鱼藤酮对大鼠纹状体兴奋性氨基酸及NMDA受体表达的影响

目的观察鱼藤酮对大鼠纹状体兴奋性氨基酸(excitatory amino acid,EAAs)及N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体表达的影响。方法采用Alzet微泵背部埋植法建立大鼠鱼藤酮慢性中毒模型,应用高效液相色谱法(HPLC)检测鱼藤酮染毒大鼠纹状体谷氨酸(glutamate,Glu)和天门冬氨酸(aspartic acid,Asp)浓度,RT-PCR技术观察NMDA受体功能亚基NR1和调节亚基NR2A、NR2B基因表达的变化。结果与正常对照组比较,鱼藤酮染毒大鼠中脑纹状体兴奋性氨基酸浓度明显升高,NMDA受体功能亚基和调节亚基基因表达异常。表现为2.0 mg/kg与4.0mg/kg鱼藤酮染毒组NR1亚基表达明显上调(P<0.05),NR2A亚基mRNA表达亦显著升高(P<0.01),而NR2B基因表达在2.0 mg/kg鱼藤酮染毒组未见明显改变。结论鱼藤酮染毒可致中脑纹状体EAAs水平升高,NMDA受体结构功能发生改变,从而诱导兴奋毒性损伤的产生。     

锰对大鼠纹状体神经细胞凋亡的影响

目的利用锰染毒大鼠模型，分析不同浓度锰对大鼠纹状体神经细胞凋亡的影响，探讨锰神经毒性的作用机制。方法将健康雄性SD大鼠随机分成空白对照组和高、中、低3个剂量染锰组，每组6只动物。染毒结束，开颅分离取出大鼠纹状体，分别做锰含量测定、Tunel染色和透射电子显微镜观察。结果高、中、低3个剂量染锰组纹状体锰含量分别为（2．98±0．52）、（2．75±0．37）、（2．61±0．73）ng／mg，均高于空白对照组的（．60±0．20）ng／mg，差异有统计学意义（P〈0．05）。高、中、低3个剂量染锰组纹状体细胞凋亡指数分别为（24．83±5．98），（17．00±5．33），（15．33±2．58），均高于空白对照组的（2．83±0．41），差异有统计学意义（P〈0．05）。且随着染锰剂量的加大，细胞凋亡指数增加。染锰组大鼠纹状体的透射电子显微镜显示中剂量染锰时，部分纹状体神经细胞出现核变小、固缩，染色质浓集等细胞凋亡的特征性改变。结论锰可致大鼠纹状体神经细胞出现程度不同的细胞凋亡，而凋亡的程度与锰浓度有关。     

牛磺酸对锰染毒大鼠纹状体神经组织细胞损伤影响

目的 探讨不同剂量牛磺酸对锰染毒大鼠纹状体神经组织细胞损伤的影响.方法 SD健康雄性大鼠162只,随机分为对照组,10、15、20 mg/kg 3个剂量的染锰组和9个牛磺酸干预组,每组12只大鼠,余6只用于对照组、染锰组、牛磺酸干预组作电镜观察.干预12周后,开颅分离出大鼠纹状体,分别进行Tunel染色、透射电镜观察、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)水平测定.结果 染锰组和牛磺酸干预组纹状体细胞凋亡指数均高于对照组,差异有统计学意义(P ＜0.05);150、200 mg/kg牛磺酸干预对10、15、20 mg/kg染锰组大鼠纹状体细胞凋亡指数有降低作用,差异有统计学意义(P＜0.05);大鼠纹状体透射电镜观察可见,15 mg/kg染锰组部分神经细胞出现核固缩等细胞凋亡的特征性改变,200 mg/kg牛磺酸干预可减轻其细胞凋亡程度;染锰组大鼠纹状体DA、5-HT水平均低于对照组(P＜0.05),150、200mg/kg牛磺酸对10 mg/kg染锰组大鼠纹状体DA和5-HT水平增加效果显著(P＜0.05).结论 锰可致大鼠纹状体神经组织细胞出现程度不同的细胞凋亡,降低纹状体中DA和5-HT的水平.牛磺酸在一定程度上对锰诱导的大鼠纹状体神经组织细胞凋亡及DA和5-HT的减少有保护作用.     

