Wortmannin抑制PI3K途径对白血病细胞周期特异性及BCL-2蛋白表达影响的研究

目的探讨Woltmannin抑制PI3K途径对K562、NB4、HL60细胞周期特异性、BCL-2蛋白表达的影响。探明PI3K途径在K562、NB4、HL60细胞周期、细胞凋亡、BCL-2蛋白表达中的不同作用。方法用PI3K特异抑制剂Wortmannin抑制PI3K途径．AraC诱导细胞凋亡，药物作用214h后，细胞经DNA特异性荧光染色，用流式细胞仪(FCM)检测细胞DNA含量、BCL-2蛋白表达。Multicyele Verson 4．00软件分析细胞DNA含量直方图及细胞周期、BCL-2蛋白表达。观察各细胞系增殖周期、细胞凋亡的变化。结果K562、NB4、HL60细胞经Wortmannin、Ara-C、Wortmannin Ara-C作用24h后细胞出现DNA含量低于G1期的亚二倍体峰(亚G1期细胞)这一凋亡细胞的特征性改变，实验组细胞增殖指数(PI)明显低于对照组，凋亡百分比显著增加。Wortmannin可以通过抑制PI3K通路使K562细胞阻滞于G1期。作用24h后细胞实验组细胞BCL-2蛋白表达较对照组降低，说明Wortmannin可促进K562细胞的凋亡。结论Wortmannin可以通过抑制PI3K通路抑制K562细胞的增殖。并可以通过抑制PBK通路使K562细胞阻滞于GI期。Wortmannin可抑制K562细胞的BCL-2蛋白表达，促进K562细胞的凋亡。Wortmannin属于细胞周期特异性药物。     

氯化甲基汞及三氧化二砷对K562细胞凋亡的影响

目的研究氯化甲基汞（MMC）及三氧化二砷（ATO）对K562细胞凋亡的影响。方法K562细胞经1．25、2．5、5、10和20μmol／LMMC或ATO作用24h，采用FITC-“Annexin”V／PI双染法进行细胞凋亡率的检测。结果K562细胞接触不同剂量MMC或ATO 24h，随着剂量增加凋亡率不断增加，5．0μmol／L的细胞凋亡率分别为（31．54±6．35）％和（25．37±7．68）％，与空白对照组（10．36±3．23）％比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论MMC及ATO均能促进K562细胞凋亡，且呈剂量依赖性。     

PTK787对K562细胞增殖及细胞周期作甩的影响

目的：观察酪氨酸激酶抑制剂PTK787对K562细胞增殖、细胞周期的作用,探讨PTK787抗急性髓系白血病的作用机制。方法：应用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）观察不同浓度P,rK787在不同时间对K562细胞增殖作用的影响;用流式细胞仪检测浓度PTK787对K562细胞周期的抑制作用。结果：随着PTK787浓度增加与作用时间延长,K562细胞的增殖抑制率逐渐升高。同一时间不同浓度组之间比较,或者同一浓度不同时间组问比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）,其中PTK787作用48h,以浓度320μmol／L对细胞抑制率最强。随着PTK787浓度增加,G1期细胞比例逐渐升高,s期细胞比例逐渐下降,各组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：PTK787可以抑制K562增殖,阻止K562细胞由G1期向S期转化,从而达到抗白血病的作用。     

维生素D受体异常表达对大鼠肾小管上皮细胞增殖凋亡的影响

目的 研究维生素D受体（VDR）异常表达对大鼠肾小管上皮细胞增殖凋亡的影响。方法 制取大鼠肾小管上皮细胞,并构建VDR干扰和过表达载体。将VDR干扰和过表达载体分别转染到大鼠肾小管上皮细胞中,通过MTT法检测VDR干扰和过表达后大鼠肾小管上皮细胞的增殖;流式细胞术检测细胞周期;Annexin - PI法检测细胞凋亡情况。结果 与对照组相比,过表达VDR后,大鼠肾小管上皮细胞的VDR蛋白表达显著上调,增殖速度下降,发生G1期阻滞,凋亡比例增多,差异具有统计学意义。而干扰VDR表达后,结果与上述相反,即大鼠肾小管上皮细胞的VDR蛋白表达显著下调,增殖速度加快,细胞凋亡比例降低,差异具有统计学意义。结论 VDR能促进大鼠肾小管上皮细胞发生细胞周期G1期阻滞,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。     

