硒对砷致人脐静脉血管内皮细胞抗氧化功能及血管细胞黏附分子-1和胞间黏附分子-1表达的影响

目的 观察硒对不同剂量砷致体外培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)抗氧化功能及胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响.方法 调节处于对数期的HUVEC细胞密度为1.0×105/ml,分别加入0(含10％标准胎牛血清,对照)和砷浓度为0.05、0.1、0.5、1.5、3.0、6.0、12.0 μmol/L的三氧化二砷溶液及在此基础上加入0.1 μmol/L亚硒酸钠溶液培养48 h.采用分光光度法检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ICAM-1和VCAM-1的表达.结果 随着砷暴露浓度的升高,HUVEC细胞培养液中SOD、GSH-Px活力均呈下降趋势,而MDA含量和ICAM-1、VCAM-1的表达呈升高趋势.与对照组相比,砷浓度为0.1～12.0μmol/L时,HUVEC细胞培养液中SOD 、GSH-Px活力均降低,ICAM-1的表达均升高,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);砷浓度为0.5～12.0 μmol/L时,HUVEC细胞培养液中MDA的含量和VCAM-1的表达均增加,差异有统计学意义(P＜0.01).砷浓度为0.05、0.5μmol/L时,加硒组HUVEC细胞培养液中SOD活力均高于不加硒组,差异有统计学意义(P＜0.05);砷浓度为0.05、0.1μmol/L时,加硒组HUVEC细胞培养液中GSH-Px活力均高于不加硒组,MDA含量和ICAM-1、VCAM-1的表达均低于不加硒组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 一定浓度的砷可使血管内皮细胞抗氧化功能降低,脂质过氧化反应增强,黏附分子表达增强,而硒可在一定程度上拮抗砷的损伤作用.     

莱菔硫烷对血管内皮细胞粘附分子表达影响

目的 研究莱菔硫烷对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞(ECV304)的细胞中粘附分子(ICAM-1)和血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)mRNA表达影响以及转录机制。方法 采用ECV304细胞为研究对象,用实时定量PCR方法(real-time PCR)检测ICAM-1和VCAM-1的mRNA表达水平,用免疫荧光法检测转录因子(NF-κB)向核内转位的情况。结果 用5,10,20μmol/L莱菔硫烷作用再用脂多糖刺激,细胞中ICAM-1mRNA表达量下降,分别为对照组的2.3,1.5和1.1倍,呈一定剂量-效应关系,与脂多糖组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);5μmol/L莱菔硫烷能使脂多糖诱导的VCAM-1 mRNA表达降低为1.4倍,而10,20μmol/L莱菔硫烷则完全抵消了脂多糖对VCAM-1 mRNA的诱导,2组VCAM-1 mRNA的表达均降低为对照组的0.4倍,与脂多糖组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);10μmol/L莱菔硫烷作用后,细胞核中绿色荧光明显弱于脂多糖单独处理组,表明莱菔硫烷可抑制脂多糖诱导的NF-κB的核转位。结论 莱菔硫烷可通过阻断NF-κB的核转位来抑制脂多糖诱导的ECV304细胞ICAM-1和VCAM-1 mRNA的表达。     

同型半胱氨酸体外对VCAM-1的表达及内皮单核细胞黏附的影响

目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)对血管内皮细胞VCAM-1的表达及内皮-单核细胞黏附率的影响。方法:体外培养的大鼠主动脉内皮细胞通过区组接种随机分为5组,分别用0、0.01、0.1、1.0、5.0mmol/LHcy干预24h后,检测培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性、丙二醛(MDA)浓度及内皮-单核细胞黏附率;免疫细胞化学法检测NF-кB蛋白的表达;Hcy干预8h后检测VCAM-1mRNA表达量。结果:与对照及0.01mmol/LHcy组相比,0.1～5.0mmol/LHcy可明显降低SOD、GSH-Px的活性,增加MDA的生成量;上调NF-кB、VCAM-1的表达,促进内皮-单核细胞黏附。结论:Hcy可能通过自身巯基氧化激活NF-кB,上调VCAM-1等黏附分子的表达,促进内皮-单核细胞的黏附,这可能是Hcy致动脉粥样硬化(AS)的机制之一。     

