干扰素-a对CCl4诱导的大鼠肝纤维化治疗作用

目的:观察干扰素-a对CCl4诱导的SD大鼠肝纤维化治疗作用,并探讨其机制.方法:SD雄性大鼠39只,随机分为正常组(n=10),每只大鼠给予花生油0.003 mL/g皮下注射,共10周.模型组(n=15),每只大鼠给予40?l4(CCl4:花生油=2:3)0.003 mL/g皮下注射,每周2次,共10周.干扰素-d治疗组(n=14).每只大鼠给予40?l4(CCl4:花生油=2:3)0.003 mL/g皮下注射,每周2次,共10周.于第7周皮下注射干扰素a-2b每日10万单位/只,至第10周.于第10周末处死所有大鼠.留取肝组织行HE和Masson染色观察肝脏组织的病理变化及进行肝纤维化分期、半定量评分,采用免疫组织化学检测肝组织中I型胶原、a平滑肌激动蛋白(a-smooth muscle actin,a-SMA)、转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)的表达.结果:CCl4诱导的SD大鼠肝纤维化的肝脏病理检查HE染色示,纤维化分期模型组明显高于正常组(P<0.01),干扰素-a治疗组明显低于模型组(P<0.05);Masson染色纤维半定量评分,模型组明显高于正常组(P<0.01),干扰素-a治疗组明显低于模型组(P<0.05).大鼠肝免疫组织化学染色,I型胶原免疫组化半定量评分模型组明显高于正常组(P<0.01),干扰素-a治疗组明显低于模型组(P<0.05);d-SMA免疫组化半定量评分模型组明显高于正常组(P<0.01),干扰素-a治疗组明显低于模型组(P<0.05);TGF-β1免疫组化表达,模型组明显高于正常组(P<0.01),干扰素-a治疗组明显低于模型组(P<0.05).结论:干扰素a-2b可降低CCl4诱导的SD大鼠肝纤维化,其机制可能与抑制肝星状细胞活化,降低TGF-β1表达有关.     

丹参滴丸对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的影响及其作用机制

目的 观察丹参滴丸对CCl₄致大鼠肝纤维化的保护作用,并探讨其作用机制。方法 除对照组外,其余各组大鼠用CCl₄复合因素法诱导肝纤维化大鼠模型,丹参滴丸各组同时ig给予丹参滴丸700、350、175 mg/kg,阳性对照组给予扶正化瘀胶囊1 500 mg/kg,每天给药1次,连续给药7周,正常大鼠给予蒸馏水作为对照组。测定各组大鼠血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）的活性及总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、IV型胶原的水平;测定肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）和羟脯氨酸（Hyp）的量;HE和Masson染色观察肝组织病理形态学改变;免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果 丹参滴丸能明显抑制肝纤维化大鼠血清中ALT、AST、NAG活性的升高,降低IV型胶原的量,增加TP和ALB的量;降低肝组织中Hyp和MDA的量,提高SOD的活性,抑制胶原纤维的增加,亦能降低α-SMA的表达。结论 丹参滴丸有明显的抗肝纤维化作用,其作用机制与其抗脂质过氧化、抑制胶原纤维的增加及降低α-SMA的表达等密切相关。     

复方肝毒清影响二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化的机制研究

目的探讨复方肝毒清的抗肝纤维化机制。方法以二甲基亚硝胺(DMN)制备大鼠肝纤维化模型,分别以去铁铵腹腔注射及高、低剂量复方肝毒清灌胃给药。观察去铁铵和复方肝毒清对大鼠肝功能、血清铁及肝组织病理学和转化生长因子-β1(TGF-β1)m RNA表达的影响。结果去铁铵与高、低剂量中药复方均能明显降低血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平及肝组织TGF-β1m RNA表达,与模型组比较,差异有统计学意义(均P0.01)。在模型组,伴随着肝星状细胞(HSC)大量活化,大鼠铁负载显著增加;铁沿纤维间隔分布,而且铁主要沉积于库普弗细胞和HSC。去铁铵及复方肝毒清能使肝组织铁负载明显减轻,胶原纤维沉积和肝细胞变性坏死明显改善。结论复方肝毒清的抗肝纤维化机制与其调节体内铁的代谢和转运及进一步抑制HSC活化有关。     

