中枢神经系统损害时DNA损伤与修复

中枢神经系统(CNS)损害时DNA损伤及修复机制缺陷与卒中等CNS疾病相关。关于DNA损伤和修复机制及其与卒中等CNS损害关系的研究是一新课题,具有重要的理论和实践意义。     

用SCGE法检测燃煤污染型砷中毒患者血细胞DNA的损伤作用

目的 探讨砷中毒的致癌机理及寻找灵敏、实用的ＤＮＡ损伤监测指标,方法 应用单细胞凝胶电泳法（ＳＣＧＥ）对贵州省兴仁县燃煤型砷中毒重病区１７５名砷接触者的血细胞ＤＮＡ损伤进行了检测,并分析了相关因素的影响。结果 砷能引起人体血细胞ＤＮＡ单逻断裂,其损伤发生早于临床表现,并与尿砷,发砷呈正相关关系,与皮肤损害进展一致,吸烟和氟的影响可加重睦ＤＮＡ的损伤作用,结论 ＳＣＧＥ具有灵敏、快速、简便等优点,可     

H2O2致小鼠淋巴细胞DNA的损伤及修复

目的 应用单细胞电泳检测（ＳＣＧＥ）过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）致小鼠淋巴细胞ＤＮＡ损伤及其修复。方法 标准ＳＣＧＥ条件下荧光显微镜观察。结果 Ｈ２Ｏ２不同浓度８０、１６０和３２０ｕｍｏｌ／Ｌ，３个组Ｈ２Ｏ２浓度均可致小鼠淋巴细胞ＤＮＡ损伤，较低剂量即可造成细胞拖尾，可逆性损伤在６０ｍｉｎ内可获得明显修复。结论 单细胞电泳可快速灵敏地检测氧化损伤，也可能用于流行病学研究。     

用随机扩增多态性分析技术鉴定卒中相关基因连锁标记

目的：寻找卒中型自发性高血压大鼠卒中相关基因的遗传标记。方法和结果：用６０ 个随机引物对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和卒中型自发性高血压大鼠（ＳＨＲｓｐ）两个品系基因组ＤＮＡ进行随机扩增多态性分析（Ｒａｎｄｏｍ Ａｍ ｐｌｉｆｉｅｄ Ｐｏｌｙｍ ｏｒｐｈｉｃＤＮＡｓ,ＲＡＰＤ）,找到一个仅存在于ＳＨＲｓｐ 而不存在于ＳＨＲ的特异性ＤＮＡ片段,此片段长６３０ｂｐ,命名为ＳＨＲｓｐ－６３０。应用ＳＨＲｓｐ－６３０ 为探针,经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交证实,该序列在ＳＨＲｓｐ 为强阳性而在ＳＨＲ为弱阳性。经测序和ＧｅｎＢａｎｋ 查询,证实ＳＨＲｓｐ－６３０为新序列,ＧｅｎＢａｎｋ 序列编号为Ｇ３８０２１。结论：ＳＨＲｓｐ－６３０ 可能是与卒中相关基因紧密连锁的ＲＡＰＤ标记。这将有助于我们了解脑卒中发生的分子遗传学机制     

阿霉素致大鼠心肌线粒体DNA突变及硒的保护作用

采用ＰＣＲ方法对大鼠心肌ｍｔＤＮＡ特异片段进行扩增，用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和薄层扫描方法检测其片段的缺失突变和点突变。阿霉素组大鼠心肌ｍｔＤＮＡ特异片段出现缺失突变（６０．５％），并有点突变（２／６）。Ｓｅ保护组检出部分缺失突变（３０．０％），未检出点突变。阿霉素可以导致大鼠心肌ｍｔＤＮＡ突变热点区域发生缺失突变和点突变。ｍｔＤＮＡ损伤可能是阿霉素致心肌损伤的重要机制之一。Ｓｅ可以降低阿霉素对ｍｔＤＮＡ的损伤，对阿霉素性心肌损伤有明显地保护作用。     

弓形虫人源,畜源分离株的生化特性研究

本文采用弓形虫特异ＤＮＡ探针杂交技术，聚丙烯酰胺电泳，免疫印迹试验，色质地弓形虫人源分离的ＳＨ、ＺＳ２株，猪源分离的ＣＮ，ＰＰ株，兔源ＲＴ株等１１个分离株在核酸、蛋白质、脂肪酸方面与国际标准人株ＲＨ株进行分子生化特性的比较与分析，实验结果表明用＾３２Ｐ标记弓形虫ＤＮＡ探针（１．１Ｋｂ０能与各虫株ＤＮＡ杂交，在２．０ＫＢ位点上显示出明显的杂交带；ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳蛋白质分子量范围在１－１２０ＫＤ间     