高脂饮食对载脂蛋白E缺乏鼠维生素D受体表达及一氧化氮合酶活性影响研究

目的了解高脂饮食对载脂蛋白（apoE）缺乏鼠（apoE^-/-）维生素D受体（VDR）表达及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）活性影响,探讨VDR在动脉粥样硬化（AS）形成的意义及可能机制。方法apoE^-／-小鼠与作为对照的C57BLP6J小鼠分别按数字表法分为正常食物组与高脂食物组,采用竞争蛋白结合放射免疫法检测小鼠血25-（OH）D水平,采用免疫荧光化学法及RT-PCR法检测小鼠主动脉VDR表达,应用硝酸还原酶法检测小鼠血一氧化氮（NO）含量和eNOS酶活力。结果高脂饮食进一步加重apoE-/-小鼠As病变、降低血25-（OH）D水平[血25-（OH）D：正常饲料C57BLP6J小鼠、高脂饲料C57BLP6J小鼠、正常饲料apoE。一小鼠、高脂饲料apoE-/-小鼠分别为[（26．44±1．28）ng／mL、（22．68±2．07）ng／mL、（1-7.46±4.2．22）ng／mL、（15．88±0．97）ng／mL,P〈0．01]。高脂饮食进一步上调apoE-/-小鼠主动脉VDR蛋白与mRNA表达水平[VDR蛋白分别为0．244±0．088、0．346±0．132、0．547±0．128、0．768±0．162,VDtlmRNA分另U为、0．228±O．08．3、0．375±0．103、0．451±0．117、0．597±0．131,P均〈0．01]。高脂饮食致apoE一小鼠血NO水平、eNOS酶活力明显增高[NO：（39．74±4．81）μmol／L、（48．1±5．24）ixmol／L、（67．34±6．14）tzmol／L、（86．74±8．05）txmol／L;eNOS：（8．6-t-O．77）u／L、（12．28±1．42）U／L、（15．96-t-O．92）U／L、（18．68±1．15）U／L,P均〈0．01]。血25-（OH）D水平与血浆中NO含量、eNOS酶活力及VDR表达呈负相关（P〈0．01）。结论apoE-/-小鼠血25-（OH）D水平降低,VDR表达量明显上调,血NO含量、eNOS酶活力增高,高脂饮食可进一步降低血25-（OH）13、NO水平,上调主动脉VDR表达,增加eNOS酶活力。高脂饮食、维生素D、apoE相互作用,影响As病变可能与NO、eNOS有关。     

1,25-(OH)_2D_3抑制人卵巢癌细胞SKOV-3增殖与调控microRNA-22的表达有关北大核心CSCD

目的通过观察1,25-(OH)2D3对SKOV-3细胞增殖和microRNA-22和microRNA-21表达的影响,探讨microRNAs在1,25-(OH)2D3抗肿瘤增殖中的作用。方法以不同浓度1,25-(OH)2D3(10-9、10-8、10-7mol/L)处理SKOV-3细胞,CCK-8法检测细胞增殖率,real time RT-PCR分析microRNA-22和microRNA-21的表达,流式细胞仪分析细胞周期,TUNEL法检测细胞凋亡。结果 1,25-(OH)2D3对SKOV-3细胞增殖有明显的抑制作用,并且存在着时间剂量依赖关系(P<0.01)。1,25-(OH)2D3可以降低microRNA-22的表达水平(P<0.05),但是不影响microRNA-21的表达。细胞周期分析显示,1,25-(OH)2D3可以诱导SKOV-3细胞阻滞于G0/G1,浓度越高阻滞越明显(P<0.05)。1,25-(OH)2D3促进SKOV-3细胞核内DNA断裂点增加,细胞凋亡增加(P<0.05)。结论在SKOV-3细胞中,1,25-(OH)2D3可能是通过抑制microRNA-22,促进细胞凋亡,调节细胞周期,抑制细胞增殖,从而到达抑制肿瘤的作用。[营养学报,2014,36(1):35-39]     

