细胞因子对肾小球肾炎中系膜细胞的作用

肾小球肾炎发病过程中，系膜细胞占有重要位置。体外研究表明系膜细胞是一代谢活性细胞，能分泌一系列细胞因子。这些细胞因子也可由肾小球内浸润的单核／巨噬细胞所分泌。本文综述了这些细胞因子在肾炎动物模型和人类肾脏病中参与的证据。这些细胞因子主要包括基底成纤维细胞生长因子、血小板源性生长因子、β－转化生长因子、集落刺激因子－１、肿瘤坏死因子、白介素－１和白介素－６。     

中医药对肾小球系膜细胞作用机理的探讨

肾小球系膜细胞 (GMC)属于肾脏血管周固有细胞 ,在正常情况下 ,GMC的数量、形态和位置均保持相对稳定 ,其合成基质的能力也较小 ;但在异常时 ,GMC是肾小球肾炎发生发展过程中的主要靶细胞[1,2 ] ,GMC异常增生是多种肾脏疾病的主要形态表现和核心病理环节。随着分子生物学技术在中医药学中的深入研究 ,现已证实某些中药对GMC的异常增殖有抑制作用 ,这为中医药治疗以GMC增生为主要病理改变的肾小球疾病提供了理论依据。现将中医药对GMC的作用机理探讨如下。　　 1　调控GMC的基因表达GMC增殖时存在着bcl- 2、ICE两种基因的异常表…     

细胞因子对肾小球肾炎中系膜细胞的作用

肾小球肾炎发病过程中，系膜细胞占有重要位置。体外研究表明系膜细胞是一代谢活性细胞，能分泌一系列细胞因子。这些细胞因子也可由肾小球内浸润的单核／巨噬细胞所分泌。本文综述了这些细胞因子在肾炎动物模型和人类肾脏病中参与的证据。这些细胞因子主要包括基底成纤维细胞生长因子、血小板源性生长因子、β－转化生长因子、集落刺激因子－１、肿瘤坏死因子、白介素－１和白介素－６。     

肾小球系膜细胞和上皮细胞的相互作用

了解肾小球系膜细胞（ＧＭＣ）和上皮细胞（ＧＥＣ）的相互作用。方法运用肾小球细胞体外培养方法和双同位素标记技术，观察阿霉素肾病大鼠ＧＭＣ条件培养液（ＧＭＣ－ＣＭ）对正常大鼠ＧＥＣ掺入３５Ｓ、３Ｈ－亮氨酸和３Ｈ－ＴｄＲ的影响，以及肾病大鼠ＧＥＣ－ＣＭ对正常大鼠ＧＭＣ掺入３Ｈ－ＴｄＲ的作用。结果肾病极期的ＧＭＣ－ＣＭ明显促进了ＧＥＣ增殖及合成含硫化合物、蛋白质的功能，反之肾病极期ＧＥＣ－ＣＭ则明显刺激了ＧＭＣ增殖。结论ＧＭＣ和ＧＥＣ可通过其可溶性产物相互作用。     

肾小球系膜细胞内皮素受体的研究

内皮素(endothelin,ET)是一种生物学作用广泛而强烈的缩血管物质,除心血管系统外,肾脏也是重要的效应器官。肾小球系膜细胞(MC)是最活跃的固有细胞,已经证明ET对MC有明显的致收缩和促增殖作用。根据一般规律,MC可能有ET受体(ET-R)。为了证实这一点,我们用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)及Northern印迹杂交法,检测ET-R在MC的表达。 一、材料和方法 1.动物:6～8周龄,体重150～200g SD雄性大鼠。2.MC培养与鉴定:按本实验室已     

细胞间粘附分子对肾小球系膜细胞增殖的影响

近年来免疫病理学研究已证实细胞间粘附分子-1(ICAM-1)作为细胞粘附分子中免疫球蛋白超家族成员之一,通过与炎性细胞表面同族型配体之间相互作用形成粘附,在免疫监督、炎症反应和动脉粥样硬化等过程中起着重要的作用。因此,有关ICAM-1与肾小球系膜细胞增殖的相关研究对进一步阐明肾小球炎性疾病的发病机理及治疗的进展具有重大意义。 一、材料与方法 1.按经典方法培养、鉴定C57BL/6小鼠肾小球系膜细胞及巨噬细胞,选取第4～6代细胞用于本实验。 2.取系膜细胞,胰酶消化后,将制成的浓度为1.0×10~4/L细胞悬液加入24孔培养板内,正常对照组和     