脑缺血与DNA损伤

脑缺血再灌注时，细胞内氧自由基大量增加，直接参与神经元损伤，其机制与氧化ＤＮＡ损伤有关。氧化ＤＮＡ损伤主要包括ＤＮＡ单链损伤和双链损伤。ＤＮＡ单链损伤可造成多二磷酸腺苷－核糖多聚酶（ＰＡＲＰ）过度激活，并引起辅酶Ｉ（ＮＡＤ＾＊）衰竭，使细胞能量代谢障碍，最终导致细胞死亡。研究氧化ＤＮＡ损伤的分子机制及导找抑制ＤＮＡ损伤的特异性药物，对于缺血性脑损伤的防治具有极其重要的意义。     

核心蛋白聚糖真核表达载体及逆转录载体的构建及鉴定

目的：通过获取核心蛋白聚糖（ｄｅｃｏｒｉｎ,ＤＣＮ）基因,构建ＤＣＮ真核表达载体和ＤＣＮ逆转病毒载体,以探索今后肾脏疾病基因治疗的途径。方法：从大鼠肾脏组织中抽取ＲＮＡ,经逆转录－ＰＣＲ方法,扩增核心蛋白聚糖ｃＤＮＡ,并经序列测定正确后,将ＤＣＮ插入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３,应用Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ介导将ｐｃＤＮＡ３－ＤＣＮ转染真核细胞ＣＯＳ－７细胞,并于转染后４８、７２和９６ｈ用ＥＬＩＳＡ     

缺血性卒中后认知损害:病理生理学机制和预测因素

缺血性卒中引起的认知损害日益引起关注,探究其病理生理学机制和相关临床预测指标对了解疾病的发生、发展和治疗至关重要.文章从脑白质损伤、淀粉样蛋白异常沉积、血脑屏障破坏和突触可塑性损伤等方面探讨了卒中后认知损害的病理生理学机制,并对可用于预测卒中后认知损害的危险因素、影像学检查和物学标志物进行了综述.     

脑缺血后DNA损伤修复研究的进展（综述）

近年来,在缺血性脑损伤机制的研究中,DNA的损伤和修复引起了越来越多的关注.现已证明.脑缺血确实可引起DNA损伤,而缺血后DNA修复酶的变化和修复机制的失控均可加剧这一过程.文章着重综述脑缺血后与DNA损伤修复有关的酶的变化和相关机制.     

脑缺血后DNA损伤修复研究的进展

近年来 ,在缺血性脑损伤机制的研究中 ,DNA的损伤和修复引起了越来越多的关注。现已证明 ,脑缺血确实可引起DNA损伤 ,而缺血后DNA修复酶的变化和修复机制的失控均可加剧这一过程。文章着重综述脑缺血后与DNA损伤修复有关的酶的变化和相关机制。     

单细胞凝胶电泳技术分析过氧化氢对大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤作用

目的观察不同浓度过氧化氢（２５－２００μｍｏｌ／Ｌ）分别作用于正常大鼠外周血淋巴细胞不同时间（５ｍｉｎ和２０ｍｉｎ）后细胞ＤＮＡ的损伤情况。方法利用快速、灵敏的检测细胞ＤＮＡ损伤的单细胞凝胶电泳（ＳＣＧ）技术结合激光扫描共聚焦显微镜,以“彗星样”淋巴细胞出现率（计数一定量细胞其中彗星样细胞所占的比例）、总彗星长度（“彗星”电泳方向上的最大长度,即尾长）和尾距（尾部ＤＮＡ占总ＤＮＡ的百分比与头尾部中     

诱导分化促进DNA损伤的肺癌细胞凋亡

本试验的目的是探讨诱导分化剂和ＤＮＡ损伤性化疗药对肺腺癌细胞凋亡的影响。材料与方法（１）材料：人肺腺癌细胞Ａ５４９购自武汉大学典型培养物保藏中心,常规培养传代。诱导分化剂全反式维甲酸（ＲＡ）和ＤＮＡ荧光染料ｈｏｅｃｈｅｓｔ３３２５８购自美国Ｓｉｇｍａ...     

