丁苄腈心安与心得安对大鼠心肌β肾上腺素受体亲和力比较

本文以~3H双氢心得舒(~3H—DHA)作为放射性配基,测定大鼠心肌上β肾上腺素受体的最大结合容量(B_(max))和平衡解离常数(K_D)分别为104.1±4.7fmol/mg蛋白质及10.1±2.7nM,Hill系数(nH)为1.007±0.002。丁苄腈心安和心得安对大白鼠心肌β肾上腺素能受体与~3H-DHA结合的半数抑制浓度(IC_(50))分别为3.30±0.74×10~(-8)M和3.87±0.66×10~(-7)M,表观解离常数各为2.20±0.49×10~(-8)及2.58±0.44×10~(-7)。故丁苄腈心得安对大鼠心肌β肾上腺素受体的亲和力约为心得安的11.7倍。     

大鼠心肌质膜[~3H]forskolin结合部位的特征(英文)

近年来从植物研究中发现的一种二萜衍生物(forskolin)是一种新型作用于心血管系统的药物。质膜中forskolin结合部位被认为是腺苷酸环化酶(EC4.6.1.1.)的催化亚单位。我们已经证明了它对大鼠心肌质膜腺苷酸环化酶的激活作用呈剂量效应相关。本文用〔1,2-~3H〕forskolin研究了大鼠心肌质膜for-skolin结合部位的特征。实验结果表明:〔~3H〕forskolin结合量和膜蛋白呈线性相关;其特异结合是快速的、可饱和的、可逆的、依赖温度的;结合反应的平衡解离常数(Ka)为0.21±SD 0.08μmol/L,其最大结合浓度为3.3±SD1.2 pmol/mg蛋白,Hill系数为1.07±SD0.05;37℃时缔合速率常数为0.0013(nmol/L)~(-1)·min~(-1),30 min达到平衡状态;心肌质膜结合的〔1,2-~3H〕forskolin被forskolin取代的解离速率常数:37℃时为0.22 min~(-1)(t_(1/2)=3.2 min),0℃时为0.03 min~(-1)(t_(1/2)=25.8min),IC_(50)为1.6μmol/L。本文实验结果提示:心肌质膜〔~3H〕forskolin结合分析可以作为研究激素和药物对心肌腺苷酸环化酶催化亚基作用的良好模型。     

间硝苯吡啶与硝苯吡啶对离体心脏、血管钙拮抗作用的比较性研究

M-Nif对离体豚鼠左心房的钙拮抗作用PD_2~′=7.05较Nif PD_2~′=7.19弱,抑制心肌的IC_(50)=7.5×10~(-8)M亦较Nif IC_(50)=2.9×10~(-6)M弱2.6倍。在离体猪冠脉条实验中M-Nif PD_2~′=7.06,Nif PD_2~′=6.88,前者稍强,前者抑制血管的作用IC_(50)=6.166×10~(-7)M亦强于后者IC_(50)=7.02×10~(-7)M 114倍,Nif扩张血管作用较抑制心肌作用强10倍,提示M-Nif扩张血管与抑制心肌的宽度更大,对治疗心力衰竭、降压将更有利。     

左旋咪唑对大鼠脑组织咪唑啉2受体-配体结合试验的影响

目的研究左旋咪唑(LMS)对大鼠脑组织咪唑啉2受体(I_2R)的影响。方法采用受体-配体竞争结合试验,观察LMS与受体的结合能力;采用受体-配体饱和试验,测定LMS处理大鼠和对照组大鼠脑内I_2R最大受体结合容量(B_(max))和平衡解离常数(K_d)变化。结果LMS抑制了放射性配基[~3H]idazoxan与大鼠脑组织内I_2R的结合,其半数抑制浓度(IC_(50))为4.04×10~(-7)mol·L~(-1)。LMS长期处理大鼠,脑内I_2R亲和力上调63%。结论LMS能与I_2R结合,长期应用LMS能通过刺激I_2R而改变了受体亲和力。     

十二烷基硫酸钠对安乃近稳定性的影响

本文研究了十二烷基硫酸钠对安乃近稳定性的影响,实验表明,当十二烷基硫酸钠的浓度为1.66×10~(-2)mol·dm~(-3)时,安乃近的稳定性最好,其氧化水解反应在30℃时的速率常数为1.30×10~(-3)min~(-1).     

