泡状棘球蚴感染纯系小鼠诱导免疫耐受的实验研究

目的探讨感染泡球蚴的小鼠皮肤移植后免疫系统的变化对移植物的影响。方法采用小鼠尾部皮肤移植建立小鼠皮肤移植模型。将64只C57BL/6小鼠及64只BALB/c小鼠各随机分为4组,每组各16对小鼠,其中16只C57BL/6小鼠为供体,16只BALB/c小鼠为受体。A组:空白对照组(非同系移植不予以任何干预);B组:实验组1,以健康C57BL/6小鼠尾部皮肤移植至BALB/c小鼠(感染泡球蚴1个月后);C组:药物对照组,采用非同系移植加药物[西罗莫司(商品名:雷铂霉素)]干预,皮肤移植术后5d每日给予西罗莫司1.5mg/kg干预;D组:实验组2,以健康C57BL/6小鼠尾部皮肤移植至BALB/c小鼠(感染泡球蚴3个月后)。术后观察BALB/c小鼠尾部移植皮肤生长情况。每组留8只用于观察BALB/c小鼠术后尾部移植皮肤生存期,每组于术后3、5、7、9d4个时间点各取2只小鼠尾部移植皮片,用于观察小鼠尾部移植皮肤病理变化情况。结果 A、B、C、D组移植皮肤存活时间平均为(6.00±0.76)、(7.50±0.93)、(13.25±1.04)、(11.5±0.93)d。C组小鼠移植皮片存活时间较D组长,差异有统计学意义(P<0.05)。C、D组移植皮肤存活时间较A、B组延长,差异有统计学意义(P<0.01)。组织病理学检查:A、B组移植皮片均在术后1周左右发生明显的逐渐加重的急性免疫排斥反应,C、D组移植皮片的免疫排斥反应较A、B组轻。结论小鼠感染泡状棘球蚴后有利于同种异体移植皮片的存活,可以延长移植皮片的生存时间。该模型为研究感染泡球的免疫实验研究提供了良好的实验平台,为进一步研究泡球蚴感染后机体免疫状态的变化提供了理论依据。     

棘球蚴免疫逃避机制研究进展

棘球蚴病是一种危害人类健康和畜牧业发展的人兽共患寄生虫病,呈世界性分布,由细粒棘球蚴或泡状棘球蚴在宿主体内寄生造成,这两种棘球蚴在宿主体内能够生长发育,与其复杂有效的免疫逃避机制密不可分。根据近年来的研究文献,本文综述了棘球蚴逃避宿主防御免疫攻击的机制,指出了研究棘球蚴免疫逃避机制的意义和今后努力的方向。     

细粒棘球蚴抗原B亚单位基因序列分析

【目的】获得细粒棘球蚴抗原B亚单位基因序列 ,并进行序列分析。【方法】从包虫病羊体内获取细粒棘球蚴原头节 ,使用TRIZOL试剂提取总RNA ,逆转录成cDNA。根据E .granulosus抗原B亚单位基因的已知序列设计一对引物 ,采用RT PCR技术扩增出抗原B亚单位基因 ;将PCR产物纯化后用双脱氧链末端终止法进行序列测定 ,并进行序列分析。【结果】用RT PCR成功扩增出细粒棘球蚴抗原B亚单位基因序列 ,测序表明该基因ORF为 2 70bp ,和已发表基因核苷酸序列相比 ,缺失 3个碱基 ,同源性为 84 2 % ,推导编码氨基酸序列同源性为 77 8%。【结论】从E .granulosuscDNA扩增出抗原B亚单位基因 ,该基因编码 8ku亚单位前体蛋白。     

棘球蚴抗原B对小鼠1型糖尿病拮抗作用研究

目的:探讨细粒棘球蚴抗原B对小鼠1型糖尿病的拮抗作用及其机制。方法:30只雄BALB/c小鼠随机分为三组:肌内注射细粒棘球蚴抗原B加糖尿病成模组(A组,10只);肌内注射生理盐水加糖尿病成模组(B组,10只);对照组(C组,10只)。A组给予细粒棘球蚴抗原B,B组给予相同剂量的生理盐水,均为连续5 d,随后A组、B组均给予小剂量链脲佐菌素诱导1型糖尿病,C组未予任何处理。动态观察血糖变化,至3周末剖杀小鼠,留取血清,取胰腺组织切片HE染色,进行胰岛炎评分,用ELISA测定血清白介素-2(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)水平。结果:给药后,小鼠血糖逐渐升高,分别在第3天、成模后1周、成模后2周及成模后3周,B组血糖水平分别显著高于A组和C组(P<0.05);A组胰岛可见淋巴细胞浸润不多,而B组胰岛可见较多淋巴细胞浸润;糖尿病模型建立3周末,A组小鼠血清IL-4水平高于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.05),A组小鼠血清IFN-γ水平低于B组(P<0.05)。结论:细粒棘球蚴抗原B对小鼠实验性1型糖尿病具有拮抗和保护作用,其机制可能与Th1/Th2免疫偏移有关。     