1,25-(OH)_2D_3抑制人卵巢癌细胞SKOV-3增殖与调控microRNA-22的表达有关

目的通过观察1,25-(OH)2D3对SKOV-3细胞增殖和microRNA-22和microRNA-21表达的影响,探讨microRNAs在1,25-(OH)2D3抗肿瘤增殖中的作用。方法以不同浓度1,25-(OH)2D3(10-9、10-8、10-7mol/L)处理SKOV-3细胞,CCK-8法检测细胞增殖率,real time RT-PCR分析microRNA-22和microRNA-21的表达,流式细胞仪分析细胞周期,TUNEL法检测细胞凋亡。结果 1,25-(OH)2D3对SKOV-3细胞增殖有明显的抑制作用,并且存在着时间剂量依赖关系(P<0.01)。1,25-(OH)2D3可以降低microRNA-22的表达水平(P<0.05),但是不影响microRNA-21的表达。细胞周期分析显示,1,25-(OH)2D3可以诱导SKOV-3细胞阻滞于G0/G1,浓度越高阻滞越明显(P<0.05)。1,25-(OH)2D3促进SKOV-3细胞核内DNA断裂点增加,细胞凋亡增加(P<0.05)。结论在SKOV-3细胞中,1,25-(OH)2D3可能是通过抑制microRNA-22,促进细胞凋亡,调节细胞周期,抑制细胞增殖,从而到达抑制肿瘤的作用。[营养学报,2014,36(1):35-39]     

1,25-(OH)2D3抑制人肝癌细胞增殖的研究

目的：探讨1，25－（OH）2D3抑制肝癌细胞增殖的机制。方法：体外培养肝癌细胞株SMMC－7721，培养基因10、50及100（nmol/L)1，25－（OH）2D3作用2d,4d,6d后，用四唑盐比色试验（MTT）和平板克隆形成实验检测细胞的存活和生长；台盼蓝拒染法绘制生长曲线；DNA凝胶电泳检测肝癌细胞凋亡。结果：MTT和平板克隆形成实验检测结果显示10－100nmol/L的1，25－（OH）2D3均对SMMC－7721细胞株有显的抑制作用，且呈剂量－效应关系。DNA凝胶电泳结果显示，1，25－（OH）2D3能够诱导SMMC－7721细胞凋亡。结论：1，25－（OH）2D3对于人肝癌细胞株SMMC－7721的增殖有显的抑制，其机理可能是通过干扰肝癌细胞的DNA代谢和诱导肝癌细胞凋亡。     

As2O3对NB4细胞增殖及凋亡的影响

目的研究不同浓度的三氧化二砷（As2O3）对急性粒细胞白血病细胞株NB4（APLM3）凋亡及细胞周期的影响。方法采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法测As2O3对NB4的细胞毒活性，流式细胞仪AnnexinVFITC-PI检测细胞凋亡率，溴化丙碇（PI）染色法检测细胞周期。结果1～8μmol／LAs2O3能显著抑制NB4细胞增殖，且这些变化呈明显的时间和浓度依赖关系（时间一剂量效应）。2～8μmol／LAs2O3能显著诱导NIM细胞凋亡，处理时间为12h，其早期凋亡率和总凋亡率均与剂量呈线性正相关；处理时间为24h，其早期凋亡率、中晚期凋亡率和总凋亡率与剂量呈线性正相关；As2O3处理时间为36h和48hNB4细胞以中晚期调亡为主。流式细胞检测表明，不同浓度的As2O3均使NB4细胞周期阻滞在G2／M期。结论As2O3能抑制人白血病NB4细胞增殖，其作用机制可能是通过诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖使细胞受阻于G2／M期。其诱导凋亡作用具有时间和浓度依赖关系。     