子痫前期孕妇胎盘及血清中AT1-AA和VCAM-1表达水平变化及其与病情严重程度关系

目的 探讨子痫前期孕妇胎盘及血清中血管细胞黏附因子-1(vascular cell adhesion factor-1,VCAM-1)和抗血管紧张素Ⅱ1型受体自身抗体(anti-angiotensin II type 1 receptor autoantibody,AT1-AA)表达水平,并探讨其与病情严重程度的关系。 方法 选取30例正常分娩孕妇(对照组)、30例子痫前期孕妇(子痫前期组)和30例重度子痫前期孕妇(重度子痫前期组)。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测3组孕妇分娩前外周血清中VCAM-1和AT1-AA水平,采用Real-TimePCR技术检测3组胎盘组织中VCAM-1 mRNA和AT1-AA mRNA表达水平。 结果 3组孕妇外周血中VCAM-1和AT1-AA、胎盘组织中VCAM-1 mRNA和AT1-AA mRNA表达水平差异均存在统计学意义(P<0.05),重度子痫前期组(血清VCAM-1、AT1-AA含量以及组织VCAM-1,AT1-AA1mRNA表达水平分别为[(39.8±13.5)μg/L、(148.7±12.7 )ng/L、(0.67±0.15)、(0.59±0.14)]高于对照组[(42.7±5.5)μg/L、(59.8±6.7)ng/L,(0.20±0.04)、(0.18±0.05)]和子痫前期组[(99.2±8.7)μg/L、(113.7±10.8)ng/L,(0.35±0.09)、(0.33±0.10)],子痫前期组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。重度子痫前期组和子痫前期组孕妇中,外周血VCAM-1和AT1-AA表达水平呈正相关(P<0.05),胎盘组织中VCAM-1 mRNA和AT1-AA mRNA表达水平呈正相关(P<0.05)。 结论 子痫前期孕妇胎盘及血清中VCAM-1和AT1-AA表达上调,且与子痫前期严重程度密切相关,子痫前期发生可能与AT1-AA诱导VCAM-1表达有关。     

碳纳米管暴露致大鼠主动脉血管内皮损伤作用的研究

目的探讨碳纳米管暴露致大鼠主动脉血管内皮损伤作用的机制。方法通过气管滴注染毒Wistar大鼠,观察不同剂量(0,3.5,17.5 mg/kg)和不同时间(7 d和30 d)的碳纳米管暴露后大鼠血清中氧化应激指标谷胱甘肽(GSH)、超氧阴离子(O_2~-·)的变化水平;利用酶联免疫吸附方法测定血清中可溶性血管细胞粘附分子-1(sICAM-1)和可溶性细胞间粘附分子-1(sVCAM-1)的表达水平;利用免疫组织化学方法观察主动脉血管内皮中血管细胞粘附分子-1(ICAM-1)和细胞间粘附分子-1(VCAM-1)的表达水平,同时采用粒径相当的纳米碳黑作为阴性对照和二氧化硅作为阳性对照。结果碳纳米管染毒组机体发生氧化应激,而且在一定范围内存在剂量和时间依赖关系;血清中sICAM-1、sVCAM-以及主动脉血管内皮ICAM-1和VCAM-1均有不同程度的过度表达,随着染毒剂量和染毒时间的增加而升高;与对照组比较,碳纳米管暴露组机体氧化损伤更为严重。结论碳纳米管暴露致机体发生氧化应激进而诱导细胞粘附分子ICAM-1和VCAM-1的表达,使血管内皮功能发生紊乱,促进动脉粥样硬化的形成。     

瓦斯爆炸伤对大鼠肺组织核因子_KB及细胞间黏附分子-1表达的影响及意义

目的研究瓦斯爆炸伤肺组织中核因子kB(NF-kB)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达及二者之间关系。方法建立瓦斯爆炸伤大鼠模型,用地高辛标记NF-kB cDNA探针检测肺组织NF-kB mRNA的表达,用免疫组化SP法检测肺组织NF-kB及ICAM-1的表达。结果瓦斯爆炸伤后各实验组大鼠肺组织中NF-kB mRNA及其蛋白表达、ICAM-1的蛋白表达均较对照组明显增多,在伤后2 h增多最明显。肺组织病理学检查显示,瓦斯爆炸伤后,部分气管黏膜上皮脱落、管壁明显充血、水肿、中性粒细胞浸润；肺泡出血、水肿、大量炎细胞浸润。电镜示Ⅱ型肺泡上皮细胞变性脱落,改变明显。结论瓦斯爆炸伤致NF-kB活化,并促进ICAM-1的表达,与急性肺损伤关系密切。     