细粒棘球蚴抗原B对NOD小鼠1型糖尿病的预防作用

目的探讨细粒棘球蚴抗原B(抗原B)对非肥胖糖尿病(NOD)小鼠1型糖尿病免疫机制的影响。方法将造模成功的20只NOD小鼠依据随机数字表法分为抗原B处理组和生理盐水处理组,各10只。记录并比较两组小鼠初始/成模后/用药后1、2、3周的体质量和血糖变化值。运用酶联免疫吸附测定法检测小鼠血清中白细胞介素(IL)2/IL-10的水平;运用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测胰腺组织中两种细胞因子的表达量。结果在用药后3周各组小鼠之间体质量比较差异有统计学意义(P<0.05),生理盐水处理组体质量下降明显;生理盐水处理组血糖上升水平较抗原B处理组高(P<0.05)。酶联免疫吸附测定结果显示,抗原B处理组IL-2水平较生理盐水处理组低,血清IL-10水平高于生理盐水处理组(P<0.05)。荧光定量PCR结果:抗原B处理组IL-2 mRNA表达量较生理盐水处理组显著下调,IL-10显著上调(P<0.05)。结论细粒棘球蚴抗原B可以降低IL-2水平,升高IL-10水平,暂可认为使Th1/Th2细胞发生免疫偏移,向着有利于胰岛保护的方向,细粒棘球蚴抗原B可能有预防或治疗1型糖尿病的作用。     

免疫亲和层析纯化棘球蚴囊液特异性抗原的研究

应用兔抗健康人血清球蛋白吸附柱、兔抗猪囊尾蚴血清球蛋白吸附柱分别对人棘球蚴囊液粗抗原进行了免疫亲和吸附，制得纯化抗原，并用ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法检测其抗原性。试验表明：经兔抗猪囊尾蚴血清球蛋白吸附柱纯化的抗原与人猪囊虫病血清的交叉反应为０，表明基本去除了粗抗原中所含的与猪囊尾的交叉成份。经兔抗健康人血清球蛋白吸附柱吸附后的抗原，并不影响对棘球蚴病人的阳性检出率，并在琼脂扩散试验中与兔抗人血清球蛋白之间没有出现沉淀线，这表明基本除去了粗抗原中的宿主成分。表明免疫亲和层析是一个有效的抗原纯化方法     

骆驼蓬籽治疗小鼠腹腔棘球蚴和泡球蚴的效果

作者报道了用含骆驼蓬(Peganum harmala L)籽提取液5％的药食喂养人工接种腹腔继发性棘球蝴和泡球蝴小鼠,疗程60～120d,实验结果发现对鼠体内的棘球蝴和泡球蚴均有抑制生长的作用。与对照组相比,对棘球蝴与泡球蚴囊的大小、数量及囊重进行了观察,囊重减轻率分别为59％～63％与54％(P<0.05)。光镜和透射电镜观察,可见用药组棘球蚴囊壁角质层与生发膜被损伤。     

细粒棘球蚴重组EgP-29诱导免疫小鼠脾细胞增殖及细胞因子水平的变化

目的 探讨细粒棘球蚴重组抗原(rEgP-29)接种小鼠后的免疫保护机制.方法 ICR小鼠随机分为免疫组和对照组,采用rEgP-29免疫、Eg原头蚴攻击感染小鼠后20周,以MTT法检测经刀豆蛋白(ConA)和rEgP-29刺激后T淋巴细胞增殖水平,ELISA法检测体外脾细胞诱生的IL-2、IL-4和IFN-γ水平.结果 MTT法检测证实rEgP-29免疫组小鼠脾淋巴细胞增殖水平明显高于对照组(P＜0.05);ELISA法检测表明,免疫组小鼠经ConA或rEgP-29诱生的IL-2、IFN-γ水平与对照组相比显著增加(P＜0.05),而IL-4水平无明显变化.结论 rEgP-29可能诱导Th1型免疫应答为主,对抗Eg原头蚴攻击感染.     

