理气活血祛湿法对脂肪肝大鼠血脂、血粘度影响的实验研究

目的:探讨理气活血祛湿法组方对实验性脂肪肝大鼠血脂、血粘度的影响。方法:根据不同治法拆方(分为全方组,疏肝理气组,活血化瘀组,健脾祛湿组,理气加活血组,理气加祛湿组,活血加祛湿组),观察各配伍组方对实验性脂肪肝大鼠血清总胆固醇、甘油三酯、全血比粘度的影响。结果:理气活血祛湿法组方能明显降低脂肪肝模型大鼠血清Tch、TG及全血比粘度。结论:理气活血祛湿法组方具有改善实验性脂肪肝大鼠血脂、血粘度的作用。     

不同治则抗幼年大鼠非酒精性脂肪肝作用的实验比较研究

目的观察中药疏肝、健脾、化痰、补肾及多法联用的不同治则组方对幼年大鼠非酒精性脂肪肝的防治作用,为儿科临床运用中药防治儿童非酒精性脂肪肝提供治疗思路。方法选用四周龄刚断奶SD幼年大鼠,采用脂肪乳灌胃及高胆固醇高脂饮食喂养,复制非酒精性脂肪肝大鼠模型,设空白对照组、模型组、疏肝组、健脾组、化痰组、补肾组及综合组,比较各组大鼠体重指数、肝指数,检测大鼠血清中胆固醇（TCH）,甘油三酯（TG）,肝功能（ALT、AST）,肝组织SOD活性及肝脏组织病理学变化。结果疏肝、健脾、化痰、补肾及自拟综合方均能有效地减轻大鼠体重和肝重,均能够降低大鼠血液中TG、TC的含量和ALT、AST酶的活性,改善肝组织脂肪变性的病理状态,其中补肾法及自拟综合法作用最为明显。结论治则方中的一些药物具有抗氧化作用,减轻脂质过氧化引起的肝脏损伤,降低肝脏脂肪沉积。     

清肝祛湿活血方对非酒精性脂肪肝大鼠生化指标和肝组织病理学的影响

目的:观察清肝祛湿活血方对非酒精性脂肪肝大鼠总胆固醇(CHOL)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)等生化指标和肝脏组织病理学结果的影响。方法:通过高脂饮食诱导非酒精性大鼠脂肪肝模型,随机分为正常对照组、模型对照组、多烯磷脂酰胆碱组、清肝祛湿活血方低、中、高剂量组,60 d后开始取材,检测大鼠CHOL、TG、ALT、AST、HDL-C、LDL-C等生化指标和肝脏组织病理学结果。结果:与模型对照组对比,清肝祛湿活血方高、中、低剂量组血清CHOL、TG、LDL-C水平和ALT、AST活性均降低,差别有统计学意义(P0.05或P0.01),HDL-C升高,差别有统计学意义(P0.05或P0.01);所有给药组大鼠肝脏脂肪变性程度均获改善,其中清肝祛湿活血方高剂量组效果明显。结论:清肝祛湿活血方可有效减少非酒精性脂肪肝大鼠肝脏脂肪堆积、调节血脂、改善肝功能。     

清肝祛湿活血方对非酒精性脂肪肝大鼠Srebp-1c表达的影响

目的:探讨清肝祛湿活血方对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏固醇调节元件结合蛋白-1c(Srebp-1c)表达的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为空白组,模型组,多烯磷脂酰胆碱组,清肝祛湿活血方低、中、高剂量组6组。常规饲养7天后,空白组给予普通饲料喂养;其余各组给予高脂饲料喂养+腹腔注射四环素制备非酒精性脂肪肝大鼠模型,共4周。造模成功后清肝祛湿活血方各剂量组用清肝祛湿活血方治疗,多烯磷脂酰胆碱组予易善复治疗,模型组和空白组给予等量蒸馏水。给药4周后观察大鼠血脂、肝组织病理学改变及Western Blot法测定肝脏Srebp-1c表达。结果:与模型组比较,清肝祛湿活血方低、中、高剂量组TG和TC明显降低(P0.05);肝脂肪变性明显减轻;肝脏Srebp-1c表达均明显下降(P0.01)。结论:清肝祛湿活血方能下调大鼠肝脏Srebp-1c表达,对非酒精性脂肪肝有较好的治疗作用。     

