低碘膳食对大鼠脑组织同源盒基因Nkx-6.1和Nkx-6.2 mRNA表达的影响

目的 研究低碘膳食对大鼠脑组织同源盒基因Nkx-6.1、Nkx-6.2 mRNA表达的影响,探讨低碘导致脑发育迟滞的可能分子作用机制.方法 20只雌性Wistar大鼠按体质量随机分为2组:低碘组和对照组,均饲以低碘饲料(含碘量为13.66 μg/kg),分别饮用去离子水和含碘200 μg/L的碘酸钾溶液,3个月时采用化学发光免疫分析法检测大鼠血清甲状腺激素水平,然后将雌鼠与正常饲养的Wistar雄鼠进行交配,分别取孕16 d、新生期及生后20日龄仔鼠脑组织,采用实时荧光定量PCR检测Nkx-6.1、Nkx-6.2 mRNA的表达.结果 ①低碘组大鼠血清TT3、TT4、FT3、FT4水平[(0.89±0.20)、(0.32±0.16)nmol/L,(3.33±0.61)、(3.28±0.80)pmol/L]均明显低于对照组[(1.04±0.06)、(39.42±14.68)nmoL/L,(4.83±0.33)、(26.99±4.48)pmol,t=2.71、6.52、5.70、12.89,P<0.05或<0.01].②对照组孕16 d、新生期及20日龄仔鼠脑组织Nkx-6.1 mRNA表达水平分别为(1.90±0.23)×10-3、(1.86±0.40)×10-4、(1.11±0.27)×10-4,各日龄间比较差异有统计学意义(F=827.58,P<0.01),随着日龄增加Nkx-6.1 mRNA表达水平明显下降,两两比较差异均有统计学意义(P均<0.01);低碘组各日龄仔鼠脑组织Nkx-6.1 mRNA表达水平分别为(1.16±0.16)×10-3、(3.44±0.49)×10-4、(3.58±0.64)×10-4,差异有统计学意义(F=297.25,P<0.01),但变化趋势与对照组不同,孕16 d表达水平最高,与新生期及20日龄比较,差异有统计学意义(P<0.01);低碘组与对照组比较,孕16 d明显降低(t=10.14,P<0.01).而新生期及20日龄则明显增高(t值分别为9.69、13.81,P均<0.01).③对照组和低碘组各日龄仔鼠脑组织Nkx-6.2 mRNA表达水平分别为(1.03±0.19)×10-2、(1.33±0.10)×10-3、(8.79±0.87)×10-2和(0.31±0.03)×10-2、(1.53±0.13)×10-3、(7.51±0.86)×10-2,组间比较差异有统计学意义(F值分别为1293.02、1065.83,P均<0.01),随着日龄增加,两组表达趋势一致,20日龄最高,孕16 d次之,新生期最低;低碘组20日龄仔鼠与新生期及孕16 d比较,差异有统计学意义(P均<0.01),对照组新生期仔鼠与孕16 d比较,差异有统计学意义(P<0.01);低碘组与对照组比较,孕16 d及20日龄明显降低(t值分别为14.35、4.05,P均<0.01),而新生期仔鼠则明显增高(t=4.78,P<0.01).结论 同源盒基因Nkx-6.1、Nkx-6.2mRNA表达水平改变可能与低碘导致脑发育迟滞有关.     

生芪降糖颗粒对2型糖尿病大鼠血糖、血脂及血管内皮素表达的影响

目的 探讨生芪降糖颗粒对糖尿病大鼠血糖、血脂及血管内皮素表达的影响.方法 制作2型糖尿病大鼠模型,随机分为生芪降糖颗粒低剂量组、中剂量组、高剂量组、文迪雅组、对照组.正常组给予蒸馏水灌胃,模型组分别给予生芪降糖颗粒低剂量、中剂量、高剂量、文迪雅、蒸馏水灌胃,至血糖下降至正常组水平或与造模时比较有统计学差异为治疗有效.测定各组血糖、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、胰岛素、主动脉内皮素1(ET-1)的变化及ET-1mRNA表达.结果 药物干预后生芪降糖颗粒中、高剂量组和文迪雅组血糖、TC、TG和胰岛素明显下降(P均<0.01).文迪雅组和生芪降糖颗粒高剂量组ET-1和主动脉El-1mRNA表达量较对照组均显著下降(P均<0.01).结论 ①生芪降糖颗粒有抗糖尿病作用,并呈剂量依赖性;②生芪降糖颗粒降低ET-1mRNA的表达,可保护和改善糖尿病大鼠主动脉内皮和心肌的功能.     

