二氢吡啶类钙通道阻滞药对人肝微粒体中氯吡格雷代谢的抑制作用

目的:研究二氢吡啶类(DHPs)钙通道阻滞药硝苯地平、氨氯地平、非洛地平对人肝微粒体中氯吡格雷代谢的影响,为临床合理用药提供参考。方法:采用人肝微粒体体外代谢模型,将0.1、1、5、10、25、50、100、200μmol/L的硝苯地平、氨氯地平、非洛地平分别与氯吡格雷(20μmol/L)在人肝微粒体中进行共孵育,孵育15 min后加入5倍体积的含内标氯雷他定的冰乙腈溶液(内标终质量浓度为500 ng/ml)终止反应。沉淀蛋白后取上清液,采用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)法检测氯吡格雷的浓度,以不加DHPs药物为阴性对照计算各DHPs药物作用下氯吡格雷的代谢抑制率。结果:硝苯地平、氨氯地平、非洛地平对人肝微粒体中氯吡格雷的代谢均有一定程度的抑制作用,但200μmol/L浓度时代谢抑制率仍不及50%,提示半数抑制浓度均大于200μmol/L。结论:DHPs药物能抑制人肝微粒体中氯吡格雷的代谢,但抑制作用不强。提示DHPs药物不与氯吡格雷发生相互作用,不会影响两者临床联合使用。     

二氢吡啶类药物与牛血清白蛋白相互作用的研究

目的 研究二氢吡啶类药物(DHP)（包括硝苯地平、尼群地平、尼卡地平、尼莫地平、非洛地平）与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制。     

人肝微粒体中尼莫地平代谢的酶动力学及其抑制(英文)

目的:在体外研究人肝微粒体中尼莫地平代谢的酶动力学及选择性的细胞色素P-450(CYP450)酶抑制剂对尼莫地平代谢的影响。方法:采用人肝微粒体研究尼莫地平脱氢酶的代谢动力学,运用Eadie-Hof-stee方程估算其动力学参数。在体外运用CYP450酶的选择性抑制剂探讨其对尼莫地平代谢的影响及人肝微粒体中参与尼莫地平二氢吡啶环脱氢代谢的CYP450酶。结果:尼莫地平在人肝微粒体中的代谢存在较大的个体差异,尼莫地平脱氢酶的K_m为(36±11)μmol,其V_m为(17±7)μmol·g~(-1)·min~(-1)。酮康唑和三乙酰竹桃霉素竞争性地抑制尼莫地平二氢吡啶环脱氢代谢,其K_i值分别为0.59和122.2μmol。非那西丁、奎尼丁、DDC、Sul和Tra对尼莫地平二氢吡啶环脱氢代谢没有明显的影响。结论:尼莫地平在体内的药物动力学个体差异与其在肝中的代谢存在多态性有关。CYP3A参与了尼莫地平二氢吡啶环脱氢代谢,CYP3A的抑制剂可能会与尼莫地平发生代谢相互作用。     

补骨脂素和异补骨脂素对体外细胞色素P450酶活性的抑制和诱导作用

目的探讨补骨脂素(PSO)和异补骨脂素(IPSO)对细胞色素P450(CYP)活性的抑制和诱导作用。方法将人肝微粒体或鼠肝微粒体与PSO或IPSO以及CYP特异性探针底物共孵育30 min,分别以非那西丁O-脱乙基、甲苯磺丁脲4-羟基化、美芬妥因-4-羟基化、右美沙芬O-脱甲基化和咪达唑仑1'-羟基化为同工酶CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6(大鼠2D2)和CYP3A4(大鼠3A1/2)代谢活性的标志,用HPLC-MS/MS法检测相应代谢产物的生成量并计算相应的IC50值,评价PSO和IPSO对5种CYP同工酶的潜在抑制作用。将PSO和IPSO或阳性诱导剂与"三明治"培养大鼠肝原代细胞共孵育72 h后,再加入CYP探针底物孵育1 h,检测相应代谢产物的生成量,与阳性诱导剂组比较,评价二者对CYP1A和CYP3A的诱导作用。结果 PSO和IPSO对人肝微粒体和鼠肝微粒体的CYP1A2均有较强的抑制作用,在人肝微粒体中的IC50值分别为0.17和0.13μmol·L-1;在鼠肝微粒体中的IC50值分别为0.47和0.36μmol·L-1。二者对人肝微粒体的CYP2D6也有中等强度的抑制作用,IC50值分别为3.59和9.51μmol·L-1。PSO和IPSO 100μmol·L-1可分别将大鼠肝细胞的CYP3A活性提高1.18和0.96倍,有一定的诱导作用。结论 PSO和IPSO能显著抑制CYP1A2酶活性,对CYP3A有一定的诱导作用。     

