SDZ诱导肺癌A549细胞凋亡

目的旨在探讨SDZ体外对肺癌A549细胞生长的作用。方法采用hoechst染色、荧光显微镜下观察SDZ诱导肺癌A549细胞凋亡的作用。结果经SDZ1000μg／ml作用24h肿瘤细胞即可发生凋亡,凋亡率达31．7％。结论SDZ体外可诱导肺癌A549细胞凋亡。     

内源性大麻素联用顺铂对人肺腺癌A549细胞的诱导凋亡作用

目的观察内源性大麻素（AEA）、顺铂（DDP）单用或联用对人肺癌A549细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测AEA和DDP对肺癌A549细胞的增殖抑制作用,以流式细胞仪（FCM）PI单染检测AEA联用DDP对细胞周期的影响,以Annexinv／PI双染法检测AEA联用DDP对细胞凋亡的影响。结果AEA对肺癌细胞增殖有明显的抑制作用,且呈剂量、时间依赖性。10,20μmol／L的AEA和1,2mg／L的DDP联合作用24,48,72h后,细胞增殖抑制率显著高于单用组;两药联用后诱导细胞凋亡的作用显著增强,AEA可使A549细胞阻滞于G2／M期。结论AEA及DDP对肺癌A549细胞的增殖具有显著的抑制作用,并可诱导细胞凋亡,在一定范围内呈量效关系,且两者联合应用具有相加或协同作用。     

榄香烯诱导肺癌A549细胞凋亡作用的剂量和时间依赖性研究

目的探讨榄香烯对肺癌A549细胞的增殖抑制作用及其对细胞凋亡的影响。方法每批细胞按空白对照组和药物处理组随机分组,检测榄香烯对癌细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞光度分析术(FCM)检测细胞凋亡率及细胞周期时相分布,同时进行细胞的形态学观察。结果榄香烯存在剂量依赖性和时间依赖性,榄香烯在48 h、72 h对A549细胞周期有明显影响;榄香烯可阻滞A549细胞于S期并诱导细胞凋亡,但细胞凋亡率并不完全与药物浓度成正相关。结论榄香烯对肿瘤细胞具有较强的增殖抑制作用,在一定药物浓度范围内,随药物浓度的增加榄香烯可使细胞凋亡率升高,但超过一定作用浓度,药物的细胞毒作用增强,细胞凋亡率则呈下降趋势。     

夏枯草乙醇提取物体外诱导肺癌细胞A549凋亡的研究

目的探讨夏枯草乙醇提取物对人肺癌细胞系A549细胞的增殖、迁移、细胞周期及凋亡的影响。方法不同质量浓度夏枯草提取物作用于人肺癌A549细胞,采用MTT比色法、细胞划痕实验等检测其对肿瘤细胞的生长及迁移的抑制作用,应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化情况,并使用Annexin-V FITC和PI双染试剂盒进行凋亡分析。结果一定质量浓度的夏枯草提取物可明显抑制肺癌细胞的增殖和迁移,并呈量效和时效关系,可诱导细胞发生G0/G1期或G2/M期细胞周期阻滞,且Sub G1峰比例明显上升,在低、中质量浓度(1.0和2.0mg·L-1)时以晚期凋亡为主,在高质量浓度(4.0mg·L-1)时主要发生早期凋亡。结论夏枯草提取物可抑制肺癌A549细胞的增殖和迁移,改变细胞周期,诱导肿瘤细胞凋亡。     

枸杞多糖对人肺癌A549细胞影响的研究

目的:探讨枸杞多糖(LBP)对人肺癌A549细胞的影响及作用机制。方法:将LBP作用于肺癌A549细胞,应用M TT法、电镜和钙离子测定等技术测定LBP的抗肿瘤作用及作用机理。结果:LBP呈剂量依赖性(100m g/L~2000m g/L)地抑制人肺癌A549细胞的增殖,诱导其凋亡,并可使细胞内钙离子浓度升高。结论:LBP可诱导A549细胞凋亡,其作用机制可能与细胞内钙离子浓度升高有关。     