山莨菪碱四个立体异构体与M胆碱受体作用的强度比较

用[3~H]-QNB配体受体结合实验,抗Ach对豚鼠回肠纵肌条收缩效应,抗毛果芸香碱流涎及扩瞳效应为指标,比较山莨菪碱四个立体异构体(A.6S,2′S;B.6S,2′R;C.6R,2′R;D.6R,2′S)与M受体相互作用的构效关系,结果A,B,C,D四个异构体效应分别为:(1)受体结合实验K_i(M)2.69×10~(-7),1.43×10~(-7),1.63×10~(-5),2.15×10~(-6);(2)抗Ach豚鼠回肠纵条收缩:K_6(M)2.98×10~(-8);1.38×10~(-8);1.52×10~5;1.0l×10~(-7);(3)扩瞳:ED_4(mol/kg)1.6×10~(-6),1.9×10~(-6),5.1×10~(-5),3.6×10~(-5);(4)抗毛果芸香碱流涎:ED_(50)(mol/kg)1.5×10~(-6);1.3×10~(-6);2.6×10~(-5);3.1×10~(-5)。以上结果表明四个异构体效应强度为6S,2′R≌6S,2′S>>6R,2′S>6R,2′R。     

多巴胺D1受体在Sf9昆虫细胞中的表达及左旋氯代斯阔任对重组D1受体的激动作用

目的:在Sf9昆虫细胞中表达D_1受体,并研究左旋氯代斯阔任对重组D_1受体的激动作用。方法:构建含D_1受体cDNA的重组杆状病毒,以其感染Sf9昆虫细胞得到D_1受体表达。[~3H]SCH23390受体结合检测重组D_1受体的药理特性。[~3H]SCH23390受体结合和cAMP测定实验检测左旋氯代斯阔任对重组D_1受体的激动作用。结果:在Sf9昆虫细胞中成功表达D_1受体,[~3H]SCH23390与重组D_1受体最大结合量(B_(max))为(0.94±0.06)nmol/g蛋白,[~3H]SCH23390与重组D_1受体的结合解离常数(K_d)为(1.9±0.3)nmol/L,其药理特性与小牛纹状体脑匀浆所得结果一致。左旋氯代斯阔任对重组D_1受体有高亲和力,解离常数K_i为(6.3±1.4)nmol/L;并剂量依赖地引起胞内cAMP增加,EC_(50)为0.72μmol/L(95％可信限为0.67-0.77μmol/L),表现出D_1激动作用。结论:在杆状病毒/昆虫细胞Sf9中,成功建立了D_1受体异源表达系统。在细胞分子水平,直接证实了左旋氯代斯阔任对D_1受体的激动作用。     

对多发性骨髓瘤细胞株KM_3的糖皮质激素受体的研究

笔者用放射配体结合测定法对培养的人骨髓瘤细胞株KM_3的糖皮质激素受体(GR)进行了检测,数量为(24674±1631)位点/细胞,平衡解离常数(d)为(3.82±1.21)nmol/L。研究发现地塞米松抑制KM_3细胞株的增殖,起着直接的杀伤作用。     