低碘膳食对大鼠脑组织同源盒基因nkx2.1表达的影响

目的 研究低碘膳食对大鼠脑组织同源盒基因nkx2.1表达的影响.方法 雌性Wistar大鼠40只,按体质量随机分为低碘组和对照组,均饲以含碘量为13.66μg/kg的低碘饲料,分别饮用去离子水和200μg/L碘酸钾溶液,3个月后用化学发光免疫分析方法测定大鼠血清甲状腺激素(Tr3、Tr4、FT3、FT4),再将两组大鼠与健康雄鼠进行交配,在孕16 d、新生及20日龄时,取胎鼠或仔鼠脑组织,用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测脑组织nkx2.1 mRNA表达.结果 大鼠血清TT3、TT4、FT3、FT4水平,低碘组[(0.89±0.20)、(0.32±0.16)nmol/L、(3.33±0.61)、(3.28±0.80)pmol/L]明显低于对照组[(1.04±0.06)、(39.42±14.68)nmol/L、(4.83±0.33)、(26.99±4.48)pmol/L;t值分别为2.71、6.52、5.70、12.89,P<0.05或<0.01].对照组孕16 d、新生及20日龄大鼠脑组织nkx2.1 mRNA表达分别为(5.60±0.30)×10-3、(1.20±0.29)×10-3、(0.18±0.06)× 10-3,低碘组同日龄大鼠nkx2.1 mRNA表达分别为(3.00±0.55)×10-3、(1.90±0.21)×10-3、(0.69±0.15)×10-3.对照组、低碘组各日龄胎、仔鼠之间nkx2.1 mRNA表达水平比较,差异有统计学意义(F值分别为2102.07、162.40,P均<0.01),对照组、低碘组新生仔鼠nkx2.1 mRNA的表达比孕16 d胎鼠低(P均<0.01),20日龄仔鼠nkx2.1mRNA表达比孕16 d和新生降低(P均<0.01);低碘组与同日龄对照组比较.对照组孕16 d胎鼠nkx2.1 mRNA表达明显高于低碘组胎鼠(t=16.073,P<0.01),而新生及20日低碘组明显高于对照组(t值分别为7.537、12.227,P均<0.01).结论 低碘导致的脑发育迟滞与nkx2.1在腩组织中的差异表达密切相关.     

三七总皂苷对心肌梗死大鼠血管新生及VEGF表达的影响

目的探讨三七总皂苷对心肌梗死大鼠血管新生及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法成年健康Wistar大鼠108只,随机分为对照组、三七总皂苷低剂量组和高剂量组,各36只。采用左冠状动脉结扎法建立急性心肌梗死大鼠模型。模型建立后对照组给予生理盐水100mg/kg腹腔注射;三七总皂苷低、高剂量组分别给予100mg/kg和400mg/kg三七总皂苷腹腔注射,每日一次。分别于术后3d,7d,14d和21d处死大鼠9只,检测各组大鼠心肌梗死周边组织微血管密度、心肌梗死面积百分比、心肌梗死周围组织VEGF mRNA表达水平,分析微血管密度与VEGF mRNA的相关性。结果 3组大鼠心肌梗死周边组织微血管密度逐渐增加,低剂量组和高剂量组各时点心肌梗死周边组织微血管密度显著高于对照组(P0.05);而高剂量组显著高于低剂量组(P0.05);3组大鼠各时点心肌梗死面积百分比差别有统计学意义,高低剂量组显著低于对照组(P0.05);而低剂量组和高剂量组差别无统计学意义(P0.05);对照组大鼠心肌梗死周围组织VEGF mRNA表达呈现先增高后降低的趋势;高低剂量组大鼠VEGF mRNA表达随时间推移显著增高;各时点高剂量组VEGF mRNA表达水平显著高于对照组和低剂量组(P0.05),低剂量组显著高于对照组(P0.05);3组大鼠心肌梗死周围组织血管密度与VEGF mRNA均呈现正相关(r_(对照组)=0.86,r_(低剂量组)=0.84,r_(高剂量组)=0.86,P0.05)。结论三七总皂苷通过上调VEGF表达促进新生血管生成,减少了心肌梗死面积。     

