颞叶癫痫患者海马苔藓纤维发芽的实验研究

目的观察颞叶癫痫病人海马齿状回和CA3区苔藓纤维出芽情况。方法癫痫组样本来自12例颞叶癫痫病例的手术切除标本包含海马齿状回和CA3区的脑组织，对照组脑组织样本来自4例非癫痫病的尸检脑组织。应用Timm组织化学染色方法在光镜和电镜水平进行海马结构苔藓纤维发芽的研究。结果光镜下癫痫组可见苔藓纤维穿越海马齿状回颗粒细胞层到达内分子层．CA3区也可见明显的苔藓纤维发芽。癫痫组CA3区和齿状回内分子层苔藓纤维发芽评分高于对照组．统计学上差异有显著性意义。电子显微镜下观察显示癫痫组患者齿状回内分子层可见到银标记的突触末端，主要和树突形成突触连接，所形成的突触为非对称性突触。结论颞叶癫痫可致海马齿状回和CA3区苔藓纤维发芽增加，这可能是难治性癫痫形成的重要机制。     

癫痫大鼠海马出芽苔藓纤维突触的超微结构特征

目的:探讨匹罗卡品颞叶癫痫大鼠海马出芽苔藓纤维突触的超微结构特征及其在颞叶癫痫发病机制中的作用。方法:采用Timm组化染色标记出芽苔藓纤维突触末端,在电镜下观察新生突触的类型、比例、定位、以及突触后靶成分。结果:颞叶癫痫大鼠齿状回内分子层可见到银标记的突触末端,出芽苔藓纤维突触主要是轴棘型非对称性突触,其次是轴树型非对称性突触,偶可看到出芽轴突和颗粒细胞体形成突触联系。结论:轴棘型非对称性突触是颞叶癫痫大鼠海马出芽苔藓纤维突触的主要类型,出芽苔藓纤维突触的超微结构特性支持重组突触形成重复的兴奋性环路,而且形成的新的兴奋性环路可能在颞叶癫痫的发生与发展中起重要作用。     

匹罗卡品癫痫大鼠海马TrkB受体表达与苔藓纤维突触重建的关系

目的 探讨匹罗卡品诱导慢性癫痫大鼠海马齿状颗粒细胞苔藓纤维突触重建与神经营养素受体TrkB表达的关系。方法 取匹罗卡品诱导大鼠急性癫痫持续状态及慢性自发性颞叶癫痫发作期大鼠脑片，用免疫组织化学方法检测TrkB及突触体素(P38，一种突触形成标志物)在大鼠海马的表达。结果 急性癫痫持续状态诱导颗粒细胞表达TrkB一过性增高，第2次表达高峰呈现在7～30d；P38免疫反应性在齿状回内分子层则呈进行性增加，与neo-Timm显示的异常苔藓纤维出芽相一致。结论 TrkB受体激活有助于海马齿状回苔藓纤维轴突生长及突触形成从而有利于颞叶癫痫的发生。     

层黏连蛋白在耐药性癫痫苔藓纤维发芽发生发展中的作用

癫痫是多种原因引起的以中枢神经元反复异常放电为特征的综合征,部分患者对常规治疗效果不佳,发展为耐药性癫痫。长期痫性损伤可导致海马齿状回发生苔藓纤维出芽及异位突触联系,形成异常的兴奋性环路,从而增高颗粒细胞的敏感性,促进自发性癫痫发作的反复产生。层黏连蛋白与神经异常再生密切相关,是细胞外基质的重要成分,具有调节神经细胞生长、黏附、迁移和信号传导的功能;其是神经元异常生长、胶质细胞增生与苔藓纤维发芽过程中的关键因素。苔藓纤维发芽是耐药性癫痫患者脑组织中异常神经网络形成的基础,层黏连蛋白在耐药性癫痫的发生、发展中扮演重要角色。     

NMDA受体与癫痫发病机制的研究现状

癫痫的主要机制为脑内兴奋性氨基酸活性升高。在癫痫发作中,N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体含量增多,表达升高,且其各个亚型之间相互作用,构形发生变化,使突触后膜支架蛋白磷酸化,发生级联发应,使NMDA受体配体离子通道持续开放,神经元持续放电,并向周围神经元放散扩布;长期癫痫反复发作,导致苔藓纤维发芽,神经元缺失;这些形态学和电生理改变,反之,导致癫痫的易感和反复发作。通过多年动物实验和临床应用,提示N-甲基-D-冬氨酸受体亚单位2B(NR2B),高选择性的拮抗剂有广阔的临床应用前景。     

