粉防己碱对糖尿病性勃起功能障碍大鼠勃起功能的影响

目的探讨粉防己碱(tetrandrine,Tet)对糖尿病性勃起功能障碍大鼠勃起功能的影响及机制。方法 24只糖尿病性勃起功能障碍(Erectile dysfunction,ED)大鼠随机分为Tet组(n=8)、罂粟碱组(n=8),另选取8只大鼠作为阴性对照组,Tet组和罂粟碱组分别在阴茎海绵体注射Tet和罂粟碱,阴性对照组注射等容量生理盐水,观察各组大鼠阴茎海绵体内压的改变以及环磷酸腺苷(cAMP)的变化,观察各组阴茎勃起次数和勃起率的改变。结果罂粟碱组和Tet组阴茎海绵体内压和cAMP含量明显高于阴性对照组(P<0.05),ED对照组、罂粟碱组和Tet组平均勃起次数和勃起率均明显低于阴性对照组(P<0.05或P<0.01)。结论 Tet行阴茎海绵体注射可有效松弛阴茎海绵体平滑肌,改善阴茎勃起功能,其机制可能与提高阴茎海绵体内cAMP含量有关。     

高脂血症大鼠阴茎海绵体组织eNOS/iNOS蛋白表达变化的实验研究

目的　探讨高脂血症对大鼠阴茎海绵体组织内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)和诱生型一氧化氮合酶 (iN OS)蛋白表达的影响。方法　 2 8只雄性SD大鼠随机分为实验组 (n =16 )和正常对照组 (n =12 )。实验组大鼠给予高胆固醇食料 ,正常对照组给予普通食料喂养 ,于实验开始后 6周末和 12周末 ,分别随机取各组 1/ 2大鼠观察其勃起功能 ,并采用免疫组化SP法检测阴茎海绵体组织中eNOS和iNOS蛋白质的表达情况。结果　 6周末 ,实验组和正常对照组相比eNOS和iNOS的表达及阴茎勃起次数差异均有显著性 (P <0 .0 1) ,而勃起率差异不明显 ;12周末 ,两组在eNOS和iNOS蛋白的表达及阴茎勃起次数均有显著差异 (P <0 .0 1) ;实验组eNOS和iNOS的表达及阴茎勃起次数 ,12周末均明显低于 6周末 ,两两比较差异均有显著性 (P <0 .0 1)。结论　高脂血症可以明显降低阴茎组织中eNOS以及iNOS蛋白质表达 ,这可能是高脂血症引起勃起功能障碍 (ED)的发病机制之一     

神经生长因子干预对大鼠糖尿病性勃起功能障碍的影响

目的:通过使用神经生长因子(NGF)干预糖尿病性勃起功能障碍(ED)大鼠,检测海绵体内压(ICP)和阴茎海绵体组织中含神经型一氧化氮合酶(nNOS)神经纤维的变化,以探讨NGF干预糖尿病性ED的作用机制.方法:将成年雄性SD大鼠分为5组:A组为正常对照组(6只),B组为糖尿病性ED无干预组(15只),C组为糖尿病性ED单用NGF干预组(14只),D组为糖尿病性ED单用胰岛素干预组(12只),E组为糖尿病性ED联用NGF、胰岛素干预组(13只)(胰岛素通过颈部皮下注射给药,NGF通过腹腔内注射给药).采用腹腔注射STZ法制作糖尿病模型,造模8周后从糖尿病大鼠中筛选出合并勃起功能障碍大鼠:B(n=8),C(n=8),D(n=6),E(n=6),经药物干预后8周所有大鼠测ICP,并取阴茎海绵体组织用免疫组化EnVision法观察nNOS神经纤维的变化.结果:与B组相比,C、D、E组ICP水平均显著升高(P＜0.05),其阴茎组织中含nNOS神经纤维水平也显著升高(P＜0.05).结论:给予外源性NGF可能有助于糖尿病性ED局部神经病变减轻和勃起功能改善,NGF在糖尿病性ED的发病中可能具有重要作用.     

