黄芪总苷对四氯化碳所致大鼠肝纤维化的防治作用

目的 观察黄芪总苷(Astragalosides,AST)对四氯化碳(Carbon Tetrachloride,CCL4)所致大鼠肝纤维化的防治作用。方法 CCL4皮下注射制备大鼠肝纤维化模型,造模4周后,灌胃给药AST 20,40,80 mg·kg-1·d-1,连续用药9周后测定肝纤维化大鼠的肝、脾指数,血清GPT和GOT,肝组织中羟脯氨酸(HYP)含量,并对肝组织进行病理组织学观察。结果 AST高、中、低3种剂量均可明显降低CCL4升高的血清GPT和GOT水平,使CCL4升高的大鼠肝组织中HYP含量恢复,高剂量还可明显降低肝、脾指数,AST的中、高剂量组均可明显减轻肝组织纤维化和肝硬化的病理组织学变化。结论 AST有明显的抗CCL4性肝纤维化作用,其中AST高剂量组的疗效最为显著。     

白芍总苷对免疫性肝纤维化大鼠肝组织NF-KB和TGF-β1蛋白表达的影响

目的研究免疫性肝纤维化大鼠肝组织中核转录因子-KB（nuc｜ealrfactor-KB，NF-KB）和转化生长因子β1（transforming growth factor betal，TGF-β1）的变化以及白芍总苷（TGP）对两者蛋白表达的影响。方法采用猪血清诱导建立大鼠肝纤维化模型，肝组织HE染色和V-G染色观察肝组织损伤及胶原表达变化；免疫组化S-P法观察NF-KB065和TGF-β1蛋白表达；显微摄像及图像分析检测胶原、NF-KB065和TGF-β1蛋白的表达量。结果与正常组比较，模型组大鼠肝组织明显破坏，胶原合成增加，NF-KB065和TGF-β1表达增强（P〈0．01）；与模型组比较，TGP治疗组肝组织破坏减轻，纤维化程度也明显改善，胶原面积、NF-KB065和TGF-β1表达均明显减少（P〈0．01），三者呈相关性。结论NF-KB介导TGF-β1产生或活化在免疫性肝纤维化过程中可能发挥着重要作用，而TGP抑制纤维化大鼠肝组织NF-KB和TGF-β1的表达可能是TGP的抗肝纤维化主要作用机制之一。     

以肝星状细胞为靶标的抗肝纤维化治疗进展

任何病因导致的慢性肝损伤,均可发展为肝纤维化。损伤肝脏的纤维化形成过程中,活化肝星状细胞(HSC)是主要细胞类型,并有重要细胞因子参与。目前治疗都以阻止活化HSC在损伤部位聚集和细胞外基质沉积为目标。该文就以HSC为靶标的抗肝纤维化最新治疗方案作一综述。     

白芍总苷对免疫性肝纤维化大鼠肝组织NF-κB和TGF-β1蛋白表达的影响

目的研究免疫性肝纤维化大鼠肝组织中核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和转化生长因子β1(trans-forming growth factor beta1,TGF-β1)的变化以及白芍总苷(TGP)对两者蛋白表达的影响。方法采用猪血清诱导建立大鼠肝纤维化模型,肝组织HE染色和V-G染色观察肝组织损伤及胶原表达变化;免疫组化S-P法观察NF-κB p65和TGF-β1蛋白表达;显微摄像及图像分析检测胶原、NF-κBp65和TGF-β1蛋白的表达量。结果与正常组比较,模型组大鼠肝组织明显破坏,胶原合成增加,NF-κB p65和TGF-β1表达增强(P<0.01);与模型组比较,TGP治疗组肝组织破坏减轻,纤维化程度也明显改善,胶原面积、NF-κB p65和TGF-β1表达均明显减少(P<0.01),三者呈相关性。结论NF-κB介导TGF-β1产生或活化在免疫性肝纤维化过程中可能发挥着重要作用,而TGP抑制纤维化大鼠肝组织NF-κB和TGF-β1的表达可能是TGP的抗肝纤维化主要作用机制之一。     

白芍总苷对大鼠实验性关节炎的作用

目的观察白芍总苷对大鼠胶原性关节炎(CIA)关节肿胀度和组织学的影响。方法用鸡Ⅱ型胶原诱导建立CIA大鼠模型,造模后第7～27 d,用药组每日白芍总苷(TPG,25,50,100 mg.kg-1.d-1)灌胃,模型组等量生理盐水灌胃。观察CIA大鼠足爪组织病理学变化及关节指数、体重变化。结果与模型组相比,TPG可明显降低CIA大鼠关节指数(P<0.05),大、中剂量白芍总苷使CIA大鼠体重明显减轻(P<0.01)。结论白芍总苷对大鼠胶原性关节炎有明显抑制作用,能明显改善CIA大鼠症状。     