疏肝健脾方药对NASH大鼠肝组织TLR4 mRNA及其蛋白表达的影响

目的:观察疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病(NASH)大鼠肝组织TLR4 mRNA及蛋白表达的影响,探讨疏肝健脾方药抗大鼠NASH的作用机制。方法:SPF级雄性SD大鼠72只,随机分为正常对照组、模型组、疏肝高剂量组(9.6 g/kg柴胡疏肝散)、疏肝低剂量组(3.2 g/kg柴胡疏肝散)、健脾高剂量组(30 g/kg参苓白术散)、健脾低剂量组(10 g/kg参苓白术散)、合方高剂量组(39.6 g/kg柴胡疏肝散合参苓白术散)、合方低剂量组(13.2 g/kg柴胡疏肝散合参苓白术散),每组9只。采用高脂饲料(10 mL/kg)喂养建立NASH大鼠模型,16 w后各组大鼠以3%戊巴比妥钠腹腔麻醉,腹主动脉采血,全自动生化仪检测血脂、肝脂和肝功能;HE和油红O染色观察肝组织病理变化;Real time Q-PCR检测肝组织TLR4 mRNA表达水平;Western blot检测肝组织TLR4蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肝细胞脂肪变性明显,肝细胞肿大,小叶内、汇管区炎细胞浸润,血清TC、LDL-C,肝组织TC、TG、肝组织TLR4 mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.01);与模型组比较,各用药组大鼠血脂、肝脂、肝组织TLR4 mRNA和蛋白表达均有不同程度降低(P<0.05或P<0.01),以高剂量作用最为显著。结论:疏肝健脾方药可能是通过下调TLR4 mRNA和蛋白表达水平发挥抗NASH的作用,TLR4可能是疏肝健脾方药抗NASH的有效靶点之一。疏肝健脾方药防治NASH可能存在一定的量效依赖关系。     

疏肝消脂Ⅲ方胶囊对大鼠脂肪肝疗效的实验研究

目的:观察疏肝消脂Ⅲ方胶囊对大鼠脂肪肝的疗效并探讨其作用机制。方法:通过高脂饲料联合酒精建立大鼠脂肪肝模型,40只大鼠随机分为正常空白对照组(10只)和模型组(30只),建立大鼠模型后再随机分为3组,模型疏肝消脂Ⅲ方胶囊组、模型对照组、模型水林佳组。用药5周后检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆汁酸(TBA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、游离脂肪酸(FFA)、C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),并用光镜观察肝脏组织显微结构。结果:模型疏肝消脂Ⅲ方胶囊组血清AST、ALT、TBA、TC、TG、LDL-C、FFA、CRP、TNF-α比模型对照组明显降低(P<0.01);模型疏肝消脂Ⅲ方胶囊组血清HDL-C比模型对照组增高(P<0.01);FFA、CRP、TNF-α模型疏肝消脂方组与模型水林佳组比较,差异均有非常显著性意义(P<0.01)。结论:疏肝消脂Ⅲ方胶囊可明显改善脂肪肝大鼠肝功能及肝脏组织结构,其机制可能与降低血脂、减轻炎症反应有关。     