不同孕期补充甲状腺激素对子鼠脑组织生长相关蛋白-43表达的影响

目的 研究不同孕期低碘孕鼠补充甲状腺激素对子鼠脑组织生长相关蛋白(GAP) - 43表达的影响,探讨甲状腺激素不足造成的脑发育落后现象的可能机制.方法 1月龄Wistar大鼠160只,雌、雄各半.雌性大鼠随机分为8组:正常组和7个低碘组,每组10只.各组均饲以低碘饲料,正常组饮用碘浓度为200 μg/L的碘酸钾溶液,总碘摄入量相当于大鼠生理碘需要量,低碘组饮用去离子水.3个月后,与正常Wistar雄鼠进行交配.选择1个低碘组不补充甲状腺激素作为阴性对照,其余6组分别在妊娠早期(孕1～17 d)和妊娠中、晚期(孕18 d～出生后20 d)补充高、中、低剂量甲状腺激素,剂量分别为:3.5、2、0.5 μg/100 g体重.8组分别取新生当天、生后7d、14 d、21 d、28 d的子鼠脑组织,应用SABC法检测GAP- 43在神经细胞中的表达,图像分析方法定量检测蛋白的含量.结果 低碘组不同日龄子鼠脑组织GAP-43的表达普遍低于同日龄正常组(P＜0.05),只有在28 d时大于正常组(P＜0.05);对低碘孕鼠给予中、高剂量的甲状腺激素,可以使子鼠脑组织GAP-43的表达接近正常水平,尤其是在孕早期补充甲状腺激素(P＜0.05).结论 孕鼠低碘导致子鼠脑组织GAP- 43表达降低,低碘孕鼠补充中剂量以上的甲状腺激素,可以使子代GAP-43的表达水平接近正常,在孕早期补充效果更好.     

垂体腺苷酸环化酶激活肽对脑缺氧缺血新生大鼠胱冬酶-3和X-连锁凋亡抑制蛋白表达的影响

目的 观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(pituitary adenylate cyclase activating peptide,PACAP)对脑缺氧缺血(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)新生大鼠胱冬酶-3和x-连锁凋亡抑制蛋白(x-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)的影响,探讨其脑保护作用和有效剂量.方法 60只新生大鼠随机分为假手术组、生理盐水对照组以及PACAP大剂量组(10-8 mol)、中等剂量组(10-9 mol)和小剂量组(10-8 mol),建立HIBD动物模型.应用实时荧光定量聚合酶链反应法榆测新生大鼠HIBD后24 h损伤侧脑组织的胱冬酶-3 mRNA和XIAP mRNA表达情况,应用分光光度法检测胱冬酶-3活性.结果 在HIBD后24 h,生理盐水对照组胱冬酶-3 mRNA表达和酶活性以及XIAP mRNA表达均显著高于假手术组(P均<0.01);PACAP各剂量组胱冬酶-3 mRNA表达和酶活性均显著低于生理盐水对照组(P均<0.01),而XIAP mRNA表达均显著高于牛理盐水对照组(P均<0.01).结论 PACAP能上调XIAP mRNA表达,抑制胱冬酶-3 mRNA表达和酶活性,对新生大鼠HIBD具有保护作用,而且在大剂量、中等剂量和小剂量时均有效.     