二氢吡啶类药物与牛血清白蛋白相互作用的研究

目的研究二氢吡啶类药物(DHP)（包括硝苯地平、尼群地平、尼卡地平、尼莫地平、非洛地平）与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制。方法采用荧光法和紫外光谱法。结果分别求出DHP与BSA间的结合距离、能量转移效率等相互作用参数。结论DHP在体内与蛋白结合后,白蛋白仅起运载工具的作用将之运输到受体作用部位。     

心血管病临床合理用药专题笔谈

3.2钙拮抗剂(CCB)常用钙拮抗剂有三大类,分别是苯烷胺类,以维拉帕米(Verapamil)为代表;硫氮卓类,以地尔硫(硫氮酮,Diltiazem)为代表;二氢吡啶类,以硝苯地平(心痛定,Nifedipine)为代表,其控释剂为拜心同(30mg/片),其缓释剂为尼福达(20mg/片);此外新合成的制剂有尼群地平(Nitrendipine)、尼卡地平(Nica dipine)、尼莫地平(Ni modipine)、非洛地平(Felodipine)、氨氯地平(络活喜,Amlodipine)、拉西地平(Lacidipine)等,其中氨氯地平、非洛地平、拉西地平及拜心同等作用时间长,不致引起血压昼夜明显波动,特别是拜心同口服片,血压昼夜谷…     

2001-2004年重庆地区18家医院钙通道阻滞剂应用分析

目的：分析长江流域医院用药信息网中重庆地区18家入网医院钙通道阻滞剂近4年的应用状况，为该类药物的生产、销售和临床应用提供参考。方法：采用DDD分析法和金额排序法，对18家医院2001-2004年钙通道阻滞的消耗品种、金额、DDDs和DDC进行统计分析。结果：4年间重庆地区钙通道阻滞剂居购入金额前5位的是硝苯地平、氨氯地平、非洛地平、尼莫地平、氟桂利嗪，且氨氯地平和硝苯地平的DDDs逐年上升；氨氯地平、氟桂利嗪和尼卡地平的DDC值逐年下降．硝苯地平的DDC值逐年上升。结论：钙通道阻滞剂临床应用多年，其作用已为临床所证实，特别是第3代钙通道阻滞剂氨氯地平的应用前景十分光明。     

20味中成药对5个人肝微粒体酶活性的影响

目的：考察六神丸等20个常用中成药对CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4这5个人肝微粒体中主要的药物代谢酶的活性是否有影响。方法：采用人肝微粒体孵育法,分别采用非那西丁、甲苯磺丁脲、美芬妥因、氢溴酸右美沙芬和咪达唑仑作为5个酶的探针药物,采用液相色谱－质谱联用法测定了探针药物代谢产物的浓度,比较分别加入待测药物和空白缓冲液时代谢产物的初始生成速度。结果：六神丸对CYP1A2有明显抑制作用,IC50为28．75μg／mL;肝苏颗粒对CYP2C19有明显抑制作用,IC50为29．80μg／mL;丹参片对CYP1A2有明显抑制作用,IC50为48．55μg／mL;贝羚胶囊对CYP1A2有明显抑制作用,IC50为17．45μg／mL;复方夏天无片对CYP2D6有明显抑制作用,IC50为40．26μg／mL;丹参酮胶囊对CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CY173A4均有明显抑制作用,IC50分别为7．04、13．97、55．77、33．90μg／mL和34．57μg／mL;通风定胶囊对CYP2D6有明显抑制作用,IC铀为37．56μg／mL结论：所测定的多数中成药对药物代谢酶有明显的抑制作用,这些药物与药物代谢酶的底物药物联用发生药物相互作用的可能性较大,临床联合用药须谨慎。     

体外探讨五味子乙素对大鼠肝微粒体CYP3A的影响及其作用机制

目的通过体外药物代谢实验探讨五味子乙素对CYP3A活性的影响,并探讨其作用机制。方法以大鼠肝微粒体为载体,选取咪达唑仑为药物"探针",建立高效液相色谱法(HPLC)检测五味子乙素对肝微粒体代谢咪达唑仑的影响,体外给药测定其IC50值以及相关酶动力学参数,并推测其可能的作用机制。结果孵育体系内源性物质不干扰测定,方法快捷、稳定、灵敏度高。结果显示五味子乙素呈剂量依赖性抑制体外肝微粒体咪达唑仑代谢,其IC50为5.50g.L-1,据此计算其Ki为4.32mol·L-1。结论五味子乙素体外抑制大鼠肝微粒体CYP3A活性,其作用机制为可逆性抑制,属于非竞争性抑制类型。     