威草胶囊拆方对尿酸性肾病大鼠肾组织CTGF和HGF的影响

目的观察威草胶囊方中健脾补肾药和祛湿活血药对尿酸性肾病大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)和肝细胞生长因子(HGF)表达的影响,探讨威草胶囊方中不同组分保护肾功能的具体机制。方法将60只清洁级Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、别嘌呤醇组、威草胶囊组、健脾补肾组和祛湿活血组,每组10只。用酵母和腺嘌呤合用复制尿酸性肾病模型,复制成功后均改用普通饲料喂养。正常组和模型组每日给予蒸馏水2 m L灌胃,别嘌呤醇组给予别嘌呤醇0.05 g/(kg·d)灌胃,威草胶囊组给予威草胶囊混悬液1.08g/(kg·d)灌胃,健脾补肾组给予健脾补肾药混悬液0.58 g/(kg·d)灌胃,祛湿活血组给予祛湿活血药混悬液0.50 g/(kg·d)灌胃,共4周。用苏木精和伊红进行肾组织染色并制成病理切片,观察每组切片中大鼠肾组织的病理形态学,采用RT-PCR技术检测肾组织中CTGF mRNA及HGF mRNA的表达情况。结果模型组CTGF mRNA表达水平明显高于正常组(P0.05),HGF mRNA表达水平明显低于正常组(P0.05)。各给药组CTGF mRNA表达水平均明显低于模型组(P均0.05),HGF mRNA表达水平均明显高于模型组(P均0.05),威草胶囊组与别嘌呤醇组比较差异无统计学意义(P0.05)。健脾补肾组和祛湿活血组CTGF mRNA表达水平均明显高于威草胶囊组(P均0.05);HGF mRNA的表达水平健脾补肾组明显高于威草胶囊组(P0.05),祛湿活血组明显低于威草胶囊组(P0.05)。祛湿活血组CTGF mRNA、HGF mRNA表达水平均明显低于健脾补肾组(P均0.05)。结论威草胶囊及其不同组分均可减轻肾间质纤维化程度,起到肾保护作用,机制可能与下调CTGF在尿酸性肾病大鼠肾组织中的表达,上调HGF表达有关。健脾补肾药与祛湿活血药合用对下调大鼠肾组织CTGF表达具有协同作用;健脾补肾药与祛湿活血药均有上调大鼠肾组织HGF表达的作用,而健脾补肾药上调大鼠肾组织HGF表达的作用强于祛湿活血药和威草胶囊。     

降肝脂对脂肪肝模型大鼠血液指标的影响

目的观察降肝脂对高脂饲料所致脂肪肝模型大鼠血液指标的影响。方法采用高脂饲料复制大鼠脂肪肝模型,实验分为正常组、模型组和降肝脂高、中、低剂量组,以东宝肝泰为阳性组,以高、中、低剂量降肝脂和东宝肝泰进行干预,12周末取血测定各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的血浆浓度。结果与模型组相比,用药各组大鼠血清中TC、TG、LDL-C和LDL-C含量均明显降低(P0.05或P0.01)。结论降肝脂可明显降低高脂饲料所致脂肪肝模型大鼠血脂含量。     

清肝祛湿活血方治疗非酒精性脂肪肝的疗效评价

目的:观察清肝祛湿活血方治疗非酒精性脂肪肝患者的临床疗效,并探讨其作用机制。方法:将112例非酒精性脂肪肝患者采用随机数字表法分为对照组(57例)和治疗组(55例)。对照组给予多烯磷脂酰胆碱胶囊;治疗组给予清肝祛湿活血方。治疗2个月,观察治疗前后两组患者消化系统彩超、肝功能、血脂水平、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、体重指数(BMI)、腰围和证候积分。结果:治疗组总有效率优于对照组(P0.05);与治疗前比较,治疗后两组患者的谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),HOMA-IR,BMI及腰围均明显下降(P0.05,P0.01),且治疗组优于对照组(P0.05)。结论:清肝祛湿活血方能够显著改善非酒精性脂肪肝患者临床症状,降低体重指数、腰围,改善肝功能、胰岛素抵抗,调节血脂代谢。     

清肝方对脂肪肝大鼠氧化损伤相关因子及LXR-ɑ 表达的影响

目的:探讨清肝方对脂肪肝大鼠的疗效及对氧化损伤相关因子及肝X受体α基因(LXR-α)表达的影响。方法:将60只SD大鼠随机分成正常组、模型组、清肝方低剂量组、清肝方中剂量组、清肝方高剂量组、辛伐他汀组,每组10只。除了正常组,其余各组采用基础饲料、2%胆固醇及10%猪油喂养6周,复制大鼠脂肪肝模型。辛伐他汀组灌胃辛伐他汀25.2 mg/(kg·d);清肝方低、中、高剂量组分别灌胃清肝方5、10、15 g/(kg·d),正常组和模型组同期予等容量生理盐水灌胃;每天1次,连续给药6周。比较各组血脂水平和肝功能。检测各组总抗氧化能力(T-GSH)、超氧化物歧化酶活性(SOD)、丙二醛(MDA)水平和LXR-αm RNA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(FFA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、LXR-αm RNA、MDA水平明显升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、SOD、T-GSH水平明显降低,差异均有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,清肝方低、中、高剂量组和辛伐他汀组大鼠TC、TG、LDL-C、FFA、ALT、AST、LXR-αm RNA、MDA水平明显降低,HDL-C、SOD、T-GSH明显升高,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:清肝方对脂肪肝模型大鼠具有明显改善血脂和肝功能作用,通过提高肝脏的脂质过氧化产物清除能力,降低LXR-α的表达来改善肝血脂和肝功能。     

