阿托伐他汀对糖尿病大鼠内皮祖细胞及视网膜病变影响的研究

目的探讨他汀类药物对糖尿病大鼠循环内皮祖细胞（EPCs）及视网膜病变的影响及作用机制。方法成年Wistar大鼠150只,随机分为2组。正常对照组（阴性组）,糖尿病组（阳性组）。注射链尿佐菌素（STZ）,造糖尿病大鼠模型。将糖尿病大鼠再随机分为3组：低剂量组（他汀10mg／Kg·d）,高剂量组（他汀20mg／Kg·d）,单纯糖尿病组。灌胃给药,对照组及单纯糖尿病组给予等量生理盐水。大鼠分别于3个月,6个月时按比例随机处死。取动脉血检测EPCs数量、取眼球固定后观察视网膜血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达情况。结果糖尿病大鼠造模成功率81％。3个月及6个月时,低剂量组存活率均较高剂量组及单纯糖尿病组有所增加（P〈0．05）。他汀类药物促进EPCs数量上升,低剂量组与对照组、糖尿病组、高剂量组比较,3个月及6个月时各组间均有统计学意义（P〉0．05）,高剂量组与对照组及糖尿病组比较无统计学差异（P〈0．05）。不同剂量的他汀类药物对视网膜VEGF蛋白表达情况：糖尿病组VEGF免疫阳性表达最强,高剂量组VEGF免疫阳性表达比糖尿病组减弱,低剂量治疗组VEGF免疫阳性表达最低。结论他汀类药物能够促进EPCs数量增加。小剂量他汀类药物可抑制糖尿病大鼠视网膜VEGF表达,减缓视网膜病变进展;并降低糖尿病大鼠的死亡率。     

阿托伐他汀对糖尿病大鼠视网膜核因子-κB表达的影响

目的 探讨他汀类药物对糖尿病大鼠视网膜核因子(NF)-κB表达的影响及其可能机制.方法 雄性SD大鼠60只,随机抽40只腹腔注射链脲佐菌素65 mg/kg建立糖尿病模型,余20只为正常对照组.成模大鼠随机分成两组,糖尿病非药物干预组及阿托伐他汀干预组.干预组予阿托伐他汀(2 mg·kg-1·d-1)灌胃,对照组及糖尿病非药物干预组给予等量饮用水.大鼠分别于3,6个月时按比例处死.取一眼视网膜组织抽提RNA,另一眼固定后做免疫组织化学观察.RT-PCR法扩增NF-κB基因,比较3组大鼠的NF-κB mRNA表达差异.免疫组织化学法观察NF-κB蛋白表达差异.结果 PCR结果示糖尿病大鼠视网膜NF-κB mRNA表达较正常大鼠明显增高(P＜0.05),药物干预的大鼠,NF-κB mRNA表达比糖尿病非药物干预组明显减少(P＜0.05).免疫组织化学结果示视网膜上,NF-κB主要分布在血管层,糖尿病大鼠视网膜中NF-κB阳性的细胞比正常组明显增多(P＜0.05),且着色较深.阿托伐他汀干预组NF-κB阳性的细胞比糖尿病大鼠明显减少(P＜0.05),且着色较浅.结论 阿托伐他汀能降低糖尿病大鼠视网膜中NF-κB mRNA及NF-κB蛋白质的表达,减缓视网膜病变进展.     

重组人生长激素对荷人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤生长及VEGF表达的影响

目的:探讨重组人生长激素frhGH)对荷人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠移植瘤生长及VEGF表达的影响.方法:免疫细胞化学染色法鉴定SGC-7901细胞株GHR表达状态,30只接种皮下移植瘤的裸鼠随机分为:对照组(生理盐水0.2 mL/d).低剂量rhGH组[0.5 U/(kg·d)],高剂量rhGH组[2.5 U/(kg·d)],连续给药14 d,观察并记录裸鼠体质量和肿瘤体积,酶联免疫吸附法测定血清VEGF含量,免疫组织化学法检测胃癌组织中VEGF蛋白表达,RT-PCR检测VEGFmRNA表达.结果:SGC-7901细胞株GHR呈强阳性表达.自rhGH给药第3天起,rhGH给药组与对照组肿瘤体积相差悬殊(P＜0.05),且高剂量rhGHVg低剂量rhGH促肿瘤生长效应更加明显(P＜0.05),3组间裸鼠体质量差别不明显(P＞0.05).裸鼠血清VEGF含量,与对照组和低剂量rhGH组相比,高剂量rhGH组血清中VEGF水平明显升高,差别具有统计学意义(252.94 ng/L±15.32ng/L VS 49.94 ng/L4±5.73 ng/L,167.60 ng/L±9.54 ng/L.均P＜0.05).肿瘤组织VEGF蛋白的表达,对照组VEGF表达呈中度阳性;低剂量rhGH组和高剂量rhGH组VEGF表达量高,呈强阳性.肿瘤组织VEGF mRNA表达水平,高剂量rhGH组VEGF相对表达量明显高于对照组和低剂量rhGH组,差别具有统计学意义(0.647±0.0447 vs 0.3234±.0258,0.412±0.035 1.均P＜0.05).结论:rhGH能促进GHR阳性表达的SGC-7901移植瘤生长,并促进VEGF表达.     