皮质发育障碍大鼠小脑回形态学和海马苔藓纤维发芽的研究

目的 探讨液氮损伤诱导局灶性皮质发育障碍大鼠海马形态学及苔藓纤维发芽的情况。方法 实验随机分为正常对照组、假手术组和液氮损伤组，建立局灶性皮质发育障碍动物模型，察看其行为改变；采用常规HE染色、Nissl染色和Timm’s硫化银组织化学方法染色，肉眼和光镜下观察大鼠脑皮质形态变化，光镜下评估海马苔藓纤维发芽情况，各组数据取苔藓纤维发芽评分，采用非参数秩和Kruskal—Wallis H检验，组间两两比较用Nemenyi法。结果 液氮损伤组大鼠行为轻微改变，鼠脑嘴尾方向形成了一小的脑回，同侧海马CA3区有苔藓纤维发芽．而正常对照组和假手术组却没有。结论 幼鼠早期液氮损伤可导致小脑回形成及海马CA3区苔藓纤维发芽。小脑回周围异常兴奋性突触环路和海马CA3区苔藓纤维发芽形成推测是局灶性皮质发育障碍导致癫痫发生的重要机制。     

Nogo-A及其受体与癫痫大鼠海马苔藓纤维发芽的关系

目的研究神经轴突再生抑制因子Nogo-A及其受体NgR蛋白在癫痫大鼠海马细胞内的表达水平,探讨Nogo-A及NgR与癫痫大鼠海马苔藓纤维发芽(mossy fiber sprouting,MFS)发生、发展的关系,为进一步明确癫痫发病机制提供研究依据。方法采用红藻氨酸(KA)颈部皮下注射法建立大鼠癫痫模型。(1)采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法对大鼠海马中Nogo-A及NgR蛋白进行检测,并用图像分析仪对染色结果进行分析;(2)应用Timm's硫化银法对大鼠海马脑片进行染色,并对结果进行半定量分析。结果(1)实验组Nogo-A蛋白表达与对照组差别无显著性意义(P>0.05);(2)注射KA后4h NgR蛋白表达降低,至造模后7d,NgR蛋白表达升高至正常水平,实验组与对照组之间比较,组内、组间表达均有显著性差异(P<0.01);(3)Timm's硫化银染色结果显示:最早在造模2w后可见海马苔藓状纤维发芽,染色结果为淡染,至造模后2个月发芽脑片染色为深染。结论红藻氨酸造模后癫痫大鼠海马Nogo-A蛋白表达无改变;NgR蛋白表达在造模初期呈现降量调节;癫痫大鼠海马苔藓状纤维发芽的发生可能与NgR蛋白水平...     

外伤后癫痫大鼠脑内突触素和苔藓纤维的观察

目的 通过研究液压脑损伤后突触索和苔藓纤维在外伤后癫痫和非癫痫的大鼠脑内的不同变化,以探讨外伤后癫痫的发病机制.方法 应用液压脑损伤复制脑损伤动物模型并记录脑电图和行为学变化,3个月后应用突触素免疫组织化学、Timm染色和汁算机图像分析技术分析皮质区突触索及海马区苔鲜纤维的不同变化.结果 突触素在皮质损伤区表达癫痫组(n=11)高于非癫痫组(n=20,P<0.05),苔藓纤维出芽在癫痫组CA3区始层明显增多(P<0.05).结论 突触素的表达增强和苔藓纤维出芽与外伤后癫痫天系密切,因果关系有待进一步研究.     