干扰素-α对CCl4诱导的大鼠肝纤维化治疗作用

目的：观察干扰素-α对CCl4诱导的SD大鼠肝纤维化治疗作用,并探讨其机制。方法：SD雄性大鼠39只,随机分为正常组（n=10）,每只大鼠给予花生油0.003 mL/g皮下注射,共10周。模型组（n=15）,每只大鼠给予40%CCl4（CCl4∶花生油=2∶3）0.003 mL/g皮下注射,每周2次,共10周。干扰素-α治疗组（n=14）。每只大鼠给予40%CCl4（CCl4∶花生油=2∶3）0.003 mL/g皮下注射,每周2次,共10周。于第7周皮下注射干扰素α-2b每日10万单位/只,至第10周。于第10周末处死所有大鼠,留取肝组织行HE和Masson染色观察肝脏组织的病理变化及进行肝纤维化分期、半定量评分,采用免疫组织化学检测肝组织中Ⅰ型胶原、α平滑肌激动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、转化生长因子β1（transforming growth factor beta1,TGF-β1）的表达。结果：CCl4诱导的SD大鼠肝纤维化的肝脏病理检查HE染色示,纤维化分期模型组明显高于正常组（P〈0.01）,干扰素-α治疗组明显低于模型组（P〈0.05）;Masson染色纤维半定量评分,模型组明显高于正常组（P〈0.01）,干扰素-α治疗组明显低于模型组（P〈0.05）。大鼠肝免疫组织化学染色,I型胶原免疫组化半定量评分模型组明显高于正常组（P〈0.01）,干扰素-α治疗组明显低于模型组（P〈0.05）;α-SMA免疫组化半定量评分模型组明显高于正常组（P〈0.01）,干扰素-α治疗组明显低于模型组（P〈0.05）;TGF-β1免疫组化表达,模型组明显高于正常组（P〈0.01）,干扰素-α治疗组明显低于模型组（P〈0.05）。结论：干扰素α-2b可降低CCl4诱导的SD大鼠肝纤维化,其机制可能与抑制肝星状细胞活化,降低TGF-β1表达有关。     

解毒软肝汤对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的作用

目的：研究解毒软肝汤对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的预防与治疗作用。并探讨其作用机理，方法：以CCl4诱导大鼠肝纤维化模型，造模前2周及造模结束后分别给予相应药物灌胃，各持续10周，实验结束后测定肝组织羟脯氨酸（Hyp)，血清超氧化物歧化酶（SOD），丙二醛（MDA0，肿瘤坏死因子α1（TNF－α），转化生长因子β1（TGF－β1），光镜观察肝组织病理形态变化。结果：解毒软肝汤预防和治疗组及秋水仙碱组Hyp,MDA,TNF-α，TGF－β1显著降低（P＜0．01），SOD显著升高（P＜0．01），胶原沉积明显减轻（P＜0．01），且解毒软肝汤组疗效优于秋水仙碱组。结论：解毒软肝汤具有确切的抗肝纤维化的作用。效果优于秋水仙碱，副作用较秋水仙碱小，对机体的损害较轻，具有较大的临床应用价值，其作用机理可能与抗脂质过氧化和抑制肝是星状细胞（HSC）活化有关。     

肝康合剂实验性治疗大鼠肝纤维化的分子机制研究

目的:探讨肝康合剂对实验性免疫诱导型肝纤维化大鼠的治疗作用及机制。方法:建立雌性Wistar大鼠免疫损伤性肝纤维化大鼠模型,将肝康合剂作为抗肝纤维化药物,通过光镜观察肝脏HE、VanGieson(VG)胶原染色,原位杂交技术及免疫组化染色等方法,观察大鼠使用肝康合剂后肝脏组织中TIMP-1、TIMP-2的表达。结果:免疫诱导肝纤维化大鼠在造模结束后肝组织学改变呈进行性加重,以造模结束后3月为著,TIMP-1、TIMP-2mRNA及蛋白呈强阳性表达,电镜见模型组有较多激活的HSC及大量胶原纤维沉积在肝窦周间隙及肝细胞间,经肝康合剂治疗后的大鼠与模型组大鼠相比肝组织结构明显好转,纤维组织明显减少,未见到激活的HSC,TIMP-1、TIMP-2mRNA及蛋白表达与模型组相比均明显降低(P<0.05),并且其效果为预防组及治疗组效果均明显优于秋水仙碱组。结论:肝康合剂可以逆转肝纤维化,抗肝纤维化机制可为:1抑制肝星状细胞活化,减少ECM的生成及TIMP分泌;2直接抑制TIMP-1、TIMP-2mRNA和蛋白的表达;二者共同作用使得TIMP分泌减少,从而降低对MMPs的抑制,有利于MMPs对ECM的降解。     