特发性膜性肾病患者脂蛋白（a）水平的临床观察

目的：对特发性膜性肾病（IMN）患者的脂蛋白（a）[LP（a）]进行测定,分析探讨在IMN患者中LP（a）的水平及其与肾损害的相关性。方法：将83例慢性肾脏病（CKD）3期以内的特发性膜性肾病患者根据24h尿蛋白水平及血清白蛋白水平分为IMN肾病组46例和IMN非肾病组37例,并与56例来我院体检的健康对照组比较,分别测定各组的LP（a）、三酰甘油（TG）、胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、载脂蛋白A1（ApoAl）、载脂蛋白B（ApoB）、血清白蛋白（Alb）、血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）及24huPm。结果：IMN肾病组和IMN非肾病组的血清LP（a）均较对照组升高,差异有统计学意义（P〈0．05）;IMN肾病组LP（a）较IMN非肾病组升高,但差异无统计学意义。以LP（a）为因变量,以Alb、24hUpro、Scr、BUN、TG、TC、HDL、LDL、ApoAl、ApoB为自变量,分别进行相关分析,结果显示,LP（a）与TC（r=0．530,P〈0．01）、LDL（r=0．571,P〈0．01）、ApoB（r=0．472,P〈0．01）及24hUpro（r=0．256,P〈0．05）呈正相关,与Alb呈负相关（r=-0．472,P〈0．01）,与其他血脂变化以及Scr、BUN无明显相关性。结论：特发性膜性肾病患者存在血清LP（a）的代谢紊乱,在表现为肾病综合征的患者中LP（a）具有更高的水平,而LP（a）的增高会加速肾病的进展,促进肾小球硬化,并易于合并心血管事件。LP（a）与TC、LDL、ApoB以及24h UPro呈正相关,与Alb呈负相关,提示LP（a）增高的主要原因可能为尿蛋白丢失,低Alb刺激肝脏合成脂蛋白速度增加。     

肾小球系膜细胞凋亡研究进展

细胞凋亡(apoptosis)即程序化细胞死亡(programmed cell death,PCD),是基因控制的细胞主动死亡过程.凋亡与细胞有丝分裂起相反作用,对于维持组织内环境稳定,胚胎发育及机体各种生理功能和病理反应都具有重要意义.     

地塞米松对肾小球系膜细胞表达细胞间粘附分子的影响

细胞粘附分子是近年免疫学研究最有活力的领域之一,其介导的细胞与细胞、细胞与基质粘附作用在免疫炎症反应等多种病理过程中起着关键性作用。目前知道,肾小球系膜细胞(MC)表面低表达细胞间粘附     

The interaction of glomerular mesangial cells and epithelial cells

The interaction of cells within the glomerulus plays an important role in the development and progression of glomerular disease. To investigate the interaction of glomerular mesangial cells (GMC) and epithelial cells (GEC), and mediator(s) of this interaction, we investigated the effect of Adriamycin (doxorubicin hydrochloride)-induced (ADR) rat GMC-conditioned medium (GMC-CM) on the incorporation of ³⁵S, ³H-leucine, and ³H-thymidine in normal rat GEC, as well as ³H-thymidine uptake by normal rat GMC in response to ADR-rat GEC-CM. In addition, changes in the responsiveness to interleukin-6 (IL-6) and the products of IL-6 were assessed in ADR-rat GMC. The results showed that: (1) GMC-CM of ADR-rat with heavy proteinuria stimulated GEC proliferation and the synthesis of sulfated compounds and protein, while the GEC-CM of ADR-rat from the same nephrotic period increased GMC proliferation; (2) the ADR-rat GMC had altered responsiveness to IL-6 and its products. The stimulation index results demonstrated the interaction of GMC and GEC in the ADR-induced rat model, and that this interaction related closely to the degree of proteinuria and was mediated by soluble products of the damaged glomerular cell. Received March 29, 1996; received in revised form July 1, 1997; accepted July 2, 1997     