钙敏感受体(CaR)调节动脉粥样硬化斑块形成的机制研究

目的观察钙敏感受体(CaR)的表达变化对动脉粥样硬化斑块形成的影响。方法 30只ApoE-/-小鼠,体重18~25 g,随机选择10只分为空白对照组、CaR激动剂(GdCl3)(50 mg/kg)组、CaR抑制剂(NPS2390)(100 mg/kg)组以灌胃的方式给药,每周2次,高脂饮食10周后处死;通过腹主动脉介入方法测量血压;通过全自动生化分析仪及血生化测定试剂盒检测总TC、TG、HDL含量和LDL含量;光镜下观测各组大鼠颈动脉横切面测量颈动脉内膜和中膜厚度。ELISA法检测血清血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-l)和外周血管假性血友病因子(vWF)水平;Western blot检测细胞内细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和CC类趋化因子受体2(CCR2)蛋白的表达情况。结果与空白对照组比较,GdCl3组内膜增厚程度、中膜脂质的沉积范围和TC、TG和LDL水平均明显降低,而HDL明显升高;NPS2390组内膜增厚程度、中膜脂质的沉积范围和血压、TC、TG和LDL均明显升高,而HDL水平明显降低;ELISA法检测结果显示:与空白对照组比较,GdCl3组上清中VCAM-1、MCP-1和vWF含量均明显降低;而NPS2390组细胞培养的上清中VCAM-1、MCP-1和vWF含量均明显增加;Western blot检测结果发现:与空白对照组比较,GdCl3组ICAM-1和CCR2的表达均明显下降;而NPS2390组ICAM-1和CCR2的表达均明显增强(P0.05)。结论 CaR可以通过影响相关炎性因子的分泌和蛋白的表达来抑制动脉粥样硬化斑块的形成。     

铁调素对NF-κB介导血管内皮细胞炎症反应的影响

目的探讨铁调素(hepcidin)对血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC)炎症通路中核转录因子κB(Nuclear Factor-κB,NF-κB)家族的影响。方法使用不同浓度的人铁调素处理人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell;HUVEC)24h后,利用蛋白印迹技术(Western blot)检测细胞中核转录因子κB抑制蛋白α(inhibitor of NF-κB;IκBα)、细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的蛋白表达;免疫荧光法观察NF-κB p65转核、ICAM-1蛋白表达;体外粘附实验检测干预后的HUVEC的粘附能力。结果铁调素能剂量依赖的降低HUVEC中IκBα及促进ICAM-1表达,其中干预剂量大于300 ng/ml处理组时的相比对照组差异均具有统计学意义(P<0.05);激光共聚焦成像结果显示,600 ng/ml铁调素处理24h后,HUVEC中NF-κB p65转入核内,ICAM-1蛋白表达增加;粘附实验的结果显示,剂量量大于75 ng/ml铁调素处理能剂量依赖性的上调HUVEC的粘附能力,与对照组相比差异均具有统计学意义(P<0.05)结论铁调素可诱导血管内皮细胞IκBα的下调,促使NF-κB p65转核,升高血管内皮细胞ICAM-1的表达水平。铁调素可通过调控NF-κB通路介导血管内皮细胞炎症反应。[营养学报,2014,36(1):31-34]     

铁调素对NF-κB介导血管内皮细胞炎症反应的影响北大核心CSCD

目的探讨铁调素(hepcidin)对血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC)炎症通路中核转录因子κB(Nuclear Factor-κB,NF-κB)家族的影响。方法使用不同浓度的人铁调素处理人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell;HUVEC)24h后,利用蛋白印迹技术(Western blot)检测细胞中核转录因子κB抑制蛋白α(inhibitor of NF-κB;IκBα)、细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的蛋白表达;免疫荧光法观察NF-κB p65转核、ICAM-1蛋白表达;体外粘附实验检测干预后的HUVEC的粘附能力。结果铁调素能剂量依赖的降低HUVEC中IκBα及促进ICAM-1表达,其中干预剂量大于300 ng/ml处理组时的相比对照组差异均具有统计学意义(P<0.05);激光共聚焦成像结果显示,600 ng/ml铁调素处理24h后,HUVEC中NF-κB p65转入核内,ICAM-1蛋白表达增加;粘附实验的结果显示,剂量量大于75 ng/ml铁调素处理能剂量依赖性的上调HUVEC的粘附能力,与对照组相比差异均具有统计学意义(P<0.05)结论铁调素可诱导血管内皮细胞IκBα的下调,促使NF-κB p65转核,升高血管内皮细胞ICAM-1的表达水平。铁调素可通过调控NF-κB通路介导血管内皮细胞炎症反应。[营养学报,2014,36(1):31-34]     

