讨漯河地区无偿献血人群血清学筛查阴性核酸检测阳性献血者乙型肝炎病毒感染的特征。方法选取2016年1月—2017年4月漯河市中心血站采集的32 855例献血者血液标本为研究对象,采用速率法检测ALT,两种不同试剂酶联免疫吸附试验进行初检、复检HBs Ag、抗-HIV、抗-HCV及抗-TP,对血清学检测合格的献血者进行核酸筛查,并对核酸检测结果进行分析。结果在血清学检测合格的32 181例献血者中,检出HBV-DNA阳性24例(0.07%),未检测出HCV-RNA和HIV-RNA阳性献血者;男性和女性HBV-DNA阳性率比较差异无统计学意义(P0.05);初次献血与重复献血HBV-DNA阳性率比较,差异有统计学意义(P0.05);不同年龄段献血者HBV-DNA阳性率比较,差异有统计学意义(P0.05)。18~22岁年龄段献血者HBV-DNA阳性检出率最低,49岁以上年龄段献血者检出率最高;24例HBV-DNA阳性献血者在其献血后第6个月末成功随访21例,窗口期感染1例,隐匿性HBV感染20例。结论血清学筛查合格献血者血液标本存在一定程度的HBV漏检,NAT检测可降低经输血传播HBV的风险,隐匿性感染是本地区HBs Ag阴性HBV-DNA阳性献血者的主要感染形式,为输血传播感染性疾病的主要原因。     

2种策略鉴定ELISA无反应性Procleix Ultrio Elite血液核酸检测不确定标本的功效分析

目的比较2种策略鉴定ELISA无反应性Procleix Ultrio Elite单人份血液HBV/HCV/HIV核酸联合检测不确定献血者标本的效果。方法首先采用Procleix Ultrio Elite单人份血液HBV/HCV/HIV核酸联合试剂和2种不同厂家的ELISA试剂对献血者血液标本进行HBV、HCV及HIV-1/2感染性标志物筛查。ELISA无反应性Procleix Ultrio Elite血液核酸检测不确定献血者标本再分别进行一次TaqScreen MPX v2.0单人份标本HBV/HCV/HIV核酸联合检测(策略1)、2次Procleix Ultrio Elite HBV/HCV/HIV分项鉴别实验(策略2)。随后对其中的30份血液核酸检测不确定标本进行追踪分析。结果在检测的81 874份献血者标本中,181份为HBsAg、抗HCV、抗HIV的ELISA检测无反应性而经Procleix Ultrio Elite试剂血液HBV/HCV/HIV核酸联合检测不确定标本(0.22%)。在这些不确定标本中,策略1和策略2试验分别检测出核酸反应性标本33份和38份,均为HBV DNA阳性,两者的检出率差异无统计学意义(P0.05)。追踪结果显示,30份血液核酸检测不确定标本在3个月～6个月内均未出现HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA反应性结果。结论 ELISA无反应性Procleix Ultrio Elite单人份血液HBV/HCV/HIV核酸联合检测不确定标本中存在着一定数量的血液HBV DNA反应性标本,多种厂家试剂联合检测可提升检出效率。     

HBV、HCV、HIV核酸检测试剂在洛阳地区血液筛查中的应用与分析

目的评估国产核酸检测试剂应用于献血者血液筛查的可行性,以及酶免疫分析(enzyme immunoassay,EIA)检测合格血液的输血残余风险。方法采用苏州华益美生物科技有限公司乙型肝炎(乙肝)病毒(hepatitis B virus,HBV)、丙型肝炎(丙肝)病毒(hepatitis C virus,HCV)、人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)核酸检测试剂盒及PCR-荧光法,对洛阳市血站经EIA筛查合格的40 195份献血者标本进行核酸筛查。阳性标本经拆分后使用Gen Probe公司试剂进行确认,并采用化学发光法免疫试剂对HBV-DNA阳性样本进行乙肝五项免疫指标检测。结果在40 195份EIA检测合格的献血者标本中,发现25份HBV-DNA阳性(阳性检出率0.622‰),1份HCV-RNA阳性(阳性检出率0.025‰),未发现HIV-RNA阳性。在20份HBV-DNA阳性标本中,发现3份(15.0%)乙肝免疫学指标五项全阴的"窗口期"标本以及17份(85.0%)HBs Ag阴性而HBc Ab阳性的疑似HBV隐匿性感染标本。结论现行血清学EIA筛查方法对于HBV、HCV仍具有一定的输血残余风险,尤其是来自隐匿性HBV感染。在EIA检测后增加核酸检测(nucleic acid testing,NAT)筛查,有助于提高临床用血安全。同时说明国产核酸检测试剂具备较高的敏感性和特异性,试验过程机器运行状态良好,检测数据准确、可靠。     

