IL-1β诱导甲状腺细胞UGRP1表达及其与Fas/FasL介导凋亡的相关性

目的 探讨白细胞介素-1β(IL-1β)诱导甲状腺细胞子宫球蛋白相关蛋白1(UGRP1)的表达及其与Fas/Fas L介导细胞凋亡的相关性。方法 设立对照组、IL-1β组、IL-1β+抗Fas L抗体组,体外培养大鼠甲状腺细胞(FRTL-5细胞),采用Real-time PCR法检测各组细胞UGRP1及Fas mRNA表达水平;采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果与对照组比较,IL-1β组、IL-1β+抗Fas L抗体组UGRP1及Fas mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P <0.05);与对照组比较,IL-1β组甲状腺细胞早期凋亡率升高(7.49%±1.91%vs 28.46%±3.17%),差异有统计学意义(P <0.001),与IL-1β组比较,IL-1β+抗Fas L抗体组甲状腺细胞早期凋亡率降低(28.46%±3.17%vs 19.20%±1.75%),差异有统计学意义(P <0.05);与IL-1β组比较,IL-1β+抗Fas L抗体组UGRP1 mRNA (2.22±0.31 vs 2.66±0.28)及Fas mRNA(2.75±0.18 v...     

系统性红斑狼疮患者血清IL-10与T细胞凋亡的关系研究

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者血清IL-10与T细胞凋亡的关系.方法:采用ABC-ELISA法检测SLE患者血清IL-10含量;三色荧光流式细胞术检测患者外周血中CD3 、CD4 、CD8 T细胞亚群及其Fas、FasL的表达和早期凋亡,并分析其与血清IL-10水平的相关性.结果:SLE患者血清IL-10水平明显升高,并与SLE活动指数(SLEDAI)和血清中抗ds-DNA抗体呈正相关;外周血中T细胞CD4 亚群比例下降、CD4 /CD8 的比值降低,CD3 、CD4 、CD8 T细胞Fas、FasL的表达均增高,T细胞尤其是CD4 亚群凋亡增加,以上变化以活动性SLE更为显著;SLE患者血清IL-10水平与CD4 /CD8 细胞比值呈负相关,与T细胞FasL表达异常增加和CD4 T细胞亚群凋亡显著增多呈正相关.结论:SLE异常增高的IL-10促使T细胞高表达FasL,诱导CD4 T细胞凋亡,参与了SLE的病理进程.     

Fas系统介导的细胞凋亡与桥本氏甲状腺炎关系的研究

目的:为了研究Fas/FasL介导的细胞凋亡在桥本氏甲状腺炎发病机制中的作用,评价其在治疗中的意义.方法:采用流式细胞仪、双抗体夹心ELISA法及免疫组化方法分别测定桥本氏甲状腺炎(HT)及正常时照组外周血T淋巴细胞Fas抗原表达情况,血浆中sFas水平及甲状腺腺泡细胞Fas抗原及Fas配体的表达情况.结果:发现HT组甲状腺细胞Fas和FasL表达强度显著高于正常对照组(P<0.01),血浆sFas水平(2.05ng/ml±0.54ng/ml)明显低于正常组(3.59ng/ml±0.68ng/ml,P<0.001),HT外周血T淋巴细胞Fas抗原阳性细胞数(79.99％±16.08％)显著高于正常对照组(57.22％±11.57％,P<0.001).结论:Fas系统介导的细胞凋亡与桥本氏甲状腺炎发病密切相关。     

干扰素-γ、干扰素-α2b联合应用诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡及机制

目的研究干扰素-γ、于扰素-α2b联合应用对MCF-7乳腺癌细胞的诱导凋亡作用及其机制。方法流式细胞仪(FCM)检测处理后细胞凋亡及Fas/FasL蛋白表达情况。结果处理后凋亡细胞百分率及FasL的表达增加,随着处理时间的延长,表达有增加趋势,差异有统计学意义(P0.05);Fas的表达无明显变化。结论干扰素-γ、干扰素-α2b联合应用可诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡,机制可能与上调FasL的表达,加强Fas/FasL之间的交联及使Fas/FasL通路敏感性增加有关。     

细胞凋亡与甲状腺疾病

研究表明,细胞凋亡存在于正常和病理甲状腺组织中,凋亡相关蛋白Fas,FasL及Bcl-2家族的表达也随之发生相应的变化.在桥本氏甲状腺炎中,甲状腺细胞Fas表达增强,诱导细胞凋亡引起甲状腺组的损伤,Graves'病时,Fas表达减弱,Bcl-2增强,从而造成甲状腺滤泡上皮细胞增生肥大.促甲状腺激素、碘和细胞因子等多种因素对甲状腺细胞的凋亡具有调节作用,但含碘中药对甲状腺细胞凋亡的影响报道甚少,就此作一综述.     

