巨噬细胞炎症蛋白1-α、解整合素样-金蛋白酶8、12 和CD68蛋白在颌骨巨细胞病变及长骨骨巨细胞瘤中的表达

目的检测巨噬细胞炎症蛋白1-α(MIP-1α)、解整合素样-金属蛋白酶(ADAM)8、12和CD68在颌骨巨细胞病变和长骨骨巨细胞瘤中的表达,探讨其在这两种巨细胞病变中的多核巨细胞发生中的作用.方法采用免疫组织化学SP法检测24例颌骨中心性巨细胞病变,24例长骨骨巨细胞瘤石蜡组织中的MIP-1α、ADAM8、ADAM12和CD68蛋白的表达.结果 MIP-1α在24例颌骨中心性巨细胞病变和24例长骨骨巨细胞瘤中的血管、类骨质和新骨形成区中强表达,而在多核巨细胞和圆形单核细胞中为阴性;ADAM8、ADAM12和CD68在颌骨中心性巨细胞肉芽肿和长骨骨巨细胞瘤中几乎所有多核巨细胞和部分圆形单核基质细胞均为阳性.结论颌骨中心性巨细胞病变和长骨骨巨细胞瘤中的多核巨细胞可能由CD68+的圆形单核基质细胞融合而成,这些圆形单核细胞可能是由骨微环境中的趋化因子,募集外周血中循环的单核细胞到病变局部分化而成的具有破骨细胞前体细胞性质的细胞,继而在某些融合蛋白作用下发生融合,成熟为多核破骨样巨细胞.     

巨噬细胞炎症蛋白1-α、解整合素样-金属蛋白酶8、12和CD68蛋白在颌骨巨细胞病变及长骨骨巨细胞瘤中的表达

目的检测巨噬细胞炎症蛋白1-α[(MIP-1α)、解整合素样-金属蛋白酶(ADAM)8、12和CD68在颌骨巨细胞病变和长骨骨巨细胞瘤中的表达，探讨其在这两种巨细胞病变中的多核巨细胞发生中的作用。方法采用免疫组织化学sP法检测24例颌骨中心性巨细胞病变，24例长骨骨巨细胞瘤石蜡组织中的MIP-1α、ADAM8、ADAMl2和CD68蛋白的表达。结果MIP-1α在24例颌骨中心性巨细胞病变和24例长骨骨巨细胞瘤中的血管、类骨质和新骨形成区中强表达，而在多核巨细胞和圆形单核细胞中为阴性；ADAM8、ADAM12和CD68在颌骨中心性巨细胞肉芽肿和长骨骨巨细胞瘤中几乎所有多核巨细胞和部分圆形单核基质细胞均为阳性。结论颌骨中心性巨细胞病变和长骨骨巨细胞瘤中的多核巨细胞可能由CD68 的圆形单核基质细胞融合而成，这些圆形单核细胞可能是由骨微环境中的趋化因子，募集外周血中循环的单核细胞到病变局部分化而成的具有破骨细胞前体细胞性质的细胞，继而在某些融合蛋白作用下发生融合，成熟为多核破骨样巨细胞。     

骨巨细胞瘤中PTEN基因与PCNA的表达

目的 探讨PTEN与骨巨细胞瘤中破骨样多核巨细胞的关系。方法 采用免疫组化染色方法检测27例骨巨细胞瘤PTEN蛋白与PCNA的表达、PCR检测骨巨细胞瘤PTEN基因的外显子。结果 77．8％(21／27例)骨巨细胞瘤中仅破骨样多核巨细胞PTEN蛋白呈强表达，PCNA不表达；而间质细胞基本不表达PTEN蛋白，但具有不同比例的PCNA阳性细胞。在所分析的8例骨巨细胞瘤中，PCR均检测到PTEN基因的外显子。结论 PTEN在GCT破骨样多核巨细胞的过表达可能是骨巨细胞瘤形成原因之一。     