铅对钾通道亚单位和NMDA受体亚单位的影响

[目的 ]研究低浓度铅对大鼠海马神经元钾通道亚单位和NMDA受体亚单位的影响及其作用机制。 [方法 ]应用全细胞膜片钳技术和原位杂交技术。 [结果 ]铅提高了动作电位的发放频率 ,抑制了K 通道电流 ,使IA 电流激活电压升高 ,失活时间常数延长 ;铅抑制了IH 电流的大小 ,使得IH 从超级化方向往去极化方向移动 ;增加了ID 的激活时程。铅暴露组 15d大鼠海马CA1,CA4 ,DG区 ,而 2 1d时海马CA4 ,DG区的NR1mRNA表达增强 ;铅暴露组 2 1d大鼠海马CA1,CA2 ,CA4 和DG区的NR2DmRNA表达增高 ;铅暴露组 15d大鼠海马CA1,CA4 ,DG区 ,而 2 1d时海马CA1,DG区的NR3AmRNA表达水平显著降低 ;没有观察到铅对NR2BmRNA表达的影响。还观察到铅可影响海马CA1、CA3 ,DG区的AMPA受体 ,以及CA1和DG区的Kainate受体。 [结论 ]低浓度铅暴露损伤了大鼠海马神经元和背根神经节钾通道亚单位和海马NMDA受体亚单位的mRNA的表达     

牛磺酸对锰染毒大鼠纹状体活性钙调素含量的影响

目的利用锰染毒大鼠模型,探讨不同剂量牛磺酸对不同剂量锰染毒大鼠纹状体活性钙调素(CaM)含量的影响。方法选取SD健康雄性大鼠,随机分为对照组、锰染毒组(10、15、20 mg/kg 3个剂量组)和干预组(按正交实验设计分9个组)。干预时间结束后,比较各实验组大鼠纹状体活性钙调素含量的变化。结果10 mg/kg锰染毒组的活性CaM含量比对照组高,差异有统计学意义(P<0.05),各锰染毒组随着染毒剂量的加大,活性CaM含量呈下降趋势。干预组中的牛磺酸剂量为150、200 mg/kg时,对10 mg/kg锰染毒大鼠纹状体活性CaM含量有调节作用,差异有统计学意义(P<0.01)。结论锰可影响大鼠纹状体活性钙调素含量,且其影响与锰染毒剂量有关。     

锰干扰纹状体内N-甲基-D天冬氨酸受体致小鼠学习记忆功障碍的研究

目的 研究纹状体内N-甲基-D天冬氨酸受体在锰致小鼠学习记忆功能障碍中的作用。方法 将48只昆明小鼠按体重随机分成4组,每组12只,雌雄各半,分别为对照组,12.5、25、50 mg/kg染锰组。腹腔注射,剂量为50 ml/kg,连续染毒2周,进行水迷宫以及避暗实验。处死小鼠,取纹状体,HE染色观察纹状体组织形态,电镜观察超微结构,免疫组化和Western blotting法测定NR2A和NR2B的表达。结果 水迷宫实验训练阶段的后期,50 mg/kg MnCl2组较同日对照组小鼠的逃避潜伏期和游泳距离增加;在6天和13天的检测阶段,50 mg/kg MnCl2组的小鼠穿环次数明显减少,25、50 mg/kg MnCl2组小鼠24 h后进入暗室的潜伏期明显缩短,次数明显增加。随着染锰剂量的增加,可见纹状体的组织形态发生病理性改变并出现超微结构损伤; 在25、50 mg/kg MnCl2组中,NR2A和NR2B的免疫组化表达的阳性面积比和积分光密度均明显下降,两者的蛋白水平亦明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 锰通过干扰纹状体内NMDA受体的表达,造成小鼠学习记忆功能障碍。     