瓦斯爆炸伤对大鼠肺组织核因子κB及细胞间黏附分子-1表达的影响及意义

目的研究瓦斯爆炸伤肺组织中核因子κB（NF-κB）及细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的表达及二者之间关系.方法建立瓦斯爆炸伤大鼠模型,用地高辛标记NF-κB cDNA探针检测肺组织NF-κB mRNA的表达,用免疫组化SP法检测肺组织NF-κB及ICAM-1的表达.结果瓦斯爆炸伤后各实验组大鼠肺组织中NF-κB mRNA及其蛋白表达、ICAM-1的蛋白表达均较对照组明显增多,在伤后2h增多最明显.肺组织病理学检查显示,瓦斯爆炸伤后,部分气管黏膜上皮脱落、管壁明显充血、水肿、中性粒细胞浸润;肺泡出血、水肿、大量炎细胞浸润.电镜示Ⅱ型肺泡上皮细胞变性脱落,改变明显.结论瓦斯爆炸伤致NF-κB活化,并促进ICAM-1的表达,与急性肺损伤关系密切.     

乳腺癌患者血清血管细胞黏附分子1 B7-同源物2及组织分泌型蛋白Dickkopf-1 血管内皮生长因子水平变化和临床意义分析

目的 探讨乳腺癌患者血清血管细胞黏附分子1(VCAM-1)、B7-同源物2(B7-H2)及组织分泌型蛋白Dickkopf-1(DKK-1)、血管内皮生长因子(VEGF)水平变化和临床意义。方法 选取2020年2月—2021年7月间嘉兴市妇幼保健院收治的乳腺癌患者50例,另收集同期健康女性志愿者30例为健康对照组。采集空腹外周静脉血4 ml,酶联免疫吸附法检测血清VCAM-1、B7-H2浓度。术中采集乳腺癌患者的肿瘤病灶组织和癌旁正常组织,Western Blot检测不同组织标本中DKK-1、VEGF蛋白表达。收集乳腺癌患者和健康女性志愿者的人口学资料,以及乳腺癌患者的临床病理资料。术后对乳腺癌患者进行1年随访,记录不良预后发生情况。结果 乳腺癌组血清VCAM-1浓度(67.81±19.27)ng/ml、B7-H2浓度(484.29±31.70)μg/L明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。乳腺癌组织中DKK-1蛋白相对表达量(4.46±1.32)、VEGF蛋白相对表达量(4.81±1.56)明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.01)。血清VCAM...     

妊娠期高血压疾病患者胎盘黏附分子的表达与意义

目的 观察妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管内皮黏附分子-1(VCAM-1)的表达,探讨它们与妊娠期高血压疾病的关系及意义.方法 收集妊娠期高血压疾病患者52例(疾病组),其中妊娠期高血压11例、轻度子痫前期18例和重度子痫前期23例;正常孕妇26例作为对照组.采用HE染色和免疫组化SP法对胎盘组织进行检测并用图像分析测量软件观察、分析ICAM-1、VCAM-1阳性表达情况.结果 疾病组胎盘绒毛毛细血管内皮细胞ICAM-1和VCAM-1阳性表达率[78.85%(41/52)和75.00%(39/52)]均明显高于对照组[26.92%(7/26)和23.08%(6/26)](P<0.01);重度子痫前期患者[100.00%(23/23)和100.00%(23,23)]明显高于轻度子痫前期患者[77.78%(14/18)和72.22%(13/18)]和妊娠期高血压患者[36.36%(4/11)和27.27%(3/11)](P<0.05或<0.01),轻度子痫前期患者明显高于妊娠期高血压患者(P<0.05).疾病组胎盘绒毛合体滋养细胞ICAM-1和VCAM-1的阳性表达率[38.46%(20/52)和44.23%(23/52)]明显低于对照组[100.00%(26/26)和96.15%(25/26)](P<0.01);重度子痫前期患者[8.70%(2/23)和13.04%(3/23)]明显低于轻度子痫前期患者[44.44%(8/18)和50.00%(9/18)]和妊娠期高血压患者[90.91%(10/11)和100.00%(11/11)](P<0.05或<0.01),轻度子痫前期患者明显低于妊娠期高血压患者(P<0.05).结论 胎盘绒毛毛细血管内皮细胞及绒毛合体滋养细胞ICAM-1、VCAM-1的异常表达参与了妊娠期高血压疾病血管内皮损伤的病理生理过程.     