长链非编码RNA CUST-49525和CUST-40243在1,4-苯醌致K562细胞毒性中的表达

目的 通过检测LncRNA CUST-49525和CUST-40243在1,4-苯醌致细胞毒性过程中表达的变化，为后期研究两者在细胞毒性中参与的调控作用提供依据。方法 使用0、10、20、40μmol/L的1,4-苯醌染毒K562细胞24 h，光学显微镜下观察细胞形态特征；采用CCK-8法测定细胞生长情况；采用流式细胞术分析细胞周期分布和凋亡情况；使用实时荧光定量PCR法测定LncRNA CUST-49525和CUST-40243表达情况。结果 1,4-苯醌染毒K562细胞24 h后镜下观察细胞数量和形态发生明显改变，与对照组相比，20和40μmol/L剂量组K562细胞相对增殖率显著降低（P<0.01）；各剂量组1,4-苯醌均可诱导细胞发生凋亡，呈现浓度依赖性（P<0.01），与对照组相比，20和40μmol/L剂量组K562细胞G1期比例增加（P<0.01）,S期比例下降（P<0.05）；实时荧光定量PCR结果显示，与对照组相比，20和40μmol/L剂量组K562细胞中LncRNA CUST-49525和CUST-40243表达量增加（P<0.01）...     

维生素D受体在肠道肿瘤生长中与β-catenin通路之间的关系

目的探讨维生素D受体（VDR）对肠道肿瘤生长的影响以及与β-catenin信号通路之间的关系。方法体外培养的人类结肠癌SW480细胞株经维生素D处理4h,免疫沉淀法检测VDR和t3-catenin蛋白的交互作用,24h后用Westernblot检测细胞E．cadherin蛋白的表达。体内实验比较APCmin／＋VDR-／-与APCmin／＋小鼠,免疫组化法检测两型小鼠肠道肿瘤VDR、β-catenin和Brdu蛋白的表达,Westernblot检测肿瘤和肿瘤旁组织β-catenin蛋白的表达。结果维生素D处理SW480细胞后,VDR和β-catenin蛋白相互结合,随后E-cadherin蛋白表达增高（对照组灰度值145．57±4．21,实验组109．35±3．56,t=32．63,P〈0．05）。缺失VDR的APCmin／＋VDR-／-小鼠肠道肿瘤中β-catenin蛋白表达免疫组化（灰度值140．51±2．57）及Westemblot（灰度值166．47±2．36）检测均高于APCmin／＋肿瘤（分别为145．41±3．62、182．35±3．24,t=2．65,4．36,P〈0．05）。结论维生素D抑制肠道肿瘤增殖的作用可能通过VDR影响β-catenin信号通路来完成。     