虎杖苷对LPS作用下心肌细胞β-肾上腺素能受体的调节作用

目的　探讨LPS对心肌细胞 β肾上腺素能受体 (β AR)功能的影响以及虎杖苷 (PD)的防治效果。方法　体外培养心肌细胞 ,利用放射配体竞争结合法检测 β AR数量和亲和力 ,同时应用流式细胞术检测 β AR数量。 结果　正常心肌细胞膜上的 β AR最大结合容量 (Bmax)为 (4 14± 1 4 1)fmol·1× 10 5cells-1,解离常数Kd 值为 (4 0 2± 0 5 9)nmol·L-1;LPS刺激后 ,受体Bmax减小为 1 78± 0 12fmol·(1×10 5cells) -1,亲和力下降为 (2 3 88± 2 34)nmol·L-1;当用PD处理后 ,最大结合容量和亲和常数都恢复至接近正常 ,分别为 (3 37± 0 36 )fmol·(1× 10 5cells) -1和 (3 4 4± 0 4 4 )nmol·L-1;单纯用PD处理细胞Bmax和Kd 都与正常组差异无显著性 ,分别为 (2 76± 0 32 )fmol· 1× 10 5cells) -1和(4 6 3± 1 5 4 )nmol·L-1。流式细胞术检测 β AR数量变化与放射配体结合法检测结果一致。结论　LPS可直接引起心肌细胞β AR数量下调、亲和力降低 ,虎杖苷可调节 β AR的功能 ,使其维持正常水平。     

氚标记强效镇痛剂N-[1-(β-羟基-β-苯乙基)-3-甲基-4-哌啶基]-N-丙酰苯胺的制备以及与阿片受体的结合试验

本文报道以N-[1-(对-溴苯甲酰甲基)-3-甲基-4-哌啶基]-N-丙酰苯胺(Ⅲ)为前体,以PdO/BaSO_4作催化剂,用氚气进行卤—氚置换,氚化还原羰基的反应。反应产物经硅胶纸层析纯化后,用甲基橙比色法定量测定,得到N-{1-[β-羟基-β-氚-β-(对-氚苯基)乙基]-3-甲基-4-哌啶基}-N-丙酰苯胺(Ⅳ,[~3H]F-7302),其比放射性为59 Ci/mM,放化纯度为98％。[~3H]F-7302与小鼠脑内阿片受体的特异性结合在浓度为4.5×10~(-9)M时达到饱和,解离常数Kd=1.25×10~(-9)M,最大结合量B_(max)=93.08×10~(12)M/g蛋白,其特异性结合与非特异性结合比值达10～15。     

N—乙酰胆碱受体动力学研究

目的 开展N-乙酰胆碱受体(N-AChR)的动力学研究.方法 (1)选择a-BuTX作为主要工具药,进行~(125)I-a-BuTX与电鳐电器官的N-AChR饱和结合实验,用Scatfit程序拟合。125I-a-BuTX与电鳐电器官的N-AChR结合的解离动力学实验,当结合达到饱合后,向两个反应体系分别加入1000倍以上的a-BuTX或烟碱.不同时间取样、分离后,γ-计数仪计数。(2) 13日龄的鸡胚骨骼肌N-AChR及20日龄的鸡视叶的N-AChR与~(125)-I-a-BuTX饱和结合实验,用Scaifit程序拟合。另外以烟碱对125I-a-BuTX与电鳐电器官、鸡视叶、鸡胚骨骼肌N-AChR结合的竞争实验,用Logit程序计算IC_(50)值。结果(1)1251-a-BuTX与电鳐电器官的N-AChR饱和结合实验得到一条双曲线的Scatchard图,符合一配基两受体结合模型,求得高、低两个结合位点和两个B_(max)(最大结合值),两个体系的解离动力学均为二次解离曲线,分别求得两个解离常数和两个半衰期.(2)两种实验结果,均符合一配基一受体结合模型,分别求得一个结合位点和一个B_(max).烟碱对~(125)-I-a-BuTX电鳐电器官的N-AChR结合的竞争作用IG_(50)值分别为3.86×10~(-5)和1.65×10~(-6)mol.对鸡视叶的N-AChR竞争作用.IC_(50)值为6.02×10~(-7)mol,对骨骼肌竞争作用IG_(50)值为4.60×10~(-6)。结论 (1)电鳐电器官中存在~(12     