Effects of lipoprotein(a) on mesangial cell proliferation and viability

BACKGROUND: Lipoprotein abnormalities are considered to accelerate glomerularinjury in various forms of renal disease, probably by affectingmesangial proliferation. Serum levels of the atherogenic Lipoprotein(a)(Lp(a)) are elevated in patients with nephrotic syndrome andLp(a) deposits have been identified in diseased glomeruli. Sofar, the influence of Lp(a) on mesangial cell function has notbeen defined. METHODS: The influence of Lp(a) on mesangial cell proliferation was assessedin a rat mesangial cell culture model by direct measurementof cell growth as well as analysis of DNA-synthesis and mRNAlevels of c-fos and c-myc, two growth-associated ‘immediateearly response genes’. RESULTS: Lp(a) triggered a biphasic response on DNA synthesis: ³H-thymidineuptake was increased when cells were incubated with Lp(a) (2.5–10µg/ml) for 24 h. The response was dose dependent, a maximaleffect was seen for Lp(a) 5 µg/ml. The stimulatory propertiesof Lp(a) were comparable to 10% fetal calf serum (FCS). No additiveeffect of 10% FCS and Lp(a) on DNA synthesis was observed. Cellproliferation was moderately stimulated (120±9% of control)by low levels of Lp(a) in the presence of small amounts of FCS.Messanger RNA levels for c-fos and c-myc were upregulated asearly as 15 min after incubation with Lp(a) 5 µg/ml, amaximum response was observed after 30 and 240 min respectively.Stimulation of DNA synthesis was partly blunted when cells wereincubated with Lp(a) in the presence of catalase 100 U/ml andsuperoxide dismutase 10^–7M (SOD) but not in the presenceof SOD alone. Lp(a) in concentrations above 10 µg/ml depressedDNA-synthesis and elicted signs of cytotoxicity. The cytotoxiceffects of Lp(a) were not blunted by oxygen radical scavengers.The stimulatory and cytotoxic effects of Lp(a) were not restrictedto a specific isoform. CONCLUSION: Low concentrations of Lp(a) stimulated growth of mesangial cells,whereas higher concentrations had antiproliferative or toxiceffects. The stimulation of mesangial cell proliferation aswell as the cytotoxic effects causes by Lp(a) are both likelyto have a negative impact on the course of renal disease.     

胰岛素诱导Zucker肥胖大鼠肾小球系膜细胞核因子-κB活性的变化

目的 研究胰岛素(INS)对体外培养的Zucker大鼠肾小球系膜细胞(GMC)核因子κB(NF-κB)活化的影响,以及INS诱导的NF-κB活性的变化与Zucker大鼠年龄(即病程)以及基因型的相关性。方法 (1)分别取Zucker肥胖大鼠(3月龄和10月龄)和Zucker瘦型大鼠(3月龄和10月龄)4组大鼠的GMCs(O_(3m),O_(10m),L_(3m),L_(10m))进行传代培养。(2)凝胶迁移率实验(EMSA)和超迁移率实验(GSA)检测不同浓度及不同时相INS对Zucker大鼠肾小球系膜细胞NF-κB活性的影响,以及NF-κB二聚体中p50和p65成分的变化。(3)应用Western印迹检测胞浆和胞核内NF-κB p65水平。结果 (1)INS诱导后,4组GMC内NF-κB活性均较对照组明显增强(F=219.65,P<0.01);(2)随着INS刺激浓度增加和时间的延长,GMC内NF-κB活性相应增强,0.5 mg/L的INS刺激24h时,NF-κB活性强度达最高峰;INS刺激浓度升为5 mg/L,则15h达最高峰;(3)INS主要激活NF-κB二聚体成份中的p65;(4)O_(3m)组NF-κB的活性显著高于O_(10m)组(P<0.01),L_(3m)组NF-κB的活性显著高于L_(10m)组(P<0.01),O_(3m)组显著高于L_(3m)组(P<0.01),O_(10m)组显著高于L_(10m)组(P<0.01)。(5)INS可呈剂量依赖性地降低胞浆内的p65的蛋白水平和上调胞核内p65水平。结论 INS可诱导Zucker大鼠GMC内NF-κB活化,其活化方     