MK-801对锰致神经元损伤的保护作用

[目的]研究不同浓度锰对原代培养神经元的损伤情况,同时用MK-801预处理,观察其对锰致神经元损伤的保护作用。[方法]选用原代培养神经元为模型,待细胞生长至最佳状态时,予以分组处理。染锰组为含不同浓度氯化锰25、100、400μmol/L的培养液,MK-801预处理组,用10μmol/LMK-801预处理30min后,再用400μmol/L氯化锰处理神经元,对照组为正常培养液,通过检测细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)释放量以及用TUNEL技术检测细胞凋亡的方法,评价MK-801对锰致神经元损伤的保护作用。[结果]用不同剂量锰处理神经元6～48h发现,神经元胞体固缩,突起断裂,网络消失。细胞活力和LDH释放量在同一染毒时间,随锰浓度升高细胞活力逐渐降低,LDH释放量逐渐升高;在同一锰浓度处理神经元,随着时间的延长细胞活力逐渐降低,LDH释放量逐渐升高。随锰浓度的升高,神经元细胞凋亡率和积分光密度均逐渐上升。用MK-801预处理30min后,400μmol/L锰处理神经元发现,与单纯用400μmol/L锰处理比较,细胞活力回升,LDH释放量降低,细胞凋亡率和积分光密度均有所下降。[结论]锰可以剂量依赖性和时间依赖性的对神经元造成损伤,促使细胞凋亡;MK-801可以在一定程度上有效地保护神经元。     

MK-801对大鼠脑部多巴胺含量及Fos蛋白表达影响

目的 探讨5-甲基二氢丙环庚烯亚胺马来酸（MK-801）对伤害性电刺激隐神经引起的扣带回前部（ACC）多巴胺含量与Fos蛋白表达影响;N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体可能参与隐神经伤害性信息传入引起的ACC 多巴胺含量升高与Fos蛋白表达增强过程。方法 72只雄性Wistar大鼠,随机分为对照组、假刺激组、电刺激组、MK-801低、高剂量组及生理盐水对照组;将大鼠断头、取大脑右侧ACC,匀浆,4 ℃、10 000 r/min离心20 min,取上清液20 μL,应用高效液相色谱-电化学检测技术检测ACC内多巴胺含量;将ACC脑组织连续冠状冰冻切片,用免疫组化技术测定Fos蛋白表达。结果 与假刺激组比较,电刺激组大鼠ACC 多巴胺含量[（24.89±2.50）ng/g]、Fos蛋白表达量（8.481 1±1.243 2）和阳性细胞百分比[（3.133 8±0.824 2）%]明显升高;与电刺激组比较,0.5、1.0 mg/kg MK-801组大鼠ACC多巴胺含量[分别为（15.07±3.75）、（14.84±2.92）ng/g]、Fos蛋白表达量[分别为（7.107 8±0.610 7）、（7.037 5±0.411 8）]与阳性细胞百分比[分别为（2.173 9±0.466 8）、（2.047 6±0.361 3）%]明显下降;提示MK-801对伤害性电刺激隐神经引起的大鼠脑ACC多巴胺含量升高与Fos蛋白表达增强具有拮抗作用。结论 NMDA受体可能参与隐神经伤害性信息传入引起的ACC多巴胺含量升高与Fos蛋白表达增强过程。     