NOD鼠胰岛细胞FasL/Fas凋亡通路的动态变化

目的:观察雌性NOD鼠在不同病程时,胰腺细胞因子mRNA和凋亡因子mRNA的表达,及胰岛内细胞因子和凋亡因子蛋白的表达.方法:54只雌性NOD鼠随要分为C1、C2、C3三组各18只,分别于4周龄,15周龄和30周龄(或发病时)处死,摘取胰腺.RT-PCR法检测胰腺IFN-γ、IL-10、Fas,FasL和CPP32mRNA的表达水平.HE染色观察胰岛炎程度.SP免疫组化染色观察胰岛内胰岛细胞及炎症细胞Fas,FasL及CPP32蛋白表达水平.结果:随病程的进展胰腺Fas、IFN-γ mR-NA的表达水平增加(P＜0.05),IL-10mRNA三组间无显著性差异.C2和C3组胰腺FasL、CPP32mRNA水平较C1组明显增强(FasL、P＜0.05;CPP32,P＜0.01),C2与C3组比较无显著差异.胰腺Fas、CPP32mRNA与IFN-γmRNA的表达水平呈正相关(相关系数γ=0.677,0.530),与IL-10mRNA的表达不相关(γ=-0.427,-0.464).免疫组化染色显示:C1、C2、C3组胰岛细胞FasL均高表达,三组间无显著差异(P＞0.05),Fas、CPP32的表达在C1组组弱表达,C2、C3组表达增强.C2、C3与C1组之间均有统计学差异(P＜0.05),C2与C3组比较无显著差异.C1组几无炎症细胞浸润,C2与C3组之间比较炎症细胞Fas、FasL、CPP32的表达无显著性差异.结论:在NOD鼠糖尿病发病中Th1细胞因子起主导作用;FasL/Fas凋亡通路参与NOD鼠胰岛β细胞的破坏;Th1细胞因子IFN-γ能上调胰腺FasL/Fas凋亡通路.     

同型半胱氨酸诱导血管内皮细胞凋亡及对p53、Fas表达的影响

目的:通过血管内皮细胞的培养,了解同型半胱氨酸(Hcy)对内皮细胞的损伤程度,初步探讨诱导血管内皮细胞凋亡的可能途径.方法:用不同浓度的Hcy处理内皮细胞后,应用透射电子显微镜技术以及Annexin V/PI染色加流式细胞术了解细胞凋亡状态,同时采用流式细胞仪检测细胞Fas以及p53的表达情况.结果:0.5 mmol/L和5 mmol/L的Hcy均能促进细胞凋亡,Hcy能促进细胞p53的表达,而且随着Hcy浓度的升高,其表达也逐步增强,不同浓度Hcy处理后各组细胞Fas蛋白的表达差异无显著性.结论:Hcy能诱导血管内皮细胞凋亡,这种作用可能与其促进p53表达有关.     

绒癌中Fas/FasL的表达及其介导的细胞凋亡的意义

目的 研究Fas/FasL在绒毛膜癌细胞中的表达,及绒癌细胞与Jurkat细胞共培养诱导T细胞凋亡的机制.方法 用免疫荧光染色法检测绒癌细胞系Fas/FasL的阳性表达情况,MTT法检测随时间变化绒癌细胞对Jurkat细胞的抑制情况,流式细胞仪检测Jurkat细胞与绒癌细胞共培养24 h、中和抗体NOK-2封闭FasL 24 h Jurkat细胞的凋亡情况,透射电镜观察细胞的凋亡形态.结果 绒癌细胞上均有Fas及FasL的表达,在绒癌细胞上Fas的阳性表达较低,而FasL表达较多(P<0 05).绒癌细胞与Jurkat 细胞共培养可诱导Jurkat 细胞凋亡,绒癌细胞与Jurkat细胞共培养后随着时间的延长Jurkat细胞的凋亡率增加(P<0 05),出现特征性凋亡形态特征.用中和抗体NOK-2 封闭细胞表面FasL 后, Jurkat细胞的凋亡率下降.结论 两种绒癌细胞上均有Fas及Fasl的表达,绒癌细胞能抵抗Fas介导的凋亡,其表面的FasL可抑制T 细胞的免疫功能,Fas/FasL途径是绒癌细胞免疫逃逸的重要机制之一.     