血管活性肠多肽对老龄勃起功能障碍大鼠的作用及机制研究

目的 观察血管活性肠多肽（VIP）对老龄勃起功能障碍（ED）大鼠的作用及其机制。方法40只SPF级雄性SD大鼠饲养至18月龄构建老龄模型大鼠,采用阿扑吗啡实验筛选老龄ED大鼠,阿扑吗啡实验结果阳性的老龄勃起功能正常大鼠为正常组,实验结果阴性的老龄ED大鼠为ED组和干预组,每组7只。干预组大鼠使用VIP 25 ng/kg隔日腹腔注射,治疗28 d。检测阴茎海绵体内压（ICP）及平均动脉压（MAP）评估勃起功能;酶联免疫吸附法检测大鼠阴茎海绵体组织环磷酸腺苷（cAMP）、一氧化氮（NO）含量;组织免疫荧光技术（IF）测大鼠阴茎海绵体组织血管性血友病因子（vWF）表达水平;蛋白质印迹法检测海绵体蛋白激酶A (PKA)、内皮源性一氧化氮合酶（eNOS）、血管性血友病因子（vWF）及血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达水平。结果 正常组、ED组和干预组基础ICP分别为（20.41±5.92）mmHg、（21.76±5.37）mmHg和（18.54±3.97）mmHg(1mmHg=0.133 kPa),MAP分别为（123.52±14.74）mmHg,(118.83±10.97)mmHg和（114...     

阿魏酸钠对糖尿病性勃起功能障碍大鼠的干预作用

目的 探讨阿魏酸钠在糖尿病大鼠阴茎勃起功能障碍中的干预作用及其机制.方法 选择雄性SD大鼠通过腹腔内注射链脲佐菌素方法建立糖尿病大鼠模型44只,然后将成模大鼠分成糖尿病干预组22只和糖尿病对照组22只,并设正常对照组.其中糖尿病干预组每日灌胃法给予阿魏酸钠100 tag·kg-1·d-1干预.12周后观察大鼠阴茎勃起功能,并获取阴茎海绵体组织和血清中的超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT),一氧化氮合酶(NOS)与丙二醛(MDA)的水平变化和阴茎海绵体组织的病理学改变.结果 成功建立糖尿病大鼠模型.与糖尿病对照组相比,糖尿病干预组和正常对照组大鼠阴茎勃起功能更好,3组的阴茎勃起率分别为22%、66%和100%.SOD、CAT和NOS在糖尿病对照组中的活性均低于正常对照组和糖尿病干预组;NO在正常对照组和糖尿病干预组的含量[(112±28)nmol/ml、(137±25)nmol/ml]高于糖尿病对照组[(56±10)nmol/ml,均P<0.01];MDA在正常对照组和糖尿病干预组的含量低于糖尿病对照组(均P<0.01).光镜下,糖尿病对照组阴茎海绵体平滑肌数量减少,间质血管管壁增厚,管腔变窄.结论 阿魏酸钠可能通过调节自由基代谢、抗氧化损伤和促进NO生成增加的途径,对糖尿病性勃起功能障碍起到干预作用.     

高血压大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化

目的 探讨高血压大鼠阴茎海绵体平滑肌是否存在表型转化及对勃起功能的影响.方法 16周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)及其同系正常血压大鼠(WKY),测量尾动脉收缩压,颈部皮下注射阿朴吗啡后检测阴茎勃起功能,然后将大鼠分为高血压勃起功能障碍组(HBP&ED)、高血压组(HBP)和正常对照组(Control).免疫组化染色和彩色图文分析系统分析各组大鼠阴茎海绵体中平滑肌细胞碱性调宁蛋白(calponin 1)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达,实时荧光定量RT-PCR分析各组大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞calponin 1 mRNA和OPN mRNA的相对表达量.结果 在大鼠阴茎海绵体中calponin 1和calponin 1 mRNA表达情况:HBP&ED组低于HBP组(P=0.021,P=0.006)和control组(P=0.000,P=0.001),HBP组低于control组(P=0.000,P=0.015);OPN和OPN mRNA表达情况:HBP&ED组高于HBP组(P=0.000,P=0.000)及control组(P=0.000,P=0.000),HBP组高于control组(PP=0.013,p=0.000).结论 高血压大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞存在表型由收缩型向合成型转化,这种转化达到一定程度最终可能导致大鼠勃起功能障碍.     