化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠炎症损伤及纤维化的干预作用

目的:探讨化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠肝组织炎症损伤及纤维化的影响。方法:雄性SD大鼠72只,随机分为空白组,模型组,多烯磷脂酰胆碱胶囊对照组,化痰祛湿活血方高(50.4 g/kg)、中(25.2 g/kg)、低剂量(12.6 g/kg)组。采用化学发光法检测化痰祛湿活血方对NASH大鼠谷丙转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,ALT)、谷草转氨酶(millet straw transaminase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、甘油三酯(triglycerides,TG)、胆固醇(cholesterol,TC)、葡萄糖(glucose,GLU)的影响,制作石蜡切片行苏木素-伊红染色(HE)检测化痰祛湿活血方对NASH大鼠肝组织炎症损伤的影响,行淀粉酶预处理-过碘酸雪夫氏染色(DPAS)检测化痰祛湿活血方对NASH大鼠肝组织中库普弗细胞的影响,行马松三色染色(Masson)检测化痰祛湿活血方对NASH大鼠肝组织纤维化的影响。结果:与模型组相比,各用药组ALT、AST、ALP、TG、TC、GLU均有不同程度下降(P<0.05);高剂量组改善最显著(P<0.05);高剂量组在改善NASH大鼠炎症损伤及纤维化方面优于其他用药组(P<0.05)。结论:化痰祛湿活血方能够改善NASH大鼠肝组织炎症及纤维化程度,高剂量组疗效最显著。     

疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织脂肪酸合成酶mRNA及蛋白表达的影响

目的:观察疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)mRNA及蛋白表达的影响,探讨疏肝健脾方药抗大鼠NAFLD的作用机制。方法:雄性SD大鼠,分为正常组、模型组、健脾组、疏肝组、综合组。使用高脂肪乳剂灌胃造模,治疗组给予相应药物灌胃,8周后处死大鼠,检测血清转氨酶、血脂和肝脂水平;HE染色观察肝组织病理变化;RT-PCR和免疫组织化学方法检测肝组织FAS基因和蛋白的表达。结果:与模型组相比,各药物干预组大鼠血清AST、TC、TG含量和肝组织TC含量均显著下降(P<0.05,P<0.01),健脾组和疏肝组肝组织TG含量显著下降(P<0.05);光镜观察各药物均能改善大鼠肝细胞脂肪变性,以疏肝组更为显著;各用药组FAS mRNA表达水平和蛋白的表达均有下降(P<0.05),其中疏肝组表达的水平最低。结论:疏肝健脾方药能显著改善NAFLD大鼠脂质代谢紊乱,减轻肝损伤,具有良好的抗NAFLD的作用。其机制可能与下调FAS mRNA及蛋白表达有关。     

非酒精性脂肪肝大鼠模型的建立

目的:建立类似于人类饮食习惯的非酒精性脂肪肝动物模型。方法:将wistar大鼠随机分为盐水组和模型组,每日盐水组灌胃生理盐水,模型组灌胃高脂乳剂,观察不同时间大鼠血脂四项、肝总胆固醇(TC)、肝甘油三酯(TG)以及肝脏病理结构的变化。结果:第3周模型组血TC、血低密度脂蛋白(LDL-C)、血高密度脂蛋白(HDL-C)、肝TC、与盐水组相比明显升高(P<0．05)。病理结果示:肝细胞明显水肿,部分肝细胞胞浆内出现大小不等的脂滴,呈部分肝细胞脂肪变性;第8周模型组血TC、LDL-C、HDL-C、肝TC、肝TG与盐水组相比明显升高(P<0．05),肝细胞内脂滴数量增加,部分肝细胞再生;第10周模型组血TC、血LDL-C、肝TC、与盐水组相比明显升高(P<0．05),肝内灶片状肝细胞脂肪变性,肝小叶中央区肝细胞脂肪变性严重,出现肝细胞点状坏死。模型组肝脏指数均小于盐水组(P<0．01)。结论:用高脂乳剂灌胃wistar大鼠建立脂肪肝动物模型,模仿人类的饮食习惯模型稳定。     