梓醇对糖尿病大鼠胰岛细胞Insulin表达的影响

目的观察梓醇对糖尿病大鼠胰岛细胞Insulin表达的影响。方法选取雄性Wistar大鼠,8周龄,根据随机数字表法分为正常组(10只)与实验组(90只)。实验组饲养8周高糖高脂饮食后经腹腔注射链脲佐菌素15 mg/kg,以空腹血糖≥16.7 mmol/L作为2型糖尿病成模标准,将符合2型糖尿病成模标准的60只大鼠随机分为模型组、二甲双胍组、梓醇低剂量组、梓醇中剂量组、梓醇高剂量组。正常组和模型组灌胃蒸馏水5mL/(kg·d);二甲双胍组灌胃二甲双胍90 mg/(kg·d);梓醇低、中、高剂量组分别灌胃梓醇2.5mg/(kg·d)、5mg/(kg·d)、10mg/(kg·d)。分别干预12周后,经免疫组化检测胰岛细胞Insulin的表达水平,Western Blot检测腺苷酸活化蛋白激酶-α1(AMPK-α1)蛋白表达。结果免疫组化染色显示,各组大鼠胰岛细胞Insulin均有表达,与模型组相比,二甲双胍组、梓醇各剂量组大鼠胰岛细胞Insulin表达增多,其中梓醇高剂量组、梓醇低剂量组Insulin表达与二甲双胍组比较差异有统计学意义(P0.01)。Western Blot检测结果显示,与模型组比较,二甲双胍组、梓醇低剂量组、梓醇中剂量组、梓醇高剂量组胰岛细胞AMPK-α1蛋白表达相对增多(P0.01),其中梓醇高剂量组AMPK-α1蛋白表达较二甲双胍组、梓醇低剂量组、梓醇中剂量组表达增多,差异有统计学意义(P0.01)。结论梓醇可促进糖尿病大鼠Insulin分泌,其机制可能是通过上调AMPK-α1蛋白表达发挥作用。     

黄芪甲苷对压力超负荷大鼠心室重构及过氧化物酶体增殖物激活受体a表达的影响

目的:研究黄芪甲苷对压力超负荷大鼠心室重构的影响,初步探讨其具体机制。方法:8周龄健康SD大鼠采用腹主动脉缩窄法建立压力超负荷模型,术后6周行大鼠超声心动图判断建模是否成功,建模成功后随机分为盐酸贝那普利组、模型对照组、低剂量及高剂量黄芪甲苷组,另建立假手术组,每组20只大鼠,低剂量和高剂量黄芪甲苷组分别给予40 mg/(kg·d)、80 mg/(kg·d)的黄芪甲苷灌胃,盐酸贝那普利组给予10 mg/(kg·d)的盐酸贝那普利灌胃,假手术组及模型对照组给予相同体积的生理盐水灌胃。干预8周后行大鼠超声心动图测定大鼠心脏结构及功能指标,然后行大鼠左心室插管收集血流动力学参数,留取大鼠血液及心肌测定游离脂肪酸(FFA)浓度,留取心肌组织行苏木素伊红(HE)染色、Masson染色观察心肌细胞形态学变化,蛋白免疫印迹(Western blot)、实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测过氧化物酶体增殖物激活受体a(PPARa)蛋白及mRNA表达情况。结果:与假手术组相比,模型对照组大鼠的左心室质量指数、胶原容积分数、FFA浓度增高(P均0.05~0.01),PPARa蛋白及其mRNA表达明显下降(P均0.01)。黄芪甲苷干预后,低剂量及高剂量黄芪甲苷组左心室质量指数、胶原容积分数、FFA浓度较模型对照组下降(P均0.05~0.01),PPARa蛋白及其mRNA表达较模型对照组升高(P均0.01)。结论:黄芪甲苷可以抑制压力超负荷大鼠心室重构,其机制可能是通过上调PPARa及其mRNA的表达情况,提高心肌FFA利用率,进而改善心肌能量代谢实现的。     

灯盏花素干预大鼠肝星状细胞TGFβ1、α-SMA的表达

目的 研究灯盏花素对CCl4诱导的肝纤维化模型大鼠TGFβ1、α-SMA表达的研究.方法 本实验用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,喂服灯盏花素.60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、灯盏花素高剂量组、灯盏花素中剂量组、灯盏花素低剂量组、秋水仙碱组.用药4w后,测定肝纤维化模型大鼠的谷草转氨酶、谷丙转氨酶,检测平滑肌肌动蛋白mRNA和蛋白的表达,转化生长因子mRNA与蛋白的表达.结果 模型组大鼠血清ALT、AST明显高于正常对照组(P＜0.05).与模型组相比较,灯盏花素高、中、低剂量组ALT、AST均明显降低(P＜0.05).模型组与正常对照组α-SMA mRNA及蛋白有显著性差异(P＜0.01);灯盏花素不同剂量组均能使α-SMA mRNA及蛋白表达显著降低(P＜0.01).模型组与正常对照组TGFβ1 mRNA及蛋白有显著性差异(P＜0.01),灯盏花素不同剂量组均能使TGFβ1 mRNA及蛋白的表达显著降低(P＜0.01或P＜0.05).光镜显示:灯盏花素各剂量组的肝脏病理学改变较模型组减轻.结论 ①灯盏花素能保护肝细胞活性,促进肝细胞修复再生;降低转氨酶,具有抗肝纤维化作用.②灯盏花素可以降低α-SMA、TGFβ1表达,抑制星状细胞激活.     