尿激酶型纤溶酶原激活物系统对骨巨细胞瘤细胞基质金属蛋白酶-2和组织基质金属蛋白酶抑制物-3表达的影响

目的:研究尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)信号转导对骨巨细胞瘤基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和金属蛋白酶组织抑制物-3(TIMP-3)的调节。方法:用免疫组化检测骨巨细胞瘤组织中uPAR、MMP-2和TIMP-3的表达。用免疫共沉淀法检测uPA对瘤细胞信号转导通路的p44蛋白磷酸化水平。用蛋白印迹法检测用uPA和uPAR抗体处理后瘤细胞MMP-2和TIMP-3蛋白表达。结果:(1)uPAR主要表达在部分单核基质细胞和一些多核巨细胞的胞膜上;(2)MMP-2主要表达在瘤细胞的胞浆,在多核巨细胞,其表达有明显的极向性;(3)在骨巨细胞瘤组织TIMP-3表达量低于MMP-2,在多核巨细胞也显示极向性表达;(4)将uPA-ATF加入培养的骨巨细胞瘤细胞后,细胞信号通路上的p44蛋白磷酸化水平明显增高。用uPAR抗体处理后,细胞p44蛋白磷酸化水平明显降低。说明uPA-ATF参与细胞信号转导,而且受uPAR拮抗剂的影响;(5)uPA-ATF信号通路上调MMP-2和TIMP-3的表达,而uPAR抗体则下调MMP-2和TIMP-3的表达。结论:本实验首次直接证明uPA-ATF通过信号转导能调节MMP-2和TIMP-3的表达,而后者则在骨巨细胞瘤局部骨质吸收中起重要作用。     

骨巨细胞瘤中骨保护因子及破骨细胞分化因子的表达

目的 检测骨巨细胞瘤中骨保护因子（OPG）及破骨细胞分化因子（ODF）mRNA的表达,并探讨多核巨细胞的来源及造成骨吸收的分子机制。方法 采用半定量逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）方法检测骨巨细胞瘤和正常骨组织中OPG、ODF及其辅助因子巨噬细胞克隆刺激因子、信号受体RANK mRNA的表达,并将两种组织中各因子的表达情况进行半定量比较。结果 正常骨组织中OPG、巨噬细胞克隆刺激因子、RANK mRNA有表达,ODF呈微弱表达;骨巨细胞瘤中OPG、ODF、巨噬细胞克隆刺激因子、RANK mRAN均有表达,ODF的表达非常丰富。骨巨细胞瘤中ODF与OPG的比值远远高于正常骨组织。结论 骨巨细胞瘤中的微环境具备破骨细胞形成及其促进骨吸收的必要条件,多核巨细胞的来源及其骨吸收功能与上述几种因子的表达有关。     

骨巨细胞瘤组织中端粒酶活性的原位检测及意义

目的:探讨骨巨细胞瘤(GCT)石蜡切片中端粒酶活性检测的可行性以及端粒酶在GCT生物学特性中的意义。方法:采用针对人端粒酶hTERT寡核苷酸探针序列, 对27例GCT石蜡标本进行原位杂交, 检测端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达情况。结果:27例GCT中8例hTERTmRNA表达阳性, 石蜡切片中基质细胞、部分多核巨细胞hTERTmRNA表达阳性。结论:采用原位杂交技术检测GCT石蜡切片中hTERT表达, 证实GCT中可能存在肿瘤性巨细胞。     

