核因子-κB与治疗类风湿关节炎的药物

转录因子核因子 κＢ(ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ κＢ ,ＮＦ κＢ)是可与多种基因启动子或增强子上的κＢ位点发生特异性结合并能促使基因的转录的蛋白质总称。ＮＦ κＢ为ＮＦ κＢ Ｒｅｌ家族的一员。在哺乳动物细胞中 ,已区分出如下几种核因子 κＢ的蛋白质 :ｐ6 5 ,ｃ Ｒｅｌ,ＲｅｌＢ ,ｖ Ｒｅｌ,ｐ5 0 ｐ10 5与 ｐ5 2 ｐ10 0 ,其中ｐ5 0与ＲｅｌＡ (ｐ6 5 )两亚基形成的异二聚体为最常见的形式[1 ,2 ] 。当细胞处于静息状态时 ,ＮＦ κＢ同源或异源二聚体与抑制性蛋白κＢ (ＩκＢｓ)以非活性的形式结合成三聚体存在于细胞质中。…     

核因子-κB与肾脏疾病

核因子 (ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ ,ＮＦ) ＫａｐｐａＢ(κＢ)是一种重要的核转录因子 ,它参予细胞内的信号传递 ,调控多种基因的表达。它的异常激活或完全抑制与多种疾病的发生有关[1～ 4 ] 。多种肾脏疾病 ,如肾小球肾炎、肾细胞癌、糖尿病肾病、间质性肾炎及肾纤维化等 ,均伴有ＮＦ κΒ转录活性的异常。1　ＮＦ κＢ的结构及特点现已明确 ,ＮＦ κΒ是一序列特异性的ＤＮＡ结合蛋白 ,与其细胞内抑制物ＩκΒ结合 ,以非活性形式存在于胞浆中。多种物质 ,如肿瘤坏死因子α(ＴＮＦ α)、脂多糖 (ＬＰＳ)或佛波乙酯 (ＰＭＡ)等 ,可刺激…     

核因子-κB与阿尔茨海默病

早在 2 0世纪 80年代中期Ｓｅｎ和Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ〔1〕 即在Ｂ淋巴细胞中发现一种特异结合于免疫球蛋白κ轻链基因增强子上的核转录因子蛋白 ,因而命名为核因子 κＢ (ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒκＢ ,ＮＦ κＢ)。ＮＦ κＢ是机体细胞快速反应系统中关键的因子 ,随其功能变化可快速调节细胞的转录程序 ,使其能适应外界应激情况〔2〕 。ＮＦ κＢ本身和调节分子的复杂性使得ＮＦ κＢ可在不同的细胞中发挥不同的生理作用。　　一、ＮＦ κＢ的功能与活化　　 1.ＮＦ κＢ的结构与活化 :现已证实多种细胞中均有ＮＦ κＢ ,其蛋白亚基主…     

核因子—κB的研究现状

自 198 6年发现核因子 κＢ(ＮＦ κＢ)以来 ,由于在炎症性疾病中的特殊作用 ,引起了人们的广泛兴趣。ＮＦ κＢ是在进化学上高度保守的一种转录因子。广泛存在于各种组织中 ,并调节多种前炎症介质的表达。1　ＮＦ κＢ/ＲＥＬ的生物学特性ＮＦ κＢ亚单位克隆已经揭示其内部有一个保守的中心区域 ,Ｒｅｌ同源结合域。内含ＤＮＡ结合区 ,二聚体化区和核定位序列 ,分别负责ＤＮＡ结合 ,二聚体化和与ＩκＢ家族成员相互作用以及携带核定位信号 (ＮＬＳ)。在哺乳动物中ＮＦ κＢ/Ｒｅｌ家族有 5个多肽链亚基 ,Ｐ5 0 /Ｐ10 5 ,Ｐ65 /ＲｅｌＡ ,…     