灵芝多糖对高脂性脂肪肝大鼠氧化应激的影响

目的:研究灵芝多糖对高脂性脂肪肝大鼠氧化应激的影响。方法:SD大鼠72只,随机分为6组:正常对照组(N组),模型组(M组),灵芝多糖低(GLPs-L)、中(GLPs-M)、高(GLPs-H)剂量组(200,400,800 mg·kg-1)和辛伐他汀组(SV 1.8mg·kg-1)。用高脂饲料喂养建立大鼠高脂性脂肪肝(HFL)模型。经12周给药后,分别测定各实验组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化能力(T-AOC)以及肝组织中MDA,SOD,GSH-Px和T-AOC的含量;光镜观察肝组织脂肪病变程度。结果:M组血清TC,TG,LDL-C含量显著升高(P<0.01);与M组比较,GLPs-M,GLPs-H组血清TC,TG,LDL-C含量均显著降低(P<0.05或P<0.01),GLPs-H组HDL-C含量显著增加(P<0.05);GLPs-M,GLPs-H组血清和肝匀浆中MDA含量较M组相比均明显降低(P<0.05或P<0.01),SOD,GSH-Px和T-AOC水平较M组相比均明显上升(P<0.05或P<0.01)。GLPs-M,GLPs-H组可使肝细胞脂肪变性程度明显减轻。结论:灵芝多糖能明显降低高脂性脂肪肝大鼠血脂水平,有效对抗氧化应激,对大鼠高脂性脂肪肝有一定的防治作用。     

化痰祛湿活血方干预非酒精性脂肪性肝炎大鼠ADPN/AKT/NF-κB通路的研究

目的探讨化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠ADPN/AKT/NF-κB信号通路中关键蛋白ADPN、AdipoR2、p-AKT(ser473)、p-NF-κBp65(ser536)表达的影响及抗炎作用。方法 72只雄性SD大鼠,随机分为空白组、模型组、对照组及化痰祛湿活血方高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组12只;空白组予普通饲料、不给药,其余5组予高脂饲料;模型组予生理盐水1 m L/100g灌胃,对照组予多烯磷脂酰胆碱28.5 mg/100 g灌胃,高剂量、中剂量、低剂量组分别予化痰祛湿活血方5.04、2.52、1.26 g/100 g灌胃,连续7周。检测肝功能(ALT、AST、ALP)、血脂(TC、TG)、血糖(GLU)水平,HE染色观察肝组织病理学变化,免疫组化测定ADPN、AdipoR2、p-AKT(ser473)、p-NF-κBp65(ser536)蛋白表达。结果 (1)与空白组比较,模型组大鼠血清ALT、AST、ALP、TC、TG、GLU水平明显升高(P0.01);与模型组比较,各用药组大鼠血清ALT、AST、ALP、TC、TG、GLU水平均明显下降(P0.05,P0.01);与化痰祛湿活血方高剂量组比较,化痰祛湿活血方中、低剂量组及对照组大鼠血清ALT、AST、ALP、TC、TG、GLU水平明显升高(P0.05,P0.01)。化痰祛湿活血方高剂量组少数肝细胞胞内有细小脂滴,小叶分界清晰,肝索呈放射状排列;中剂量组部分肝细胞存在大小不等的脂滴,少数汇管区有炎症细胞浸润。(2)与空白组比较,模型组大鼠肝组织ADPN、AdipoR2、p-AKT(ser473)蛋白表达明显下降,p-NF-κBp65(ser536)蛋白表达明显升高(均P0.01);与模型组比较,各用药组大鼠肝组织AdipoR2、p-AKT(ser473)蛋白表达明显升高,pNF-κBp65蛋白表达明显下降(均P0.01),化痰祛湿活血方高、中剂量组及对照组大鼠肝组织ADPN蛋白表达明显升高(P0.01);与高剂量组比较,化痰祛湿活血方中、低剂量组及对照组大鼠肝组织ADPN、AdipoR2蛋白表达明显下降,p-NF-κBp65蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01)。结论化痰祛湿活血方能通过上调肝组织中ADPN、AdipoR2、p-AKT(ser473)的蛋白表达,抑制p-NF-κBp65(ser536)的蛋白表达,而有效改善肝功能、血脂、GLU,改善NASH大鼠肝组织脂肪变程度,减轻肝脏炎症。     