骨巨细胞瘤中多核巨细胞的分离提纯及原代培养

骨巨细胞瘤是一种以溶骨为主要特征的常见骨肿瘤 ,在病理形态上是由较多的多核巨细胞和大量的单核基质细胞组成。有学者认为骨巨细胞瘤中的多核巨细胞是破骨细胞的肿瘤性变异 ,故该肿瘤曾被命名为“破骨细胞瘤”[1 ] 。近年来 ,越来越多的资料显示 ,骨巨细胞瘤中的多核巨细胞具有许多破骨细胞的特征[2 ] ;而且它们能有效地吸收骨质[3,4] 。Ｚａｍｂｏｎｉｎ等[5 ] 提出 ,骨巨细胞瘤中的多核巨细胞可以作为一种研究破骨细胞生物学特征和骨质吸收的新手段。然而 ,如何有效地从骨巨细胞瘤中提取高纯度的破骨细胞样多核巨细胞 ,文献报道较少[6 ]…     

骨肿瘤的针吸细胞学诊断

目的：探讨骨肿瘤针吸细胞学的诊断标准。方法：分析４６例骨肉瘤针吸细胞学涂片,并与２４例骨巨细胞瘤和１２例骨转移性癌进行对照,找出骨肉瘤的细胞学特征,并与组织学对照分析。结果：观察到骨肿瘤中有关１０种细胞学改变：骨肉瘤涂片中,多形性大细胞（９１．３％）,核仁明显（６９．５％）,单核瘤巨细胞（７６％）,多核瘤巨细胞（６５．２％）,核分裂象（３６．９％）,出血、坏死（９３．４％）。骨巨细胞瘤以多核巨细胞     

睾丸软组织巨细胞瘤临床病理观察

目的 探讨睾丸软组织巨细胞瘤的病理特点.方法 对1例睾丸软组织巨细胞瘤的临床表现、组织形态免疫组化进行综合分析,并结合文献讨论其病理特点及鉴别诊断.结果 睾丸软组织巨细胞瘤边界清楚,切面浅棕色,镜下瘤体成结节状,单核、多核巨细胞散在分布,细胞无异型,可见骨化生,CD68(+).结论 睾丸软组织巨细胞瘤与其它部位软组织巨细胞瘤病理特征相同,易与富含单核、多核巨细胞的相关肿瘤混淆,CD68可资鉴别.     

denosumab治疗前后骨巨细胞瘤组织形态及分子表型分析

目的探讨骨巨细胞瘤denosumab治疗前后组织学形态与分子表型的改变。方法收集2017年1月至2019年12月就诊于北京积水潭医院的10例经denosumab治疗的骨巨细胞瘤病例,行光镜观察。EnVision二步法免疫组织化学进行H3.3、RANK、RANKL的表达检测,采用Sanger测序法检测H3F3A基因的突变类型。结果10例患者包括女性6例,男性4例,年龄20~62岁(平均年龄34岁)。其中发病部位在骶骨有5例,在股骨、桡骨、胫骨、肩胛骨及髌骨各有1例。术前使用denosumab治疗3~6个月。4例患者分别于术后5、6、11、14个月复发,其余术后经随访4~24个月未见复发。denosumab治疗后骨巨细胞瘤表现为巨细胞消失伴显著的新骨形成。治疗后复发病例表现为经典巨细胞瘤结构的复现并伴有denosumab治疗后的成骨形态。免疫组织化学H3.3染色10例均显示治疗前后一致性的瘤细胞核表达,RANK表达于多核巨细胞与单核细胞,RANKL表达于肿瘤细胞。Sanger测序显示所有病例均存在H3F3A G34W突变。结论通过对denosumab治疗前后骨巨细胞瘤组织形态及RANK、RANKL、H3.3免疫表型辅助分析,显示骨巨细胞瘤的细胞组成,并能对denosumab的治疗机制进行深入理解。     