缺氧条件下中介素和系膜细胞对内皮细胞血管生成的影响

目的探讨缺氧条件下,中介素(IMD)和肾小球系膜细胞(HMC)对内皮细胞的影响。方法内皮细胞分为4组:(1)内皮细胞与系膜细胞共培养,加IMD处理作为HEMI组;(2)内皮细胞与系膜细胞共培养,无处理作为HEM组;(3)内皮细胞加IMD处理作为HEI组;(4)内皮细胞无处理作为HE组;将各组细胞在1%O2、94%N2、5%CO2条件下缺氧培养12 h后,蛋白质印迹法(Western blot)、免疫细胞化学技术检测相关蛋白表达,实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测相关基因mRNA相对表达量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血管内皮生长因子A(VEGFA)含量,体外血管形成实验检测内皮细胞的成管分支数。实验结果两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果上皮型钙黏分子(VE-cadherin)表达量HEMI(1.629±0.197、1.557±0.066、10.552±0.523)高于HEM(1.116±0.118、1.340±0.161、8.128±0.542)、HEI(1.278±0.096、1.078±0.088、7.523±1.211)、HE组(1.000±0.000,F=0.734、1.244、6.134,P<0.05),差异有统计学意义;血小板内皮细胞黏附分子(PECAM-1/CD31)表达量HEMI(1.309±0.234、1.203±0.105、1.654±0.462)高于HEM(1.067±0.379、1.038±0.035、1.601±0.397)、HEI(1.225±0.091、1.101±0.038、1.605±0.207)、HE组(1.000±0.000),差异无统计学意义(F=5.083、5.434、6.428,P>0.05);VEGF表达量HEMI(0.904±0.005、1.922±0.457)高于HEM组(0.690±0.071、1.000±0.000,F=8.307、10.896,P<0.01),ELISA中加入IMD组(1.018±0.319)VEGFA浓度比值高于对照组(0.921±0.294,F=0.132,P<0.05),差异有统计学意义;体外血管形成中HEMI(22.289±0.131)、HEM(21.318±0.594)、HEI(21.533±0.867)、HE(20.755±1.798)高于NE组(18.731±0.525,F=5.926、0.030、1.033,P<0.05;F=6.753,P>0.05)。结论缺氧条件下,IMD可以直接或通过系膜细胞间接双重影响内皮细胞,促进血管形成。     

缺氧条件下中介素和系膜细胞对内皮细胞血管生成的影响

目的探讨缺氧条件下,中介素(IMD)和肾小球系膜细胞(HMC)对内皮细胞的影响。方法内皮细胞分为4组:(1)内皮细胞与系膜细胞共培养,加IMD处理作为HEMI组;(2)内皮细胞与系膜细胞共培养,无处理作为HEM组;(3)内皮细胞加IMD处理作为HEI组;(4)内皮细胞无处理作为HE组;将各组细胞在1%O2、94%N2、5%CO2条件下缺氧培养12 h后,蛋白质印迹法(Western blot)、免疫细胞化学技术检测相关蛋白表达,实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测相关基因mRNA相对表达量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血管内皮生长因子A(VEGFA)含量,体外血管形成实验检测内皮细胞的成管分支数。实验结果两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果上皮型钙黏分子(VE-cadherin)表达量HEMI(1.629±0.197、1.557±0.066、10.552±0.523)高于HEM(1.116±0.118、1.340±0.161、8.128±0.542)、HEI(1.278±0.096、1.078±0.088、7.523±1.211)、HE组(1.000±0.000,F=0.734、1.244、6.134,P<0.05),差异有统计学意义;血小板内皮细胞黏附分子(PECAM-1/CD31)表达量HEMI(1.309±0.234、1.203±0.105、1.654±0.462)高于HEM(1.067±0.379、1.038±0.035、1.601±0.397)、HEI(1.225±0.091、1.101±0.038、1.605±0.207)、HE组(1.000±0.000),差异无统计学意义(F=5.083、5.434、6.428,P>0.05);VEGF表达量HEMI(0.904±0.005、1.922±0.457)高于HEM组(0.690±0.071、1.000±0.000,F=8.307、10.896,P<0.01),ELISA中加入IMD组(1.018±0.319)VEGFA浓度比值高于对照组(0.921±0.294,F=0.132,P<0.05),差异有统计学意义;体外血管形成中HEMI(22.289±0.131)、HEM(21.318±0.594)、HEI(21.533±0.867)、HE(20.755±1.798)高于NE组(18.731±0.525,F=5.926、0.030、1.033,P<0.05;F=6.753,P>0.05)。结论缺氧条件下,IMD可以直接或通过系膜细胞间接双重影响内皮细胞,促进血管形成。     