突触素与癫痫

癫痫（epilepsy）是最常见的神经系统疾病之一,其发病机制复杂,目前认为癫痫发病是由于中枢神经系统兴奋与抑制性不平衡导致大脑神经元异常放电所致。近年研究表明,这种兴奋与抑制间的不平衡主要与离子通道、突触传递及神经胶质细胞的改变有关。癫痫发生时大脑海马部位出现的苔藓纤维异常出芽及伴随的突触重建被认为是其细胞机制之一。近年来研究的热点之一是海马结构的可塑性重建,这种可塑性主要表现在突触上。     

突触素与癫痫

癫痫（epilepsy）是最常见的神经系统疾病之一，其发病机制复杂，目前认为癫痫发病是由于中枢神经系统兴奋与抑制性不平衡导致大脑神经元异常放电所致。近年研究表明，这种兴奋与抑制间的不平衡主要与离子通道、突触传递及神经胶质细胞的改变有关。癫痫发生时大脑海马部位出现的苔藓纤维异常出芽及伴随的突触重建被认为是其细胞机制之一。近年来研究的热点之一是海马结构的可塑性重建，这种可塑性主要表现在突触上。     

颞叶癫痫发病机理的研究进展

癫痫是神经系统最常见的疾病之一,其产生是由于兴奋作用增强,抑制作用减弱或两者兼有之。经典的发病机制是基于海马-边缘系统特殊的解剖关系以及兴奋性或抑制性受体引发的电生理学改变而提出的。目前盛行的学说有再发兴奋学说和返回抑制学说,分别从兴奋、抑制两方面阐述颞叶癫痫的发病机制。此外,近年来研究表明神经肽Y、缝隙连接、基因表达模式及神经胶质增生等都与癫痫发生关系密切,成为学术界关注的热点。     

海马颗粒细胞和苔藓纤维表达GABA的研究

颗粒细胞和苔藓纤维除了释放谷氨酸外,还能合成和释放γ-氨基丁酸(GABA).研究发现大鼠出生三周内可在海马颗粒细胞和苔藓纤维内发现GABA能标志物:GABA、谷氨酸脱羧酶、囊泡GABA转运体、囊泡GABA转运体mRNA和GABA膜转运体mRNA水平升高,但成年大鼠只能在高兴奋状态后检测到这些标志物的短暂升高.电生理学研究使海马CA3区锥体细胞内苔藓纤维释放GABA产生的IPSP区别于其他的干扰性IPSP,也揭示出此种释放的一些特点,如GABA与谷氨酸释放于不同囊泡,并能被Ⅲ型谷氨酸受体阻断.苔藓纤维GABA的释放可以产生神经保护、兴奋抑制和抗癫痫的作用.     

轴突导向分子和癫痫后海马重构

轴突导向因子通过吸引或排斥作用,在海马发育期间,及成年海马正常生理功能的维持中,为神经系统轴索和树突提供向靶区定向生长的导向信息,而在癫痫后海马损伤的修复过程中,参与了海马苔藓纤维发芽、突触的可塑性改变及高兴奋性的形成、神经元的再生,对癫痫后海马重塑发挥重要的调控作用。     

匹罗卡品癫痫模型中突触素Ⅰ的表达及苔藓纤维出芽的动态变化

目的探讨癫痫发生过程中突触素Ⅰ(SYNⅠ)在海马和齿状回的表达及齿状回苔藓纤维出芽的动态变化。方法建立匹罗卡品癫痫持续状态模型,用图像分析系统测定海马和齿状回不同时点SYNⅠ免疫反应吸光度值．Neo-timms’染色观察齿状回苔藓出芽的演变。结果SYNⅠ在海马和齿状回的表达于癫痫状态后2d、7d出现降低,14d开始升高,30d、60d表达明显增高；齿状回内分子层于14d开始出现苔藓纤维出芽,大鼠在同期开始出现自发发作。结论在癫痫状态后2d即出现了突触可塑性的变化,14d后由于神经轴突的再生,齿状回内分子层出现苔藓纤维出芽,形成了兴奋性的环路,可能是癫痫反复自发发作的病理基础,SYNⅠ及苔藓纤维出芽较好的反应了神经可塑性的变化。     

N-cadherin在颞叶癫痫海马苔藓纤维出芽和突触重组中的作用

目的 探讨神经性钙粘附分子(N-cadherin)在癫痫状态后海马苔藓纤维出芽和突触重组中的作用。方法取锂一匹罗卡品诱导大鼠癫痫持续状态及慢性自发性颞叶癫痫发作期的大鼠脑片，用Timm染色和免疫组化的方法分别检测苔藓纤维出芽和N-cadherin在大鼠海马组织中的表达。结果癫痫状态后第2周和第4周的实验组大鼠可见到苔藓纤维出芽，穿越齿状回颗粒细胞层到达内分子层，并在此形成一条致密的层状带(Timm染色)。免疫组化染色发现实验组大鼠在第2周和第4周，海马齿状回内分子层可以看到强染色，并形成一条致密带，与Timm染色时观察到的条带一致。结论癫痫状态后在海马齿状回内分子层N-cadherin的表达上调．N-cadherin可能参与了癫痫后苔藓纤维出芽和突触重组过程。     

