子宫内膜上皮细胞与小鼠胚胎共培养对小鼠胚胎早期发育的影响

目的:采用子宫内膜上皮细胞与小鼠胚胎共培养,观察其对早期胚胎体外发育的影响。方法:对小鼠子宫内膜上皮细胞进行分离、培养鉴定,然后与体外受精的小鼠胚胎进行共培养,观察共培养对小鼠胚胎卵裂率、孵化率以及囊胚期胚胎总细胞数的影响。结果:与无上皮细胞相比,共培养明显促进了小鼠桑椹胚率(71.3%和61.2%,P<0.05),囊胚率(50.0%和39.7%,P<0.05),囊胚孵化率(34.8%和24.3%,P<0.05)和胚胎总细胞数(44.1和35.6,P<0.05)。结论:子宫内膜上皮细胞能够促进小鼠胚胎的体外发育,对早期胚胎的体外发育环境具有优化作用。     

转基因胚胎受体小鼠的妊娠期与产仔存活率

在以显微注射法制备１０多种基因构件的转基因小鼠的过程中,对所有的转基因胚胎受体小鼠（ＩＣＲ）的妊娠期及其产仔存活率进行了观察。结果：９８只怀孕受体小鼠中,７５只在移植后１９～２１ｄ产仔,产仔存活率为９３．５％（３７４／４００）;１６只在移植后２２～２４ｄ自然分娩,全部为死仔;７只在移植后２２～２３ｄ行剖宫产术,产仔存活率为６０．７％（１７／２８）。以上结果表明：受体母鼠的怀孕期与正常小鼠基本一致;过期妊娠受体鼠自然分娩,其产仔存活率极低（０％）,若采用剖宫取胎再寄养的方法,可大大提高过期妊娠受体鼠的产仔存活率。     

子宫内膜癌存活率受种族差异影响

美国国立卫生院(NIH)下属的国立癌症研究所(NCI)的一份研究分析报告显示,子宫内膜癌在高加索裔和非洲裔的美国人之间存在着生物学差异。在沃尔特·里德陆军医学中心(WRAMC)与其他研究机构联合进行的两项单独研究中,分别对4项子宫内膜癌临床试验中的患者结果与子宫内膜     

凋亡和坏死细胞输注对脓毒症小鼠存活率的影响

目的研究凋亡和坏死细胞对脓毒症小鼠存活率的影响。方法将BALB/c小鼠分为3组,分别为PBS对照组、凋亡细胞输注组和坏死细胞输注组,输注3d后行盲肠结扎穿孔,制作脓毒症模型,观察脓毒症小鼠的存活率和器官病理损伤。结果 PBS对照组小鼠2周存活率为44.6%,肺脏和肾脏组织出现一定程度的损伤;凋亡细胞输注组1周存活率为69.6%,较对照组显著提高(P=0.012),肺脏和肾脏组织损伤明显减轻;坏死细胞输注组1周存活率为31.6%,较对照组显著下降(P=0.035),肺脏和肾脏组织损伤明显加重。结论脓毒症造模前3d输注凋亡细胞可以减轻器官损伤,提高脓毒症小鼠的存活率,而输注坏死细胞可以加重器官损伤,降低存活率。     

氯胺酮对内毒素休克小鼠存活率的影响

目的 研究氯胺酮对内毒素休克小鼠72h存活率的影响。方法 实验小鼠随机分为阳性对照组（LPS组，n=23) 、氯胺酮1组（K1组，n=22)、氨胺酮2组（K2组,n=23)，各组小鼠均经尾静脉注射LPS（25mg/kg)，K1、K2组分别在LPS注射前30min肌肉注射氯胺酮（100mg/kg)，K2组还在LPS注射后1h、4h、7h皮下注射氨胺酮（20mg/kg)，观察72h存活率。结果 三组小鼠的72h存活率分别为21.74%、54.53%、69.57%，K1、K2组值分别显著（P＜0.05)、非常显著（P＜0.01)地高于LPS组。结论 氯胺酮可提高内毒素休克小鼠的72h存活率，此作用可能与其抑制LSP刺激后机体的炎症反应有关。     