TNF-α对人肺癌A549细胞凋亡的影响

目的探讨TNF-α对人肺癌A549细胞凋亡的影响;方法培养人肺癌A549细胞,与TNF-α(10、100U·ml-1)共孵育,通过Western blot分析P53蛋白表达的变化,同时利用Annexin V/PI双染色流式细胞仪,检测人肺癌A549细胞凋亡率的变化。结果与空白组相比,TNF-α组的P53蛋白表达明显升高,且细胞凋亡率也明显升高,分别为1.22±0.62和1.65±0.38(P<0.01)。结论TNF-α可以诱导人肺癌A549细胞凋亡,从而可能起到抗肿瘤的疗效。     

罗汉果提取物诱导肺癌细胞A549凋亡的研究

目的探讨罗汉果醇诱导肺癌细胞凋亡的作用及可能的分子机制。方法通过分离、纯化得到罗汉果醇单体,以肺癌细胞A549为对象,采用MTT法检测罗汉果醇对肺癌细胞的抑制作用;利用荧光染色、流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期;以蛋白印迹法检测罗汉果醇对p21、Bcl-2蛋白表达的影响。结果罗汉果醇能抑制肺癌细胞的增殖,具有促进细胞凋亡、阻滞细胞周期的作用;蛋白印迹检测表明,罗汉果醇可以促进p21表达升高,Bcl-2表达下降。结论罗汉果醇通过调节p21、Bcl-2的表达来诱导细胞凋亡和周期阻滞,从而促进肺癌细胞A549的凋亡。     

藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞凋亡的诱导作用

目的:研究藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞凋亡的诱导作用。方法:以0(阴性对照)、40、80、160μg/ml藤梨根乙酸乙酯提取物培养细胞48、72 h后,凝胶电泳法测定细胞DNA裂解情况。以0(阴性对照)、40、80、160μg/ml藤梨根乙酸乙酯提取物培养细胞24、48、72 h后,流式细胞仪测定细胞凋亡和细胞周期分布情况;免疫组化法测定细胞生存素(Survivin)表达。结果:40、80、160μg/ml藤梨根乙酸乙酯提取物培养细胞48、72 h后出现凋亡细胞特有的梯状条带;与阴性对照比较,40、80、160μg/ml藤梨根乙酸乙酯提取物培养细胞24、48、72 h后细胞凋亡率升高,G0/G1期细胞比例升高,Survivin表达减弱,且呈时间、浓度依赖关系。结论:藤梨根乙酸乙酯提取物可诱导A549细胞凋亡,将细胞周期阻滞于G0/G1期,其机制可能与降低Survivin表达有关。     

siRNA 靶向沉默 Lipocalin-2基因增加人肺癌 A549细胞对顺铂的敏感性

目的：利用针对 Lipocalin-2的小干扰 RNA（siRNA）沉默人肺癌 A549细胞中 Lipocalin-2基因表达,观察其对顺铂化疗敏感性的影响。方法分别采用免疫组织化学 SP 法和 Western blot 检测 Lipocalin-2在肺癌组织和3种肺癌细胞株（A549、NCI-H661、NCI-H446）中的表达情况。设计并构建靶向 Lipocalin-2的 siRNA 转染 A549细胞,采用Real-time PCR 和 Western blot 检测转染效率。MTT 法检测顺铂处理后细胞存活率及半数抑制浓度（IC50）。流式细胞术检测顺铂处理后细胞凋亡率。结果 Lipocalin-2蛋白在肺癌组织和肺癌 A549、NCI-H661、NCI-H446细胞中均异常高表达（ P ＜0.05）。siRNA-Lipocalin-2转染 A549细胞能在 mRNA 和蛋白水平显著抑制 Lipocalin-2表达,同时顺铂诱导的细胞存活率显著降低,凋亡率显著增高（ P ＜0.05）。结论利用特异性 siRNA 能有效抑制人肺癌 A549细胞中Lipocalin-2 mRNA 和蛋白表达,增强细胞对顺铂的敏感性。     