支气管哮喘患儿微量元素与血清黏附因子水平及相关性分析

目的探讨小儿支气管哮喘微量元素与血清黏附因子水平及相关性。方法选择支气管哮喘患儿87例作为观察组,同时选择健康儿童60例作为对照组,分别检测两组儿童的微量元素及ICAM-1、VCAM-1检测。结果观察组Zn、Ca、Fe较对照组有显著性下降(P0.05),Cu、Mg较对照组虽略有变化但无统计学差异(PO.05)。观察组患儿较对照组ICAM-1、VCAM-1均出现显著性升高(PO.05)。ICAM-1与Zn、Ca、Fe显著负相关,与Cu、Mg未见显著相关性(PO.05)。VCAM-1与Zn、Ca、Fe显著负相关,与Cu、Mg未见显著相关性(PO.05)。结论支气管哮喘患儿微量元素水平失衡与ICAM-1、VCAM-1紊乱密切相关,其共同参与支气管哮喘发病过程。     

胎盘组织中IGFBP-1、VCAM-1、AQP3与妊娠期糖尿病的相关性

目的探究妊娠期糖尿病(GDM)患者胎盘组织中胰岛素生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、水通道蛋白3(AQP3)与胰岛素抵抗及妊娠结局的关系。方法选取郑州大学附属南阳市中心医院120例单胎妊娠的GDM患者(GDM组)及同期接受分娩的80例糖耐量正常者(健康对照组)为研究受试者。分娩后收集胎盘组织1 g,检测并比较两组受试者IGFBP-1、VCAM-1、AQP3基因表达差异及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)水平,经Pearson相关分析评估GDM患者IGFBP-1、VCAM-1、AQP3基因表达与胰岛素指标的相关性。根据GDM组不良妊娠结局发生情况将其分为结局正常组及结局异常组两亚组,分别比较不同妊娠结局亚组间IGFBP-1、VCAM-1、AQP3基因表达差异,经Spearman相关分析评估GDM患者IGFBP-1、VCAM-1、AQP3基因表达与妊娠结局之间的相关性。结果 GDM组胎盘组织中IGFBP-1、AQP3的mRNA相对表达量及HOMA-β水平显著低于健康对照组,VCAM-1的mRNA相对表达量、HOMA-IR水平显著高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关分析,GDM组患者IGFBP-1、AQP3的mRNA相对表达量与HOMA-IR均具有负相关性(P<0.05),与HOMA-β呈正相关性(P<0.05),而VCAM-1与HOMA-IR具有正相关性(P<0.05),与HOM A-β呈负相关性(P<0.05);GDM组胎盘组织中IGFBP-1、AQP3的mRNA相对表达量显著低于健康对照组,VCAM-1的mRNA相对表达量显著高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关分析,GDM组患者妊娠结局与IGFBP-1、AQP3的mRNA相对表达量具有负相关性(P<0.05),与VCAM-1 mRNA相对表达量具有正相关性(P<0.05)。结论胎盘组织中IGFBP-1、VCAM-1、AQP3对评估GDM患者胰岛素抵抗及妊娠结局有重要意义。     