骨巨细胞瘤生物学行为的相关因素分析

目的 探讨骨巨细胞瘤的组织发生以及与肿瘤复发、侵袭、恶变等生物学行为相关的因素.方法 从临床、影像学、手术方式、病理形态、免疫表达和随访结果等方面对2005至2011年间收集的123例骨巨细胞瘤进行分析和研究.结果 骨巨细胞瘤的术后复发率与术前骨巨细胞瘤的影像学分级(P=0.032)、CD147 (P=0.034)和p53(P =0.005)的过表达以及手术方式(P =0.048)有明显相关性,但与骨巨细胞瘤的髓内浸润、骨皮质浸润、骨旁软组织浸润、脉管内瘤栓、单核间质细胞的梭形变、核分裂象多少、Ki-67阳性指数、凝固性坏死、继发性动脉瘤样骨囊肿、出现反应性骨等形态学改变均缺乏明显相关性,骨巨细胞瘤中单核间质细胞p63阳性率(79.7％,94/118)明显高于软骨母细胞瘤(44.7％,21/47)、骨肉瘤(22.2％,10/45)等其他富于巨细胞的骨肿瘤.结论 骨巨细胞瘤是一种有低度恶性潜能的肿瘤,形态学特征难以预测其生物学行为.p63阳性、PGM-1阴性的单核间质细胞是其肿瘤成分,此种细胞p53的过表达以及骨巨细胞瘤各种细胞成分(包括反应性单核巨噬细胞和多核巨细胞)CD147的过表达与骨巨细胞瘤的侵袭、复发和恶变有关.术前根据骨巨细胞瘤的影像学分级选择合适的手术方式是减少复发最重要的因素.     

骨肉瘤骨连结蛋白免疫组化研究

应用多克隆抗体bONⅡ检测30例骨肉瘤中骨连结蛋白的表达,旨在探讨它在骨肉瘤诊断中的意义。结果显示:所有骨肉瘤均呈阳性反应,骨样组织中的基质亦为阳性。对照组中软骨肉瘤,尤文肉瘤和骨恶性淋巴瘤为阴性,骨恶性纤维组织细胞瘤和巨细胞瘤中的多核瘤巨细胞显弱阳性。结果表明骨连结蛋白免疫组化染色对骨肉瘤的诊断,特别是骨样基质缺乏或不易确定的骨肉瘤诊断,以及对小细胞型骨肉瘤和其它小圆细胞骨肿瘤的鉴别诊断具有重要的实用价值。     

骨巨细胞瘤TIMP-3启动子甲基化的研究

目的 检测骨巨细胞瘤(GCT)中TIMP—3启动子甲基化及其蛋白表达，探讨该肿瘤组织TIMP—3蛋白表达缺失的原因和TIMP-3启动子甲基化与GCT分级和复发的关系。方法 用免疫组织化学SP法和蛋白免疫印迹检测TIMP—3在GCT组织中的表达，用甲基化特异的PCR(MSP)法检测TIMP—3基因启动子的甲基化状态。结果 TIMP—3主要在单核基质细胞和多核巨细胞的胞质表达，后者的表达具有明显的极向性。17例GCT中有5例(29．4％)TIMP—3蛋白丢失，其中4例的TIMP—3启动子发生异常甲基化，且均为组织学分级为Ⅱ级的病例。结论 GCT的局部骨质破坏，可能与TIMP—3丢失有关；而TIMP—3启动子的异常甲基化，是TIMP—3基因失活和蛋白丢失的重要机制。     

硫化氢在骨巨细胞瘤中的检测及其在病情评估中的意义

目的检测骨巨细胞瘤组织硫化氢浓度并研究其临床意义。方法检测骨巨细胞瘤患者肿瘤组织和瘤旁正常组织硫化氢、胱硫醚合成酶(Cystathionine beta synthase,CBS)和胱硫醚裂解酶(Cystathionine gamma synthase,CSE)表达并比较其差异,分析骨巨细胞瘤患者硫化氢浓度与临床病理因素的关系。结果骨巨细胞瘤组织中硫化氢浓度、CBS和CSE的m RNA和蛋白质表达均显著高于瘤旁正常组织(0.05)。骨巨细胞瘤患者肿瘤组织中硫化氢浓度在性别、年龄和肿瘤部位中无明显差异(均0.05),在肿瘤最大径、Jaffe分级和Campanacci分级中差异均具有统计学意义(均0.001),肿瘤最大径越大、Jaffe分级越高及Campanacci分级越高硫化氢浓度越高。结论骨巨细胞瘤中硫化氢浓度显著升高,与临床病理因素密切相关,可能在骨巨细胞瘤病情评估中具有重要意义。     