健脾疏肝方与调肝化浊解毒方预防大鼠非酒精性脂肪性肝炎药效学观察

目的:观察健脾疏肝方与调肝化浊解毒方对NASH大鼠模型的药效学作用.方法:以高脂饮食建立大鼠NASH模型,并于造模同时进行药物干预;实验第8周末进行血清ALT、AST、TG、HDL-C、LDL-C及肝组织SOD、MDA、GSH-PX的测定,同时观察肝脏病理切片.结果:与模型组相比,健脾疏肝方及调肝化浊解毒方均能够明显降低血清ALT、AST(P＜0.01);健脾疏肝方能显著降低血清TG水平(P＜0.05);调肝化浊解毒方能明显改善血清HDL-C、LDL-C含量(P＜0.05);此外,健脾疏肝方与调肝化浊解毒方均能显著降低肝组织MDA水平(P＜0.01),而健脾疏肝方能同时升高肝组织GSH-PX水平(P＜0.01).病理切片示:与模型组相比,健脾疏肝方与调肝化浊解毒方组肝小叶内空泡变性、脂肪样变均减少,炎细胞浸润得到改善,但组间差异不明显.结论:健脾疏肝方与调肝化浊解毒方均能明显降低NASH大鼠肝酶、调节脂代谢、提高肝脏抗氧化能力,虽然在指标干预上略有侧重,但又有交叉,均在防治NASH的发生发展中起到积极的作用.     

不同中医治法方药对非酒精性脂肪性肝炎大鼠内脂素的影响

目的:观察不同中医治法方药对非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠内脂素(Visfatin)的影响,探讨不同治法方药防治NASH的可能机制。方法:60只大鼠随机分为正常组、模型组、疏肝组、化痰组、活血组和补肾组6组,每组10只。正常组予标准饲料喂养,其他各组每天予高脂饲料喂养;同时疏肝组、化痰组、活血组、补肾组分别以柴胡疏肝散、二陈汤合四苓散、膈下逐瘀汤以及金匮肾气丸干预,均连续12周。HE染色光镜下观察肝组织病理学变化;Real time-PCR法检测肝组织Visfatin mRNA的表达;ELISA法检测大鼠血清及肝组织的Visfatin水平。结果:模型组大鼠脏组织出现重度脂肪变、肝细胞气球样变、混合性炎细胞浸润等NASH表现;模型组大鼠肝组织NAS积分较正常组明显增高(P0.01),血清Visfatin水平、肝组织Visfatin mRNA和蛋白表达较正常组显著升高(P0.01);应用柴胡疏肝散、二陈汤合四苓散、膈下逐瘀汤、金匮肾气丸干预后,肝组织NAS积分均较模型组有不同程度下降(P0.05),肝组织Visfatin mRNA表达较模型组不同程度减少(P0.01,P0.05);化痰组、活血组和补肾组的血清及肝组织Visfatin蛋白表达较模型组明显降低(P0.01,P0.05),但疏肝组则与模型组差异无显著性(P0.05)。结论:Visfatin可能参与高脂饮食诱导的大鼠NASH的发生发展,健脾化痰、温补脾肾、活血化瘀等不同中医治法方药能通过降低机体Visfatin的分泌来调节NASH大鼠的脂代谢紊乱,减轻肝脏脂肪变和炎症损伤。     