藤黄酸通过YAP信号通路发挥对高糖诱导的内皮损伤的保护作用

目的 探讨藤黄酸在高糖诱导的内皮损伤中的保护作用及可能的作用机制。方法 人脐静脉内皮细胞（HUVEC）分5组,对照组给与低糖培养基培养,模型组和藤黄酸低剂量组、中剂量组和高剂量组均给与40mmol/L葡萄糖培养基培养,藤黄酸各给药组分别给与0.2μM、0.4μM、0.8μM藤黄酸处理,MTT检测各组细胞活力,流式细胞术检测各组凋亡,WB检测凋亡蛋白Cl-cas-3和Cl-cas-9表达,收集各组细胞上清液,检测氧化应激指标:ROS、MDA、NO以及粘附分子ICAM-1、VCAM-1水平,WB检测YAP信号通路蛋白总YAP（t-YAP）蛋白和细胞核中YAP（n-YAP）蛋白表达量。在藤黄酸处理基础上,在HUVEC细胞中过表达YAP,MTT检测细胞活力,WB检测t-YAP和n-YAP蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组及各给药组HUVEC细胞活性明显降低、凋亡率显著增加,凋亡蛋白Cl-cas-3和Cl-cas-9表达增加,细胞中ROS、MDA水平增加,NO水平降低,ICAM-1、VCAM-1水平增加,t-YAP和n-YAP蛋白表达增加（P<0.05）,与模型组比较,藤黄酸各剂量组细胞活力显著增加、凋亡率显著降低,凋亡蛋白Cl-cas-3和Cl-cas-9表达降低,细胞中ROS、MDA水平降低,NO水平升高,ICAM-1、VCAM-1水平降低,t-YAP和n-YAP蛋白表达降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。藤黄酸+YAP组细胞活性显著低于藤黄酸组（P<0.05）,t-YAP和n-YAP蛋白显著高于藤黄酸组（P<0.05）。结论 藤黄酸可以抑制高糖诱导的HUVEC凋亡,增强细胞活力,减轻氧化应激损伤和细胞粘附,对高糖诱导的内皮损伤发挥保护作用,机制可能与抑制YAP信号通路激活有关。     

反油酸对血管内皮细胞功能及形态的影响

目的通过建立血管内皮细胞(EC)与血管平滑肌细胞(SMC)的联合培养模型,探讨反油酸对内皮细胞的损伤作用。方法将与平滑肌细胞联合培养的内皮细胞用浓度为50μmol/L的油酸和反油酸分别作用48h。试剂盒测定乳酸脱氢酶(LDH)活力、一氧化氮(NO)含量;RT-PCR测定细胞粘附因子(VCAM-1、ICAM-1和E-slectin)基因表达量;激光共聚焦显微镜观察处理后的内皮细胞形态。结果反油酸促进LDH渗出,且紧密接触模型中内皮细胞LDH渗出率较旁分泌模型显著增加;反油酸抑制内皮细胞NO分泌,两种模型间无显著性差异;紧密接触模型中内皮细胞与旁分泌模型中的内皮细胞相比,VCAM-1、ICAM-1、E-slectin基因表达量均显著上升,且反油酸促粘附因子表达作用强于油酸;与平滑肌细胞紧密接触的内皮细胞出现形态不规则,反油酸使内皮细胞变形。结论与平滑肌联合培养可增加反油酸对内皮细胞的损伤。     

丹皮酚对动脉粥样硬化大鼠炎性因子的影响

目的探讨丹皮酚(paeonol,pae)对高脂血症大鼠动脉粥样硬化(AS)的影响。方法 48只SD大鼠随机分为正常对照组,模型组,辛伐他汀组,丹皮酚组。模型组通过高脂饮食制备动脉粥样硬化模型。实验8周后检测大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)含量;酶联免疫ELISA法检测血清TNF-α,IL-1β的含量;心肌组织黏附分子ICAM-1和VCAM-1mRNA的表达水平通过RT-PCR法测定。结果模型组血脂TG、TC、LDL-C含量、炎症因子TNF-α,IL-1β水平较正常对照组明显升高(P0.01,0.001);模型组心肌黏附分子ICAM-1和VCAM-1mRNA的表达水平明显升高(P0.01),血脂HDL-C含量低于对照组(P0.01);与模型组比较,丹皮酚不同浓度组以及辛伐他汀组血脂TG、TC、LDL-C含量、炎症因子TNF-α,IL-1β水平显著降低(P0.05,0.01),心肌黏附分子ICAM-1和VCAM-1mRNA的表达水平显著降低(P0.05,0.01),血脂HDL-C含量高于模型组(P0.05,0.01)。结论丹皮酚可以干预大鼠AS的形成,同时降低血脂水平,其作用机制可能通过抑制炎性因子的释放,下调黏附分子的表达实现的。     