小鼠胚胎干细胞克隆形成和传代的影响因素

目的:探讨昆明小鼠胚胎干细胞(ESC)分离后克隆形成和细胞传代的几种影响因素,对其特性作初步鉴定.方法:对比超排卵和自然受孕2种囊胚获取方法、囊胚培养液和高糖DMEM培养液2种培养液对其克隆形成和细胞传代的影响.对贴壁后形成的原代ESC克隆进行评分.稳定传代的一株ESC进行鉴定.结果:超排卵组、自然受孕组的内细胞团形成率(64.9% vs 68.2%)和原代ECS克隆形成率(10.1% vs 14.5%)比较,差异均无统计学意义(χ2=0.345和1.385,P=0.557和0.239).囊胚培养液组24 h囊胚孵出率明显高于DMEM培养液组(56.8% vs 17.1%)(χ2=33.026,P=0.001),原代ESC克隆形成率明显低于DMEM培养液组(35.2% vs 15.9%)(χ2=9.021,P=0.002).ICM的评分与ESC克隆传代能力相关(r=0.531,P＜0.001),直径70～100 μm、周边规则、隆起明显的ICM,ESC克隆传代持久.结论:高糖DMEM培养液对克隆的分离和传代有利.对ICM贴壁后形成的ESC克隆进行评分有助于确定挑选克隆传代的时机.     

胚胎发育期和冷冻保护剂剂量对Nakagata小鼠胚胎冷冻效果的影响

目的利用不同剂量的冷冻保护剂,对ICR和Km小鼠不同发育期的胚胎进行冷冻和解冻实验。探讨Nakagata小鼠胚胎玻璃化冷冻管方法,使用不同剂量的冷冻保护剂等因素对冷冻效果的影响。方法2细胞期胚胎在KSOM微滴培养液内分别培养到2细胞4、细胞和8细胞期胚胎,分别加入50μL,100μL,200μL的DAP213冷冻保护剂,利用Nakagata方法冷冻,解冻以及观测解冻后培养至囊胚期胚胎的冷冻效果。结果冷冻保护剂DAP213剂量和ICR,KM小鼠胚胎不同细胞发育期对冷冻效果具有显著的交互影响(P<0.01)。相对而言,冷冻保护剂剂量对结果的影响(P>0.05)低于胚胎细胞发育期对冷冻效果的影响(P<0.01)。结论冷冻保护剂的剂量和胚胎细胞发育期均会影响冷冻实验的结果。胚胎的细胞发育期对冷冻效果的影响更大。对2细胞期,4细胞期和8细胞期的胚胎进行冷冻。8细胞期胚胎的冷冻效果最好,4细胞期胚胎冷冻效果最差。利用Nakagata冷冻管方法建立小鼠胚胎冷冻库,100μL冷冻保护剂效果较好。不同小鼠的品系也可影响冷冻结果。     

控制性超排卵对胚胎植入前小鼠子宫内膜蛋白质表达的影响

目的研究控制性超排卵（COH）对胚胎植入前小鼠子宫内膜蛋白质表达的影响,探讨体外受精-胚胎移植时子宫内膜容受性的生物学标志物。方法将12只ICR雌性小鼠随机分为实验组和对照组,每组6只。实验组采取促排卵措施,对照组未作任何处理。通过双向电泳和质谱分析技术研究COH对小鼠子宫内膜蛋白表达的影响。结果实验组蛋白电泳图谱与对照组有明显差异,2倍以上差异表达蛋白总数为89个。截取其中16个蛋白质点进行了质谱分析,检测出9种有意义的差异表达蛋白。结论COH可导致子宫内膜多种蛋白质表达改变,通过筛选子宫内膜容受性的生物学标志物,可以为提高COH周期的胚胎种植率和妊娠率提供理论依据。     

单侧子宫结扎断离术对小鼠宫内胚胎处理因素的影响观察

目的探讨妊娠小鼠单侧子宫结扎断离术对小鼠宫内胚胎实验处理因素的影响。方法将妊娠9~18d(D9~D18)小鼠随机分为两组,对照组采用宫内双侧胚胎羊膜腔(D10~D12)和腹腔(D14~D16)注射生理盐水20μL,实验组采用单侧子宫结扎断离术,再行单侧宫内胚胎羊膜腔(D10~D12)和腹腔(D14~D16)注射20μL生理盐水,术后观察妊娠小鼠术后成活、分娩情况,及其子代鼠的发育学指标。结果与对照组比较,单侧子宫结扎断离术能够降低妊娠小鼠的流产率、妊娠鼠意外死亡率和死胎率,提高妊娠小鼠的活产率(P<0.05),并且对新生鼠的发育学指标没有影响(P>0.05)。结论采用妊娠小鼠单侧子宫结扎断离术进行宫内胚胎实验研究可以提高实验效率,且简单易行。     