c-fos与心血管疾病

立早基因ｃ ｆｏｓ属核内蛋白类细胞癌基因 ,膜信号通过第二信使激活细胞浆内转录因子 ,促进ｃ ｆｏｓ基因转录。ｃ ｆｏｓ转录产物ＦＯＳ蛋白与另一核内原癌基因ｃ ｊｕｎ的产物ＪＵＮ通过“亮氨酸拉链”形成异源二聚体 ,构成转录因子 ,与核内ＤＮＡ结合 ,调节种种晚期基因的转录 ,发挥第三信使作用[1 3] 。近年发现ｃ -ｆｏｓ癌基因与心血管疾病关系密切 ,本文就其在心血管研究中进展作一综述。1　ｃ ｆｏｓ与血管活性因子的关系研究表明 ,ｃ ｆｏｓ与多种心血管活性因子如血管紧张素 (ＡｎｇⅡ )、儿茶酚胺、内皮素 (ＥＴ )、心纳素(ＡＮ…     

白细胞介素18与炎症性肝病

白细胞介素 18(ＩＬ - 18)是由活化的巨噬细胞产生的一种细胞因子。起初发现它可诱导辅助性Ｔ细胞和自然杀伤细胞 (ＮＫ)产生γ -干扰素 (ＩＦＮ -γ) ,故一度被称为ＩＦＮ -γ诱生因子 (ＩＧＩＦ)。近来诸多研究证实 :ＩＬ - 18除能强烈地诱导免疫细胞释放ＩＦＮ -γ、ＴＮＦ -α等细胞因子外 ,它亦具有增强ＦａｓＬ表达、增强ＮＫ细胞毒作用等多种生物学效能 ,在免疫调节、抗感染及慢性炎症性疾病发病过程中起着重要作用。本文就近年来关于ＩＬ - 18在炎症性肝病发病过程中的作用及机制等方面的研究进展作一综述。1　ＩＬ - 18的生物学特…     

含弓形虫ROP1基因真核表达重组质粒DNA免疫小鼠的研究Ⅴ.IFN-γ基因真核表达重组质粒的构建及其在DNA免疫中基因佐剂的作用

目的　构建ＩＦＮ－γ基因真核表达重组质粒作为基因佐剂,观察其与ｐｃＤＮＡ３－ＲＯＰ１（ｐｃ－ＲＯＰ１） ＤＮＡ共同免疫小鼠所诱导的免疫应答。方法　将ＩＦＮ－γ基因片段定向插入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３,双酶切鉴定,获得ｐｃＩＦＮ 重组子;碱裂解法大量制备,经肌肉注射免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,每只鼠注射ｐｃＩＦＮ、ｐｃ－ＲＯＰ１ 各１００μｇ,两周后同量加强免疫一次,以ｐｃＤＮＡ３空质粒及生理盐水组为对照。分别于免疫后第３０ 天、５０ 天、７０天共三次用ＭＴＴ法测定小鼠脾脏Ｔ淋巴细胞增殖活性及ＮＫ细胞活性;双夹心ＥＬＩＳＡ 测定血清细胞因子ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２及酶法测定ＮＯ含量;ＥＬＩＳＡ法测定ＩｇＧ抗体滴度。结果　构建成功的作用下,该两项指标均明显提高,且ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２ 及ＮＯ水平均较不加佐剂组显著提高（Ｐ＜ ０．０１）;而对ＩｇＧ抗体滴度无显著影响（Ｐ＞ ０．０５。结论　ＩＦＮ－γ基因佐剂具有协同ｐｃ－ＲＯＰ１ＤＮＡ免疫的作用,可增强免疫鼠细胞免疫应答,ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２细胞因子及ＮＯ的产生     

细胞因子与类风湿性关节炎

细胞因子 (Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ,ＣＫ)是一类由机体免疫细胞和非免疫细胞产生并分泌到细胞外的糖蛋白分子 ,它们调节多种细胞生理功能 ,具有多种生物学功能。细胞因子包括淋巴细胞产生的淋巴因子和单核巨噬细胞产生的单核因子等。目前已知白细胞介素 (ｉｎｔｅｒ ｌｅｕｋｉｎ ,ＩＬ)、干扰素 (ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ,ＩＦＮ)、集落刺激因子(ｃｏｌｏｎｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＣＳＦ)、肿瘤坏死因子 (ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ ,ＴＮＦ)、转化生长因子 (ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ ,ＴＧ…     