苔藓纤维出芽机制研究进展

苔藓纤维出芽（mossy fiber sprouting，MFS）是癫痫发作后最常见的病理改变之一，与癫痫的反复自发性发作密切相关。在痫性损伤后由于门区神经元和CA3区锥体细胞大量死亡，齿状回内分子层（IML）失神经传人，同时颗粒细胞也失去投射靶，因此苔藓纤维芽生侧枝进入颗粒体层、IML以及CA3区始层，重建海马神经网络。虽然MFS也可形成抑制性突触，但兴奋性突触的形成占优势，同时齿状回对兴奋的滤过作用降低，冲动便在再生神经回路中迅速传播，最终导致癫痫反复发作。MFS的过程十分复杂，目前认为神经细胞死亡和痫性发作是促使出芽的两大因素，但其具体机制尚未明确，本文就MFS相关的分子因素以及信号转导通路与出芽关系的研究现状作一综述。     

红藻氨酸诱导癫痫发作大鼠海马EphA5受体及其配体ephrinA3基因表达变化的研究

目的研究在红藻氨酸(Kainic acid,KA)诱导的损伤型颞叶癫痫(Mesial temporal lobe epilepsy,MTLE)的大鼠海马中,轴突导向因子EphA5受体及其配体ephrinA3基因表达的变化,探讨EphA5/ephrinA3与癫痫后海马兴奋性神经网络形成的作用和关系。方法侧脑室内微量注射KA,建立KA诱导的成年大鼠MTLE模型,用原位杂交法检测癫痫发作1d、1周、2周、3周、4周大鼠海马内EphA5/ephrinA3 mRNA的表达,定量分析表达的动态变化。结果EphA5/ephrinA3 mRNA于癫痫发作后1周,在海马齿状回颗粒细胞层和CA_3区锥体细胞层开始增强,2周达到高峰,4周恢复接近对照组水平。结论在KA所致的癫痫持续状态(Status epilepsy,SE)中,海马神经元通过增强EphA5/ephrinA3 mRNA的表达。调控MTLE大鼠海马内苔藓纤维和突触的重建,是癫痫后海马新的稳定的异常兴奋性神经网络形成的可能机制。     

实验性癫痫发作后GABA在海马结构中变化的研究进展

各类癫痫的发生几乎都与脑内γ-氨基丁酸(GABA)的功能变化有关。海马结构在癫痫的发生发展中起重 要作用。本文着重介绍海马结构中GABA、对GABA数量和功能有影响的谷氨酸脱羧酶(GAD)、GABA转运体(GAT) 及GABA受体在实验性癫痫发作后发生的重要变化,以了解其在癫痫中发生发展机理,认为EP发作后海马结构 GABA能抑制作用增强,可防止EP灶过度兴奋的扩散,此可能属机体对神经网络过度兴奋的代偿或适应性反应。     

非离子通道基因与癫痫

癫痫的产生是神经元兴奋性和抑制性通路失衡的结果。神经元电位的产生与离子通道密切相关,离子通道功能障碍可直接导致神经元兴奋,引起癫痫发作[1]。有研究发现40%的特发性癫痫与遗传相关[2],迄今已发现14个基因突变,其中大多编码离子通道,包括电压门控通道(Na+、Ca2+、K+、Cl-)和配体门控通道(GABA受体、烟碱乙酰胆碱受     

神经递质与癫痫的发病机制

神经递质的变化在癫痫发病中起了很重要的作用。日前研究较多的有γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、5-羟色胺(5-HT)、神经肽、一氧化氮(NO)等。从对神经元作用上看,神经递质大体上可以分为兴奋性和抑制性两类。我们从神经递质的合成、运输、突触释放、降解以及受体结合及酶的代谢等各级水平进行对神经递质与癫痫发病的机制作一综述。