伴有破骨细胞样巨细胞的胰腺未分化癌1例报道及文献复习

目的：探讨伴有破骨细胞样巨细胞的胰腺未分化癌的临床病理特点.方法：观察1例伴有破骨细胞样巨细胞的胰腺未分化癌的形态学特征,并进行免疫组织化学染色.结果：伴有破骨细胞样巨细胞的胰腺未分化癌肿瘤主要有两种细胞组成,一种为单核细胞,分为组织细胞样单核细胞和梭形或多形性瘤细胞两型;另一种为多核巨细胞,分为非肿瘤性的破骨细胞样巨细胞和瘤巨细胞两型.免疫组织化学研究显示,这两种细胞Vimentin均阳性,均不表达cytokeratin（AE1/AE3）,CK5/6,CEA,CgA;其中破骨细胞样巨细胞、组织细胞样单核细胞CD45,CD68阳性,而瘤巨细胞和梭形瘤细胞阴性.结论：伴有破骨细胞样巨细胞的胰腺未分化癌是一种罕见恶性肿瘤,可能为胰腺未分化癌的一个亚型.诊断需与胰腺恶性纤维组织细胞瘤、转移的骨巨细胞瘤或黑色素瘤等鉴别.     

ADAM23在小鼠脑组织的表达

目的:观察整合素-金属蛋白水解酶23(ADAM23)在成年小鼠脑组织的表达及分布。方法:RT-PCR克隆ADAM23全长序列,体外逆转录合成地高辛标记的RNA探针;原位杂交法检测ADAM23在脑各组织的表达。结果:ADAM23 mRNA在小鼠大脑皮层区、海马CA3区、小脑的浦肯野细胞层(Purkinje cell)区、舌下神经核区高表达;而小脑、下丘的中央核、小脑核侧部区等弱表达。结论:ADAM23在成年小鼠脑组织的广泛表达尤其中枢神经系统的高表达,预示着ADAM23在中枢神经系统内有重要作用。     

解整合素-金属蛋白酶12在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的：探讨子痫前期患者胎盘组织中解整合素-金属蛋白酶12(a disintegrin and metalloproteinase 12,ADAM12)蛋白和mRNA表达水平变化及其意义。方法 采用免疫组织化学方法检测31例子痫前期患者（子痫前期组包括子痫前期重度16例、子痫前期轻度15例）和20例正常足月孕妇（对照组）胎盘组织中ADAM12的蛋白表达水平。采用杂交组化方法检测各组孕妇胎盘组织中ADAM12-S和ADAM12-L的mRNA表达水平。结果：子痫前期组孕妇胎盘组织中ADAM12蛋白表达水平为0.56±0.14,对照组的为0.39±0.14,两者相比,差异有统计学意义（P<0.05）;子痫前期重度组与轻度组比较,差异没有统计学意义（P>0.05）。子痫前期组孕妇胎盘组织中ADAM12-S mRNA水平为0.52±0.09,对照组为0.40±0.15,两者相比,差异有统计学意义（P<0.01）;子痫前期重度组与轻度组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;子痫前期组孕妇胎盘组织中ADAM12-L mRNA水平为0.51±0.09,对照组为0.42±0.18,两者相比,差异有统计学意义（P<0.05）;子痫前期重度组与轻度组比较,差异没有统计学意义（P>0.05）。结论：ADAM12蛋白和mRNA水平在胎盘组织中的表达增高可能在子痫前期的发病过程中起重要作用。     