Hhcy大鼠阴茎海绵体内cAMP,cGMP含量及研究

目的:探讨高同型半胱氨酸血症大鼠阴茎海绵体组织内cAMP,cGMP含量的变化并研究其对阴茎勃起功能影响。方法:取40只成年雄性大鼠,随机分成两组,分为正常对照组和Hhcy组。Hhcy组给予3%高蛋氨酸饲料喂养,正常组给予普通饲料喂养,饲养四周后后分别注射阿扑吗啡进行大鼠阴茎勃起功能实验,抽取血清检测Hhcy含量,麻醉后取阴茎海绵体测量cAMP,cGMP含量。结果:Hhcy组血清中同型半胱氨酸含量显著高于正常组,大鼠阴茎组织中cAMP,cGMP含量显著低于正常组。结论:高同型半胱氨酸血症大鼠阴茎海绵体中cAMP,cGMP含量降低。高同型半胱氨酸血症是阴茎勃起功能障碍的危险因素。     

5-羟色胺2A受体阻滞剂保护糖尿病大鼠阴茎勃起功能作用的研究

目的:探讨5-羟色胺2A(5-HT2A)受体阻滞剂(盐酸沙格雷酯)对糖尿病大鼠阴茎勃起功能的影响及其作用机制。方法:设立正常对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)、盐酸沙格雷酯治疗组(SH组)、西地那非治疗组(WG组)。SH组大鼠给予盐酸沙格雷酯100mg/(kg.d)灌胃,连续给药12周,WG组大鼠在进行阿朴吗啡(APO)诱导阴茎勃起实验前3d给予西地那非20mg/(kg.d)。在第0、4、8、12周进行APO试验;检测各组血清NO、5-HT、ET-1含量,计算NO/ET-1比值;免疫组化法检测阴茎海绵体内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达水平;光镜、透射电镜下观察各组大鼠阴茎组织病变情况。结果:药物干预第4、8、12周时,与DM组比较,SH组大鼠阴茎勃起率、勃起次数均有明显的增加;与WG组相比,SH组早期勃起率及勃起次数均低于WG组,中期上述指标与WG组接近,后期勃起率、勃起次数均高于WG组,但无统计学差异。与DM组相比,SH组大鼠阴茎组织eNOS蛋白表达水平上调,血清5-HT浓度下降,NO浓度上升,NO/ET-1比值上升,阴茎海绵体病理损伤明显减轻。结论:5-HT2A受体阻滞对糖尿病大鼠勃起功能有保护作用。5-HT及5-HT2A受体在糖尿病性ED的发生中具有重要作用。     

动脉性阴茎勃起功能障碍大鼠模型的建立及发生机制

目的：建立动脉性阴茎勃起功能障碍（ED）动物模型,并探讨其发生机制。方法：选取雄性Wistar大鼠30只,通过结扎大鼠双侧髂内动脉设立实验组(n=15),采用假手术设立对照组(n=15)。饲养4 周后,对2组大鼠行注射阿朴吗啡(APO)实验和电刺激海绵体神经 (ICP) 实验,评价其勃起功能;利用电镜观察2组大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞的超微结构;采用免疫组织化学方法检测2组大鼠阴茎组织中一氧化氮合成酶（NOS）的表达。结果：在APO实验中实验组大鼠的勃起次数明显少于对照组(P<0.01);大鼠打哈欠次数两组之间无变化（P>0.05）;在ICP实验中实验组ICP增幅明显低于对照组(P<0.01);电镜显示实验组大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞超微结构发生基底膜增厚、细胞膜平整、空泡增多、核固缩和染色质积聚改变;免疫组织化学结果显示实验组阴茎组织中NOS染色弱于对照组。结论：采用结扎雄性大鼠双侧髂内动脉方法建立ED 动物模型较为简便、可行且可靠;动脉性ED的发生与阴茎组织细胞超微结构改变和NOS低表达有关。     