白细胞介素1受体拮抗剂诱导急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡机制的研究

目的:从胰腺腺泡细胞凋亡的角度探讨白细胞介素1受体拮抗剂(IL-1Ra)干预急性胰腺炎的可能机制。方法:72只SD大鼠,随机分为胰腺炎组、IL-1Ra干预组、对照组,每组24只,各组造模后在1,2,6和12 h 4个时间点分别检测6只大鼠。干预组分别于制模前12,6,2 h及制模时各注射IL-1Ra 1 mg/100 mg体质量,胰腺炎组仅同时注射等量生理盐水。应用细胞凋亡原位标记(TUNEL)染色、免疫组化技术等检测胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因Bax,Bcl-2,Fas,FasL的蛋白表达。结果:干预组1,2,6和12 h胰腺细胞凋亡指数显著高于胰腺炎组相应时间点(均P<0.01);对照组见较弱的Bax、Fas的表达,干预组各时间点胰腺细胞Bax、Fas染色阳性率明显高于胰腺炎组(均P<0.01);对照组未见Bcl-2表达,干预组各时间点胰腺细胞Bcl-2染色阳性率与胰腺炎组相比无显著差异性(均P>0.05);胰腺炎组、干预组中均没有见到胰腺腺泡细胞中FasL表达,但是在间质中均可见浸润的炎性细胞FasL免疫组化染色阳性。结论:IL-1Ra干预急性胰腺炎的机制可能不仅限于对炎症反应的抑制,它可能是通过上调凋亡调控基因Bax和Fas/FasL系统的表达,诱导胰腺腺泡细胞的凋亡从而减轻胰腺炎的严重程度。     

白细胞介素-1受体拮抗剂在急性胰腺炎中的作用及机制探讨

目的从胰腺腺泡细胞凋亡的角度探讨白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1Ra)在急性胰腺炎中的作用及机制。方法用牛磺胆酸钠建立大鼠急性坏死性胰腺炎模型,IL-1Ra腹腔注射诱导胰腺腺泡细胞凋亡,并应用细胞凋亡原位标记检测(TUNEL)染色、免疫组化等技术检测胰腺细胞凋亡及Fas/FasL的蛋白表达。结果干预组1,2,6,12 h胰腺细胞凋亡指数显著高于胰腺炎组相应时间点(均P<0.01);对照组见较弱的Fas的表达,干预组各时间点胰腺细胞Fas染色阳性率明显高于胰腺炎组(均P<0.01);胰腺炎组、干预组中均没有见到胰腺腺泡细胞中FasL表达,但是在间质中均可见浸润的炎性细胞FasL免疫组化染色阳性。结论IL-1Ra减轻急性胰腺炎的机制可能不仅限于对炎症反应的抑制,它可能是通过上调凋亡调控基因Fas/FasL系统的表达,诱导胰腺腺泡细胞的凋亡从而减轻胰腺炎的严重程度。     

半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(Caspase)及其在细胞凋亡中的作用

白细胞介素β转化酶,即ICE,与线虫死亡基因产物Ced-3蛋白相似,目前已发现14种ICE类似物,Alnemri将ICE家族统一命名为Caspase(Cystein-asparate protease,半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶),Caspase以结构酶原形式广泛存在于细胞。Caspase酶原主要经细胞色素C及死亡受体激活。Caspase活性中心含半胱氨酸,其选择性裂解底物天冬氨酸后残基,通过对蛋白激酶、核酸酶及细胞骨架的裂解,Caspase可激活特定信号系统,产生核皱缩,DNA片段形成等凋亡现象,最终导致细胞死亡,Caspase特异性抑制剂可抑制此作用。许多基因与Caspase参与的凋亡有关。     

细胞凋亡与细胞骨架的改变

细胞凋亡时,细胞形态会发生一系列特征性的改变.近年来,发现细胞骨架也会发生相应的变化,包括细胞骨架网状结构降解、凝聚和分布不均等.通过对细胞骨架蛋白的生物活性、功能及细胞凋亡时细胞骨架结构形态的动态变化、相关调控因素等研究,显示凋亡细胞骨架改变是细胞凋亡形态学改变的基础,提示可通过改变细胞骨架结构来诱导细胞凋亡,以达到治疗肿瘤及其他疾病的目的.     