辛伐他汀联合顺铂对人非小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用

目的研究辛伐他汀联合顺铂对人非小细胞肺癌A549细胞的抑制作用,并探讨其作用机制。方法采用MTT法检测0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L顺铂和3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L辛伐他汀对A549细胞增殖抑制率的影响;考察2.5μmol/L顺铂与3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L辛伐他汀联用对A549细胞增殖抑制作用的协同效果;Annexin V-FITC/PI双染后流式细胞术检测5μmol/L顺铂与25μmol/L辛伐他汀联合应用对对A549细胞凋亡率的影响;分光光度法检测辛伐他汀(25μmol/L)联合顺铂(2.5μmol/L)对A549细胞caspase-3活性的影响。结果辛伐他汀或顺铂对A549细胞的增殖有显著的抑制作用,随着浓度的增加、时间的延长,呈时间、剂量相关性,其抑制作用增强(P0.01)。顺铂(2.5μmol/L)与不同浓度(3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L)辛伐他汀联用对A549细胞的增殖有抑制作用,随着时间的延长,辛伐他汀剂量的增加,两者联用抑制作用呈增强的趋势(P0.01),2.5μmol/L顺铂联用辛伐他汀25μmol/L的抑制作用具有协同效果。25μmol/L辛伐他汀和2.5μmol/L顺铂能有效地诱导A549细胞的凋亡,而且两者联合使用可以显著增加A549细胞的凋亡率。25μmol/L辛伐他汀联合2.5μmol/L顺铂应可以显著增加A549细胞的caspase-3酶活性。结论辛伐他汀能够显著增强顺铂对A549细胞增殖抑制、诱导凋亡的作用,可能通过上调caspase-3活性诱导A549细胞凋亡。     

牛膝多糖硫酸酯和磷酸酯衍生物对人肺癌A549细胞的影响

目的探讨牛膝多糖硫酸酯(S-AbPS)和磷酸酯(P-AbPS)衍生物对人肺癌A549细胞的影响及其作用机制。方法用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测牛膝多糖、S-AbPS和P-AbPS对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪观察S-AbPS和P-AbPS处理A549细胞后细胞凋亡的改变。结果S-AbPS和P-AbPS对A549细胞的增殖有抑制作用,且存在时间和剂量相关性。S-AbPS和P-AbPS的48 h抑瘤活性均较同浓度的牛膝多糖强。流式细胞仪分析显示,S-AbPS和P-AbPS均可不同程度地诱导细胞凋亡。结论S-AbPS和P-AbPS较牛膝多糖能更有效地抑制人肺癌A549细胞的增殖,其机制可能是通过诱导A549细胞凋亡而实现。     

斑蝥素对A549细胞增殖抑制作用的研究

目的研究斑蝥素对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用和机制。方法采用MTT法检测斑蝥素对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪分析A549细胞周期及斑蝥素对细胞周期的影响。结果斑蝥素对A549细胞的增殖有抑制作用;其抑制作用机制为使A549细胞周期出现明显的G2/M期阻滞。结论斑蝥素对人肺癌A549细胞的增殖有抑制作用。     

花旗松素对人肺癌细胞A549增殖的抑制作用及其机制研究

目的研究花旗松素对人肺癌细胞A549增殖的抑制作用,并探讨其诱导细胞凋亡的可能机制。方法 WST-1法检测不同质量浓度(0~200μg/m L)花旗松素对A549细胞增殖的影响;Annexin-V/PI双染法检测花旗松素对A549细胞凋亡的影响;细胞免疫荧光法观察花旗松素处理后A549细胞中凋亡蛋白Bax的表达;Western blotting法检测Bcl-2、Akt、P53蛋白表达的变化。结果 WST-1法检测到花旗松素能有效抑制A549细胞的增殖,呈现时间–剂量–效应关系。通过流式细胞仪分析,花旗松素诱导细胞凋亡,上调了促凋亡蛋白Bax的表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,抑制Akt的过表达,并且促进P53的表达。结论花旗松素对A549细胞的增殖具有显著的抑制作用,其诱导的凋亡机制可能与Bcl-2、Akt相关信号通路的激活有关。     