褪黑素对锰致小鼠纹状体多巴胺能系统障碍的影响

目的研究锰对小鼠纹状体多巴胺系统的影响以及褪黑素(MLT)的干预作用,为锰中毒机制的研究提供理论依据。方法小鼠70只,随机均分为(1)对照组、(2)氯化锰组、(3)低MLT+氯化锰组、(4)中MLT+氯化锰组、(5)高MLT+氯化锰组。第1、2组皮下注射(sc)0.9%氯化钠,第3~5组sc给予1.25、2.5和5 mg/kg MLT;2 h后,第1组腹腔注射(ip)0.9%生理盐水,第2~5组ip给予50 mg/kg Mn Cl2。每天1次,连续2周。ELISA检测黑质内多巴胺(DA)含量,免疫组织化学及western blotting检测DAT和DRD1的蛋白水平。结果与对照组相比,氯化锰组上述指标均出现了不同程度的降低,纹状体DA含量显著降低69.97%(P0.01),免疫组织化学结果显示DAT和DRD1积分光密度分别下降62.54%和66.61%(P0.01),DAT和DRD1的蛋白水平均明显降低;与氯化锰组相比,随着MLT浓度的升高,DA含量、DAT和DRD1表达量逐渐上升,并呈剂量-效应关系。结论过量锰暴露可导致纹状体多巴胺系统的损伤,褪黑素可以拮抗锰所致的上述变化。     

锰染毒12周大鼠体内锰分布及纹状体的病理损伤

[目的]研究锰染毒12周大鼠体内锰的组织分布特点,以及高锰蓄积对纹状体的病理损伤。[方法]SD雄性大鼠(n=10)腹腔注射Mn Cl·4H2 2O,15 mg/kg体重,1次/d,5 d/周,持续染毒12周,同时设置对照组(n=10),腹腔内注射与染毒组等体积的生理盐水,周期相同。染毒结束,采用透射电镜观察两组大鼠(n=2)大脑纹状体病理改变;采用电感耦合等离子体发射光谱检测两组大鼠(n=8)各组织内锰含量。[结果]与对照组相比,染毒组大鼠体重增长缓慢。染毒12周后,除肺、小脑外,肝、胃、小肠、结肠、直肠、脾、肾、大脑、睾丸、心脏、毛发均有锰含量增高(P<0.05)。染毒组大鼠大脑组织锰含量[(1.29±0.05)μg/g组织]高于对照组[(0.65±0.13)μg/g组织](P=0.001)。透射电镜观察可见纹状体神经元内大量脂褐素沉积。[结论]锰在慢性锰中毒大鼠多组织贮留,主要影响消化系统、肾脏、睾丸以及大脑。锰的神经毒性可能与氧化损伤有关。     

The NMDA receptor antagonist MK-801 produces ethanol-like discrimination in the rat

Two groups of rats, one derived from N/Nih stock and the second from the (putatively) serotonin-compromised Fawn-Hooded line, were trained to discriminate ethanol from its vehicle in a drug discrimination paradigm. Once each of the two groups attained discrimination criterion, dose-response relationships with lower doses of ethanol indicated that the Fawn-Hooded rats were less sensitive (ED₅₀ value = 579.5 mg/kg) than the N/Nih rats (ED₅₀ = 371.4 mg/kg). Testing of various doses of the NMDA (N-methyl-D-aspartate) receptor antagonist MK-801 produced complete generalization in each group of animals, with a similar difference in ED₅₀ values between N/Nih and Fawn-Hooded lines. These results extend previous ethanol-to-MK-801 generalization reported in pigeons, and are discussed in light of a possible NMDA-mediated contribution to the ethanol-induced discriminative stimulus cues.     

药物干预对低能量激光眼损伤后视功能的影响

目的:应用视功能测定的方法观察MK-801对激光视网膜损伤的治疗作用.方法:用氦氖激光造成大鼠视网膜损伤模型,治疗组照后即刻肌注MK-801(2mg/kg),通过检测视网膜电流图(electroretinogram,ERG)b波幅值的变化,观察MK-801的治疗作用.结果:统计分析结果表明,MK-801治疗组的b波幅值要显著高于损伤对照组和生理盐水注射组(P<0.05).结论:MK-801能有效地保护激光照后大鼠视网膜的功能.     