单胚胎玻璃化冷冻对小鼠胚胎体外发育的影响

目的:比较单胚胎玻璃化冷冻与慢速冷冻对小鼠分裂期胚胎损伤和体外发育的影响,探讨使用玻璃化冷冻保存大量胚胎的可行性。方法:选择8-细胞胚胎随机进行改良的玻璃化和慢速冷冻,复苏后培养至囊胚孵出,计数胚胎复苏率、卵裂球死亡率、囊胚形成率、细胞团数、孵出率,并进行组间比较分析。结果:玻璃化冷冻组复苏率、卵裂球死亡率、囊胚形成率、孵出率、细胞团数分别为100%、12.7%、75.7%、66.4%、112,慢速冷冻组分别为87.1%、31.0%、35.5%、58.7%、78,除囊胚孵出率其余各指标两组间差异均具有统计学意义。结论:单胚胎玻璃化法冻存小鼠分裂期胚胎复苏后细胞成活率高,结构完整,更好的保持了胚胎的发育潜能。     

移植胎肝细胞对环磷酰胺处理小鼠存活率的影响

本文复制了小鼠免疫/造血功能抑制(IHS)模型,观察了移植胎肝细胞对IHS小鼠存活率的影响。结果发现,经静脉或脾内移植胎肝细胞(FLC)可延长IHS小鼠存活率,其效果以后一种移植途径为佳;同种FLC移植(C_(57)→ICR)和同系FLC移植(ICR→ICR)对IHS小鼠生存率延长效果类似。实验提示,移植FLC可能会改善IHS小鼠免疫和造血功能。     

内毒素和大肠杆菌繁殖对小鼠胚胎体外发育的影响

目的：通过了解内毒素和大肠杆菌繁殖对小鼠胚胎发育的影响,探讨污染胚胎对内毒素的耐受性及胚胎污染的解决办法。方法：将150枚小鼠2-细胞胚胎随机分成5组,A组作为对照,B、C组分别加入细菌内毒素0.25 EU/ml、0.5 EU/ml,D、E组均加入大肠杆菌,中途对E组换液,终止细菌污染。在第2天和第4天观察各组胚胎发育情况,对胚胎质量进行评估。结果：（1）对照组存活率和囊胚形成率均100%,内毒素B、C 2组存活率和囊胚形成率均为100%,囊胚形态学观察与对照组无差别。（2）D、E组第２天存活无统计学差异（P>0.05）,第4天E组囊胚形成率明显高于D组（P<0.01）,但囊胚质量较差。结论：菌体繁殖代谢对胚胎的影响大于单纯的内毒素,及时终止污染可部分缓解细菌污染对胚胎发育的影响。     

锌对小鼠胚胎肢芽细胞分化和增殖的影响

目的观察锌缺乏与锌过量对小鼠胚胎肢芽细胞分化的影响及其毒性作用.方法取12天龄昆明种小鼠胚胎的肢芽,应用微团培养技术,观察不同剂量的锌对肢芽细胞分化和增殖的影响.结果培养基中锌缺乏时或者培养基锌浓度达42 μmol/L时,均可明显抑制细胞分化和增殖（P〈0.01）.当培养基锌浓度为21 μmol/L或28 μmol/L时,对肢芽细胞分化和增殖均具有明显的促进作用,而锌浓度达35 μmol/L时,对细胞分化的促进作用转化为抑制作用但不影响细胞的存活.结论体外实验条件下,锌对小鼠胚胎肢芽细胞的分化和增殖表现为促进和抑制双重作用;缺锌及过量锌均可抑制细胞的分化并产生毒性作用.     