大鼠阴茎组织5-HT_2受体表达及其在糖尿病ED中变化的研究

目的:观察5-羟色胺2型受体(5-HT2R)在正常及糖尿病ED大鼠阴茎组织的表达及变化情况;观察糖尿病大鼠阴茎勃起功能的变化情况及阴茎海绵体病理损伤情况。方法:设立正常对照组(NC)及糖尿病组(DM)。在糖尿病造模后第4、8、12周进行APO诱导阴茎勃起试验,记录阴茎勃起次数及勃起阳性率。将12周DM组大鼠分为未发生ED组(NED)和ED组(DED)。取阴茎组织,免疫组化法测定5-HT2R的表达情况,光镜、透射电镜下观察大鼠阴茎组织病理改变。ELISA法测定血清5-HT含量。结果:1大鼠阴茎组织中5-HT2R的阳性染色分布在阴茎血管和海绵窦的内皮及平滑肌、神经纤维中。相对于血清5-HT浓度的增高,DM组大鼠阴茎5-HT2R表达较NC组明显下调(P<0.01);DED组5-HT2R表达下调较NED组更为显著(P<0.05)。2与NC组相比,DM组大鼠阴茎勃起功能明显下降。光镜、透射电镜下观察DED组大鼠阴茎海绵体存在明显病理损伤。结论:5-HT2R主要在阴茎血管和海绵窦的内皮及平滑肌、神经纤维中表达;5-HT及其2型受体在糖尿病性ED的发生中具有一定作用;糖尿病造成阴茎组织不可逆性病理损伤,严重影响大鼠阴茎勃起功能。     

糖尿病大鼠阴茎海绵体组织中核因子κB表达的研究

目的:观察糖尿病雄性SD大鼠阴茎海绵体组织中核因子-κB(NF-κB)活性的变化以及分布,探讨糖尿病性勃起功能障碍(ED)发病机制.方法:将成年雄性SD大鼠40只分为3组:A组为正常对照组(10只),B组为糖尿病4周组(14只),C组为糖尿病12周组(16只),采用腹腔注射STZ法制作糖尿病模型.B组大鼠于4周后,A组、C组大鼠于12周后通过注射阿朴吗啡后评价勃起功能,并取阴茎海绵体组织免疫组化EnVision法分析NF-κB的分布与表达,同时采用电泳迁移率变动分析法(EMSA)进行NF-κB活性检测.结果:B组、C组大鼠勃起功能水平较A组显著降低(P＜0.05),其海绵体组织中NF-κB活性显著高于A组(P＜0.05),且NF-κB表达随病程延长呈现逐渐增强趋势;糖尿病性大鼠阴茎海绵体组织中NF-κB主要分布在内皮细胞中,平滑肌细胞和其他细胞中分布较少.结论:糖尿病大鼠阴茎海绵体组织中NF-κB活性及分布与正常相比有明显差异,且与糖尿病病变程度有密切关系,提示NF-κB在糖尿病性ED发病中可能起重要作用.     

维药伊木萨克片对大鼠性功能与阴茎组织中一氧化氮合酶活性的影响

目的:探讨维药伊木萨克片对雄性大鼠阴茎勃起功能的影响及其机制。方法:取具有正常性功能SD雄性大鼠20只,随机分为正常对照组(n=10)和伊木萨克组(n=10),用等量溶剂与伊木萨克片(250mg·kg-1.d-1)分别对2组大鼠连续干预6周后,进行阿朴吗啡(APO)阴茎勃起实验和交配实验,并检测阴茎海绵体窦压(ICP);用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测阴茎组织中的一氧化氮合酶(NOS)活性。结果:(1)与正常对照组比较,伊木萨克组阴茎勃起所需时间显著缩短(P<0.01),插入次数明显增加(P<0.01),且基础ICP值与电刺激诱导ICP值均显著升高(P<0.05);(2)NOS活性在伊木萨克组显著高于正常对照组(P<0.01)。结论:维药伊木萨克片能够显著提高正常大鼠的阴茎勃起功能,其机制与提高NOS活性有关。     