苦参碱联合阿霉素对耐药白血病K562／AO2细胞株凋亡及Bel-2表达的影响

目的研究苦参碱联合阿霉素对耐药白血病细胞系K562／AO2体外增殖的抑制、诱导凋亡及对Bcl-2表达的影响。方法实验分对照组,阿霉素组,苦参碱组（又分为0．50mg／ml、0．75mg／ml、1．0mg／ml3个不同的浓度组）和苦参碱＋阿霉素组（也根据苦参碱的浓度不同分为0．50mg／ml、0．75mg／ml、1．0mg／ml3个不同的浓度组）,共分为8个组。取对数生长的肿瘤细胞,1×10^6／孔,分别加入阿霉素、不同浓度的苦参碱,不同浓度的苦参碱联合阿霉素予以处理,对照组只加等体积的培养基不加药物。加入药物后继续培养48小时。以MTr法检测肿瘤细胞增殖的抑制率,流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡、Bcl-2表达。结果单纯阿霉素组、单纯苦参碱组、苦参碱＋阿霉素组对K562／A02细胞系均有抑制作用;随苦参碱浓度的增高,抑制作用增强,各组间差异有统计学意义（P〈0．01）;苦参碱＋阿霉素组的细胞抑制率均显著高于单纯苦参碱组和单纯阿霉素组,差异有统计学意义（P〈0．01）。苦参碱组及苦参碱联合阿霉素组K562／A02细胞凋亡率较对照组明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）;苦参碱＋阿霉素组的细胞凋亡率较单纯苦参碱组及单纯阿霉素组均显著升高,差异有统计学意义（P〈0．01）,并且随苦参碱浓度的增加,细胞凋亡率增加。各单纯组及联合组细胞Bcl-2的阳性表达率与对照组相比均明显下调,差异有统计学意义（P〈0．05）;苦参碱＋阿霉索组细胞Bcl-2表达率与单纯苦参碱组、单纯阿霉素组相比均明显下调,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论苦参碱与阿霉素联合能增强对K562／AO2细胞的抑制作用,促进其凋亡,明显降低Bcl-2表达。     

锰对人脐静脉内皮细胞及半胱天冬酶表达影响

目的探讨锰对人脐静脉内皮细胞系HUVEC-304细胞生长周期及半胱天冬酶-3（caspas-3）、半胱天冬酶-8（caspase-8）表达的影响。方法以100～800μmoml／L）的氯化锰分别处理HUVEC-304细胞24～72h后，四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法检测EVC-304细胞的生长活性；流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡情况；蛋白印迹法（Western blot）检捌HUVEC-304细胞在，氯化锰半数抑制浓度（IC50）400μmol／L作用24h时caspase．8、caspase-3的表达。结果氯化锰可呈时间及剂量依赖性抑制HUVEC-304细胞的增殖和诱导细胞凋亡，抑制率为22．34％～90．94％，凋亡率为10．20％～98．73％。氯化锰24hIC50约为400μmol／L，在此浓度下。HUVEC-304细胞caspase-8、caspase-3表达显著增高。（P〈0．05）。结论氯化锰能够抑制HUVEC-304细胞的增殖。星明显的时效和量效关系。caspase-8、cas-pase-3表达增高在细胞增殖和凋亡中起重要的作用，可能是其作用机制之一。     

绿茶主要活性成分对叙利亚地鼠胚胎癌前细胞生长和凋亡的影响

目的建立叙利亚地鼠胚胎细胞（Syrian hamster embryo cell,SHE细胞）混合培养模型,研究表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-Gallate,EGCG）对SHE癌前细胞生长、增殖和凋亡的作用,探讨EGCG的抑癌机制。方法将SHE癌前细胞和正常细胞分别按1：10000、1：1000、1：100、1：10比例接种于6孔的培养皿中,培养7d,建立SHE细胞混合培养模型。以0μmol／L EGCG为对照组,分别选取浓度为0．5、1、5、10、50μmol／L的EGCG,通过SHE细胞生长实验,原位细胞凋亡实验、原位细胞增殖实验和基因芯片检测EGCG对SHE正常细胞、SHE癌前细胞和混合培养模型中SHE癌前细胞的生长、增殖、凋亡及相关调控基因表达的影响。结果SHE癌前细胞与正常细胞的比例为1：100是合适的混合培养模型。0．5、1、5、10μmol／L的EGCG促进了SHE正常细胞的生长,而浓度为50μmol／L的EGCG抑制了SHE正常细胞的生长。在1：200比例的SHE癌前细胞和正常细胞混合培养模型中,与对照组相比,浓度为5、10μmol／L的EGCG抑制了不同大小的SHE癌前细胞克隆的生长。对照组中SHE癌前细胞的DNA合成指数和凋亡指数分别是39．3％和6．5％,5、10p,mol／LEGCG作用后SHE癌前细胞的DNA合成指数分别降至25．6％和24．8％,细胞凋亡指数分别升至12．65％和14．5％。EGCG抑制了混合培养模型中SHE癌前细胞的生长和增殖,促进了其凋亡。EGCG对于细胞凋亡的调控可能通过p53、NF—KB、bcl-2通道的基因表达来实现;EGCG对于细胞增殖的调控可能通过阻滞细胞周期G1／S期实现。结论EGCG可能是通过抑制癌前细胞的增殖和促进其凋亡进而抑制癌症。     