精甘天丝四肽对人肾小球系膜细胞肌动蛋白及凋亡的影响

观察精-甘-天-丝(RGDS)四肽对肾小球系膜细胞肌动蛋白及凋亡的影响,以探讨细胞外基质(ECM)-整合素-细胞骨架的相互作用机制。方法 共聚焦显微镜观察肾小球系膜细胞肌动蛋白微丝的变化;以流式细胞仪和DNA电泳方法检测细胞凋亡。结果 用RGDS肽处理2小时后,系膜细胞开始由梭形变为圆形或卵圆形,同时细胞质的肌动蛋白微丝亦由弥漫分布变为聚集成团,居于细胞质一侧,形成着边现象,这些细胞继而脱壁、悬浮于培养上清中,脱落细胞经碘化丙啶染色见细胞核固缩、破碎。至第10小时RGDS处理组的系膜细胞大都脱壁,脱落细胞的DNA电泳呈现梯形条带,流式细胞仪分析显示处理组系膜细胞中出现了低二倍体细胞群(A_0峰),证实处理组的脱落细胞发生了细胞凋亡。在实验观察期间对照组的系膜细胞始终呈贴壁状态生长,细胞质肌动蛋白微丝呈弥漫分布。结论 RGDS肽可以使肾小球系膜细胞细胞骨架肌动蛋白微丝分布异常,导致肾小球系膜细胞变形、脱壁和凋亡。     

TRPC1通道参与调节肾小球系膜细胞的收缩

目的探讨离体和在体情况下TRPC1通道是否参与肾小球系膜细胞的收缩。方法通过计算细胞表面积来观察肾小球系膜细胞的收缩情况。分别利用荧光标记的菊粉和对氨基马尿酸（PAH）的血浆清除率计算大鼠肾小球滤过率（GFR）和肾血浆流量。结果在肾小球系膜细胞的培养液中加入血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）10min后，细胞表面积减少（37．2％±4．0％），系膜细胞的收缩反应可因TRPC1基因敲除而受到显著抑制（20．1％±3．0％）。给大鼠注射AngⅡ（1．7ng·min^-1·100g^-1BW）可引起GFR下降，注射TRPC1抗体（300μg／L）显著抑制AngⅡ引起GFR下降（P〈0．05）。但与TRPC1抗体相同浓度的免疫球蛋白，不能抑制AngⅡ引起的GFR下降。另外，TRPC1抗体不影响AngⅡ引起的血压改变和肾血流量的下降。结论本实验表明TRPC1通道在调节肾小球系膜细胞收缩功能方面发挥了重要的作用。     

内皮素对人肾小球系膜细胞表达细胞粘附分子的影响

目的 探讨内皮素-1(ET1-1)对体外培养的人肾小球系膜细胞表达细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)的调节作用。方法 利用Northern杂交技术和细胞ELISA方法分别从mRNA和蛋白质两个水平观察ICAW-1和VCAM-1的变化。结果 在正常培养条件下,人肾小球系膜细胞仅低水平表达一定量的ICAM-1、VCAM-1的mRNA和蛋白质;ET-1(10~(-7)mol)刺激后,这两种细胞粘附分子的mRNA表达迅速上调,且随后其相应蛋白质表达也显著增加并呈时间依赖性。结论 提示ET-1对粘附分子表达的促进作用可能在传小球疾病的发生中具有重要意义。     

Functional endothelin 1 receptors on human glomerular podocytes and mesangial cells.

To determine if endothelin 1 (Et1) receptors are present in human glomeruli, and which glomerular cells possess these receptors, 125I Et1 binding to isolated glomeruli and cultured glomerular mesangial and epithelial cells was studied. The latter were identified as podocytes. We demonstrated that Et1 binds specifically and reversibly to isolated human glomeruli and to cultured glomerular mesangial and epithelial cells. Scatchard analysis of competitive inhibition of 125I Et1 binding gave the following results (m +/- SEM, n = 3): isolated glomeruli, Kd = 4.2 +/- 2.1 x 10(-10) M, Bmax = 8.1 +/- 1.2 x 10(10) sites/mg protein; mesangial cells, Kd = 5.2 +/- 1.5 x 10(-10) M, Bmax = 1.87 +/- 0.49 x 10(4) sites/cell; epithelial cells, Kd = 7.2 +/- 1.5 x 10(-10) M, Bmax = 2.46 +/- 0.15 x 10(4) sites/cell. These receptors seem to be functional, since in both mesangial and epithelial cells Et1 induces a rapid and transient increase in intracellular [Ca2+]i. All these results indicate that Et1 may regulate glomerular filtration rate through an autocrine-paracrine pathway on mesangial cells and on podocytes.