补肾柔肝方对肝纤维化大鼠肝组织纤维化的影响及机制研究

目的:观察补肾柔肝方对肝纤维化大鼠肝组织中TβRⅠ、TβRⅡ及α-SMA的mRNA和蛋白表达的影响,探讨补肾柔肝方抗肝纤维化的作用机制。方法:Wistar大鼠53只,随机分为4组,空白对照组、模型组、秋水仙碱组、补肾柔肝方组。除空白对照组外,其余均造模,造模组首次于背部皮下注射纯CCl45 ml/kg,3 d后皮下注射40%(V/V)CCl4花生油3 ml/kg,每周2次,造膜8周制备肝纤维化模型。造模后秋水仙碱组用秋水仙碱水溶液灌胃(5 ml·kg-1·d-1),补肾柔肝方组给予补肾柔肝方流浸膏灌胃(5 ml·kg-1·d-1),连续8周。取各组大鼠肝组织,分别采用PT-PCR法和Western blot法检测肝组织TβRⅠ、TβRⅡ、α-SMA mRNA表达和蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠的TβRⅠ、TβRⅡ、α-SMA蛋白表达升高;TβRⅠ、TβRⅡmRNA、α-SMA mRNA表达明显升高(P0.01);与模型组大鼠相比,秋水仙碱组及补肾柔肝方组TβRⅠa、TβRⅡ、α-SMA蛋白表达水平有所降低;TβRⅠ、TβRⅡmRNA、α-SMAmRNA表达水平明显降低(P0.05)。结论:补肾柔肝方能够降低大鼠肝脏内TβRⅠ、TβRⅡ、α-SMA的mRNA和蛋白表达水平,减轻大鼠肝脏的纤维化程度。     

异种动物血清诱导的大鼠肝纤维化模型及其机制

研究建立免疫性肝纤维化模型，并探讨该模型形成过程中的形态变化特点及模型形成的始动机制。Ｗｉｓｔａｒ大鼠腹腔注射猪血清诱导免疫性肝纤维化模型，以光镜和电镜观察肝纤维化不同阶段的形态变化，并计数嗜酸性粒细胞（Ｅｏｓ）和肥大细胞，以免疫荧光法检测肝内ＩｇＧ和补体Ｇ３。结果：①猪血清洲射８周后均形成肝纤维化；②肝纤维化形成过程中除肝星状细胞（ＨＳＣ，原称Iｔｏ细胞）增多外，尚发现原始间叶细胞（ＰＭＣ）增多     

异种动物血清诱导的大鼠肝纤维化模型及其机制

研究建立免疫性肝纤维化模型，并探讨该模型形成过程中的形态变化特点及模型形成的始动机制。Wistar大鼠腹腔注射猪血清诱导免疫性肝纤维化模型，以光镜和电镜观察肝纤维化不同阶段的形态变化，并计数嗜酸性粒细胞（Eos）和肥大细胞，以免疫荧光法检测肝内IgG和补体C3。结果：①猪血清注射8周后均形成肝纤维化；②肝纤维化形成过程中除肝星状细胞（HSC，原称Ito细胞）增多外，尚发现原始间叶细胞（PMC）增多、活化；③实验早期汇管区及间隔内Eos和肥大细胞增多，IgG和C3阳性，停止注射后逐渐减弱。结论：本模型用于肝纤维化过程的研究较为理想，其发生可能与异种血清引起的Ⅰ型变态反应中迟发相反应有关；除HSC外，原始间叶细胞也是纤维生成细胞的重要来源。     