核酸检测与酶免检测在宁夏地区无偿献血者血液筛查中的应用

目的:对ELISA和NAT检测结果进行分析,找出两种检测方法在血液筛查中的优势、劣势。方法:收集宁夏地区2016年1月到2016年12月无偿献血者标本,进行ELISA和NAT检测,并对检测数据进行比对分析。结果:两种检测方法比对中共检测标本60958份,酶免检测总阳性数为477份,阳性率为0.78%,NAT检测阳性数154份,阳性率为0.25%。ELISA双试剂阳性标本与核酸检测结果的符合率为65.14%,单试剂阳性标本与核酸检测结果的符合率为2.17%,灰区阳性标本与核酸检测结果符合率为0。ELISA检测阴性标本NAT检测阳性数为57例,全为HBV DNA阳性,经电化学发光检测乙肝两对半结果为50例是隐匿性乙肝感染,7例检测结果为阴性。结论:NAT检测假阳性率较ELISA低,ELISA方法漏检主要为隐匿性乙肝感染的漏检。NAT检测方法在献血者血液筛查中优于ELISA检测方法。     

免疫结合胶体金层析法和ELISA检测HBsAg用于口岸卫生检疫的风险评估

目的评估免疫结合胶体金层析法(dot immunochromatography gold assay,DICGA)和ELISA检测HBsAg在口岸卫生检疫中的风险.方法用ELISA对血清标本进行HBsAg检测,对阳性标本用DICGA复检,对复检阴性标本再用ELISA检测.比较两种方法的一致性.分析DICGA阴性,而ELISA阳性的标本数在各个吸光度区间的构成比.结果对10 566份出入境人员血清标本用ELISA进行两对半检测,对1 189份HBsAg阳性血清用DICGA进行复核检验,对其中328份DICGA阴性标本再次用ELISA检验,检出39份阳性,289份阴性.DICGA的敏感性为95.67%,准确性为96.72%,特异性为100%,两种方法的一致性(Kappa值)达91.48%.DICGA阴性但是ELISA阳性的标本数在各个吸光度区间的构成比分别是(1.5,1.0)17%,(1.0,0.5)50%,(0.5,0.105)100%.DICGA在(1.5,0.105)区间有一半以上HBsAg不能检出(56.52%),在(1.0,0.105)有77.78%的假阴性,对(0.5,0.105)则基本不能检出.对ELISA两种试剂的假阳性率分别为:34.66%(269/776)和4.84%(20/413).结论在口岸卫生检疫中,不宜单独用DICGA检测HBsAg.对ELISA需要选择质量高的试剂,每个实验室最好在使用前亲自傲试剂评估.     

绍兴市59例HBsAg阳性淘汰无偿献血者回访结果分析

目的:探讨不同HBsAg酶免试剂在血液筛查中的应用效果及与核酸检测的相关性。方法:使用进口超敏与国产HBsAg试剂对59例阳性淘汰的献血者进行回访检测,并用巢式PCR和乙肝三系指标对HB-sAg进行验证。结果:59例召回标本共检测出HBsAg阳性35例,其中进口超敏试剂34例,国产试剂21例;59例标本HBV-DNA检测,有29例DNA阳性,阳性率为49.2%。结论:目前市售的HBsAg酶免检测试剂均存在一定的生物学假阳性,进口超敏试剂质量优于国产试剂,作为采供血机构,为确保输血安全,应探索建立酶免技术与核酸诊断相结合的新的血液检测模式,以进一步提高血液检测能力。