二氢吡啶类钙离子拮抗剂对血压晨峰现象影响的研究

目的比较不同二氢吡啶类钙离子拮抗剂对轻中度原发性高血压的疗效。方法150例轻中度原发性高血压患者,随机分为苯磺酸氨氯地平组,非洛地平缓释剂组,硝苯地平控释片组,每组50例。规范治疗4周,比较不同药物对清晨自测血压、动态血压及血压晨峰的影响。结果三组患者治疗后各项观察指标（自测SBP、自测DBP、24hSBP、24hDBP）与治疗前比较均明显降低（P〈0．05）。苯磺酸氨氯地平组对血压晨峰的影响明显优于非洛地平缓释剂组和硝苯地平控释片组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论二氢吡啶类钙离子拮抗剂对24h平均血压及清晨自测血压均有良好的疗效。苯磺酸氨氯地平对血压晨峰的改善情况优于非洛地平缓释剂和硝苯地平控释片。     

烟酰胺磷酸核糖转移酶抑制剂的设计合成及抗肿瘤细胞增殖活性

目的寻找新的烟酰胺磷酸核糖转移酶（Nampt）抑制剂,为进一步药物设计提供依据。方法以进入临床研究的APO866为先导化合物,设计合成一系列Nampt抑制剂。以哌嗪为原料,经取代、SN2反应、Gabriel反应、成胍、环合等多步反应得到关键中间体（7a7,b）,该中间体再与酰氯衍生物反应,最终合成目标化合物。结果与结论合成了8个全新的Nampt抑制剂,化合物的结构经质谱和核磁共振氢谱确证;初步体外抗肿瘤实验结果表明,其中3个化合物（H1、H5、H7）具有一定的抗肿瘤活性,其活性与阳性对照APO866相当。     

钩藤碱对麻醉大鼠颈动脉窦压力感受器活动的抑制作用(英文)

目的探讨钩藤碱(Rhy)对大鼠颈动脉窦压力感受器活动的影响及其有关机制。方法通过隔离灌流颈动脉窦区的方法来获得颈动脉窦压力感受器活动的各项参数,阈压(TP)、饱和压(SP)、最大斜率(PS)和窦神经放电的最大积分值(PIV)。① Rhy10, 50和100μmo·lL-1用K-H液稀释后,隔离灌流颈动脉窦区。待钩藤碱发挥作用后,用K-H液冲洗恢复,在给药前后以阶梯方式升降窦内压以刺激颈动脉窦压力感受器,同时记录窦神经传入放电及积分。②分别预先灌流一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)、K+通道阻断剂四乙胺(TEA)和L-钙通道开放剂Bay K8644,观察他们对钩藤碱效应的影响。结果①Rhy 10μmol.L-1灌流隔离的颈动脉窦区,PS从(19.2±0.3)%降至(18.2±0.1)%·kPa-1,PIV从(219.3±3.3)%降至(199.1±3.8)%,同时TP和SP分别从(8.2±0.3)和(21.5±0.1)增加至(9.1±0.1)kPa和(22.1±0.1)kPa。用Rhy 50和100μmol·L-1进行灌流时,如PS,TP和SP的变化均呈浓度依赖性,表明Rhy可以抑制CBA。②预先灌流L-NAME不能阻断Rhy的效应。③预先灌流K+通道阻断剂TEA 1mmol·L-1也不能阻断Rhy对颈动脉窦压力感受器放电活动的抑制。④预先灌流L-钙通道开放剂Bay K8644可大部分阻断Rhy的作用。结论 Rhy可直接抑制大鼠颈动脉窦压力感受器传入神经放电活动,其机制可能为Rhy抑制了动脉压力感受器上的Ca2+内流。     

司帕沙星、联苯乙酸对大鼠海马神经元GABA-A和离子型谷氨酸受体的作用(英文)