Survivin在冬凌草甲素介导下对人前列腺癌细胞PC-3凋亡的作用

目的观察冬凌草甲素对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞株-PC-3细胞的诱导凋亡作用,探讨Survivin在此过程中的作用。方法用不同浓度的冬凌草甲素干预PC-3细胞,MIT试验分析观察其对PC-3细胞活力的影响;通过用流式细胞仪分析PC．3早期凋亡细胞的百分率;用Western印迹检法、实时荧光定量PCR方法检测PC-3细胞Survivin的蛋白和mRNA表达的变化。结果（1）细胞生长抑制力呈一定的时间、剂量依赖性,冬凌草甲素浓度为2．5、5、10、20、40μmol／L时,干预48h后相对应的平均细胞生长抑制率依次为9．2％、25．3％、39．3％、77．2％、92．5％,药物抑制PC-3细胞活力的IC50约为10．29μmol／L;流式细胞仪检测经不同浓度的冬凌草甲素（0,10,20,40μmol／L）干预48h后,PC-3细胞的早期凋亡率分别为4．8％,15．4％,19．5％和27．4％（P〈0．05）。（2）冬凌草甲素以浓度依赖性方式抑制PC-3细胞的Survivin的蛋白和mRNA表达。结论冬凌草甲素能以浓度依赖性方式诱导PC-3细胞凋亡。冬凌草甲素通过影响Survivin的表达来诱导PC-3细胞凋亡。     

厚朴酚对白血病细胞K562体外作用机制探讨

目的探讨中草药提取物厚朴酚对慢性髓性白血病细胞株K562的体外作用机制。方法选用不同浓度(0、5、10、15、20、25μmol/L)厚朴酚处理K562细胞不同时间(24 h、48 h),用MMT方法测定厚朴酚对K562细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测厚朴酚对K562细胞凋亡的影响。结果厚朴酚对K562有明显的增殖抑制作用,呈明显的时间-剂量依赖关系;其作用24 h、48 h的半数有效抑制率(IC50)分别为9.05、5.62μmol/L(P0.05)。流式细胞术检测结果显示,0、5、10、15μmol/L厚朴酚处理24 h后细胞凋亡率分别为1.35%、16.91%、29.61%、46.26%,呈剂量-时间依赖性(P0.05);同时厚朴酚能够抑制BCL-2的表达、上调Bax、细胞色素C及活化的caspase-3、caspase-9的表达。结论厚朴酚对K562细胞具有明显的增殖抑制作用,其作用可能是通过caspase依赖的线粒体途径诱导细胞凋亡的。     

β-胡萝卜素和VC对K562细胞c-myc基因表达的影响

目的研究β-胡萝卜素和维生素C对白血病细胞中c-myc癌基因表达的影响.方法体外培养白血病细父胞株K562,分别添加不同浓度的β-胡萝卜素和VC,培养24h、48h、72h后,利用台盼蓝拒染法检测两种微营养素对细胞增殖的抑制作用;同时取作用24h的细胞利用Northern印迹杂交检测细胞中c-myc基因的表达.结果VC(5、10、100μmol/L)对K562细胞增殖具有显著的抑制作用(P＜0.05),而且低浓度的VC(5μmol/L)对K562细胞的抑制作用出现较早.β-胡萝卜素3个剂量组(10、50、100μmol/L)均可抑制K562细胞增殖,具有显著性差异(P＜0.05).VC(5μmol/L)和β-胡萝卜素(50μmol/L)均能诱导K562细胞凋亡.VC(5μmol/L)对K562细胞内c-myc的表达没有明显作用(P＞0.05).β-胡萝卜素(50μmol/L)对K562细胞内c-myc的表达有显著促进作用(P＜0.05).结论VC抑制K562细胞增殖的效应与c-myc的表达无关.β-胡萝卜素可能通过上调c-myc基因的表达,进一步诱导白血病细胞凋亡,从而抑制白血病细胞增殖.     