术前射频热疗联合FOLFOX辅助治疗对结肠癌组织中MVD以及凋亡相关分子表达的影响

目的研究术前射频热疗联合FOLFOX辅助治疗对结肠癌组织中微血管密度（MVD）以及凋亡相关分子表达的影响。方法将2013年1月至2014年6月的120例结肠癌患者纳入研究,依据辅助治疗不同分为两组,观察组患者术前接受射频热疗联合FOLFOX化疗,对照组仅接受FOLFOX化疗。采用免疫组化染色的方法检测肿瘤组织中的MVD,Real-timePCR和Westernblot检测肿瘤组织中凋亡相关分子的表达情况。结果观察组患者肿瘤组织中MVD低于对照组（P＜0.05）;观察组患者肿瘤组织中Caspase-3、p16、Bax的mRNA和蛋白含量均高于对照组（均P＜0.05）;观察组患者肿瘤组织中突变型p53基因以及CDC25A、Bcl-2的mRNA和蛋白含量均低于对照组（均P＜0.05）。结论术前射频热疗联合FOLFOX辅助治疗有助于降低结肠癌组织中的MVD,同时上调促凋亡分子、抑制抗凋亡分子的表达。     

木黄酮靶向抑制MKN-45胃癌细胞Notch1蛋白表达及对增殖和凋亡的影响

目的:探讨木黄酮靶向抑制Notch1蛋白表达对人胃癌细胞MKN-45增殖和侵袭作用的影响及可能机制。方法:通过不同浓度木黄酮干预胃癌细胞MKN-45,以未干预细胞为正常对照组,Western blot法检测木黄酮抑制Notch1蛋白表达的效果,MTT法检测各组MKN-45细胞的增殖能力,荧光双标流式细胞术检测各组MKN-45细胞的凋亡状况,RT-PCR检测Bcl-2和BaxmRNA的表达水平。结果:木黄酮干预MKN-45胃癌细胞后能明显抑制Notch1蛋白表达,同时抑制MKN-45细胞增殖,促进MKN-45细胞凋亡。木黄酮干预明显上调细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax mRNA水平。结论:木黄酮干预可靶向抑制胃癌细胞MKN-45Notch1蛋白表达,抑制胃癌细胞MKN-45增殖并促进凋亡,可能与其上调细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax mRNA有关。     

何首乌饮对衰老大鼠卵巢组织凋亡相关蛋白FOX、SIRT1和c—Myc的调节作用

目的观察分析对衰老大鼠给予何首乌饮后大鼠卯巢组织凋亡相关蛋白FOX、SIRTI、c—Myc表达的影响。方法大鼠给予D-半乳糖连续腹腔注射法制备亚急性衰老大鼠模型,模型制备成功后何首乌饮连续灌胃60d,大鼠断头取卵巢。采用WesternBloting法检测各组大鼠卵巢FOX、SIRTl及e—Myc蛋白表达的变化。结果模型组较正常组卵巢细胞FOX、SIRTl及e—Mye表达量降低;何首乌饮可使卵巢组织FOX、SIRTI及c—Myc表达量增加,并呈现一定的剂量依赖性,以高剂量最佳,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论何首乌饮方剂能延缓衰老大鼠卵巢细胞凋亡的发生,其机制可能是通过干预凋亡相关基因FOX、SIRTl及e—Myc蛋白表达抑制卵巢细胞的凋亡。     

DNA拓扑异构酶与细胞凋亡

细胞凋亡 (又称细胞程序性死亡 )的调控由多种基因、核内外酶、信号蛋白等成分协同完成 ,其中DNA拓扑异构酶认为是细胞凋亡过程中核内相关的调控因素。作者就近年来对DNA拓扑异构酶的认识及其抑制物诱导细胞凋亡的机制和在细胞凋亡中的作用作一综述     