黄芪注射液对小鼠同种皮肤移植存活率的影响

目的探讨黄芪注射液对小鼠同种皮肤移植存活率的影响及对脾细胞糖皮质激素受体(GR)与血清皮质醇的调节作用。方法建立小鼠同种皮肤移植模型,通过腹腔注射给予黄芪注射液和环磷酰胺(CTX),观察黄芪注射液对同种移植物生存期的影响;采用受体放射配基结合分析和放射免疫分析方法,观察移植后不同时间小鼠脾细胞GR及血清皮质醇的改变以及黄芪注射液和环磷酰胺对其的影响。结果与对照组相比,黄芪组、黄芪+CTX组及CTX组移植皮片存活时间明显延长,差异有显著性(F=48.58,q=5.11~14.48,P<0.05)。对照组移植后第14天GR结合位点数明显降低,与未移植组比较,差异有显著性(F=48.44,q=10.95,P<0.05);CTX组GR结合位点数进一步降低,与对照组比较,差异有显著性(q=4.22,P<0.05);黄芪组GR结合位点数升高至正常水平,与对照组比较,差异有显著性(q=11.79,P<0.05),与未移植组比较,差异无显著性(q=0.84,P>0.05);黄芪与CTX合用后逆转CTX对GR结合位点数的影响(q=10.72,P<0.05)。对照组移植后第14天血清皮质醇水平明显升高,与未移植组比较,差异有显著性(F=29.46,q=7.64,P<0.05);CTX组血清皮质醇水平降低,与对照组比较,差异有显著性(q=3.46,P<0.05);黄芪组、黄芪+CTX组血清皮质醇水平升高,与对照组比较,差异有显著性(q=4.54、5.22,P<0.05)。结论黄芪注射液可以明显抑制同种移植排斥反应,提高移植物存活率,其作用机制可能与上调GR数量和血清皮质醇水平,从而使内源性糖皮质激素更好地发挥作用有关。     

小鼠胚胎的冷冻保存

1972年Whittingham等和Wilmut分别在超低温条件下冻存小鼠胚胎获得成功。20年来,先后研究出常规冷冻法、玻璃化法和快速冷冻法,已有十五种动物胚胎的冻存获得成功。这些方法和技术的出现极大地推动了低温生物学、畜牧业生产及医学的发展。胚胎冷冻保存现已成为实验动物长期保种的重要手段之一。应用冷冻胚胎技术建立实验动物胚胎库(embryo banking)可有效地防止种群的遗传漂变(genetic dreft)。遗传资源丢失和污染。     

OT对小鼠胚胎早期妊娠的影响

本文采用皮下注射外源性ＯＴ方法，观察了各种不同剂量的ＯＴ对小鼠胚胎早期妊娠的影响。结果显示：各种不同剂量的ＯＴ对小鼠胚胎早期妊娠有明显和极明显的抑制作用；对未妊娠小鼠血清中Ｅ２和Ｐ含量测定的结果表明：Ｅ２的浓度呈双相反应，ＯＴ低浓度时抑制其分泌，高浓度时促进其分泌。各种不同剂理的ＯＴ的Ｐ的分泌均呈抑制效应。提示ＯＴ对小鼠胚胎早期妊娠的抑制作用可能与它破坏了体内分泌微环境有关。     

PCB153诱导小鼠胚胎细胞凋亡对胚胎生长发育的影响

目的 探讨环境雌激素多氯联苯同系物PCB153对发育过程中小鼠胚胎细胞凋亡的影响.方法 于体外施予孕8.5 d小鼠胚胎不同浓度PCB153,应用植入后全胚胎培养技术培养胚胎;采用原位TUNEL技术观察胚胎细胞凋亡.结果 PCB153对胚胎发育具有明显影响且呈剂量-效应关系,且随PCB153浓度增加,凋亡细胞比值上升.结论 PCB153能诱导胚胎细胞凋亡,这与其致胚胎发育异常有关,可能是PCB153的致畸作用机制之一.     

小鼠胚胎玻璃化冷冻保存影响因素的研究

胚胎置玻璃化1液(VS-1)(含10%甘油 20%1.2一丙二醇 20?S的PBS液)中平衡10或17min后装管置4℃或18℃玻璃化2液(VS-2)(含25%甘油 25%1.2一丙二醇 20?S的PBS液)中。随即投入液氮冷冻保存。结果显示:在VS-1液中平衡10min组的胚胎获较高成活率;4℃的VS-2液显著地改善囊胚冷冻后成活率;桑椹胚冷冻效果优于囊胚。将解冻后120枚胚胎移植于12只受体鼠,获36只成活仔鼠。     

胚胎素对小鼠免疫功能的影响

从发育早期鸡胚中提取的胚胎素,是一种含蛋白质的生物制品,实验与临床的初步研究提示,本品具有免疫活性,对慢性肝炎有一定的疗效。现将胚胎素对小鼠免疫功能影响的结果报道如下:     

小鼠胚胎体外发育的影响因素分析

为了建立适宜的胚胎体外培养体系，本试验对小鼠２－细胞胚胎体外发育及其影响因素进行了研究。结果表明，２－细胞胚胎在供试的三种培养基中均可进一步发育；血清、ＣＯ２气体纯度、培养基水的纯度等均可影响到胚胎的发育，从而优化了胚胎体外培养的实验室条件和方法。