胰岛素生长因子1在颅缝闭合中调节作用的实验研究

目的：研究胰岛素生长因子1对大鼠颅缝细胞的骨诱导作用和体外调节小鼠矢状缝闭合的作用。方法：获取新出生的SD大鼠的矢状缝细胞进行培养和出生8d的CD1小鼠矢状缝进行体外无血清器官培养基培养，加入胰岛素生长因子1（insulin lilce growth factor 1 IGF1），浓度分别为10ng/ml和40ng/ml，并设立不加IGF1者为对照组，应用RT－PCR检测颅缝细胞的成骨细胞表型碱性磷酸酶、骨钙素和骨桥蛋白mRNA表达，ELISA法检测培养液I型胶原的分泌，光镜观察小鼠矢状缝闭合的情况。结果：加入IGF1的矢状缝细胞的成骨细胞表型碱性磷酸酶、骨钙素和骨桥蛋白mRNA表达以及培养液I型胶原分泌量较对照组明显增高。有IGF1干预的矢状缝移植体培养8d时，颅缝内侧面骨板开始接近，培养20d时，颅缝小部分闭合，培养30d时颅缝大部分闭合，无IGF1干预的对照组培养30d，颅缝未发生闭合。结论：胰岛素生长因子1通过增强颅缝细胞的骨诱导促进颅缝的闭合。     

生长因子FGF在颅缝细胞培养中作用的研究

目的:研究生长因子FGF在颅缝闭合中的调控作用.方法:以颅缝早闭动物模型(SD鼠)的颅缝为研究模型,采用细胞生物学技术、组织化学技术,研究颅缝闭合期间,生长因子bFGF作用下,细胞胶原及骨钙素分泌情况;观察生长因子bFGF,对分离培养的颅缝细胞增殖与代谢影响.结果:在大鼠颅缝分离培养细胞中,bFGF促进颅缝分离培养细胞分泌胶原、骨钙素,加快细胞增殖生长曲线平台期出现,并有效促进大鼠颅缝分离培养细胞S期增殖(p＜0.05).结论:在体外器官培养中,bFGF能促进大鼠分离培养颅缝细胞的活性(p＜0.05).     

生长因子在颅缝早闭症中作用的研究进展

颅缝早闭是一种较常见的先天性颅面畸形,表现为一条或多条颅缝过早闭合。多种因素可以在胚胎期及出生后影响头骨的发育,从而导致不同类型的颅缝早闭。目前研究表明,生长因子与颅缝闭合过程有着密切的联系,本文就生长因子在颅缝早闭症中作用的研究进展进行综述。     

SD大鼠颅缝细胞不同时期GPC3基因表达变化的研究

目的 探索GPC3基因在颅缝组织和细胞中不同时期的表达情况,为后续的疾病模型研究提供参照。方法研究并观察1 d、3 d、7 d的SD大鼠颅缝细胞组织,应用组织切片免疫荧光染色、RT-q PCR、Western Blot等方法,检测其在不同年龄SD大鼠中的表达水平,判断其与颅骨成骨及颅缝闭合的关系。结果 免疫荧光显示,GPC3在大鼠未闭合颅缝组织不同阶段胞内、细胞表面及胞外均有表达;RT-q PCR、Western Blotting结果显示,GPC3基因表达随着大鼠年龄增长呈现下降趋势。结论 SD大鼠中,GPC3与颅缝闭合密切相关。     