细粒棘球绦虫原头蚴抗原对犬的免疫效果和抗原组份分析

分别用细粒棘球绦虫活原头蚴匀浆抗原和分泌抗原２ｍｌ，加完全佐剂和不完全佐剂，免疫犬２次，每次间隔２１天，可使犬获得不完全抗攻击感染的能力。匀浆抗原的免疫优于分泌抗原，感染率为２５％，与对照组９０％比有显著差异，并对体现人虫体的发育有明显抑制作用，孕卵率为０；分泌抗原的感染率、孕卵率与对照组相比差异不大，经抗原蛋白组份分析，原头匀浆抗原显示１４条蛋白组份，分别为２２．５、３１．０、３６．０、４０．０     

小鼠对大鼠异种皮肤移植耐受的诱导

目的探索更为温和的适合临床应用的诱导异种移植耐受的方案。方法给小剂量照射（ 300 rad）的 C57BL/6 (B6)小鼠静脉注射抗小鼠 CD4单抗 0.5 ml后输注 Lewis大鼠骨髓细胞 ,并联合应用腹腔注射环磷酰胺诱导耐受。于耐受诱导后 30 d对受体小鼠作耐受状态的检查,包括供体特异性皮肤移植、混合淋巴细胞反应（ MLR）及迟发型超敏反应（ DTH）。并通过过继转移实验、外源 IL- 2对耐受小鼠供体特异性 MLR的影响等进一步探讨耐受形成的机制。结果 Lewis大鼠的皮肤移植物在耐受 B6小鼠中存活期特异性延长, MLR及 DTH检查证明 B6小鼠对 Lewis大鼠的脾细胞产生特异性耐受,对无关第三者 DA大鼠及 BALB/c小鼠的脾细胞仍表现出强烈的免疫应答。体内外过继转移实验表明 ,耐受不能被转移 ,未发现抑制细胞的存在。耐受小鼠供体特异的 MLR可以被外源 IL- 2逆转 ,说明耐受主要不是克隆排除,而与克隆不应答有关。结论应用低剂量照射、骨髓移植、环磷酰胺及抗 CD4单抗等方法法可以有效诱导出小鼠对大鼠的移植耐受。     

结直肠癌免疫逃逸机制的研究进展

结直肠癌是世界第3大常见的癌症.最近10年我国结直肠癌发病率和病死率均有所增加,迫切需要降低患者发病率或延长患者的生存期.随着免疫治疗的成功,越来越多的研究证实结直肠癌的进展与肿瘤微环境有密切的关系.肿瘤抑制抗肿瘤免疫反应并产生逃离的机制极为复杂.该文主要对结直肠癌免疫应答机制和肿瘤细胞免疫逃逸机制的研究进展进行综述.     

冠状病毒免疫逃逸机制研究进展

冠状病毒是人和动物的重要致病原,其中新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)给人类健康带来了致命威胁.宿主固有免疫反应是宿主抵抗病原体入侵的第一道防线,但过激的免疫应答也会加重病毒感染和病理损伤.病毒免疫逃逸是冠状病毒的重要致病机制.本文主要从宿主免疫传感器、干扰素、细胞因...     

体外诱导扩增CD4＋ Treg细胞诱导大鼠心脏移植免疫耐受

目的探讨体外扩增CD4＋ T细胞对大鼠心脏移植的长期存活影响。方法采用磁珠分离供体大鼠CD4＋ T细胞并体外扩增,流式细胞法分析其表型变化,同时输注给受体大鼠后监测心脏移植大鼠的存活及移植心脏的病理变化。结果CD4＋ T细胞体外扩增后细胞表达CD4＋CD25＋,输注给受体大鼠能够明显抑制免疫排斥反应,而对照组免疫排斥反应强烈,证实体外诱导扩增的CD4＋ T细胞能够诱导移植器官的免疫耐受。结论体外诱导扩增的CD4＋ T细胞为iTregs胞,具有诱导器官移植免疫耐受功能。     