目的 :观察司帕沙星单用和与联苯乙酸合用时 ,对γ 氨基丁酸 (GABA) ,NMDA ,AMPA和海人藻酸诱导电流的作用。方法 :应用全细胞式膜片钳技术在急性打散的新生大鼠海马锥体神经元上记录GABA ,NMDA ,AMPA和海人藻酸的诱导电流。结果 :司帕沙星 1mmol·L- 1对GABA诱导的电流有迅速可逆的抑制作用 ,抑制率为 (4 7.6±s2 .9) % ,而联苯乙酸 10 μmol·L- 1无抑制作用。但联苯乙酸 (10 μmol·L- 1)与司帕沙星 1mmol·L- 1合用时 ,稍稍增强抑制作用 ,司帕沙星单用或合用联苯乙酸 (10 μmol·L- 1)对GABA诱导电流的IC50 分别为 (2 38± 2 1) μmol·L- 1和 (89± 5 ) μmol·L- 1。司帕沙星、联苯乙酸或司帕沙星合用联苯乙酸对NM DA ,AMPA和海人藻酸诱导的电流无明显作用。结论 :提示司帕沙星 ,或与联苯乙酸合用时所产生的中枢神经毒性可能与抑制GABA诱导的电流有关 ,而与NMDA ,AMPA和海人藻酸诱导的电流无关。     

马蹄金素衍生物的合成及其抗HBV活性研究

目的对马蹄金素[N-(N-苯甲酰基-L-苯丙氨酰基)-O-乙酰基-L-苯丙氨醇,MTS]进行结构修饰,以期寻找到抗乙肝病毒(HBV)活性更强、毒性更低的马蹄金素衍生物。方法以马蹄金素为先导化合物进行结构优化,合成一系列不同取代基团的马蹄金素衍生物并对其进行抗HBV活性测试。结果合成了马蹄金素衍生物共计9个,经体外活性筛选结果显示有4个衍生物具有抗HBV活性,4a(IC50:24.20μmol·L-1,SI:3.69)、5f(IC50:252.60μmol·L-1,SI:>3.96)、5g(IC50:0.82μmol·L-1,SI:52.57)、5h(IC50:1.44μmol·L-1,SI:59.97)。结论化合物5g和5h显示较强的抗HBV活性,选择指数较高,具有进一步研究开发的价值。     

根皮素的心血管保护作用研究

目的 研究根皮素对狗冠状动脉舒张特征的影响及其机制.方法 制备狗冠状动脉血管环,固定于盛有K-H液的恒温肌槽内,并观察等长时血管张力的变化.结果 10 μmol·L-1或30 μmol· L-1 L根皮素使KCl及无钙K-H液中CaCl2量效曲线明显右移,使血管环敏感性和最大收缩反应明显降低.30 μmol· L-1根皮素在50 mmol· L-1 KCl预收缩的离体冠脉血管环产生一个明显的急性舒张,加入Nω-L-硝基精氨酸1×10-4mol·L-1、普蔡洛尔1×10-5 mol· L-1、亚甲蓝1×10-5 mol·L-1、二硝酸异山梨醇酯(吲哚美辛)1×10-5 mol·L-1及去内皮细胞后,根皮素的急性舒张血管作用不受影响.结论 根皮素在离体冠脉血管环的舒张效应主要是通过抑制电压依赖性钙通道实现的.根皮素的这种舒张效应与NO、内皮、β肾上腺素受体和前列腺素类皆无关.     

白藜芦醇对家兔窦房结起搏细胞的电生理效应(英文)

目的为探讨白藜芦醇是否能成为抗心律失常药,研究了其对窦房结起搏细胞的电生理效应。方法应用细胞内微电极方法记录家兔窦房结起搏细胞的动作电位。结果白藜芦醇(30~120μmol.L-1)显著降低窦房结起搏细胞的动作电位幅度、零相最大上升速率(Vmax)、舒张期除极速率和起搏放电频率。而对最大舒张期电位和90%复极化的时间无明显作用。预先应用L型钙通道开放剂Bay-K-8644(0.5μmol.L-1)灌流窦房结10 min可阻断白藜芦醇(60μmol.L-1)对起搏细胞的上述电生理效应。而应用超极化激活电流阻断剂氯化铯(2 mmol.L-1)加钾通道阻断剂四乙铵(20 mmol.L-1)或应用一氧化氮(NO)合酶阻断剂-LNAME(0.5 mmol.L-1)灌流窦房结标本10min对白藜芦醇(60μmol.L-1)的电生理效应没有明显影响。结论白藜芦醇能抑制家兔窦房结起搏细胞的自发活动,此效应可能与其通过非NO依赖性途径抑制钙离子内流有关。     