氟对体外培养血管内皮细胞影响及硒干预作用研究

目的研究不同浓度氟对体外培养血管内皮细胞的影响及硒的干预作用。方法人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)置于37℃,5%CO2,饱和湿度条件下培养。在培养液中加入氟化钠,氟浓度分别为0、100、400、700、1000、2000μmol/L,同时加入硒,浓度为100 nmol/L。连续培养48 h后,收集细胞培养液与细胞。应用瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态,吖啶橙荧光染色测定细胞凋亡,四唑氮蓝(MTT)比色法检测细胞活性;检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量;检测细胞培养液诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性、细胞iNOSmRNA、eNOSmRNA表达;检测细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)含量。结果在氟浓度100~700μmol/L加硒100 nmol/L,可明显减轻氟对细胞生长的抑制,恢复细胞形态的改变;使SOD、GSH-Px活性升高(P<0.05)、MDA含量下降(P<0.05);降低iNOS活性和iNOSmRNA表达(P<0.05),升高eNOS的活性和eNOSmRNA表达(P<0.05);减少CAM-1和VCAM-1含量(P<0.05,P<0.01)。结论氟可致血管内皮细胞形态改变、功能异常。适宜剂量硒补充可通过提高抗氧化功能,调整NO代谢,抑制粘附分子异常表达等途径拮抗高氟所致的血管内皮损伤。     

不同粒径二氧化硅对人永生化表皮细胞抗氧化酶基因mRNA表达水平的影响

目的探讨经不同粒径二氧化硅染毒人永生化表皮(HaCaT)细胞后,细胞内氧化应激相关的过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GSR)和超氧化物歧化酶(SOD-1)的mRNA表达水平的变化。方法对数生长期的HaCaT细胞分别经不同浓度(5,10,15 mg/L)、不同直径(15、30、100nm)二氧化硅粉尘处理24 h后,采用实时荧光定量PCR(RT-Q-PCR)检测CAT、GSR和SOD-1基因mRNA的表达水平。结果与对照组相比,各粒径二氧化硅染毒均能诱导HaCaT细胞CAT、GSR和SOD-1基因的mRNA表达水平发生明显变化。其中,CAT的mRNA表达水平在15 nm组和30 nm组随染毒浓度的增加明显下降;GSR的mRNA表达水平在各颗粒组中均随二氧化硅颗粒浓度的增加呈现明显的下降趋势;SOD-1的mRNA表达水平随二氧化硅颗粒浓度的增加呈现波动趋势。结论在一定剂量范围内,不同粒径二氧化硅染毒可以诱导细胞内CAT、GSR和SOD-1基因mRNA表达水平改变,推测这些改变可能参与二氧化硅的细胞毒性反应。     

邻苯二甲酸二丁酯与邻苯二甲酸单丁酯对睾丸间质细胞睾酮水平和胰岛素样因子3表达的影响

目的 观察邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)、邻苯二甲酸单丁酯(monobutyl phthalate,MBP)对小鼠睾丸间质瘤细胞(MA-10)中胰岛素样因子3(insulin-like factor 3,INSL3) mRNA 及蛋白的表达量和细胞睾酮分泌水平的影响.方法 以小鼠睾丸间质瘤细胞(MA-10)为模型,经过DBP、MBP直接染毒后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养基上清中睾酮的含量,采用荧光定量PCR测定细胞中INSL3 mRNA的表达,采用蛋白免疫印迹法(western blot)测定INSL3蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,MA-10细胞睾酮合成量在低染毒剂量(10-9～10-6 mol/L)时均表现出刺激效应,睾酮含量增加;在高染毒剂量(10-3 mol/L)时表现抑制效应,随着染毒时间的延长,睾酮水平逐渐降低.荧光定量PCR以及Western blot测定结果显示,DBP在10-6、10-4 mol/L染毒时,INSL3 mRNA及蛋白表达水平较对照组降低,差异有统计学意义(P＜0.05);随着MBP染毒剂量的增加,INSL3 mRNA及蛋白表达水平呈现下降趋势,但MBP在10-7 mol/L时,与对照组相比,对MA-10细胞中INSL3蛋白表达表现出刺激作用.结论 DBP、MBP染毒对MA-10细胞睾酮分泌表现出高剂量抑制、低剂量刺激的双向效应;DBP、MBP染毒可抑制MA-10细胞中INSL3 mRNA和蛋白的表达.