NO-1886抑制糖尿病小型猪视网膜血管内皮生长因子表达

目的　观察血管内皮生长因子 (VEGF)在早期糖尿病视网膜病变中的表达以及NO 1886对 2型糖尿病小型猪血糖的影响 ,探讨NO 1886对视网膜VEGF的作用。方法　贵州小香猪共 15头 ,随机分为 3组 :正常对照组喂普通猪饲料 (controldiet,CD) ,实验组喂高脂高蔗糖饲料 (highfat highsucrosediet,HFSD) ,治疗组 (HFSD +1%NO 1886 )前 3个月喂高脂高蔗糖饲料 ,从第 4个月初开始 ,在高脂高蔗糖饲料里加 1%NO 1886 ,实验周期为 8个月。用免疫组织化学和RT PCR技术检测VEGF在早期糖尿病小型猪视网膜的表达以及观察NO 1886对糖尿病小型猪视网膜VEGF的影响。结果　VEGF免疫阳性反应在正常对照组视网膜中表达较弱 ,其表达范围局限于视网膜节细胞层的部分细胞胞浆。而在实验组 ,VEGF蛋白的表达比正常对照组明显增加 ,胞质呈深棕黄色 ,且阳性反应细胞数增多。除了在内核层和节细胞表达外 ,VEGF阳性反应又在视杆内节和色素上皮细胞中出现 ,使其表达的空间范围比正常对照组明显增加 ,正常对照组VEGF免疫阳性反应分布于靠近视网膜内核层的少数神经节细胞的胞浆中。而实验 +NO 1886组VEGF免疫阳性仅见神经节细胞胞质中 ,阳性细胞数明显少于实验组 ,但较正常对照组为多。正常对照组VEGFmRNA表达很低 ,平均仅有 4 8.4OD ;实验组VE     

阿托伐他汀对糖尿病心肌梗死大鼠视网膜及心肌血管新生双向性研究

目的探讨阿托伐他汀对糖尿病心肌梗死大鼠视网膜心肌血管新生的双向性作用及机制。方法雄性SD大鼠80只,随机分为3组。正常组30只,心梗组(AMI组)25只,糖尿病心梗组(AMI+DM组)25只。通过结扎前降支建立心肌梗死模型,腹腔注射链脲佐菌素65 mg/kg建立糖尿病模型。糖尿病心肌梗死模型以结扎前降支先建立心肌梗死模型再腹腔注射脲佐菌素建立糖尿病模型,造模成功后,开始以2.5 mg/250 g剂量阿托伐他汀溶液灌胃,正常组以同等剂量生理盐水灌胃,大鼠分别于4个月时按比例随机处死。取心脏、视网膜做免疫组化观察心肌组织、视网膜血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达情况。结果 AMI组心肌细胞VEGF表达高于正常组心肌细胞VEGF表达[(7158.4±525.2) vs.(3263.5±454.5)ng/L],AMI+DM组VEGF表达也高于正常组[(7058.4±435.7) vs.(3263.5±454.5)ng/L],差异均有统计学意义(P0.05);AMI+DM组视网膜VEGF表达低于正常组VEGF表达[(2671.2±424.1)vs.(3345.5±321.5)ng/L],也低于AMI组[(2671.2±424.1)vs.(3097.5±310.7)ng/L],差异均有统计学意义(P0.05)。结论他汀类药物能够在促进心肌梗死心肌VEGF蛋白表达的同时抑制糖尿病大鼠视网膜VEGF表达,在延缓视网膜病变进展的同时促进梗死心肌部位血管新生。     

褪黑素对糖尿病大鼠视网膜中糖基化终产物及其受体表达的影响

目的研究褪黑素(MT)对糖尿病大鼠视网膜中糖基化终产物(AGE)和其受体(RAGE)表达的影响。方法清洁级雄性Wistar大鼠80只,体重180~200 g,随机分为正常对照组、模型对照组、低剂量MT组和高剂量MT组。模型对照组、低剂量MT组和高剂量MT组给予高脂高糖饮食配合链尿佐菌素腹腔注射诱导糖尿病模型。造模成功后,低剂量(10 mg·kg~(-1)体重·d~(-1))和高剂量(20 mg·kg~(-1)体重·d~(-1))MT灌胃16 w。HE染色观察大鼠视网膜病理学改变,免疫组化(SABC)法检测各组大鼠视网膜中AGE和RAGE表达的变化。结果 16 w后,HE染色观察,低剂量和高剂量MT组视网膜病理改变程度均较模型对照组轻。与模型对照组比较,免疫组化法检测低剂量和高剂量MT组AGE和RAGE蛋白阳性表达量明显降低(P0.05)。结论 MT可改善糖尿病大鼠视网膜形态变化,并可下调AGE和RAGE在糖尿病大鼠视网膜中的表达。     