肿瘤坏死因子-α抑制剂己酮可可碱对糖尿病大鼠阴茎海绵体RhoA/Rho激酶信号通路的影响

目的：研究糖尿病大鼠阴茎海绵体组织中RhoA/Rho激酶信号通路改变以及肿瘤坏死因子（TNF）吨抑制剂己酮可可碱（PTX）对该信号通路和阴茎勃起功能的影响。方法：SD大鼠分为对照组、糖尿病组和糖尿病药物干预组;高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素注射诱导糖尿病;腹腔埋置微渗透泵持续慢性给药;在体记录阴茎海绵体窦内压（ICP）：ELISA检测血清TNF-α浓度;Western blot检测海绵体组织中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和神经型一氧化氮合酶（nNOS）以及RhoA/Rho激酶信号通路分子的蛋白表达水平。结果：与糖尿病组比,糖尿病药物干预组血清TNF-α浓度明显下降（P〈0.01）,阴茎海绵体组织中RhoA、ROCK1和p-MYPT1表达下调（P〈0.05）,eNOS和nNOS表达增加（P〈0.05）,阴茎ICP指数显著升高（P〈0.05）。结论：TNF-α促进阴茎海绵体组织RhoA/Rho激酶信号通路的激活与表达上调,参与糖尿病性勃起功能障碍的发病机制：PTX对糖尿病大鼠的勃起功能有保护作用。     

建立神经性勃起功能障碍大鼠模型的实验研究

目的 明确大鼠海绵体神经(CN)的解剖并且建立海绵体神经损伤性勃起功能障碍(ED)的大鼠模型.方法 在连续变焦解剖显微镜下了解CN的解剖结构并通过电刺激实验证实,然后将30只雄性SD大鼠分为假手术组、双侧海绵体神经夹伤组(双夹组)、双侧海绵体神经切断组(双切组).术后2周电刺激CN并测量阴茎海绵体内压与平均颈动脉压比值(ICP/MAP)并对阴茎海绵体组织行Masson染色,观察平滑肌纤维与胶原纤维的分布,证实造模是否成功.结果 大鼠CN位于背侧前列腺叶的后外侧,盆神经节的下方.术后2周电刺激CN,双夹组与双切组均丧失勃起功能,ICP/MAP变化无统计学差异,对照组大鼠勃起功能正常,ICP/MAP变化具有统计学差异(P<0.05),Masson染色显示双夹组与双切组平滑肌纤维减少,胶原纤维增多,与假手术组相比有统计学差异(P<0.05).结论 大鼠海绵体神经分布与人体有高度相似性,是ED研究的理想动物,海绵体神经损伤后电刺激CN并测定ICP/MAP是建立神经性ED的可靠方法.     

淫羊藿苷对动脉性ED模型大鼠阴茎海绵体压力和一氧化氮合酶亚型表达的影响

目的　建立动脉性勃起功能障碍大鼠模型 (arteriogenicerectiledysfunction ,A -ED) ,研究淫羊藿苷 (Icariin)对A -ED大鼠勃起功能和一氧化氮合酶 (NOS)三种亚型表达的影响。方法　 4 0只Wistar大鼠随机分为假手术组 (A组 )、A -ED组 (B组 )、A -ED低剂量淫羊藿苷治疗组 (C组 )和AED高剂量淫羊藿苷治疗组 (D组 )。结扎大鼠双侧髂内动脉建立A -ED动物模型后 ,C组和D组每天口饲不同剂量的淫羊藿苷 ( 5mg/kg ,10mg/k) ,A组和B组口饲等体积的生理盐水。 30d后 ,通过检测各组大鼠阴茎海绵体压力 (ICP)变化评估淫羊藿苷对大鼠勃起功能的效果 ,切取阴茎海绵体组织 ,通过逆转录 -PCR和Western印迹方法检测N0S亚型的表达变化。结果　建立A -ED模型 30d后 ,B组ICP较手术前显著降低 ,N0S三种亚型的表达水平也显著降低。经淫羊藿苷治疗后 ,C组和D组的ICP比B组明显升高 (P <0 .0 1) ,且D组较C组增高效果明显 ;C组和D组的eNOS表达水平较之B组有所增高 ,与ICP的变化有相同的趋势。C组的iNOS表达水平有一定程度的升高。治疗后nNOS表达水平没有明显增高。结论　经淫羊藿苷治疗后大鼠勃起功能显著改善 ,这种功能改善与eN0S的表达增加有相同的趋势 ,提示淫羊藿苷可能通过恢复eN0s的表达来改善A -ED模型的勃起功能。     