长期低水平铅作用对子代大鼠睾丸组织抑制素B亚基表达的影响

目的探讨低水平长期铅作用对雄性大鼠睾丸组织中抑制素B(inhibin B,INH B)亚基表达的影响。方法将12只9周龄SPF级SD雌性大鼠随机分为3组,分别为对照(去离子水)组和低剂量(800 mg/L)、高剂量(1 500 mg/L)乙酸铅染毒组。采用自由饮水方式连续染毒10 d后,按2∶1雌雄同笼。将孕鼠继续分笼喂养,孕期及哺乳期喂养方式同上。仔鼠断乳后,每组选择15只雄性仔鼠,对应分别给予0(去离子水)、300、900 mg/L乙酸铅溶液继续饮水染毒至6月龄。测定血铅和睾丸铅含量及睾丸组织抑制素Bα和βB亚基基因mRNA和蛋白的表达水平。结果与对照组相比,低、高剂量铅染毒组大鼠血铅和睾丸组织中铅含量均较高,而睾丸组织中抑制素Bα和βB亚基mRNA及蛋白的表达水平均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。且随着铅染毒剂量的升高,大鼠血铅和睾丸组织中铅含量均呈上升趋势,而大鼠睾丸组织中INH Bα和βB mRNA及蛋白的表达水平均呈下降趋势。结论长期低剂量铅作用所致抑制素Bα和βB亚基表达下降可能参与了铅的雄性生殖毒性过程。     

Chronic Effect of Low Lead EXposure on Expression of INH B Subunit of Testis in Newborn Rat

目的 探讨低水平长期铅作用对雄性大鼠睾丸组织中抑制素B( inhibin B,INH B)亚基表达的影响.方法 将12只9周龄SPF级SD雌性大鼠随机分为3组,分别为对照(去离子水)组和低剂量(800 mg/L)、高剂量(1500 mg/L)乙酸铅染毒组.采用自由饮水方式连续染毒10d后,按2∶1雌雄同笼.将孕鼠继续分笼喂养,孕期及哺乳期喂养方式同上.仔鼠断乳后,每组选择15只雄性仔鼠,对应分别给予0(去离子水)、300、900 mg/L乙酸铅溶液继续饮水染毒至6月龄.测定血铅和睾丸铅含量及睾丸组织抑制素Bα和βB亚基基因mRNA和蛋白的表达水平.结果 与对照组相比,低、高剂量铅染毒组大鼠血铅和睾丸组织中铅含量均较高,而睾丸组织中抑制素B α和βB亚基mRNA及蛋白的表达水平均下降,差异有统计学意义(P＜0.05).且随着铅染毒剂量的升高,大鼠血铅和睾丸组织中铅含量均呈上升趋势,而大鼠睾丸组织中INH B α和ββB mRNA及蛋白的表达水平均呈下降趋势.结论 长期低剂量铅作用所致抑制素Bα和βB亚基表达下降可能参与了铅的雄性生殖毒性过程.     

药物干预对低能量激光视网膜损伤后NMDAR表达的影响

目的观察MK-801对低强度激光视网膜照射后谷氨酸受体(NMDAR)表达的拮抗作用,探讨MK-801治疗激光视网膜损伤的可能机制。方法用氦氖激光造成大鼠视网膜损伤模型,照后即刻肌注MK-801(2 mg/kg),通过免疫组化和原位杂交等方法,观察MK-801对激光照射后视网膜细胞中NMDAR蛋白和mRNA表达变化的影响。结果免疫组化和原位杂交的结果显示,激光照射后视网膜中NMDAR的表达显著增加,与视网膜的损伤程度相一致,照后给予MK-801可明显地减少视网膜中NMDAR的表达。结论谷氨酸受体的高表达可能是激光致眼损伤的机制之一,而MK-801可以通过抑制其表达来拮抗低强度激光所导致的视网膜损伤。     