苏拉明在肝纤维化大鼠肝星状细胞增殖和凋亡中的作用(英文)

本研究旨在探究苏拉明在肝星状细胞（HSCs）增殖、凋亡中的作用。将HSCs株分别在不同浓度的苏拉明和无苏拉明的培养基中体外培养。应用MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术测定细胞周期和增殖指数;TUNEL法检测细胞凋亡率;显微镜下观察细胞形态学变化。结果显示苏拉明干预后,与对照组比较HSCs增殖率均显著减低;苏拉明(1.4×10^-5mol/L)干预72小时,HSCs增殖率降低最明显,且呈时间和剂量依赖性;苏拉明(1.4×10^-5mol/L)干预24小时,G₁期HSCs百分比显著升高,增殖指数显著降低,而HSCs凋亡率无显著变化。苏拉明对HSCs形态无显著影响。我们认为在实验剂量范围内,苏拉明可抑制HSCs增殖,而对HSCs凋亡无影响。     

姜黄素衍生物对原代大鼠肝星状细胞作用的体外研究

目的：观察姜黄素衍生物（Curc-OEG）抑制原代肝星状细胞（HSC）增殖、活化以及诱导其凋亡的作用,探讨其可能的作用机制。方法：采用IV型胶原酶、DNA酶消化SD雄性大鼠肝脏,percoll梯度离心得到纯化的肝星状细胞。细胞分离后1d分别加入0、6.25、12.5μg/mL的姜黄素衍生物,作用7d后用RT-PCR及Western blot检测细胞α-SMA、TGF-β1、Smad2的mRNA水平和蛋白表达量。活化的肝星状细胞在第14天分别加入0、6.25、12.5、25、50、75μg/mL的姜黄素衍生物,作用24h后RT-PCR检测凋亡基因Bax、Bcl-2的mRNA水平和纤维化相关基因TGF-β1、collagen I、NF-κB及TIMP-1的mRNA水平。结果：药物作用7d后,6.25μg/mL和12.5μg/mL浓度药物处理组与对照组相比,细胞数目分别减少了56%和86%。在12.5μg/mL浓度药物作用下,原代肝星状细胞α-SMA、TGF-β1及Smad2的mRNA表达水平分别下调83%、85%及75%,蛋白表达水平分别下调94%、92%及73%（P〈0.05）。25μg/mL浓度药物作用24h后,细胞凋亡明显。在50μg/mL浓度药物作用下,活化的肝星状细胞Bax的mRNA表达水平上调约2.3倍,Bcl-2的mRNA表达水平下调约5.6倍;TGF-β1、collagen I、NF-κB及TIMP-1的mRNA表达水平分别下调90%、83%、74%、65%（P〈0.05）。结论：姜黄素衍生物可以明显抑制原代肝星状细胞的增殖和活化,促进活化的肝星状细胞凋亡及减少细胞外基质的沉积。     

大鼠肝星状细胞的分离和培养

目的:本文参考Friedman等的不连续密度离心法并作改良,建立了一种经济、简便、可靠的分离大鼠肝星状细胞(HSC)的方法。方法:用链霉蛋白酶和胶原酶灌流大鼠肝脏,Nycodenz密度梯度离心分离HSC,并进行体外培养,结果:分离培养的HSC经台盼蓝拒染实验活细胞大于98％,细胞得率为3.95×10个/肝脏。结论:该方法简便、实用、稳定、可靠,而且本方法的建立为进一步研究HSC与肝纤维化的关系,尤其是细胞水平及分子生物学水平的研究奠定了基础。     

去甲肾上腺素和酚妥拉明对大鼠肝星状细胞的影响

目的：探讨α-肾上腺素激动剂去甲肾上腺素和拮抗剂酚妥拉明对体外活化的肝星状细胞（HSC-T6）的影响。方法：体外对HSC-T6进行复苏和培养传代;MTT法检测HSC-T6的增殖;放射免疫法检测HSC-T6培养上清液中透明质酸(HA)和III型前胶原（PCIII）的浓度;流式细胞仪检测HSC-T6凋亡率;免疫细胞化学染色检测组织基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)和基质金属酶-13(MMP-13)蛋白的表达。结果：在体外培养的活化HSC-T6中,去甲肾上腺素（10-5,10-7,10-9 mol&#8226;L-1）能促进细胞增殖,升高分泌HA和PCIII水平,增强TIMP-1蛋白的阳性表达并降低其凋亡率;酚妥拉明（10-5,10-7,10-9 mol&#8226;L-1）能抑制细胞增殖,促进MMP-13的阳性表达并增加HSC-T6的凋亡率。结论：去甲肾上腺素具有促进肝纤维化的作用,酚妥拉明则具有抗纤维化的作用,该作用与其对HSC-T6增殖、凋亡及HA和PCIII分泌水平调控有关。     

白芍总苷治疗风湿免疫性疾病肝损害的疗效观察

风湿免疫性疾病常引起肝损害,很多免疫抑制剂在治疗过程中可能会加重肝的进一步损伤,我们根据白芍总苷的抗炎免疫调节及对肝细胞的保护的药理作用机制,应用白芍总苷治疗由风湿免疫性疾病所致的肝损害24例,现报告如下.     