薯蓣皂苷元衍生物的抗肿瘤活性研究

目的研究薯蓣皂苷元衍生物在体外的抗肿瘤活性。方法采用MTT法对人恶性黑色素瘤细胞A375、人肺腺癌细胞A549、人肝癌细胞HepG-2及人慢性髓原白血病细胞株K562进行体外抗肿瘤活性试验。结果薯蓣皂苷元衍生物对4个肿瘤细胞株A375、A549、K562、HepG-2具有不同程度的抗肿瘤活性。结论绝大部分薯蓣皂苷元衍生物对4个肿瘤细胞株有较好的抗肿瘤活性,IC50值都低于30μmol.L-1。化合物22对细胞株A375的IC50=4.48μmol.L-1,化合物9、10对细胞株K562的IC50分别为2.51、2.38μmol.L-1;显示其抗肿瘤活性与对照化合物1-(3β-薯蓣皂苷元)-3-苄基咪唑溴盐相当。     

染料木黄酮对豚鼠结肠平滑肌细胞L型钙通道的影响(英文)

目的研究酪氨酸激酶抑制剂染料木黄酮(GST)对豚鼠结肠平滑肌细胞L型钙通道电流的作用。方法木瓜蛋白酶法分离单个豚鼠结肠平滑肌细胞,应用全细胞式膜片钳技术记录L型钙通道电流。结果 GST(10 ~100μmo·lL-1)浓度依赖性地阻断L型钙通道电流,其作用可被洗脱,半数有效抑制浓度为(39.9±3.6)μmol·L-1。GST可使L型钙通道的稳态失活曲线向超极化方向左移约10 mV(P<0.01),对其斜率没有影响。GST的无活性拟似物大豆异黄酮对L型钙通道电流的作用明显小于GST。酪氨酸磷酸酶抑制剂原钒酸钠可阻断GST对钙通道电流的抑制作用。结论 GST可通过酪氨酸激酶途径抑制豚鼠结肠平滑肌L型钙通道。     

三氧化二砷与甲磺酸伊马替尼对慢性粒细胞白血病原代细胞增殖与凋亡的协同作用研究

目的：探讨三氧化二砷（Arsenic trioxide,ATO）对甲磺酸伊马替尼（STI571）在慢性粒细胞白血病（CML）原代细胞中对细胞增殖及凋亡的影响。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察STI571单独使用与联用ATO对慢性粒细胞白血病原代细胞增殖抑制的变化情况。流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：无毒剂量的ATO（0.15μmol·L-1）联用STI571（IC500.324±0.011μmol·L-1）较单独使用STI571（0.580±0.007μmol·L-1）时对细胞抑制率显著增大,IC50下降1.79倍（P〈0.05）。细胞经ATO（0.15μmol·L-1）、STI571（0.5μmol·L-1）联合处理24h、48h时,细胞凋亡率增大为15.6%、50.7%,协同作用为增强（＋＋）。结论：ATO能增强STI571对CML原代细胞敏感性,能促进细胞凋亡与STI571具有增强的协同作用。     

蛋白激酶C抑制药enzastaurin对吉非替尼耐药的人非小细胞肺癌细胞株生长的影响

目的：观察新型靶向制剂enzastaurin单独或联合吉非替尼对耐药人非小细胞肺癌细胞株的影响,设计合理的治疗药物组合。方法：CCK8法检测细胞增殖,Chou-Talalay联用指数法判定联合用药效果,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果：单药吉非替尼及enzastaurin作用NCI-H460耐药肺癌细胞72 h的半数抑制浓度（IC50）分别为6.99μmol·L-1（95%CI 3.55~13.79μmol·L-1）,7.25μmol·L-1（95%CI 4.77~1.02μmol·L-1）。两药联合应用对肺癌细胞的抑制作用增强（P 〈0.05）,同时给药组抑制效果更显著（P〈0.01）。同时给药组、序贯给药组（先用吉非替尼）和序贯给药组（先用enzastaurin）吉非替尼对H460细胞的IC50值分别为0.006μmol·L-1（95%CI 0.002~0.020μmol·L-1）,0.02μmol·L-1（95%CI 0.011~0.037μmol·L-1）,0.085μmol·L-1（95%CI 0.042~0.170μmol·L-1）。联合指数法显示在吉非替尼浓度0.05μmol·L-1以上时,同时给药组联合指数均〈1。细胞周期分布实验结果显示同时给药组可显著提高G0/G1期细胞比例（P〈0.05）,阻滞细胞于G1期。结论：蛋白激酶C抑制药enzastaurin与EGFR抑制药吉非替尼联用具有较好的协同作用,两药联合应用可能是出现吉非替尼耐药的非小细胞肺癌后续治疗的一个新选择。