麦迪霉素在水溶液中稳定性的研究

本实验用分光光度法对麦迪霉素的稳定性进行研究。结果表明在55℃、70℃,于pH2～9范围内稳定,在50℃、55℃,65℃,pH=1.0,pH=12.0不稳定。其水解反应服从一级反应动力学公式,测得:pH=12.0:50℃,K=4.00×10~(-3)min~(-1),55℃,K=7.68×10~(-3)min~(-1),65℃,K=4.12×10~(-2)min~(-1);pH=1.0:50℃,K=1.76×10~(-3)min~(-1),55℃,K=6.41×10~(-3)min~(-1),65℃,K=2.14×10~(-2)min(-1)。并证明温度对反应速度的影响遵守阿累尼乌斯公式。求出pH=12.0,E_a=3.27×10~4cal/mol,A=3.98×10~(19);pH=1.0,E_a=3.43×10~4cal/mol,A=3.98×10~(20),并建立具体的阿累尼乌斯公式: pH=12.0:1gK=-7.1×10~3·_T~1+19.6 pH=1.0:1gK=-7.5×10~3·(1/T)+20.6     

成人肝癌组织褪黑素受体的表达和结合特性

目的检测成人肝癌组织是否表达褪黑素受体(me-latonin receptor,MR),并探讨其结合特性。方法免疫组化法检测肝癌组织MR两种亚型(MT1、MT2)的表达和分布。采用放射配体结合法检测肝癌组织MR特异性结合和动力学特性。结果免疫组化结果显示,成人肝癌组织MT1和MT2均呈聚集型粽黄色颗粒阳性染色,主要分布在细胞膜和细胞质,细胞核中表达最少。放射配体结合结果表明,成人肝癌组织存有125I标记的褪黑素(125I-Mel)特异结合位点,最大结合容量(Bmax)值为(0.29±0.07)pmol.g-1 protein,平衡解离常数(Kd)值为(48.7±6.5)pmol·L-1,动力学分析表明该特异性结合特点为可饱和及可逆性结合。结论成人肝癌组织表达MR,包括MT1和MT2,其结合特性为低结合容量、高亲和力、可饱和性及可逆性。     

新抗胆碱药[3H]三环哌酯对人脑M受体的作用

用放射配体受体结合试验法,研究了新化合物三环哌酯与人大脑皮质M受体的结合特性,并与QNB作了比较。饱和实验结果显示,[³H]三环哌酯的结合参数与[³H]QNB相近,两种配体的作用均符合单位点模型。竞争性抑制实验结果表明二者作用强度相当。[³H]三环哌酯的结合和解离速率常数均较[³H]QNB大,且其与皮质M受体的解离受季铵酚的变构调节,结果提示,两种配体与M受体有一些不同的结合特性,在M受体研究中,[³H]三环哌酯可以作为[³H]QNB的补充工具。     

黄酮类化合物对醛糖还原酶的抑制作用

本文建立了一个微量、简便、快速的醛糖还原酶抑制剂筛选方法,对32个黄酮类化合物进行了筛选。其中黄芩甙元和异金丝桃甙乙酸盐作用较强,IC_(50)分别为3.5×10~(-6)M及2.2×10~(-6)M。此外,还对其抑制酶的动力学进行了分析。     

人工培养冬菇菌丝体中抗血栓形成成分的分离和生物学性质

从人工培养冬菇菌丝体中用阳离子交换纤维素层析分离,获得一种具有抗血栓形成作用的蛋白质,分子量为1.75×10~4u,等电点为4.3,给大鼠iv10~(-6)mol1/kg,能完全预防体外血栓形成,IC_(50)为4.4×10~(-7)mol/kg。无论是体内或体外,都具有对抗胶原引起的血小板聚集作用,体外全对抗浓度为7.5×10~(-5)mol/L,其IC_(50)为4×10~(-5)1/L,体内剂量1.25×10~(-5)mol/kg(iv)时,血小板聚集抑制率可达60%,抗血凝的最低浓度为3 ×10~(-6)mol/L。     