参芪复方对2型糖尿病GK大鼠胰岛β细胞凋亡及Caspase-3表达的影响

目的 观察参芪复方对自发性2型糖尿病(T2DM)动物GK大鼠胰岛β细胞凋亡的影响并探讨其可能机制.方法 选取4月龄SPF级雄性GK大鼠50只,随机分为模型组、盐酸二甲双胍组、参芪复方低、高剂量组并另设正常对照组.连续灌药4 w后,TUNEL染色观察各组胰岛β细胞凋亡指数(AI),并采用免疫组化染色,Mias-2000图像分析系统观察各组大鼠胰岛β细胞Caspase-3阳性物质积分光密度.结果 模型及低剂量组β细胞AI较正常组显著增高(P＜0.01),各治疗组β细胞AI显著低于模型组(P＜0.01),高剂量组及二甲双胍组β细胞AI显著低于低剂量组(P＜0.01)且与正常组比较无统计学意义(P＞0.05);模型及低剂量组胰岛Caspase-3积分光密度显著高于正常组(P＜0.01),高剂量组、二甲双胍组Caspase-3积分光密度显著低于模型组和低剂量组(P＜0.01),且与正常组比较无统计学意义(P＞0.05).结论 参芪复方能够抑制GK大鼠胰岛β细胞凋亡,机制可能与其抑制β细胞Caspase-3表达有关.     

甲状腺激素对仔鼠大脑皮质中NO/cGMP信号转导通路的作用

目的研究甲状腺激素对大鼠仔鼠大脑皮质中一氧化氮(NO)水平、一氧化氮合酶(NOS)活性和环鸟苷酸(cGMP)水平的影响,为探讨甲状腺激素对神经系统发育的作用机制提供实验资料。方法取怀孕3d的SD大鼠10只,随机分为实验组与对照组。实验组饮含1%高氯酸钠的自来水,对照组饮自来水,直至仔鼠产下15d(其产下的仔鼠分别为甲状腺功能低下仔鼠及正常仔鼠)。采用放射免疫法测定仔鼠血清中游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)和仔鼠大脑皮质cGMP水平,采用硝酸还原酶法测仔鼠大脑皮质中NO水平,采用分光光度计法测NOS活性。结果实验组仔鼠血清FT3、FT4明显低于对照组(P<0.01)。实验组仔鼠大脑皮质中NO水平、NOS活性及cGMP水平也较对照组显著降低(P<0.01)。相关分析表明:血清FT3与大脑皮质中NO、cGMP水平呈显著正相关,r值分别为0.91、0.97,P<0.01;血清FT4与大脑皮质中NO、cGMP水平也呈显著正相关,r值分别为0.90、0.96,P<0.01;大脑皮质中NO与cGMP水平呈显著正相关,r值为0.90,P<0.01。结论甲状腺激素的缺乏可降低仔鼠大脑皮质中NO、cGMP水平,NO/cGMP信号转导系统在甲状腺功能低下导致脑发育障碍中发挥重要作用。     