姜黄素诱导人肺腺癌A549细胞脱落凋亡作用的研究

目的检测姜黄素诱导人肺腺癌细胞(A549)脱落凋亡的作用。方法采用DNA ladder法,流式细胞仪(FCM)技术结合PI及AnnexinV-FITC双标记染色试验方法及W estern-b lot法观察姜黄素是否能诱导A549脱落凋亡。结果A549细胞具有抗脱落凋亡的特性,而10μmol.L-1的姜黄素即可引起悬浮培养的A549细胞发生脱落凋亡。结论姜黄素可诱导人肺腺癌细胞(A549)脱落凋亡。     

基于RNA干扰技术探讨消岩汤对肺腺癌A549细胞凋亡的影响

目的 分析消岩汤干预下sh-survivin对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响。方法 选择人肺腺癌A549细胞, 采用中药复方进行干预及shRNA进行转染, 将转染后的细胞分组, 通过MTT法观察消岩汤对A549细胞生长的影响, 免疫组化法检测survivin蛋白的表达, 流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 消岩汤能有效地抑制人肺腺癌A549的细胞增殖, 运用消岩汤作用细胞24 h后, 侵袭的细胞数明显减少, 该方作用48 h后可以诱导肿瘤细胞凋亡;消岩汤中剂量组与转染sh-survivin组抑制率相当, 不同剂量的消岩汤均可协同sh-survivin使肺癌细胞凋亡率增加。结论 消岩汤可以通过干预肿瘤细胞凋亡抑制蛋白的表达而有效抑制肿瘤的发展。     

雷公藤红素对人肺癌A549细胞增殖活性及能量代谢的影响

目的 探究雷公藤红素对人肺癌细胞（A549）的增殖活性以及能量代谢的影响。方法 噻唑蓝(MTT)法和生长曲线检测雷公藤红素对细胞的增殖抑制情况;HE染色观察细胞形态变化;分光光度法测定糖酵解途径中己糖激酶（HK）、丙酮酸激酶（PK）、乳酸脱氢酶（LDH）活力和三羧酸循环中琥珀酸脱氢酶（SDH）活力及能量代谢终产物ATP的含量。结果 雷公藤红素对A549细胞有增殖抑制作用,浓度在2 μg?mL^-1时,对A549细胞的抑制率达到62.71%,远远大于阳性药组5-FU的抑制率;生长曲线结果显示,雷公藤红素作用第4天细胞浓度最低,第6天细胞抑制程度最明显;HE结果表明雷公藤红素处理48 h后,细胞形态变圆,体积缩小,核深染且颜色变深;试剂盒检测结果显示,雷公藤红素非常显著的降低乳酸脱氢酶酶活力（P<0.01）,显著降低琥珀酸脱氢酶活力和ATP含量均显著降低(P<0.05),但对己糖激酶和丙酮酸激酶无明显作用。结论 雷公藤红素能够显著降低人肺癌A549细胞中乳酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶的活力,干扰能量代谢,抑制能量ATP生成,达到抑制A549细胞增殖的作用。     

荷包牡丹碱对人肺癌A549细胞生长及端粒酶活性的抑制作用

目的探讨荷包牡丹碱对人肺癌A549细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法 A549细胞加入荷包牡丹碱0～200μmol.L-1分别作用24,48和72 h,MTT法测定A549细胞的生长抑制作用。荷包牡丹碱0～20μmol.L-1作用72 h,端粒重复序列扩增(TRAP)法测定端粒酶活性。变温紫外法检测荷包牡丹碱9μmol.L-1对端粒酶G-四链体的稳定作用。结果荷包牡丹碱25,50,100和200μmol.L-1作用细胞72 h后的抑制率分别为33.4%,88.2%,88.6%和89.4%,明显高于正常对照组细胞(P<0.05),并具有量效(r=0.906,P<0.05)和时效(r=0.949,P<0.05)性。与正常对照组相比,荷包牡丹碱5,10,15和25μmol.L-1可有效抑制A549细胞端粒酶的活性(P<0.05),相对TRAP端粒酶活性从正常对照组的1.471±0.102分别降低为1.093±0.054,1.013±0.016,0.554±0.034,0.365±0.081(P<0.05)。荷包牡丹碱9μmol.L-1使G-四链体的熔点值从正常对照组的48℃提高到54℃。结论荷包牡丹碱可以通过稳定G-四链体结构,抑制端粒酶活性,有效抑制人肺腺癌细胞A549的生长。     