干扰素-α对CCl_4诱导的大鼠肝纤维化疗效研究

目的：观察干扰素-α（interferonα,IFN-α）对四氯化碳（CCl4）诱导的大鼠肝纤维化的治疗效果,并探讨其可能的机制。方法：45只Wistar大鼠随机分为正常组（n=15）、模型组（n=15）、IFN-α治疗组（n=15）。正常组大鼠予以橄榄油2 mL/kg腹腔注射,每周注射2次,共8周;模型组及IFN-α治疗组大鼠予以50%CCl4 2 mL/kg腹腔注射造模,每周注射2次,共8周;IFN-α治疗组于第9周予以IFN-α每日10万U/只,皮下注射,共治疗3周。11周末处死所有大鼠。取肝组织进行炎症活动度半定量评分、纤维化半定量评分,检测羟脯氨酸含量,Ⅰ型和Ⅲ型胶原、转化生长因子-β1（transforming growth factorβ1,TGF-β1）、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）、α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMPs）及组织金属蛋白酶抑制因子（tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP-1）mRNA表达量,以及MMP-9和TIMP-1蛋白表达量。结果：与模型组比较,IFN-α治疗组肝组织炎症活动度半定量评分、纤维化半定量评分显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;羟脯氨酸含量及Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA表达量显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;TGF-β1,CTGF,α-SMA,TIMP-1 mRNA表达量及TIMP-1蛋白表达量显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）,MMP-9蛋白及mRNA表达量差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：IFN-α可明显减轻CCl4诱导的大鼠肝纤维化及肝脏炎症反应,其作用机制可能为下调促肝纤维化因子TGF-β1和CTGF的表达,抑制肝星状细胞的活化,减少细胞外基质的合成;抑制肝纤维化降解因子TIMP-1的表达,调节细胞外基质的降解。     

干扰素-α对CCl4诱导的大鼠肝纤维化疗效研究

目的:观察干扰素-α (interferon α,IFN-α)对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的治疗效果,并探讨其可能的机制.方法:45只Wistar大鼠随机分为正常组(n=15)、模型组(n=15)、IFN-α治疗组(n=15).正常组大鼠予以橄榄油2 mL/kg腹腔注射,每周注射2次,共8周;模型组及IFN...     

四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型改良的研究

目的构建肝纤维化大鼠模型,并对经典四氯化碳(CCl4)复制模型方法进行适当改进。方法取Sprague-Dawley(SD)大鼠40只,雌雄各半,按随机数字表法分为A组10只、B组14只和C组16只。B组给予大鼠腹腔注射40%CCl4花生油溶液2 mL.kg-1,2次.周-1,同时给予普通全价饲料喂养(改良方法);A组为正常对照组,给予等量花生油腹腔注射,2次.周-1,同时给予普通全价饲料喂养;C组给予大鼠腹腔注射40%CCl4花生油溶液5 mL.kg-1,2次.周-1,同时给予添加10%猪油及2%胆固醇的饲料喂养(经典方法)。实验第8周末处死各组剩余大鼠:采用酶联免疫吸附法检测血清肝功能(ALT、AST、ALB、TP、A/G)水平;HE及Masson染色观察大鼠肝组织病理学变化。结果实验第8周B、C组均可见明显肝功能损害表现。B组可见部分标本肝脏假小叶形成,达到早期肝硬化,肝细胞少量脂肪变性,死亡率28.6%。C组均已形成明显肝硬化,弥漫性肝细胞脂肪变性,死亡率43.7%。结论低剂量CCl4诱导并给予普通饲料喂养可成功建立大鼠肝纤维化模型,并明显降低大鼠死亡率,提高了模型质量及实验效率。     

黄芪注射液对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的防治

目的:探讨黄芪注射液对大鼠肝纤维化的抑制作用.方法:40?l4和5%乙醇制备大鼠肝纤维化模型,黄芪注射液组给予黄芪注射液(800mg/kg·d)腹腔注射,模型组给予生理盐水腹腔注射;七周后测定血清透明质酸酶(HA)、层粘蛋白(LN)含量,肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)含量,免疫组化观察肝组织LN的表达,HE、VG染色观察肝组织病理变化.结果:与模型组比较,黄芪注射液组血清HA、LN明显降低(P＜0.05);肝组织MDA明显减少(P＜0.01),而SOD活性明显升高(P＜0.01);肝纤维化程度明显减轻(P＜0.01),肝组织LN表达明显减少.结论:黄芪注射液可减缓肝纤维化的发生,其机制与其抗氧化作用及减少LN的产生有关.     