MK-801对断尾小鼠痛阈及血清褪黑素含量影响

目的观察谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801对尾末端截断后小鼠痛阈及血清褪黑素含量影响,为进一步研究截肢后中枢可塑性变化提供实验依据。方法分别在小鼠尾末端2.5 cm截断后0.5、1、2、3 h、1 d、1周用热板法测定断尾小鼠痛阈,用ELISA法测定小鼠血清褪黑素含量,以及观察静脉注射MK-801对断尾后小鼠痛阈及血清褪黑素含量影响。结果对照组小鼠痛阈为(18.24±5.06)s,断尾前小鼠痛阈为(18.40±5.42)s,断尾后0.5、1 h,小鼠痛阈无明显变化;断尾后2 h,小鼠痛阈[(23.78±3.57)s]明显升高(P<0.01);断尾后1 d小鼠痛阈基本恢复正常;MK-801拮抗了断尾诱发小鼠痛阈升高的反应,小鼠痛阈为(15.41±7.00)s,对照组小鼠血清褪黑素含量为(155.750±61.577)pg/mL,断尾后2 h,小鼠血清褪黑素含量降低为(82.207±19.871)pg/mL,MK-801干预后小鼠血清褪黑素含量为(131.783±36.637)pg/mL。结论 NMDA受体参与了断尾诱发小鼠痛阈提高及血清褪黑素含量降低过程。     

锰中毒生物标志物的研究进展

锰是机体代谢的必需微量元素之一。适量的锰在体内充当某些酶的活性基团、激活因子等,同时参与中枢神经的生理功能。工业中锰过量接触会导致职业性锰中毒的发生,对机体的神经、免疫、生殖等各方面造成损伤。该文就近年来国内外锰中毒神经行为功能和生物标志物方面的研究进行综述。     

Effects of chronic prenatal ethanol exposure on NMDA receptor number and affinity for [3H]MK-801 in the cerebral cortex of the young postnatal and adult guinea-pig

The objective of this study was to test the hypothesis that chronic prenatal ethanol exposure (CPEE) produces changes in the number and/or affinity of N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptors in the cerebral cortex that are developmental-age-dependent. Timed, pregnant Dunkin-Hartley-strain guinea-pigs received oral intubation of one of the following regimens, given daily as two equally divided doses 2 h apart, from gestational day (GD) 2 to GD 67 (term, ~GD 68): (i) 4 g ethanol kg(-1) maternal bodyweight; (ii) isocaloric sucrose with pair feeding; or (iii) water. Maternal blood ethanol concentration was measured on GD 57 or 58 at 1 h after the daily dose, and was 51.1 +/- 8.5 mM (235 +/- 39 mg dL(-1); n = 8). At postnatal day (PD) 11 (pre-weaning) and PD 61 (adulthood), body, brain and cerebral cortical weights of the offspring were measured. The number of NMDA receptors and their affinity for [(3)H]MK-801 were measured in a crude cerebral cortical membrane preparation using saturation isotherm analysis to determine the B(max) and K(D). Chronic prenatal ethanol exposure decreased offspring brain and cerebral cortical weights at PD 11 and PD 61. At PD 11, there was no CPEE-induced change of [(3)H]MK-801 binding characteristics in the cerebral cortex. At PD 61, both B(max) and K(D) for [(3)H]MK-801 binding to cerebral cortical NMDA receptors were decreased by CPEE compared with the isocaloric sucrose/pair-fed and water treatment groups. Loss of cerebral cortical NMDA receptors and increased affinity of the remaining receptors for [(3)H]MK-801 in the adult guinea-pig, compared with no change in the number or affinity of these receptors in the young postnatal offspring, demonstrated that the effects of CPEE on these ionotropic glutamate receptors are developmental-age-dependent.     

输卵管的性激素受体表达及功能

输卵管妊娠是一种威胁女性生命的疾病,性激素及其受体(雌激素、孕激素和雄激素受体)对输卵管生理和病理有重要的调节作用,3类受体都在输卵管上表达,并表现出时间和区域特异性。其中雌激素受体和孕激素受体可能通过影响纤毛活性和平滑肌收缩参与输卵管妊娠的发病机制。