白芍总甙对实验性肝炎的保护作用

白芍总甙(TGP 10、20mg·kg~(-1),d~(-1)×7d·ip)预防给药可明显对抗D-半乳糖胺或四氯化碳所致小鼠肝损伤后血清谷丙转氨酶升高,血清白蛋的下降及肝糖原含量降低.并使形态学上的肝细胞变性和坏死得到明显地改善和恢复。同时超微结构上肝细胞内线粒体的肿胀、内浆网的空泡变性、溶酶体的脱落也得到明显恢复.上述保护作用的机制有待进一步研究。     

白芍总苷调节RhoA/ROCK1信号通路对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨白芍总苷通过调节Ras同源基因家族成员A/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1（RhoA/ROCK1）信号通路对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响。方法 通过阻断肝动脉和门静脉1 h建立肝缺血再灌注损伤大鼠模型,设假手术组、模型组、白芍总苷（100 mg/kg）组、白芍总苷＋Rhosin（100 mg/kg＋40 mg/kg）组和白芍总苷＋LPA（100 mg/kg＋1 mg/kg）组,每组8只。连续治疗6周后,检测各组大鼠血清肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBiL）];HE、TUNEL染色法观察肝组织病理改变和细胞凋亡,并计算肝损伤评分和凋亡指数（AI）;分光光度法检测肝组织中氧化应激指标[超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性和丙二醛（MDA）含量],ELISA检测炎症因子[白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）]含量;通过反转录聚合酶链反应（RT-PCR）、蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测肝组织中RhoA、ROCK1、核因子-κB p65（NF-κB p65）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、活化型半胱氨酸蛋白酶-3（C-Caspase-3）mRNA和蛋白表达。结果 与模型组比较,白芍总苷组和白芍总苷＋Rhosin组血清ALT、AST、TBiL水平显著降低（P＜0.05）;肝组织病理改变和细胞凋亡状况均明显改善,肝损伤评分和细胞AI均显著降低（P＜0.05）;SOD、CAT活性显著升高,MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著降低（P＜0.05）;RhoA、ROCK1、NF-κB p65、Bax、C-Caspase-3 mRNA和蛋白表达均显著降低,Bcl-2 mRNA和蛋白表达均显著升高（P＜0.05）。与白芍总苷组相比,Rhosin可显著增强白芍总苷对模型大鼠肝功能、肝组织病变、细胞凋亡、氧化应激、炎症及RhoA/ROCK1信号通路相关mRNA和蛋白表达的作用;LPA则显著逆转了上述调控作用。结论 白芍总苷可能通过抑制RhoA/ROCK1信号通路,减轻氧化应激、炎症和细胞凋亡,从而对大鼠肝缺血再灌注损伤起到一定的保护作用。     

白芍总苷对溃疡性结肠炎大鼠细胞因子影响的研究

目的探讨白芍总苷对溃疡性结肠炎（UC）模型大鼠细胞因子的影响。方法采用三硝基苯磺酸（TNBS）灌肠法,制备大鼠UC模型,检测白芍总苷对大鼠UC模型血清中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10含量的影响。结果模型组TNF-α、IL-6、IL-8含量明显增高,而IL-10含量明显降低,与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）;高、中剂量TGP组及SASP组TNF-α、IL-6、IL-8含量明显降低,与模型组比较其差异有统计学意义（P〈0．01）;高剂量TGP组与SASP组比较,其差异无统计学意义（P〉0．05）。结论白芍总苷可显著降低UC大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-8的含量,而显著升高IL-10的含量,有治疗UC的前景。     

白芍总苷治疗幼年特发性关节炎疗效观察

目的研究白芍总苷(TGP帕夫林)治疗幼年特发性关节炎(JIA)的疗效及不良反应.方法采用分组对照研究,治疗组42例应用白芍总苷早期联合应用激素、非甾体抗炎药(NSAIDs),后期以TGP为主,对照组26采用甲氨喋呤(MTX),治疗6个月,观察关节晨僵时间、疼痛指数、血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)等指标,分析两组疗效;并总结二者的不良反应.结果治疗组在关节晨僵、疼痛指数、ESR、CRP和总有效率等与对照组无显著性差异P＞0.05;但治疗组激素平均用量比对照组少,激素疗程明显缩短P＜0.05;肝功能损害等严重不良反应少.结论白芍总苷对幼年特发性关节炎有效,疗效与甲氨喋呤相当,可以减少激素的用量,缩短激素的疗程,不良反应少.     