CCL_4诱导大鼠肝纤维化过程中IL-18的表达及临床意义

目的检测IL-18在CCL4诱导大鼠肝纤维化形成过程中表达水平的变化,探讨IL-18是否可以作为肝硬化早期的预警信号或重要的血清学指标,为临床诊断和治疗提供理论依据。方法将48只雄性SD大鼠随机分为试验组（n=24）和正常对照组（n=24）。试验组用40%的CCL4油溶液皮下注射（0.3ml/100g）,以10%的酒精为唯一饮用水;正常对照组用等剂量蒸馏水皮下注射,普水做饮用水。在给药（蒸馏水）前（即0周）及给药（蒸馏水）后2、4、6、8周将大鼠断尾采血后离心取血清用ELISA法检测IL-18的水平。结果试验组与正常对照组相比差异明显（P〈0.05）,有统计学意义;试验组IL-18在4周、6周与0周、2周相比（P〈0.05）有统计学意义;正常对照组给蒸馏水前后IL-18的差异不显著（P〉0.05）,没有统计学意义。结论 IL-18对肝纤维化有预测价值。     

银杏叶提取物抗大鼠肝纤维化作用及机制的研究

目的 观察银杏叶提取物对肝纤维化的作用并进行初步的机制探讨.方法 以CCL4制造经典的大鼠肝纤维化模型,银杏叶提取物以0.3 mg·kg-1、0.6 mg·kg-1、0.9 mg·kg-1剂量给大鼠灌胃30 d,测定血清谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST)及血清透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)及Ⅲ型前胶原(PCⅢ),并测定肝组织中丙二醛(MDA)的含量;用不同浓度(1 mg·L-1,10 mg·L-1,100 mg·L-1,500 mg·L-1)的银杏叶提取物干预肝星状细胞(HSC),MTT法测存活细胞量,以流式细胞仪测细胞周期时相.结果 银杏叶提取物可降低血清中ALT、AST及HA、LN、PCⅢ含量,同时降低肝组织中MDA含量;MTT法结果表明银杏叶提取物可抑制肝细胞增殖,流式细胞仪检测结果表明银杏叶提取物能阻滞细胞进入S期,停滞于G0/G1期.结论 银杏叶提取物具有抗实验性肝纤维化的作用,机制可能是通过抑制HSC的增殖而发挥的.     

一贯煎对CCl_4诱导的肝纤维化大鼠肝组织胶原代谢的影响

目的：探讨一贯煎对四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）诱导的肝纤维化大鼠肝脏胶原代谢的影响。方法：腹腔注射CCl49周制备大鼠肝纤维化模型,于造模第3周、第6周末各处死6只大鼠作动态观察,自第7周起将模型大鼠随机分为模型对照组和干预组。干预组于继续造模的同时给予一贯煎灌胃3周,正常组与模型对照组大鼠给予同体积蒸馏水灌胃。第9周末处死全部大鼠,采集肝组织标本,检测肝组织组织金属蛋白酶抑制剂1（tissue inhibitor ofmetalloproteinase-1,TI MP-1）、-2,基质金属蛋白酶13（matrix metalloproteinase-13,MMP-13）、-14,α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）,Ⅰ型胶原（collagen typeⅠ,ColⅠ）等的蛋白表达以及MMP-2、-9的活性。结果：与正常大鼠比较,造模第3、6和9周时肝纤维化大鼠肝组织胶原纤维增生程度增加,肝组织α-SMA、ColⅠ、TI MP-1、TI MP-2、MMP-13、MMP-14蛋白表达和MMP-2、MMP-9活性逐渐升高（P〈0.05或P〈0.01）;与9周模型组比较,一贯煎组大鼠胶原纤维增生程度显著减轻（P〈0.05）,肝组织α-SMA、ColⅠ、TI MP-1、TI MP-2、MMP-13和MMP-14蛋白表达及MMP-2、MMP-9活性显著降低（P〈0.01）。结论：一贯煎可以抑制肝星状细胞活化,抑制胶原的合成,促进过度增生的胶原纤维的降解,从而抑制CCl4诱导大鼠肝硬化的形成。     

一贯煎对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织胶原代谢的影响

目的:探讨一贯煎对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝脏胶原代谢的影响.方法:腹腔注射CCl4 9周制备大鼠肝纤维化模型,于造模第3周、第6周末各处死6只大鼠作动态观察,自第7周起将模型大鼠随机分为模型对照组和干预组.干预组于继续造模的同时给予一贯煎灌胃3周,正常组与模型对照组大鼠给予同体积蒸馏水灌胃.第9周末处死全部大鼠,采集肝组织标本,检测肝组织组织金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhmitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)、-2,基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)、-14,α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA),I型胶原(collagen type I,Col I)等的蛋白表达以及MMP-2、-9的活性.结果:与正常大鼠比较,造模第3、6和9周时肝纤维化大鼠肝组织胶原纤维增生程度增加,肝组织α-SMA、ColI、TIMP-1、TIMP-2、MMP-13、MMP-14蛋白表达和MMP-2、MMP-9活性逐渐升高(P<0.05或P<0.01);与9周模型组比较,一贯煎组大鼠胶原纤维增生程度显著减轻(P<0.05),肝组织α-SMA、Col I、TIMP-1、TIMP-2、MMP-13和MMP-14蛋白表达及MMP-2、MMP-9活性显著降低(P<0.01).结论:一贯煎可以抑制肝星状细胞活化,抑制胶原的合成,促进过度增生的胶原纤维的降解,从而抑制CCl4诱导大鼠肝硬化的形成.     