活血化痰方对高脂血症大鼠血脂代谢的影响

目的观察活血化痰方的降脂效果并探索其降脂的分子机制。方法 SD大鼠36只(180~200 g)据体质量和随机数字表完全随机区组分组,分为6组(n=6):空白组、模型组、可定组、活血化痰方低剂量组、活血化痰方等效剂量组、活血化痰方+可定组。空白组予基础饲料,其余各组均予高脂饲料。造模的同时各药物组按人-动物药物剂量换算表分别给予相应药物灌胃。8周后,观测各组大鼠体质量的变化;生化法检测大鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TAG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的水平;ELISA法检测大鼠血清前蛋白枯草酶溶菌素9(PCSK9)、血浆卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)、胆固醇酯转移蛋白(CETP)、肝脂酶(HL)的水平及HE染色观察肝脏的病理变化。结果 1)体质量:各组别大鼠体质量差异无统计学意义(P0.05)。2)血脂:与空白组比较,模型组大鼠血清的TC、TAG、LDL-C水平显著上升(P0.05);与模型组比较,各药物组大鼠血清的TAG、LDL-C水平均下降(P0.05);与模型组比较,可定组与活血化痰方+可定组的TC显著下降(P0.05)。3)关键靶酶:与模型组比较,活血化痰方低剂量组、活血化痰方等效剂量组、活血化痰方+可定组的PCSK9水平均下降(P0.05),活血化痰方等效剂量组的HL有升高的趋势。4)肝脏的病理变化:与模型组比较,各药物组肝小叶和肝细胞索的结构较清晰,肝细胞内脂质沉积和肝脏脂肪变性程度明显减轻;可定组出现明显的肝细胞肿胀现象。结论活血化痰方可有效降低高脂血症SD大鼠血清TAG、LDL-C水平,其机制可能与其调节血清PCSK9水平、升高血清HL水平有关,同时活血化痰方能够显著改善高脂血症大鼠肝脏的脂质沉积。     

健脾活血袪湿方对肝硬化腹水大鼠水通道蛋白8的影响

目的观察健脾活血袪湿方对肝硬化腹水大鼠肝组织AQP8表达的影响。方法将健康SPF级雄性Wistar大鼠90只,随机分为空白组、模型组、健脾活血祛湿方高、中、低剂量组及秋水仙碱组,运用改良CCl4-酒精综合法造肝硬化腹水大鼠模型。用荧光定量PCR检测肝组织AQP8m RNA表达水平,免疫组织化学和Western Blotting法检测AQP8蛋白表达。结果模型组AQP8m RNA表达较空白组明显减少(P0.01),健脾活血祛湿方高剂量组AQP8m RNA表达较模型组显著(P0.01),秋水仙碱组与健脾活血祛湿方中、低剂量组AQP8m RNA表达与模型组差异有统计学意义(P0.05);免疫组化结果显示模型组AQP8少量表达,与空白组比较,AQP8蛋白表达量有显著差异(P0.01),健脾活血祛湿方高剂量组与模型组与比较,AQP9蛋白表达量显著增高(P0.01);健脾活血祛湿方高剂量组与模型组与比较,AQP8蛋白表达量显著增高(P0.01);Western Blotting结果显示健脾活血祛湿方高剂量组表达较模型组明显升高(P0.01),健脾活血祛湿方中剂量组AQP8表达较模型组略有升高,但无统计学意义(P0.05),健脾活血祛湿方低剂量组AQP8表达低于模型组。秋水仙碱组与模型组比较有差异有统计学意义(P0.05)。AQP8基因及蛋白表达升高程度与中药使用剂量有关。结论 AQP8可能在肝硬化腹水的形成及消退中起着重要作用,健脾活血祛湿方可明显提高肝硬化腹水大鼠水通道蛋白AQP8表达,可能是该方起到治疗肝硬化腹水作用的分子生物学基础之一,可以作为治疗肝硬化腹水的新靶点。     

健脾疏肝活血方治疗非酒精性脂肪肝的临床疗效观察

目的:分析健脾疏肝活血中药在非酒精性脂肪肝治疗中的临床疗效。方法:采用区组随机化方法将110例非酒精性脂肪肝患者随机分为对照组55例与治疗组55例。对照组给予血脂康胶囊、复方益肝灵片口服,治疗组予以健脾疏肝活血中药煎剂口服,观察治疗前后临床症状改变情况以及患者肝功能、血脂及B超等变化,疗程3个月。结果:2组治疗后血脂水平均较治疗前明显下降(P均0.05),但治疗后2组血脂水平比较差异无统计学意义(P0.05);脂肪肝治疗总有效率治疗组明显高于对照组(P0.05)。结论:以健脾疏肝活血法治疗非酒精性脂肪肝效果明显。