长链非编码SNHG1/miR-145/ADAM17轴在椎间盘髓核退变中的作用及其调控机制

目的 ：研究长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因1（SNHG1）、miR-145及解整合素-金属蛋白酶17（ADAM17）在椎间盘退变（IDD）组织中的表达，探讨SNHG1调控miR-145/ADAM17轴对椎间盘髓核细胞退变的影响及机制。方法 ：采用qRT-PCR、免疫印迹检测30例IDD患者经手术摘除的髓核组织SNHG1、miR-145与ADAM17的表达；双荧光素酶报告基因、RNA免疫共沉淀等确定SNHG1、miR-145与ADAM17的关系；白介素（IL）-1β诱导髓核细胞建立细胞退化模型，SNHG1 siRNA或miR-145模拟物等转染后，CCK-8、流式细胞术等检测细胞增殖、凋亡以及相关分子指标的变化。结果 ：相比于对照髓核组织，IDD髓核组织中SNHG1与ADAM17表达上调，miR-145表达下调，均与Pfirrmann分级显著相关。SNHG1可通过海绵作用靶向miR-145,miR-145也可靶向ADAM17的3’-非编码区（3’-UTR）抑制ADAM17蛋白表达。SNHG1沉默逆转了IL-1β诱导的髓核细胞凋亡及基质酶（基质金属蛋白酶13、ADAMTS4）合成，上...     

应用逆转录-聚合酶链反应检测石蜡包埋腺泡状软组织肉瘤中ASPL-TFE3融合基因的表达

目的 探讨石蜡包埋腺泡状软组织肉瘤中t(X：17)(p11．2：q25)染色体易位融合基因ASPL-TFE3 mRNA表达的意义。方法 收集以4％甲醛固定、石蜡包埋腺泡状软组织肉瘤标本8例,运用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测ASPL-TFE3融合基因mRNA表达,以管家基因β-肌动蛋白(actin)作为内对照检测mRNA质量。另以腺泡状横纹肌肉瘤6例,肾细胞癌6例,副神经节瘤2例,颗粒细胞瘤1例作为对照。结果8例腺泡状软组织肉瘤中4例检测到ASPL-TFE32型融合基因mRNA的表达,2例检测出ASPL-TFE31型融合基因mRNA的表达,余2例β-actin和ASPL-TFE3的检测均为阴性。对照组未检出ASPL-TFE3融合基因,其中6例腺泡型横纹肌肉瘤中4例有PAX3／7-FKHR融合基因的表达。结论 石蜡包埋组织中ASPL-TFE3融合基因表达可作为腺泡状软组织肉瘤诊断和鉴别诊断的分子指标,并有助于其分子发生机制的回顾性研究。     

甲状腺过氧化物酶mRNA cRNA探针的构建及意义

目的 探讨甲状腺过氧化物酶(thyroperoxidase,TPO)mRNA cRNA探针的构建及原位表达的检测方法 和意义.方法 取甲状腺结节新鲜组织,在RT-PCR扩增TPO cDNA的基础上,构建pSPT19-TPO质粒,经Hind Ⅲ和BamHⅠ单酶切后成线性化模板,在SP6和T7 RNA聚合酶作用下,体外转录合成地高辛标记的TPO cRNA反义和正义探针,进行TPO mRNA的原位杂交实验.结果 TPO mRNA阳性杂交信号分布于甲状腺滤泡细胞的胞质,本组腺瘤2例、结节性甲状腺肿4例、瘤周甲状腺组织1例原位杂交阳性,乳头状癌2例、桥本病1例原位杂交阴性.核酸原位杂交和RT-PCR检测甲状腺组织TPO mRNA的表达,结果 一致.结论 成功构建甲状腺过氧化物酶mRNA 的cRNA探针;检测TPO mRNA是一种较准确反映甲状腺组织TPO状态的方法 ,TPO mRNA的原位检测可结合组织形态学了解甲状腺滤泡细胞的功能表达状况.