西门木炔酸对HCT116细胞的抗癌活性及机制探讨

目的探讨西门木炔酸的抗结肠癌活性和相关机制。方法以}HCT116细胞为对象,用不同浓度和不同时间的西门木炔酸干预后,使用MTT法测细胞增殖活性、流式细胞仪测细胞凋亡和细胞周期情况,以及qPCR检测细胞周期相关因子的表达情况。结果西门木炔酸干预48h,显著抑制了HCT116的增殖活性(抑制浓度大于25μmol/L);干预72h,西门木炔酸25μmol/L时对HCT116细胞增殖的抑制率超过了50%。西门木炔酸也显著促进了HCT116晚期凋亡和坏死细胞的生成(25~100μmol/L)。西门木炔酸还显著阻滞HCT116细胞周期G1-S期的转变,表现为S期细胞显著下降(25~100μmol/L),并呈现时间和剂量依赖优势。此外,西门木炔酸干预下,HCT116细胞周期因子CCND3、CCNE1和CDK6的表达也显著下降(100μmol/L)。结论西门木炔酸显著抑制HCT116细胞增殖、促进细胞晚期凋亡和坏死,这与西门木炔酸抑制细胞周期因子表达进而阻滞HCT116细胞周期G1-S期的转变有关     

维生素D类似物EB1089对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨维生素D类似物EB1089对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养维生素D3受体(VDR)阳性和阴性的肝癌细胞株HepG2和HCCT细胞,培养时添加100、10和1nmol/LEB1089,分别作用2、4和6d后,用四唑蓝比色实验(MTT)、平板克隆形成实验检测细胞的存活和生长;用反转录PCR(RTPCR)检测VDRmRNA的表达;用流式细胞仪和电子显微镜检测细胞凋亡。结果EB1089对VDRmRNA表达阳性的HepG2细胞的抑制率为175%～721%,对VDRmRNA表达阴性的HCCT细胞没有抑制作用;电镜结果显示EB1089可诱导HepG2细胞凋亡,流式细胞仪结果显示凋亡细胞的百分比为214%,并可阻滞细胞周期于G1期。结论EB1089对人肝癌细胞株HepG2的增殖具有抑制作用,可通过VDR受体抑制人肝癌细胞的增殖,并可诱导HepG2细胞凋亡。     

氯化三丁基锡对大鼠睾丸支持细胞的影响

[目的]探讨氯化三丁基锡对雄性sD大鼠睾丸支持细胞活力和增殖的影响。[方法]无菌制备20-23天龄sD大鼠的睾丸支持细胞,用HE染色、FAS—L免疫组化染色进行细胞鉴定。设空白对照组、溶剂对照组和20×10^-9、40×10^-9、80×10^—9、120×10^—9mol／L氯化三丁基锡染毒组,用四唑盐比色法（MTT）、免疫细胞化学法观察细胞增殖及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达情况,流式细胞仪分析细胞周期分布。[结果]各染毒组睾丸支持细胞的存活率明显低于对照组（P〈0．05）,G0／G1期细胞构成比增加,细胞增殖指数下降,80×10^-9、120×10^-9mol／L染毒组PCNA表达量下降。[结论]氯化三丁基锡可通过抑制睾丸支持细胞增殖,影响细胞周期分布和PCNA表达而表现出对雄性大鼠的生殖毒性。