肝星状细胞HSC-T6体外肝纤维化模型的建立

目的:研究以肝星状细胞HSC-T6为靶细胞,建立体外肝纤维化模型.方法:小鼠腹腔巨噬细胞先后用卡西霉素和脂多糖刺激培养24h制备巨噬细胞条件培养基.肝星状细胞增殖和胶原合成分别采用结晶紫染色法和3H-脯氨酸掺入法测定.结果:血清和巨噬细胞条件培养基可显著促进HSC-T6细胞增殖与胶原合成.IL-1、TNF、EGF、FGF和PDGF均可促进HSC-T6细胞增殖,其中PDGF的促增殖能力最强.TGFβ1可剂量依赖地促进HSC-T6细胞胶原的合成.结论:用血清、巨噬细胞条件培养基、PDGF或TGFβ刺激HSC-T6细胞增殖和胶原合成作为体外肝纤维化模型是可行的.     

白芍总苷在免疫性肝损伤大鼠体内的药代动力学研究

目的比较白芍总苷(TGP)在免疫性肝损伤大鼠和正常大鼠体内药动学参数的异同,为临床制定给药方案提供参考。方法采用猪血清腹腔注射法建立大鼠免疫性肝损伤模型,以HPLC法测定模型大鼠和正常大鼠灌胃给予3个剂量白芍总苷后15、30、60、90、120、150、180、240、360、480、720min血浆中芍药苷和芍药内酯苷浓度,根据药时曲线计算药动学参数,采用SPSS 11.5软件分析各组各剂量间药动学参数异同。结果与正常组相比,模型组大鼠体内白芍总苷的Cmax、AUC0-t和AUC0-∞明显增大,Tmax明显提前,T12明显延长;各剂量间白芍总苷Tmax和T21没有差异,剂量与Cmax、AUC0-t和AUC0-∞有一定的相关性。结论肝损伤大鼠对TGP的吸收速度较正常大鼠快,吸收量较大,消除较慢,提示临床要针对不同的机体状态,设计合理安全的剂量,以免给药量过大引起蓄积和毒性反应。     

白芍总甙、芍药甙和白芍总甙去除芍药甙对佐剂性关节炎大鼠的免疫调节作用

福氏完全佐剂致炎后ｄ１８，佐剂性关节炎（ＡＡ）大鼠刀豆素Ａ（３ｍｇ·Ｌ－１）诱导的脾淋巴细胞增殖反应显著低于正常对照水平，脂多糖（６ｍｇ·Ｌ－１）诱导的大鼠腹腔巨噬细胞（ＰＭΦｓ）产生ＩＬ－１显著高于正常对照大鼠。０．５～３１２．５ｍｇ·Ｌ－１白芍总甙（ＴＧＰ）、芍药甙（ＰＦ）和白芍总甙去除芍药甙（ＴＧＰ－ＰＦ）均能浓度依赖性地增强ＡＡ大鼠低下的脾淋巴细胞增殖反应（量效曲线均呈钟罩形），降低ＡＡ大鼠ＰＭΦｓ过度产生ＩＬ－１（量效曲线均呈倒钟罩形）。其中，２．５～６２．５ｍｇ·Ｌ－１ＴＧＰ的调节作用显著强于ＰＦ和ＴＧＰ－ＰＦ各等剂量组。这些结果表明，上述三种药物均具有浓度和机能依赖性的双向免疫调节作用，ＴＧＰ的作用最强。     

白芍总苷对卡介苗加脂多糖引起的小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的　研究白芍总苷对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法　在建立BCG +LPS诱导免疫性肝损伤小鼠模型的基础上 ,分光光度法检测血清中ALT、AST、NO水平和肝匀浆MDA、GSH Px、SOD含量 ;放免法检测TNF α的生物学活性 ;细胞增殖法测定脾淋巴增殖反应。结果　白芍总苷 (6 0、12 0、2 4 0mg·kg-1)ig给药可明显降低免疫性肝损伤小鼠增高的血清ALT、AST活性 ,同时能减少肝匀浆MDA含量 ,使降低的肝匀浆GSH Px、SOD活性升高 ,进一步研究发现白芍总苷可明显抑制免疫性肝损伤小鼠血清NO和TNF α的产生。白芍总苷还可抑制小鼠腹腔巨噬细胞TNF α的产生 ,对ConA诱导的脾淋巴增殖反应具有恢复作用 ,而对LPS诱导的脾淋巴增殖反应无明显影响。结论　白芍总苷对免疫性肝损伤具有保护作用。