新致病基因在颅缝早闭Crouzon综合征中的初步机制研究

目的研究Rbp4(Retinol binding protein 4)、Gpc3(Glypican family of growth factor binding protein 3)、C1qtnf3(Collagenous repeat-containing sequence of 26 KDa protein)等新致病基因在颅缝早闭症中的发病机制,为疾病非手术治疗奠定理论基础。方法以Crouzon综合征Fgfr2cC342Y/+小鼠为实验模型,应用MicroCT和组织学染色,研究小鼠颅缝闭合模式;以Fgfr2cC342Y/+模型,RT-qPCR研究Rbp4、Gpc3、C1qtnf3等新致病基因的表达差异,初步探讨其在颅缝闭合过程中的调控作用;以体外培养的Fgfr2cC342Y/+小鼠颅缝细胞为模型,研究基因突变动物细胞增殖与代谢改变。结果获得Fgfr2cC342Y/+小鼠后额缝、冠状缝、人字缝、矢状缝等颅缝闭合模式,随颅骨发育、颅缝闭合,OC(Osteocalcin)、ALP(Alkalinephosphatase)表达增加,目的基因Rbp4、Gpc3、C1qtnf3表达下降,Msx2(Muscle segment homeobox gene 2)表达增加,杂合子与野生型小鼠之间均存在显著统计学差异,与前期人颅缝组织Microarray研究结果一致。Gpc1(Glypican family ofgrowth factor binding protein 1)、FliI(Flightless I)在颅缝闭合中的表达较恒定,野生型与杂合子之间未见明显统计学差异。体外培养Fgfr2cC342Y/+小鼠颅缝细胞,CellTiter96 MTS和Quant-iT Picogreen dsDNA细胞增殖与代谢分析结果显示,Fgfr2功能获得性突变可促进冠状缝细胞的增殖,从而导致成骨增加,颅缝早闭。结论 Fgfr2cC342Y/+模型新致病基因表达趋势与前期人颅缝组织Microarray研究结果一致,Rbp4、Gpc3、C1qtnf3可能在颅缝早闭中具重要调控作用。     

颅盖畸形形成机制的研究进展

目的 为深入了解颅盖畸形目前在国内外研究中的进展情况，探讨颅缝早闭过程中相关生长因子的作用，为今后的研究工作奠定基础。方法 应用计算机检索PubMed数据库，检索英文相关文章，同时检索中国期刊全文数据库的相关中文文章，并查阅相关书籍。对资料进行初审，并查看文献后的引文。纳入与颅盖畸形形成机制有关的内容，排除不相关及重复文章。结果 经对收集文章的整理，共纳入23篇文献。对纳入的颅盖畸形形成机制的文献，结合目前国内外研究状况进行综述。结论 进一步研究颅缝过早闭合及相关生长因子的作用，将有助于阐明颅盖畸形形成机制，并更好地指导临床治疗。     

颅盖畸形形成机制的研究进展

目的为深入了解颅盖畸形目前在国内外研究中的进展情况,探讨颅缝早闭过程中相关生长因子的作用,为今后的研究工作奠定基础。方法应用计算机检索PubMed数据库,检索英文相关文章,同时检索中国期刊全文数据库的相关中文文章,并查阅相关书籍。对资料进行初审,并查看文献后的引文。纳入与颅盖畸形形成机制有关的内容,排除不相关及重复文章。结果经对收集文章的整理,共纳入23篇文献。对纳入的颅盖畸形形成机制的文献,结合目前国内外研究状况进行综述。结论进一步研究颅缝过早闭合及相关生长因子的作用,将有助于阐明颅盖畸形形成机制,并更好地指导临床治疗。     

颅缝早闭畸形的遗传学研究进展

颅缝早闭症是一种常见的先天性颅颌面畸形,严重影响患儿发育,对该疾病遗传机制的研究和防治具有重要意义。通过颅骨发育、颅缝闭合的理论,现有细胞与动物研究模型,以及遗传学研究,在先天性颅缝早闭畸形病因分析中的现状和进展进行综述,并列出了近年来与颅骨发育、颅缝闭合相关的主要基因。     