伊木萨克片对糖尿病性ED大鼠阴茎组织中VIP的影响

目的 研究维药伊木萨克片对糖尿病(DM)性阴茎勃起功能障碍(ED)大鼠阴茎海绵体组织中VIP蛋白表达水平的影响.方法 随机选取雄性SD大鼠70只,其中60只以链脲佐菌素诱导建立DM模型;DM动物模型造模成功者,再进行阿朴吗啡阴茎勃起实验,以筛选DM性ED模型.以未加处理因素的10只大鼠为正常对照组;发生ED者随机分为DM性ED组、伊木萨克片组、胰岛素组、伊木萨克片联合胰岛素(联用)组;未成DM者为STZ组.各组给药6周后.采用免疫组化SP法检测各组大鼠阴茎组织中VIP含量.结果 DM性ED组、DM组VIP蛋白表达水平显著低于正常对照组(P<0.05);伊木萨克片组、胰岛素组、联用组大鼠阴茎组织中VIP蛋白表达水平高于DM性ED组(P<0.05);伊木萨克片组、胰岛素组、联用组、STZ组大鼠阴茎组织中VIP阳性细胞数与正常对照组的差异无统计学意义(P>0.05).结论 维药伊木萨克片可提高DM性ED大鼠阴茎阴茎VIP蛋白表达水平,从而改善其勃起功能.     

糖尿病勃起功能障碍大鼠血清睾酮的变化及意义

目的:探讨睾酮在糖尿病大鼠勃起功能障碍(ED)发生中的意义。方法:3月龄Wistar雄性大鼠18只(SPF级),随机分为正常对照和糖尿病组,每组9只,采用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型,3月后检测大鼠阴茎海绵体内压(ICP)和平均动脉压(MAP)以评价勃起功能,然后分别行ELISA法检测血清睾酮水平和阴茎海绵体组织中cGMP浓度的变化,Masson法检测阴茎海绵体平滑肌密度的变化。结果:糖尿病组大鼠海绵体内压为(58±11) mmHg,低于正常对照组(115±13) mmHg,差异有统计学意义(P<0. 05),同时糖尿病组大鼠的血清睾酮水平[(17. 45±2. 54) pmol/mL]较正常组[(338. 46±63. 80) pmol/mL]明显下降(P<0. 05);且我们还发现糖尿病组大鼠阴茎海绵体平滑肌密度和阴茎海绵体组织中cGMP浓度均明显下降,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论:糖尿病大鼠血清睾酮水平明显下降,可能通过降低阴茎海绵体平滑肌的密度和大鼠阴茎海绵体组织中cGMP含量,从而在糖尿病ED的发生过程中发挥一定的作用。     