成年期甲状腺功能减退症大鼠额叶突触结合蛋白I表达及T4替代治疗作用

目的 观察成年期甲状腺功能减退症(甲减)大鼠额叶突触结合蛋白I(synaptotagmin I,sytI)表达改变及不同剂量甲状腺素替代治疗的作用.方法 将44只大鼠按体质量随机分为甲减组、常规治疗组、大剂量治疗组、对照组,用丙基硫氧嘧啶(PTU)腹腔注射建立成年期大鼠甲减及治疗模型;放射免疫法测定4组大鼠血清甲状腺激素水平,免疫组织化学S-P法分析sytI蛋白在4组大鼠额叶分子层、外颗粒层、外锥体细胞层、内颗粒层、内锥体细胞层中的表达.结果 甲减组大鼠血清T3、T4[(0.34±0.04)、(43.01±2.95)nmol/L]显著低于对照组[(0.65±0.15)、(55.20±3.56)nmol/L,F值分别为6.026、4.503,P<0.05或<0.01],甲减组鼠syt I免疫反应产物在额叶分子层(0.018±0.010)、外颗粒层(0.020±0.007)、外锥体细胞层(0.013±0.008)、内颗粒层(0.011±0.005)、内锥体细胞层(0.024±0.013)均较对照组(0.028±0.010、0.031±0.010、0.028±0.010、0.022±0.008、0.038±0.013)明显减少(F值分别为5.697、8.965、14.668、13.597、6.807,P<0.05或<0.01).常规治疗组大鼠血清T3、T4[(0.63±0.05)、(55.04±3.77)nmoL/L]与对照组比较,差异无统计学意义(F值分别为3.162、0.367,P均>0.05),额叶分子层、外颗粒层、外锥体细胞层、内颗粒层、内锥体细胞层syt I蛋白表达(0.027±0.013、0.025±0.009、0.022±0.008、0.020±0.010、0.033±0.010)与对照组比较差异均无统计学意义(F值分别为0.094、2.208、2.467、0.350、0.693,P均>0.05);大剂量治疗组大鼠血清T3、T4[(1.11±0.10)、(96.68±6.42)nmol/L]显著高于对照组(F值分别为6.291、12.031,P均<0.01),额叶各层syt I蛋白表达(0.028±0.008、0.031±0.011、0.026±0.012、0.023±0.011、0.038±0.010)与对照组比较的差异均无统计学意义(F值分别为0.001、0.019、0.111、0.061、0.001,P均>0.05).结论 成年期甲减大鼠额叶内syt I蛋白表达减少,常规剂量甲状腺素替代治疗就能使其恢复至正常水平.     

大鼠脑发育期甲状腺激素对突触体素表达的影响

目的 探讨甲状腺激素对发育关键期大鼠大脑皮层、海马各区域突触体素表达的作用及影响.方法 Wistar大鼠分为4组:(1)甲减组:孕鼠自第5天起给予0.02%甲疏咪唑饮水,出生仔鼠即为先天甲减鼠;(2)T4替代组:孕鼠司样自第5天起给予0.02%甲巯咪唑饮水,仔鼠于出生当日起腹腔注T4,剂量为每日 0.02μg/g;(3)T4甲亢组:正常仔鼠于出生当日起腹腔注射T4,剂量为每日0.4μg/g;(4)正常对照组:孕鼠采用标准饲料和饮用自来水,其仔鼠作为正常对照组.采用原位杂交法对突触体素mRNA阳性信号表达进行定性及定量的测定.结果 (1)正常对照组在大脑顶叶皮层、海马突触体素表达模式基本相同且具有层状分布的特点.出生当日表达很低,在第4天表达最高.以后,随日龄增加而逐渐减少,至第30天表达水平基本接近于成年鼠水平.(2)甲减组大脑顶叶皮层和海马各时点突触体素表达均明显低于正常对照组(P＜0.01);甲减组表达高峰延迟3天,在第7天达到高峰.(3)T4-替代组在出生后第4、7、14、21、30天突触体素表达较同日龄甲减组明显增加,但仍低于同日龄正常对照组(P＜0.05或P＜0.01,除第7天海马DG区P＞0.05).(4)T4-甲亢组突触体素表达在第14、21、30天较同日龄正常对照组明显增加(P＜0.05或P＜0.01).结论在脑发育关键期,甲状腺激素的减少及T4-替代和T4-甲亢改变了大鼠大脑皮层、海马各区域突触体素的表达和时相性,进一步影响了该区域突触的发生及相关神经回路的建立,出现神经元的旷置或错误神经通路,阻碍了脑发育与功能成熟.而及时T4-替代治疗是纠正由于甲状腺激素缺乏而造成的中枢神经系统突触发育障碍的重要方法.     