含弓形虫ROP1基因真核表达重组质粒DNA免疫小鼠的研究：Ⅴ.I …

构建ＩＦＮ－γ基因真核表达重组质粒作为基因佐剂,观察其与ｐｃＤＮＡ３－ＲＯＰ１（ｐｃ－ＲＯＰ１）ＤＮＡ共同免疫小鼠所诱导的免疫应答。方法将ＩＦＮ－γ基因片段定向插入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３,双酶切鉴定,获得ｐｃＩＦＮ重组子;碱裂解法大量制备,经肌肉注射免疫ＢＡＬＢ／小鼠,每只鼠注射ｐｃＩＦＮ、ｐｃ－ＲＯＰ１各１００μｇ,两周后同时加强免疫一次,以ｐｃＤＮＡ３空质粒及生理盐水组为对照。分别于免疫后第     

肝细胞生长因子与肾脏疾病

肝细胞生长因子 (ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＨＧＦ)于 1984年分离 ,1989年克隆成功。除了促进肝细胞生长外 ,它对多种细胞具有多种生物学活性。它在肝脏再生、肝纤维化及肝硬化中的作用引起了人们的广泛注意。最近的研究表明 ,ＨＧＦ在肾脏领域同样具有重要的意义。1　生物学背景ＨＧＦ是由一α亚基和一 β亚基组成的异二聚体。其中α亚基分子量为 690 0 0、β亚基分子量为34 0 0 0 ,它们来源于同一个含 72 8个氨基酸的前体 ,两条链通过一个二硫键连结。α亚基上有一个发夹样结构功能区和四个环饼样结构功能区 ;β亚基…     

干扰素抗肝纤维化研究进展

1　引言干扰素 (Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ,ＩＦＮ)是细胞受某些反应刺激而产生的一类蛋白质 ,已有研究表明 ,至少存在α、β、γ三种亚型 :ＩＦＮ α由Ｂ淋巴细胞、无标记淋巴细胞及巨噬细胞产生 ,ＩＦＮ β由成纤维细胞和上皮细胞产生 ,在病毒感染反应中最早出现 ,ＩＦＮ γ由致敏的Ｔ淋巴细胞产生[1] 。ＩＦＮ都具有广泛的抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用。肝纤维化是由于肝贮脂细胞 (Ｆａｔ ｓｔｏｒｉｎｇｃｅｌｌｓ ,ＦＳＣｓ)活化[2 ] 、细胞内维生素Ａ丧失而引起胶原及其他细胞基质 (Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ ,ＥＣＭ)的…     

NOX通过ROS介导的信号通路与肝纤维化

还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NOX)是一种多蛋白质亚基组成的复合物,它存在于吞噬型细胞及非吞噬型细胞中,现在已经证实与肝纤维化的形成密切相关.NOX通过产生活性氧簇(ROS)介导了多种细胞内的信号转导,如通过激活细胞外信号调节激酶(ERK)以及活化蛋白-1(AP-1)和核因子(NF)-κB等转录因子,参与了肝...     

激活素A与肝脏

激活素 (ａｃｔｉｖｉｎ)是转化生长因子 (ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ β ,ＴＧＦ β)的超家族成员 ,是近年来发现的一组重要细胞因子。它具有广泛的生物学活性 ,如在动物胚胎中诱导中胚层和前后极性分化 ,在动物和人体内刺激多种细胞分化等。激活素是由两个 β亚基构成的二聚体糖蛋白 ,目前已知有 5种 β亚基 ,其分别为 βＡ、βＢ、βＣ、βＤ及 βＥ。在正常肝脏实质细胞中 ,5种 β亚基的基因均有表达 ,其中βＡ和βＢ亚基的表达是肝脏维持生理功能所必需的 ,另外 3种 β亚基在肝脏中的作用尚不很清楚。按照亚基…     