牛磺酸对大鼠肝细胞凋亡的作用

目的　探讨牛磺酸对大鼠肝细胞凋亡的作用。方法　用CCl4诱导形成大鼠急性肝损伤模型 ,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导生物素化脱氧尿嘧啶缺口末端标记 (TUNEL)技术法测定大鼠肝细胞凋亡 ,免疫组织化学法测定大鼠肝细胞Bcl 2、Bax基因表达水平。结果　牛磺酸治疗组肝细胞凋亡指数明显降低 ,Bcl 2表达增强 ,Bax表达降低 ,与模型组比较差异有显著性意义 (P <0 0 1)。结论　牛磺酸具有抑制肝细胞凋亡作用 ,机理可能与通过增强Bcl 2表达及抑制Bax表达有关。     

通精灵对实验性精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡的影响

目的探讨通精灵对精索静脉曲张大鼠睾丸生精功能的保护作用。方法将50只成年清洁级雄性Wistar大鼠分为假手术组(10只)、模型组(10只)、通精灵低剂量组(10只)、通精灵中剂量组(10只)和通精灵高剂量组(10只),按Sapyol法制作左精索静脉曲张大鼠模型。造模1个月后,不同浓度通精灵水煎剂灌胃,每日1次,连续60d。采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法检测睾丸生精细胞凋亡,比较各组左睾丸凋亡指数(AI)。结果模型组左睾丸AI明显高于假手术组及通精灵各组(<0.01),通精灵各组左睾丸AI低于模型组(<0.05)。结论通精灵能降低实验性精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡,对睾丸生精功能有保护作用。     

米非司酮对早孕后期蜕膜及绒毛孕激素受体及细胞凋亡的影响

目的　探讨米非司酮对早孕后期蜕膜及绒毛孕激素受体 (PR)及细胞凋亡的影响。方法　取孕 7～12周人工流产 (对照组 )、顿服米非司酮 2 0 0mg后 2 4h流产及服药 4 8h后流产各 2 0例患者的蜕膜及绒毛 ,应用免疫组织化学方法 (ABC法 )测定PR含量 ;应用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法测定比较细胞凋亡比率。结果　蜕膜组织PRH 积分对照组为 170 .33± 4 5 .71,服药 2 4h组为 16 3.5 5± 2 7.36 ,服药 4 8h组为 2 0 5 .2 9±34.0 4 ,后二组与对照组比较有显著性差异。对照组绒毛组织PR全部为阴性 ,服药 2 4h组 1例弱阳性 ,服药 4 8h组3例阳性 ;蜕膜细胞凋亡率对照组为 (0 .2 0 6± 0 .175 ) ,服药 2 4h组为 (0 .2 35± 0 .189) ,服药 4 8h组为 (0 .391± 0 .2 0 3) ,后者与对照组比较有显著性差异。绒毛细胞凋亡率对照组为 (0 .0 5 2± 0 .0 34) ,服药 2 4h组为 (0 .0 94± 0 .110 ) ,服药 4 8h组为 (0 .10 2± 0 .12 5 ) ,三组间差异无统计学意义。结论　米非司酮可以使蜕膜及绒毛中PR及细胞凋亡率升高 ,服药 4 8h比 2 4h作用更显著 ,其流产机制也可能作用于绒毛。     

大鼠肾移植急性排异反应中Fas基因的表达与细胞凋亡的关系

目的:探讨大鼠肾移植急性排异反应中Ｆａｓ基因的表达与细胞凋亡的关系。方法:建立大鼠同种异体肾移植模型,应用免疫组织化学方法检测Ｆａｓ基因的表达;应用原位ＤＮＡ片段未端标记法检测移植肾组织细胞凋亡状态．结果:正常大鼠肾Ｆａｓ基因主要呈弱阳性或阴性表达,而移植肾Ｆａｓ基因表达显著增强,且与肾曲小管细胞凋亡指数呈显著的正相关关系(ｒｓ＝０．５１２,Ｐ＜０．００１)．结论:大鼠移植肾Ｆａｓ基因的过量表达可引起肾组织细胞的凋亡,导致移植肾结构的破坏和功能的丧失．