脑缺血后DNA损伤修复研究的进展

近年来，在缺血性脑损伤机制的研究中，DNA的损伤和修复引起了越来越多的关注。现已证明，脑缺血确实可引起DNA损伤，而缺血后DNA修复酶的变化和修复机制的失控均可加剧这一过程。文章着重综述脑缺血后与DNA损伤修复有关的酶的变化和相关机制。     

DNA和衰老关系的研究进展

ＤＮＡ和衰老关系的研究进展田清涞，李云兰（北京大学生命科学学院，北京１００８７１）ＤＮＡ和衰老关系的研究是揭开衰老之谜的关键，涉及面宽。本文仅就端粒ＤＮＡ、线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）、ＤＮＡ甲基化和染色质ＤＮＡ合成、缺损、修复与衰老关系予以综述。１端...     

T—2毒素致DNA损伤的单细胞电泳观察

应用单细胞凝胶电泳法（ＳＣＧＥ），测定Ｔ－２毒素引起ｖｅｒｏ细胞的ＤＮＡ损伤。结果显示，Ｔ－２毒素在４００～８００ｎｇ／ｍｌ浓度范围内能够引起ＤＮＡ损伤并有明显的剂量反应关系。对于该项实验在大骨节病研究中的意义做了扼要讨论     

滤纸干血滴抽提恶性疟原虫DNA用于PCR扩增

以ＳＴＥ－蛋白酶Ｋ－ＳＤＳ、甲醇－蛋白酶Ｋ－ＳＤＳ、Ｃｈｅｌｅｘ－１００加热法和Ｃｈｅｌｅｘ－１００蛋白酶Ｋ等四种方法对恶性疟患者滤纸干血滴样品进行ＤＮＡ抽提，供ＰＣＲ扩增特异性ＡＭＡ－１ＤＮＡ片段。结果显示，除ＳＴＥ－蛋白酶Ｋ－ＳＤＳ法抽提ＤＮＡ进行ＰＣＲ试验未能获得扩增产物外，其他３种方法抽提ＤＮＡ后进行ＰＣＲ试验均获得特异性约９００ｂｐＤＮＡ片段，可供进一步试验。     

DNA损伤与肝癌发生

肝癌是最常见的恶性肿瘤之一,其发生是一个复杂的生物学过程,具体机制尚未完全阐明.研究表明,乙、丙型肝炎病毒感染,黄曲霉毒素污染,饮酒,电离辐射以及具有有遗传毒性的人体代谢产物等能够诱导肝癌的发生,他们大都直接作用于肝细胞的遗传物质,引起DNA的损伤,这是发生肝癌的重要分子基础.DNA损伤后引起细胞一系列的反应,包括损伤信号的传导,损伤修复,诱导细胞死亡.这些诱因也能作用于损伤修复系统中的某个环节,使DNA损伤不能修复或不能正确修复,细胞发生恶性转化.因此,损伤DNA的累积就成为肝癌发生的重要分子机制,对其深入研究将会为肝癌的治疗奠定基础.     

布鲁氏菌病人淋巴细胞的细胞学研究

应用ＳＣＥｓ（ＳｉｓｔｅｒＣｈｉｏｍａｔｉｄＥｘｃｈａｎｇｅｓ）的方法，对３５例布病患者和３０例健康人淋巴细胞染色体ＳＣＥ频率及ＰＨＡ淋巴细胞转化现象进行了观察，结果表明：病例组与正常对照组间ＳＣＥ频率无显著性差异；而患者的淋巴细胞转化反应受到不同程度的抑制。经分析，羊种布氏杆菌对人的ＤＮＡ损伤作用和削弱ＤＮＡ修复作用不明显；同时说明机体细胞反应失调与布氏杆菌感染有关。     

阿尔茨海默病患者淋巴细胞内DNA氧化损务的研究

有学者提出阿尔茨海默病 (Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓｄｉｓｅａｓｅ ,ＡＤ)病因的氧化应激学说〔1〕,作为有氧代谢的产物 ,活性氧 (ＲＯＳ)能够袭击所有的生物分子和细胞内各种组分 ,尤其是ＤＮＡ。ＤＮＡ发生氧化损伤后可产生许多副产物 ,如 8 羟基脱氧鸟苷 (8 ｈｙｄｒｏｘｙ 2’ ｄｅｏｘｙｇｕａｎｏｓｉｎｅ ,8 ＯＨｄＧ)等。我们于 1998年1月至 1999年 12月利用强氧化剂过氧化氢 (Ｈ2 Ｏ2 )进行急性氧化应激试验 ,并用高效液相色谱法对ＡＤ患者和健康老年人淋巴细胞内的 8 ＯＨｄＧ含量进行测定 ,以探讨氧化损伤与ＡＤ的关系。　　一、…