佤药娘母良药酒通过抑制凋亡对勃起功能障碍大鼠的机制研究

目的 研究佤药娘母良药酒对勃起功能障碍(ED)大鼠的治疗作用，及对凋亡信号通路的影响。方法 将60只SD大鼠随机平均分为假手术、模型、白酒、西地那非、娘母良低剂量、娘母良高剂量6组。通过双侧髂内动脉结扎法建立ED模型。各组给药均持续28 d，给药结束后进行APO实验，测定各组大鼠睾丸和附睾的质量和脏器指数、精子浓度以及精子活率。对各组大鼠阴茎海绵体与睾丸组织进行HE染色。采用生化试剂盒和ELISA检测各组大鼠阴茎海绵体组织中NO和cGMP含量，采用Western blot检测凋亡信号通路相关蛋白的表达。结果 与模型组相比，西地那非与娘母良干预后ED大鼠勃起次数、睾丸与附睾的质量和指数、精子数量及存活率均显著升高，阴茎海绵体与睾丸组织病理形态明显改善，阴茎海绵体组织NO以及cGMP含量升高，Bax/Bcl-2，Cleaved-caspase3和Cleaved-caspase9蛋白表达下降。结论 娘母良药酒可以促进NO与cGMP的产生并抑制阴茎海绵体组织细胞凋亡进而改善ED大鼠勃起功能。     

胰岛素样生长因子1基因治疗提高老龄大鼠eNOS mRNA和蛋白的表达

目的 探讨阴茎海绵体内注射胰岛素样生长因子1( IGF-1)基因能否提高老年性大鼠阴茎勃起功能及其对表皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响.方法 实验分为3组,老年组:24月龄SD雄性大鼠20只,按随机数字表法随机又分为2组:PBS对照组和100μg IGF-1质粒注射组,每组10只;青年对照组:4月龄SD雄性大鼠10只.注射后4周行电刺激检测大鼠阴茎海绵体内压(ICP)和平均动脉压(MAP),分析比较IGF-1基因治疗的效果;RT-PCR和Western印迹检测阴茎海绵体组织中eNOS基因mRNA和蛋白的表达.结果 IGF-1基因治疗后4周,电刺激发现老年PBS对照组ICP/MAP和总ICP明显均低于青年对照组(均P＜0.05);IGF-1质粒注射组ICP/MAP和总ICP均明显高于PBS对照组(均P＜0.05),和青年对照组相仿.IGF-1质粒注射组eNOS mRNA和蛋白表达均明显高于PBS对照组(0.62±0.16比0.25±0.08,0.71±0.19比0.27 ±0.09,均P＜0.05).结论 IGF-1基因治疗能够改善老龄大鼠的勃起功能,同时提高eNOS的含量.     

BKca下调RhoA/ROCK信号通路改善糖尿病大鼠阴茎勃起功能

目的：观察大电导钙激活钾通道（big conductance Ca2+-activated K+ channel,BKca）对糖尿病勃起功能障碍（diabetes mellitus-induced erectile dysfunction,DMED）大鼠阴茎海绵体平滑肌RhoA/ROCK信号通路的影响。方法：实验大鼠分为空白对照组8只,DMED组8只,NS1619组（DMED治疗组）7只,NS1619组大鼠采用特异性BKca激活剂（NS1619）阴茎海绵体注入2周。观察各组勃起行为,并电刺激检测阴茎海绵体内压（intracavernous pressure,ICP）/平均动脉压（mean arterial pressure,MAP）,取各组阴茎海绵体平滑肌检测肌张力,采用Western blot和定量PCR（real-time PCR）方法检测RhoA、ROCK1、ROCK2表达,反应RhoA/ROCK信号通路差异,同时检测MYPT-1表达反应肌球蛋白轻链磷酸酶（myosin light chain phosphatase,MLCP）磷酸化程度。结果：成功构建DMED大鼠模型,NS1619组大鼠与DMED组大鼠比较,勃起次数和ICP/MAP明显改善（P=0.025、0.024）,阴茎海绵体平滑肌舒缩顺应性提高（P=0.031、0.024）并且RhoA、ROCK2以及肌球蛋白磷酸酶靶向结合亚基（myosin phosphatase target subunit,MYPT）-1蛋白和mRNA表达水平下调（P=0.029、0.003、0.002）,但仍未达到正常对照组大鼠水平（P=0.018、0.040、0.003）,ROCK1表达无明显差异（P=0.533）。结论：DMED大鼠因RhoA/ROCK信号通路上调和MLCP磷酸化增强导致阴茎海绵体平滑肌舒缩顺应性降低以致勃起功能障碍发生,激活BKca可以通过下调RhoA/ROCK信号通路和抑制MLCP磷酸化,改善勃起功能。