碱性成纤维生长因子对颅缝细胞成骨分化的影响

目的 探讨碱性成纤维生长因子（FGF-2）对颅缝细胞成骨方向分化的影响.方法 ①获取新生SD大鼠颅骨矢状缝及冠状缝处颅缝细胞.②添加不同浓度FGF-2,观察颅缝细胞ALP染色、ALP活性及成骨标志物（osteocalcin,OC）表达量,了解不同浓度FGF-2对颅缝细胞向成骨分化的影响.结果①各浓度FGF-2作用于颅缝细胞后,ALP染色、活性均较对照组减弱（P ＜0.05）.其中10ng/ml FGF-2诱导的细胞ALP受到的抑制最弱.②各浓度FGF-2作用于颅缝细胞后,OC表达量均较对照组增加（P ＜0.05）.其中10ng/mlFGF-2诱导的细胞其OC表达量最高.结论 ①FGF-2抑制颅缝细胞早期成骨标志物ALP的表达,而增强晚期成骨标志物OC的表达.②较低浓度的FGF-2（10ng/ml）对ALP抑制作用最弱,对OC促进作用最强,最利于促进颅缝细胞向成骨方向分化.     

FGF-2与BMP-2在颅缝细胞成骨分化中的相互作用

目的探讨碱性成纤维生长因子2(FGF-2)与骨形成蛋白2(BMP-2)在颅缝细胞成骨分化中的相互作用及其机制。方法获取新生SD大鼠颅骨矢状缝及冠状缝处颅缝细胞,在培养体系中添加FGF-2,观察BMP-2表达情况。同时在培养体系中添加FGF-2及BMP-2,ALP染色、矿化染色、qPCR检测成骨标志物,观察颅缝细胞成骨分化情况。添加BMP-2抑制剂Noggin后,观察颅缝细胞成骨分化的转归。结果FGF-2可促进BMP-2在颅缝细胞中的表达,呈浓度依赖性及时间依赖性;两者同时作用颅缝细胞可促进其晚期成骨分化,抑制其早期成骨分化。Noggin阻断BMP-2信号通道后,FGF-2及FGF-2+BMP-2促进颅缝细胞晚期成骨分化作用均减弱。结论BMP-2是FGF-2调控颅缝细胞晚期成骨分化不可或缺的下游因子。     

颅缝早闭症与FGF信号通路

颅缝早闭系由于1条或多条颅缝早期融合而引发的各种头颅畸形,导致患儿容貌畸变,阻碍正常发育。其确切的病理机制仍然未知,但成纤维表皮生长因子(FGF)似乎在颅缝正常发育过程中起着非常重要的作用。本文总结了目前已报道的与遗传相关的颅缝早闭症及其致病基因,着重介绍与FGF因子相关的颅缝早闭症,以期为颅缝缺陷的遗传诊断和研究提供帮助。     

先天性颅缝早闭症的治疗

颅缝早闭症是指单一或多个颅缝过早闭合所引起的影响大脑发育和功能的严重先天性疾病。通过对１０例颅缝早闭症的临床表现进行分析，阐述了各种颅缝早闭造成的不同畸形头的特点，详细介绍了各种相应的手术方法，并对颅缝早闭症的病因、手术方法、手术年龄及并发症的处理等进行了讨论。     

先天性颅缝早闭症的治疗

颅缝早闭症是指单一或多个颅缝过早闭合所引起的影响大脑发育和功能的严重先天性疾病。通过对１０例颅缝早闭症的临床表现进行分析，阐述了各种颅缝早闭造成的不同畸形头的特点，详细介绍了各种相应的手术方法，并对颅缝早闭症的病因、手术方法、手术年龄及并发症的处理等进行了讨论。     

颅缝早闭症相关实验荧光定量PCR内参基因的选择研究

目的探讨用于颅缝早闭症相关实验的荧光定量PCR的最佳内参基因。方法应用与颅骨成骨、颅缝闭合相关的3组实验标本,分别为:Fgfr2cC342Y/+Crouzon综合征小鼠颅缝组织、颅缝早闭患者体外培养颅缝原代细胞和体外培养的小鼠Kusa 4b 10成骨细胞株。以常用的候选管家基因作为研究对象,利用geNorm软件对RT-qPCR结果进行比较分析,以筛选出在不同组织细胞中表达最为稳定的管家基因作为内参。结果Fgfr2cC342Y/+小鼠颅缝组织,Cyc1-Gapdh-Canx为最佳组合;颅缝早闭症患者体外培养颅缝原代细胞,18S rRNA和ATP5B为最佳组合;体外培养的小鼠Kusa 4b10成骨细胞株,18S rRNA和Canx为最佳组合。选择不同内参基因对目的基因RT-qPCR的结果影响显著。结论在设计RT-qPCR实验之前,应针对所选择的标本类型与种类进行管家基因稳定性分析,以增加结果的可信度。     