2型糖尿病大鼠不同时期膀胱收缩力动态变化的实验研究

目的观察2型糖尿病(T2DM)大鼠不同时期膀胱收缩力的动态变化情况,以探讨糖尿病膀胱病变的病理生理学机制。方法制备T2DM大鼠模型,以同龄正常大鼠为对照,在成模后6、12和20周,应用M受体激动剂卡巴胆碱,在不同药物浓度水平下进行离体逼尿肌环收缩刺激实验。结果 6周时实验组的最大收缩力(1.12±0.16)g/mg,比对照组(0.99±0.06)g/mg增高;半数有效剂量浓度(EC50)实验组(1.7±0.4)×10-7mol/L比对照组(2.7±0.3)×10-7mol/L降低;12周时实验组的最大收缩力(1.20±0.12)g/mg与对照组(1.21±0.08)g/mg差异无统计学意义;EC50实验组(2.2±0.4)×10-7mol/L与对照组(2.3±0.4)×10-7mol/L差异无统计学意义;20周时实验组的最大收缩力(1.01±0.05)g/mg比对照组(1.90±0.09)g/mg降低;EC50实验组(2.7±0.4)×10-7mol/L比对照组(2.0±0.4)×10-7mol/L增高。结论不同时期的糖尿病大鼠膀胱收缩力表现不同,随着病程的进展,膀胱逼尿肌收缩力呈现先增高后降低的趋势,对卡巴胆碱的敏感性也呈现先增高后降低的变化趋势。     

血栓素合成酶抑制剂CV-4151的药理作用

在合成的一系列新ω-(3-吡啶基)链烯酸中,CV-4151在体外及大鼠体内实验中显示了对血栓素合成酶的抑制作用最强和有前途。本品可有效地抑制马血小板微粒体TxA_2合成酶活性,IC_(50)值为2.6×10~(-8)8M;但是,即使在10~(-4)M的高浓度时,它对环氧酶、PGI_2合成酶和5-脂氧酶亦几乎没有作用。本品对血清TxA_2产生的ID_(50)值(mg/kg口服2     

川芎嗪对VEGF受体与其放射性配体结合的抑制

目的探讨川芎嗪对VEGF受体与其放射性配体结合的影响。方法采用血清药理学方法,分别制备川芎嗪大剂量、小剂量、阳性对照组鱼精蛋白、生理盐水各组含药血清,采用反相高效液相色谱法测定川芎嗪含药血清中药物浓度。将各组血清作用于人脐静脉内皮细胞ECV304,采用放射配体受体结合分析法(RBA)观察川芎嗪对VEGF受体最大结合容量(Bmax)和解离常数(Kd值)的影响。结果川芎嗪大剂量组Kd=343.30±36.64pmol·L-1,Bmax=46.26±5.85fmol/2×105cells,与生理盐水组相比Kd增大(P<0.05),Bmax减小(P<0.05)。川芎嗪小剂量组与生理盐水组相比Kd有增大趋势、Bmax有减小趋势,但差异无显著性。阳性对照组Kd=179.07±25.65pmol·L-1,受体最大结合容量Bmax=38.65±9.83fmol/2×105cells,与生理盐水组相比Kd差异无显著性(P>0.05),Bmax减小(P<0.05)。结论在川芎嗪作用下VEGF受体与125IVEGF结合的亲和力下降,VEGF受体数目下降,川芎嗪抑制VEGF受体与125IVEGF结合。川芎嗪含药血清(143.0mg·kg-1组)抑制VEGF受体与125IVEGF结合。     

云南甘草总皂甙清除氧自由基和抗脂质过氧化作用

云南甘草总皂甙(SGY)对Fenton反应生成的·OH具有较强的直接清除作用,其IC_(50)为29mg·L~(-1).且作用明显强于·OH特异性清除剂甘露醇(其IC_(50)为2.27×10~(-2)mol·L~(-1).即4315mg·L~(-1))。SGY对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统产生的O_2~+也有较强的清除作用·其IC_(50)为89mg·L~(-1)SGY对自由基发生系统(FRGS)诱导离体大鼠心肌匀浆组织产生的脂质过氧化(LPO)作用有明显的抑制效应.对FRGS诱导离体大鼠心肌线粒体膜LPO也有一定的抑制作用。结果提示SGY的抗脂质过氧化作用与其清除氧自由基作用有关。