不同碘摄入水平对大鼠甲状腺功能影响的实验研究

目的研究不同碘摄入水平对大鼠甲状腺功能的影响。方法将Wistar大鼠分为低碘(LI)组、正常碘(NI)组、5倍、10倍、50倍、100倍高碘(5HI、10HI、50HI、100HI)组,在喂养3、6、12个月后处死,分别检测血清总T4(TT4)、总T3(TT3)、游离T3(FT3)、游离T4(FT4)、反T3(rT3)水平,以及甲状腺组织中T4、T3、rT3水平。结果3个月时血清TT4、FT4、TT3、FT3、rT3以及甲状腺组织中T4、T3、rT3水平,组间比较差异均有统计学意义(F值分别为54．07、67．80、15．51、27．71、19．73、61．51、40．67、53．86,P<0．01);6个月时上述指标组间比较差异均有统计学意义(F值分别为58．80、58．75、19．64、17．22、47．21、46．01、47．22、126．87,P<0．01);12个月时甲状腺组织中T4、T3、rT3水平组间比较差异均有统计学意义(F值分别为20．44、17．69、29．23,P<0．01)。与NI组相比较,LI组血清和甲状腺组织内各激素水平明显降低,而高碘组随着时间的延长和摄入碘量的增加,血清各激素和甲状腺组织内T3水平出现逐渐降低趋势。结论碘缺乏和碘过量均可导致大鼠甲状腺功能低下,而碘缺乏的作用更明显;大鼠对长期高碘摄入比碘缺乏具有更强的耐受性,只有在长期补充过量碘(>50倍正常需要量)才发生甲状腺功能低下。     

妊娠中期妇女亚临床甲状腺异常对后代智力发育影响的研究

目的 研究妊娠16～20周妇女亚临床甲状腺异常[包括亚临床甲状腺功能减退症(甲减),低T4血症和甲状腺功能正常但甲状腺过氧化酶抗体(TPOAb)阳性]对后代智力发育和运动能力的影响.方法 选择1 268名妊娠16～20周妇女2年前保存的血清,测定其TSH、TT4、FT4和TPOAb.应用妊娠特异的甲状腺功能参考值,筛查获得亚临床甲减18例,低T4血症者19例,甲状腺功能正常但TPOAb阳性者34例.按1:2比例选择同批142名甲状腺功能正常且TPOAb阴性同孕龄妇女做对照,对她们的后代在25～30月龄时进行智力和运动发育指数测评.结果 妊娠16～20周母亲亚临床甲减组后代智力评分为(109.89±13.81)分,比对照组低8.88分(P<0.01);运动评分(108.11±9.93)分,比对照组低9.98分(P<0.01).低T4血症组后代的智力评分为(112.32±15.10)分,比对照组低9.30分(P<0.01);运动评分(112.21±12.26)分,比对照组低7.57分(P<0.01).甲状腺功能正常TPOAb阳性组后代的智力评分为(112.70±20.64)分,比对照组低10.56分(P<0.01);运动评分(110.64±12.49)分,比对照组低9.03分(P<0.01).结论 妊娠16～20周妇女亚临床甲状腺功能异常皆有可能给后代智力和运动发育造成不良影响,提示筛查和治疗妊娠前半期亚临床甲状腺异常有其必要性.     

碘过量对大鼠脑神经元特异性烯醇化酶基因表达的影响

目的 观察碘过量对大鼠脑神经元特异性烯醇化酶(NSE)基因表达的影响.方法 选用150只断乳1月龄的健康Wistar大鼠,按5×2析因设计分为10组.每组15只.按摄碘量分为正常碘(NI)、5倍碘(5HI)、10倍碘(10HI)、50倍碘(50HI)、100倍碘(100HI)5个水平,饲喂时间为3、6个月.实验期满后,取全部大鼠血样,用放射免疫分析方法测定血清总甲状腺素(TT4)、总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、反三碘甲状腺原氨酸(rT3)水平;取大鼠脑组织,采用RT-PCR方法检测脑组织NSE mRNA的表达.结果 各碘水平组TT4、TT3变化明星(F值分别为18.867、27.287,P<0.01),时间和碘水平对TT4存在交互作用(F=2.486,P<0.05);100HI组TT4、TT3均低于同时间NI、5HI、10HI、50HI组(P均<0.01).血清FT4、FT3、rT3水平,在3、6个月时变化明显(F值分别为4.968、27.046、59.776,P<0.05或<0.01),各碘水平组间变化明显(F值分别为33.058、28.420、17.482,P均<0.01),时间和碘水平对FT3、rT3存在交互作用(F值分别为6.894、5.233,P均<0.01);100HI组FT4、FT3、rT3低于同时间其他组(P<0.01或<0.05).各碘水平间NSE mRNA变化明显(F=29.006,P均<0.05);3、6个月100HI组大鼠脑中NSE mRNA水平(0.61±0.19、0.61±0.22),与NI(0.73±0.13、0.72±0.26)、5HI(0.72±0.15、0.72±0.16)、10HI(0.73±0.32、0.70±0.13)、50HI(0.71±0.18、0.69±0.31)组比较降低(P均<0.05).3、6个月时血清FT3、FT4与NSE mRNA水平均存在相关关系(r值分别为0.987、0.969及0.890、0.910,P均<0.05).结论 NSE基因的表达对过量碘摄入呈现出耐受性且有一定的阈值;当过量碘摄人为正常100倍时,在转录水平影响NSE基因的表达,表现为抑制NSE mRNA水平;在过量碘引发NSE转录减低的调控中,FT4和FT3可能均起着重要作用.     