The combination of artesunate and carboplatin exerts a synergistic anti-tumour effect on non-small cell lung cancer

Carboplatin (CBP) is a widely used targeted anticancer therapeutic drug; however, multi-drug resistance induced by the accumulation of CBP eventually causes diseases progression. The anti-malarial drug artesunate (ART) also exerts anticancer effects in various cancers; however, the combined effect of ART and CBP on non-small cell lung cancer (NSCLC) remains unclear. In the present study, the NSCLC cell line A549 was pretreated with various concentrations of CBP, ART and gemcitabine (GEM). 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assays were conducted to detect cell viability. Cell apoptosis was evaluated by both flow cytometry and TUNEL apoptotic assay. The expression profiles of cell cycle-related proteins and apoptotic proteins were determined by western blot. Cell clone numbers were visualized using crystal violet staining. Here, we found that both CBP and ART suppressed cell viability, and promoted cell apoptosis, and the combined application of ART and CBP at a lower concentration exhibited synergistic effects. Specifically, the combination of ART and CBP at a lower concentration suppressed cell clone numbers, promoted cell cycle arrest at the G₂/M phase, and induced the expression of the cell cycle and apoptosis-related proteins BAX, p21, p53, and Caspase-3, while decreasing Bcl-2 and Cyclin B1 expression. Based on these results, we concluded that combined application of ART and CBP exerts synergistic anti-tumour effects on NSCLC by enhancing cell apoptosis in a mitochondria-dependent manner.     

内源性大麻素对人肺癌A549细胞增殖的影响及机制初探

目的观察N-arachidonoyl ethanolamide(Anandamide,AEA)对A549细胞的作用并且探讨AEA的作用机制。方法倒置显微镜观察细胞的形态学变化,并用MTT法考察细胞增殖情况。结果AEA引起A549细胞死亡,且呈现剂量依赖性,IC50为(50.90±11.27)μmol·L-1。A549细胞上表达有辣椒素受体(vanilloid receptor 1,VR1),AEA对A549的作用,不可以被VR1特异性的拮抗剂Capsazepine(~10μmol·L-1)和Ruthenium Red(~10μmol·L-1)所拮抗。但AEA的作用可以被阿司匹林所减轻(P<0.05或P<0.01)。结论①AEA引起A549细胞死亡并不依赖VR1。②AEA的环氧化酶代谢产物Prostaglandin-ethanolamide(SPG-EAs)有可能参与该过程。     

雷公藤甲素对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的：研究雷公藤甲素对人肺腺癌‰细胞增殖和凋亡的影响。方法：采用MTT实验检测雷公藤甲素对体外培养的人肺腺癌A谢细胞增殖的影响，运用流式细胞术、基因组DNA电泳观察凋亡特征性“梯状”条带检测细胞凋亡，采用caspase活性定量检测试剂盒分析caspase-9，3的活化。结果：雷公藤甲素对体外培养的A谢细胞具有明显的抑制作用。流式细胞仪检测显示雷公藤甲素可以显著诱导‰细胞凋亡，DNA电泳显示雷公藤甲素作用于A谢细胞后出现凋亡细胞特有的DNA阶梯状条带。雷公藤甲素作用后‰细胞caspase-9，caspase-3活性明显升高。结论：雷公藤甲素可能通过线粒体信号通路抑制肺腺癌A谢细胞的生长并诱导其凋亡。