子宫内局部生物力学改变与胚胎兔颅缝早闭相关性的实验研究

目的研究兔子宫内作用于胚胎颅骨局部生物力在兔颅缝闭合过程中的调控作用。方法通过对妊娠25d大白兔宫内胚胎，硬脑膜外的颅骨矢状缝用5—0可吸收线缝合，改变其矢状缝局部生物作用力，建立子宫内胚胎颅骨局部生物力学改变的模型。采用胚胎外科技术、组织化学技术，研究局部生物动力学改变后，颅缝组织中的骨钙素（Osteocalcin，OCN）及骨桥蛋白（Osteopontin，OPN）的分泌情况。结果在胚胎兔出生后9d，其被缝合的矢状缝组织中OCN及OPN的含量明显增加。与对照组之间有明显差异（p〈0．05）。结论宫内局部生物力学改变，促进兔单条颅缝组织中OCN及OPN的分泌。     

影像学技术在颅缝早闭诊疗中的应用进展

颅缝早闭是一种较为常见的先天性颅面畸形,表现为一条或多条颅缝的过早闭合。尽管患儿的临床表现及病史可为该病的诊断提供一定的依据,但其确诊很大程度上还有赖于影像学的检查结果。影像学技术的发展,对颅缝早闭的诊断及评估有重要临床价值。本文就原发性颅缝早闭的影像学研究现状及进展进行综述。     

先天性颅缝早闭症的治疗

颅缝早闭症是指单一或多个颅缝过早闭合所引起的影响大脑发育和功能的严重先天性疾病。通过对10例颅缝早闭症的临床表现进行分析,阐述了各种颅缝早闭造成的不同畸形头的特点,详细介绍了各种相应的手术方法,并对颅缝早闭症的病因、手术方法、手术年龄及并发症的处理等进行了讨论。     

改良Poppen氏颅缝重建术治疗狭颅症13例麻醉处理

改良Ｐｏｐｐｅｎ氏颅缝重建术治疗狭颅症１３例麻醉处理刘华，陈新春狭颅症系颅缝早期闭合所致颅骨畸形并发脑发育受阻和慢性颅内压增高之疾病。现将我院采用Ｐｏｐｐｅｎ氏颅缝重建术治疗狭颅症１３例麻醉处理报告如下：临床资料全组１３例，男８例，女５例，年龄１０个...     

颅缝间充质干细胞在颅缝早闭症中的研究进展

颅缝间充质干细胞是一个异质性颅面干细胞群体, 具有自我更新和多向分化能力, 在颅骨生长发育、稳态维持、损伤修复等诸多生理过程中发挥着重要作用。以往对间充质干细胞或骨骼干细胞的研究主要集中在长骨上, 颅骨领域相关研究相对较少。该文对颅缝间充质干细胞的发现、提取与鉴定及其生物学特性进行了总结, 对颅缝间充质干细胞在颅缝早闭症发病机制及治疗中的最新研究进展进行了综述。     

生长因子与椎间盘再生

目的：追溯近阶段国内外有关生长因子与椎间盘修复研究的进展。方法：广泛渣阅近期有关生长因子与椎间盘修复的文献，综述生长因子在椎间盘突的表达，生长因子对椎间盘细胞的作用等特点，结果：多种生长因子在椎间盘生长发育和退变过程中表达，外源性生长因子能促进培养的椎间盘细胞分化增殖，合成蛋白多糖和胶原，运用腺病毒可将生长因子基因转染至椎间盘细胞。结论：生长因子在椎间盘的生长发育和退变过程中起调节作用，可望运用生长因子进行椎间盘退变治疗和修复重建。重庆