褪黑素保护大鼠肝纤维化的机制初步研究

目的研究褪黑素保护大鼠肝纤维化的机制。方法用四氯化碳(CCl4)制造大鼠肝纤维化模型,同时予10mg/(kg.d)褪黑素腹腔注射;在造模的第3月末处死大鼠,用α-SMA单抗标记活化的肝脏星状细胞(HSC),并计算其数量,同时进行肝脏纤维化评分。结果褪黑素可以显著降低CCl4诱导大鼠肝脏纤维化评分,减少活化的HSC数量。结论褪黑素是通过抑制HSC的活化达到保护CCl4诱导的大鼠肝纤维化作用。     

氧化苦参碱减轻大鼠肝纤维化的机制研究

目的探讨氧化苦参碱（oxymatrine,OM）减轻四氯化碳诱导肝纤维化（hepatic fibrosis,HF）的机制。方法建立四氯化碳诱导的大鼠HF模型,制备氧化苦参碱脂质体（Oxymatrine liposomes,OM-liposome）、精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arginine-Glycin-Aspartic acid,RGD）三肽序列偶联的OM及异硫氰酸荧光素（fluorescent isothiocyanate,FITC）标记的OM-liposome和RGD-OM-liposome。分离HF大鼠的肝脏星状细胞（hepatic stellate cells,HSCs）并体外培养：①将OM-liposome、RGD-OM-liposome和RGD偶联的空白脂质体（RGD-liposome）作用于HSCs,利用透射电镜检测HSCs的细胞亚显微结构（凋亡小体）变化,利用流式细胞技术检测HSCs的细胞周期,利用台盼蓝染色检测HSCs的细胞活性。②将FITC-OM-liposome和FITC-RGD-OM-liposome作用于HSCs,利用荧光显微镜技术比较两种剂型OM在HSCs中的分布。结果①与RGD-liposome比较,OM-liposome可促进HSCs凋亡小体形成,增加HSCs凋亡,降低HSCs的细胞活性;与OM-liposome比较,RGD-OM-liposome可进一步增加HSCs内凋亡小体,促进HSCs凋亡,降低HSCs活性。②RGD可促进OM-liposome在HSCs内的分布。结论 OM-liposome可在体外诱导HSCs凋亡,RGD可促进OM-liposome在HSCs的分布,进一步促进HSCs的凋亡。诱导HSCs凋亡可能是OM减轻肝纤维化的重要机制。     

四氯化碳和硫代乙酰胺诱导大鼠肝纤维化的对比研究

目的：采用四氯化碳（CCL4）和硫代乙酰胺（thioacetamide,TAA）两种试剂分别制备大鼠肝纤维化模型,探讨两种方法的优缺点及适用范围.方法：将60只SD大鼠随机分为4组,用CCL4和TAA制备肝纤维化模型并分别设立对照组.观察大鼠一般情况并于第28,56日称体质量,测定血清谷丙转氨酶（ALT）,谷草转氨酶（AST）以及透明质酸（HA）和IV型胶原（CIV）、肝匀浆超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）,取肝组织进行HE和Masson染色,分别观察肝组织的损伤程度和胶原增生的情况.结果：第28日,两模型组的各项指标与其对照组比较均有显著差异,而模型组之间无显著差异;第56日,CCL4组各项指标有明显好转,部分指标与对照组无差异,而TAA组的各项指标进一步恶化,部分指标与CCL4组对比有显著差异.结论：CCL4所致的肝纤维化模型更适用于肝纤维化自发逆转机制以及相关治疗策略的研究.TAA所致的肝纤维化模型适用于肝纤维化的机制研究、治疗药物的筛选和肝纤维化血清学标记物的可靠性评价等.