γ干扰素对培养的人甲状腺细胞HLA-DR抗原基因表达的影响

ＭＨＣⅡ类抗原ＨＬＡ ＤＲ在致自身免疫性甲状腺病(ＡＩＴＤ)中起着非常重要的作用 ,γ干扰素 (ＩＦＮγ)在调控自身免疫性甲状腺病中的作用日益受到重视 ,同时它对细胞的生长起一定的作用 ,其作用机制未明。本研究运用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交技术、3 Ｈ ＴｄＲ掺入法及ｃＡＭＰ测定法 ,从细胞学角度分别研究ＩＦＮγ对人甲状腺细胞ＨＬＡ ＤＲ的表达和细胞生长状态的影响 ,以及ＩＦＮγ对细胞ｃＡＭＰ的影响 ,为阐明ＩＦＮγ在Ｇｒａｖｅｓ病中的作用提供理论依据。一、材料与方法1.细胞培养 :(1)标本来源 :Ｇｒａｖｅｓ病甲状腺组…     

c-Met蛋白与肝细胞癌相关性的研究进展

ｃ Ｍｅｔ蛋白是肝细胞生长因子 (ＨＧＦ)的特异膜受体 ,ＨＧＦ -ｃ Ｍｅｔ系统与正常肝细胞的分裂、增殖密切相关。若该系统异常改变 ,则使肝细胞生长失控 ,导致细胞恶性转化。近年来 ,人们对ｃ Ｍｅｔ蛋白与肝细胞癌相关性的研究逐渐成为热点。本文就这方面内容综述如下。1　ｃ Ｍｅｔ蛋白的结构特征及其介导的信号通路ｃ Ｍｅｔ蛋白位于人第七号染色体 7ｑ2 1 ｑ31的原癌基因ｃ Ｍｅｔ编码 ,属于受体酪氨酸蛋白激酶 (ＲＰ ＴＫ)家族成员。成熟的ｃ Ｍｅｔ蛋白由 50ｋＤ的α亚基 (Ｐ50 α)通过二硫键与 145ｋＤ的 β亚基 (Ｐ145β)相连 ,…     

肺炎衣原体非细胞成分刺激人血液单核细胞产生细胞因子

炎症在致动脉粥样硬化 (ＡＳ)早期起重要作用 ,而细胞因子可促进炎症的发生和发展。本研究旨在评价肺炎衣原体 (Ｃｐ)非细胞成分刺激产生促炎性细胞因子和趋化因子的能力。方法　将外周血单核细胞 (ＰＢＭＣ)或纯化的淋巴细胞加入 96孔细胞板 ,然后分别加入感染后超声破碎或热处理的Ｈｅｐ2细胞及未感染的Ｈｅｐ2细胞提取物 ,以刺激细胞因子的产生。检测指标包括肿瘤坏死因子α(ＴＮＦ α)、白介素(ＩＬ) 1 β、ＩＬ 6、ＩＬ 8、γ干扰素 (ＩＦＮ γ)、单核细胞趋化蛋白 1 (ＭＣＰ 1 )和巨噬细胞炎性蛋白 1α(ＭＩＰ 1α)。其中ＴＮＦ α和…     

细胞因子对正常甲状腺细胞cAMP生成的调节

目的　本文研究白介素１（ Ｉ Ｌ１） 、干扰素α（ Ｉ Ｆ Ｎα） 和肿瘤坏死因子（ Ｔ Ｎ Ｆ） 对人正常甲状腺细胞环磷酸腺苷（ｃ Ａ Ｍ Ｐ） 生成的影响。方法　运用人甲状腺细胞原代培养技术和放免分析技术，检测不同种类细胞因子刺激甲状腺细胞引起的ｃ Ａ Ｍ Ｐ 释放状况。结果　（１） Ｉ Ｌ１ 、 Ｉ Ｆ Ｎα和 Ｔ Ｎ Ｆ 均可促进甲状腺细胞基础ｃ Ａ Ｍ Ｐ 的释放。（２） Ｉ Ｌ１ 在１０ － ３ ～１０３ Ｕ／ｍｌ 的浓度范围内，可明显增强促甲状腺激素（ Ｔ Ｓ Ｈ） 对甲状腺细胞生成ｃ Ａ Ｍ Ｐ 的刺激效应，其中以１０ － １ Ｕ／ｍｌ 的 Ｉ Ｌ１ 作用最强。（３） Ｉ Ｆ Ｎα对 Ｔ Ｓ Ｈ 刺激甲状腺细胞ｃ Ａ Ｍ Ｐ 的生成具有双向调节作用，１０ － ２ ～１ Ｕ／ ｍｌ 可增加ｃ Ａ Ｍ Ｐ 释放，而１０３ Ｕ／ｍｌ 时则抑制 Ｔ Ｓ Ｈ 的刺激效应。（４）１０ ～１０４ Ｕ／ｍｌ 的 Ｔ Ｎ Ｆ 使 Ｔ Ｓ Ｈ 刺激甲状腺细胞生成ｃ Ａ Ｍ Ｐ 的量显著减少。结论　多种细胞因子参与甲状腺功能的调节，并可能与自身免疫性甲状腺疾病的发生发展过程有一定关联。     