复方沙棘提取液对老龄大鼠SODmRNA表达的影响

目的　研究复方沙棘提取物对老龄大鼠 SOD活力及 SODm RNA表达的影响。方法　心脏取血 ,以 TBA显色法测定 SOD活力 ;同时取心肌组织制成组织匀浆 ,应用 RT- PCR法检测 SODm RNA表达量。结果　与对照组比较 ,给药后中、高剂量组 SOD活力明显增高(P<0 .0 5,P<0 .0 1 ) ,SODm RNA高度表达 (P<0 .0 1 ) ,LPO明显下降 (P<0 .0 5,P<0 .0 1 )。结论　复方沙棘提取液在基因及蛋白质水平上促进SOD的表达     

The paraventricular nucleus of the hypothalamus has a major role in thyroid hormone feedback regulation of thyrotropin synthesis and secretion

The role of the hypothalamic paraventricular nucleus (PVN) in thyroid hormone regulation of TSH synthesis during hypothyroidism was studied in adult male rats that were normal (n = 10), had primary hypothyroidism with sham lesions in the hypothalamus (n = 17), and had primary hypothyroidism with PVN lesions (n = 14). Two and 4 weeks after initiation of treatment, plasma levels of thyroid hormones (TSH, corticosterone and PRL) and pituitary content of TSH beta and alpha-subunit mRNA were measured. TRH mRNA levels in the PVN were determined by in situ hybridization histochemistry. At 2 weeks, despite a decrease in plasma free T4 in both hypothyroid groups, plasma TSH levels increased, but to a lesser degree, in the hypothyroid PVN lesioned compared to hypothyroid sham-lesioned group (7.8 +/- 1.3 vs. 20.5 +/- 1.1 ng/dl; P less than 0.05). Similarly, at 4 weeks, the hypothyroid PVN-lesioned group demonstrated a blunted TSH response compared to the hypothyroid sham-lesioned group (6.8 +/- 0.7 vs. 24.0 +/- 1.3 ng/dl; P less than 0.05). Plasma corticosterone and PRL did not significantly differ between sham-lesioned and PVN-lesioned groups. TSH beta mRNA levels markedly increased in hypothyroid sham-lesioned rats compared to those in euthyroid controls at 2 weeks (476 +/- 21% vs. 100 +/- 39%; P less than 0.05) and 4 weeks (1680 +/- 270% vs. 100 +/- 35%; P less than 0.05). In contrast, TSH beta mRNA levels did not increase with hypothyroidism in the PVN-lesioned group compared to those in euthyroid controls at 2 weeks (140 +/- 16%, P = NS) and only partially increased at 4 weeks (507 +/- 135; P less than 0.05). alpha mRNA levels at 4 weeks markedly increased in hypothyroid sham-lesioned rats compared to those in euthyroid controls (1121 +/- 226% vs. 100 +/- 48%; P less than 0.05), but did not increase in the hypothyroid PVN-lesioned rats (61 +/- 15%; P = NS). TRH mRNA in the PVN increased in the hypothyroid sham-lesioned rats compared to those in euthyroid controls (16.6 +/- 1.3 vs. 4.8 +/- 1.2 arbitrary densitometric units; P less than 0.05), and TRH mRNA was not detectable in the PVN of hypothyroid-lesioned rats at 2 weeks. In summary, lesions in rat PVN prevented the full increase in plasma TSH, pituitary TSH beta mRNA, and alpha mRNA levels in response to hypothyroidism. Thus, factors in the PVN are important in thyroid hormone feedback regulation of both TSH synthesis and secretion.