三七总甙对1型糖尿病大鼠早期肾脏病变保护作用的研究

目的:探讨三七总甙(PNS)防治糖尿病肾病的作用及机制。方法:SD系大鼠50只,随机分为正常组、糖尿病模型组、PNS低剂量组、PNS高剂量组、卡托普利组,每组10只。采用尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)建立1型糖尿病大鼠模型,随机分为PNS低、高剂量组分别予PNS100、200mg/(kg.d)灌胃4周后,测定空腹血糖(FBG)、24h尿微量白蛋白及用免疫组织化学方法检测大鼠肾组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达水平。结果:糖尿病组大鼠FBG、24h尿微量白蛋白及VEGF表达明显升高,PNS高剂量组各项指标均明显降低。结论:PNS能有效防治糖尿病肾病的作用可能与肾组织中VEGF水平降低有关。     

水蛭素对缺血性脑卒中大鼠微血管新生及HIF-VEGF-Notch通路的影响

目的 探讨水蛭素对缺血性脑卒中大鼠脑组织微血管新生及缺氧诱导因子(HIF)-血管内皮生长因子(VEGF)-Notch通路的影响。方法 将120只SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、阳性对照组、水蛭素低剂量组(0.5 mg/kg)和水蛭素高剂量组(1.0 mg/kg),每组20只。采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),以尼莫地平为阳性对照药物(1 mg/kg),阳性对照组及水蛭素各剂量组连续腹腔注射7 d,应用Longa法对各组大鼠进行神经功能学评分,干/湿重法测定脑组织含水量,2,3,5-氯化三苯基四氯唑(TTC)染色观察脑组织梗死体积,免疫组化法测定梗死灶周围微血管密度(CD31)表达情况,免疫印迹法(Western Blot)检测脑组织HIF-VEGF-Notch通路相关蛋白的表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠神经功能评分增高(P<0.01),脑组织含水量及脑梗死体积增大(P<0.01),脑组织中CD31阳性细胞表达及HIF-1α、VEGF、Notch1的蛋白表达增加(P<0.05或P<0.01)。水蛭素低剂量组、水蛭素高剂量组神经功能评分...     

糖尿病性视网膜病变血管内皮生长因子与糖基化终末产物的关系

目的 研究糖尿病性视网膜病变(DR)血管内皮细胞生长因子(VEGF)与蛋白质糖基化终末产物(AGEs)的关系.方法 建立糖尿病大鼠模型,随机分为正常对照组(M),糖尿病1个月组(M1)、3个月组(M3)、5个月组(M5).在不同时间点取视网膜,在视网膜切片上行VEGF免疫组化,同时在透射电镜下观察各组视网膜超微结构,并检测动脉血清中AGEs水平.结果 视网膜VEGF免疫组化染色显示,M3组VEGF阳性表达率为33.3%,M5组为88.9%;VEGF免疫组化阳性组的AGEs水平(91.31±17.28)高于阴性组(68.60±14.38),差异有统计学意义(F=5.80,P=0.029 4).M1组与M组相比AGEs水平增加,但差异无统计学意义(P>0.05),而M3、M5组与M组相比AGEs水平明显增加(P<0.05,P<0.01).透射电镜观察:M 组未见视网膜微血管异常改变,从M1组开始出现异常改变,以M5组最明显,表现为基底膜节段性增厚,内皮细胞肿胀变形,周细胞核异染色质浓集居边,线粒体肿胀变性,甚至呈空泡状.结论 糖尿病视网膜病变模型AGEs水平升高与VEGF表达增强一致.     

阿托伐他汀对兔动脉粥样硬化斑块的干预作用

目的：探讨阿托伐他汀对实验兔动脉粥样硬化模型血脂、血清血管内皮生长因子（VEGF）水平及动脉粥样斑块内VEGF蛋白水平的影响。方法20只雄性新西兰大白兔,按随机数字表法等分为对照组、模型组、低剂量他汀组和高剂量他汀组,其中对照组采用普通饲料喂养,后3组均采用高脂饲料喂养,4w后行腹主动脉球囊损伤,模型组不加其他处理,低剂量他汀组予5 mg/（kg.d）,高剂量他汀组予10 mg/（kg.d）。分别于0w、6w和12w检测各组血清甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-C）、血管内皮生长因子（VEGF）水平,12w后行腹主动脉HE染色观察动脉粥样硬化改变,检测斑块内VEGF蛋白和VEGF mRNA的表达。结果与对照组相比,模型组、低剂量他汀组、高剂量他汀组在6w和12w的血LDL-C、TG、TC、VEGF均显著增高（P＜0.01）。与模型组比较,他汀组血LDL-C、TG、TC、VEGF在第6w和12w有明显降低,但高剂量他汀组降低更为明显（P＜0.05）;同时,他汀组动脉粥样硬化斑块中VEGF蛋白和mRNA表达均下降。结论阿托伐他汀可降低兔动脉粥样硬化模型的血脂水平,且呈剂量依赖性;同时还可下调AS斑块内VEGF的表达水平。