高糖培养下大鼠肾小球系膜细胞JunD表达及转录因子-激活物蛋白1的活化

转录因子激活物蛋白 1(ａｃｔｉｖａｔｏｒｐｒｏｔｅｉｎ 1,ＡＰ 1)在糖尿病肾病特征性病理改变的发生发展中起重要作用。转化生长因子 (ＴＧＦ) β1、肾小球细胞外基质的重要成分层粘蛋白、Ⅰ型胶原的启动子区域都含有ＡＰ 1的结合位点 ;已有文献提示ＡＰ 1的活化介导了高糖诱导的ＴＧＦ β1表达升高〔1〕,同时ＡＰ 1也参与了ＴＧＦ β1诱导的细胞外基质表达升高〔2〕。转录因子ＡＰ 1由Ｊｕｎ蛋白 Ｆｏｓ蛋白异源二聚体或Ｊｕｎ蛋白同源二聚体组成。其二聚体 (ＪｕｎＤ)为其活化形式 ,可与ＴＰＡ反应元件结合 ,启动靶基因的转录。ＡＰ 1…     

FK506的临床应用与血药浓度检测

1　概　　述ＦＫ50 6 (商品名为ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓ ,普乐可复 )是从土壤真菌中提取的一种大环内酯类抗生素 ,常温下呈白色结晶或晶状粉末。分子式Ｃ4 4 Ｎ6 9ＮＯ12 ·Ｈ2 Ｏ ,分子量 82 2 0 5。因该药在水中的溶解度低 ,制造时与水溶性多聚物 (羟丙基甲基纤维素 )制成固体扩散剂 ,口服吸收具有较好的稳定性 ,半衰期 5～8ｈ[1～ 5] 。该药 1984年由日本藤泽公司开发成功 ,1989年开始用于临床 ,1995年经ＦＤＡ获准后在美国正式使用。ＦＫ50 6与ＦＫ50 6受体结合后抑制了磷酸酶的活性 ,从而抑制核调蛋白和Ｔ细胞活化因子 (如白介素 2 )…     

人类神经胶质细胞源神经营养因子的基因克隆与表达

目的获得能表达有生物学活性的成熟蛋白的人类神经胶质细胞源神经营养因子（ｇｌｉａｌｃｅｌｌｉｎｅｄｅｒｉｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ，ＧＤＮＦ）基因片段。方法分离神经胶质细胞瘤的ｍＲＮＡ，逆转录，采用ＰＣＲ技术，获得ＧＤＮＦ基因片段，将其组装入高效表达载体ｐＢＶ２２０中，表达、分离表达产物。测定其对鸡胚背根神经节的神经营养作用。结果ＰＣＲ后获得４０２ｂｐ的ＧＤＮＦ编码成熟蛋白基因片段，测序结果表明：第４２４碱基由Ａ变为Ｇ。将此片段组装入原核表达载体后，在菌体可溶性蛋白中获得有生物学活性的ＧＤＮＦ。１０００ｍｌ培养液可获４ｍｇＧＤＮＦ粗制品，５０ｎｇ粗制品可促进鸡胚背根神经节生长。结论获得了ＧＤＮＦ基因片段，并使其在原核表达系统中表达。在菌体可溶性蛋白组分中获得了具有促进鸡胚背根神经节生长的ＧＤＮＦ成熟蛋白。