大鼠肝细胞经脾脏多次移植的实验研究

目的　研究大鼠肝细胞经脾脏多次移植的有效性及其安全性。方法　观察同种异体移植组和同系移植组进行 3次经脾脏肝细胞移植后 ,移植肝细胞在受体组织内的存活量及形态学的变化。结果　在同系移植组 ,3次移植与 1次移植相比较 ,前者明显地增加了受体内存活的移植肝细胞量 (P <0 .0 1) ,未产生严重的并发症。同种异体移植组在环孢素 A作用下 ,与同系移植组相比较 ,两组移植效果无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　大鼠肝细胞经脾脏多次移植可有效地增加受体内存活的移植肝细胞量 ;同种异体移植组在免疫抑制剂作用下和同系移植组相比 ,移植效果相似。     

The amino acid and fatty acid composition of the thermostable lipoprotein ("Antigen 880") of hydatid cyst fluid (HCF)

Analysis for the amino acid composition of "Antigen 880" was carried out by use of double dimension paper chromatography and Biotronik 2,000 automatic amino acid analyzer. By the double dimension paper chromatography, leucine, phenylalanine, tyrosine and alanine were identified as amino acid components of the protein moiety of "Antigen 880". In the Biotronik 2,000 automatic amino acid analyzer showed the concentration of the various amino acids to be as follows: isoleucine, leucine, tyrosine, phenylalanine, lysine and histidine were identified as amino acid constituents of "Antigen 880". Quantitative studies in Biotronik 2,000 analyzer showed the concentration of the various amino acids to be as follows: valine -0.85 mumol/ml; leucine - 0.22 mumol/ml. /ml; iso-leucine - 0.18 mumol/ml; tyrosine - 0.04 mumol/ml, and histidine - 0.02 mumol/ml. The fatty acid composition of the lipid moiety of "Antigen 880" was investigated by use of Gas-Liquid chromatography. In this method, C8:0. C10:0, C12:0, C14:0, C16:0 and C18 were identified as the fatty acid constituents of the lipid moiety of "Antigen 880".     

百草枯中毒大鼠胃肠损伤的实验研究

目的:观察百草枯(PQ)中毒大鼠胃肠损伤的病理变化及胃肠组织中肿瘤坏死因子-(TNF-)、白介素-1(IL-1)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的表达变化,探讨炎症反应及氧自由基在PQ所致胃肠损伤中的作用。方法:40只SD大鼠,随机分为对照组和中毒组。其中对照组10只用0.9%氯化钠注射液一次性灌胃;中毒组30只给予0.9%氯化钠注射液稀释PQ,按180 mg/kg一次性灌胃,分别于6、24、72 h后处死10只,留取胃肠标本,观察胃肠大体,HE染色的病理改变,并采用免疫组织化学SP法检测胃肠组织中MDA、SOD、TNF-和IL-1的表达,ELISA法检测胃肠组织中TNF-和IL-1的表达。结果:PQ中毒大鼠胃肠有明显病理损伤;中毒组大鼠胃肠组织中TNF-、IL-1及MDA的表达均明显高于对照组(P0.01);中毒组SOD表达明显低于对照组(P0.01)。结论:PQ中毒大鼠胃肠有明显病理损伤,炎症反应及氧自由基在PQ所致胃肠损伤中可能起重要的作用。     

Nef引起免疫逃逸的机制

病毒负性调节因子( Negative regulate factor, Nef )是 HIV 的调节蛋白之一，其生物学活性在不同灵长类慢病毒中高度保守 ，可以通过调节宿主细胞膜表面的受体，结合多种重要的信号转导分子等多种途径逃避免疫监视,而在获得性免疫缺陷综合征(Acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)的发病中具有重要的作用。因此本文将阐明Nef蛋白的结构, Nef对免疫细胞生物学功能的影响及其机制。     

左旋咪唑激发大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎的初步观察

目的：观察左旋咪唑(LMS)激发大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的作用。方法：将Wistar大鼠分为5组：Control组、GPSCH(琢鼠全脊髓匀浆) CEA(完全福氏佐剂)组、LMS组、LMS CFA组和CFA组，采用动物行为学、常规HE和LFB染色法观察动物的发病情况与中枢神经系统(CNS)的病理变化情况。结果：①LMS CFA组2/10和GPSCH CFA组5／10大鼠出现典型的EAE行为学改变、CNS炎性细胞浸润和髓鞘脱失。②CFA组8／10大鼠出现住剂性关节炎症状，未见CNS炎性细胞浸洞和髓鞘脱失。③LMS组和Control组都未见动物行为学和CNS病理学改变。结论：LMS CFA可直接激发EAE，而不需要全脊髓匀浆的诱导。