白细胞介素1β多克隆抗体对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的作用

目的：研究白细胞介素－（ＩＬ）１β多克隆抗体对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（ＨＩＢＤ）后对损伤大脑的保护效应。方法：制备左脑ＨＩＢＤ的新生大鼠模型,于ＨＩＢＤ前后分别腹腔注射一定浓度的ＩＬ－１β多克隆抗体,观察用药前后损伤大脑脑水含量及组织病理学变化。结果：ＨＩＢＤ前后腹腔注射ＩＬ－１β多克隆抗体可明显降低脑水含量（Ｐ＜０．０１）,但对其相应ｍＲＮＡ转录无影响。组织病理学观察发现用药组大脑水肿明显减轻,神经元死亡明显减少。结论：ＩＬ－１β多克隆抗体可以拮抗ＩＬ－１β的炎性作用,对ＨＩＢＤ大脑有保护效应。     

肿瘤坏死因子α和缺血性脑损伤

缺血性脑损伤是由多种因素综合作用的结果,肿瘤坏死因子α是一种参与缺血性脑损伤病理生理过程的多功能细胞因子,具有双重、多样及网络性生物效应,在脑缺血的不同阶段产生不同甚至相反的综合性作用。本文对近年来脑缺血时肿瘤坏死因子α的表达变化、作用及相关机制的研究进展进行了综述。文中表明肿瘤坏死因子α在脑缺血后反应性增高,不仅可促进炎性坏死和细胞凋亡,而且还具有一定的神经保护作用。通过进一步研究其双向作用的机制,阻断它的神经毒性作用,充分发挥其神经保护作用,可为脑缺血损伤的有效治疗提供新思路。     

下调lncRNA-MALAT1表达对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的 探讨小图lncRNA-MALAT1表达对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）的影响。方法 取SPF级7 d龄SD大鼠40只,随机分为假手术组、模型组、lncRNA对照组、silncMALAT1组,每组10只。Rice-Vannucci法建立新生大鼠HIBD模型,造模后2 h,侧脑室分别注射生理盐水、生理盐水、空载体重组腺病毒液、silncMALAT1各5μl。造模后7 d,Morris水迷宫试验评估空间学习和记忆能力,TUNEL染色检测海马组织神经元凋亡,PCR和免疫印迹法检测海马组织BDNF/TrkB信号通路mRNA和蛋白表达变化。结果 模型组造模失败2只,lncRNA组失败2只,silncMALAT1组失败1只,造模成功率为83.33%。下调lncRNAMALAT1表达,明显增加新生大鼠学习和记忆能力（P<0.05）,明显减少海马组织神经元凋亡率（P<0.05）,明显下调BDNF/TrkB mRNA和蛋白表达水平（P<0.05）。结论 下调lncRNA-MALAT1表达可减轻新生大鼠HIBD,其机制可能与抑制BDNF/TrkB信号通路、减轻海马组织神经元凋亡...     

新生儿缺氧缺血性脑病血浆肿瘤坏死因子水平的观察分析

新生儿缺氧缺血性脑病血浆肿瘤坏死因子水平的观察分析罗克娴，王新良，王俊怡，郭文香，周淑敏肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）是一种多功能的细胞因子，近年来ＴＮＦ在机体组织损伤中的作用日益得到重视。本文采用双抗体夹心法对新生儿缺氧缺血性脑病（ＨＩＥ）血浆中ＴＮＦ水平...     

肿瘤坏死因子-α在大鼠实验性脑出血脑损伤中的作用

目的 探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在大鼠实验性脑出血（ICH）后脑损伤中的作用。方法 采用立体定向自体血注入大鼠尾状核建立ICH模型。观察ICH大鼠术前及术后各时点血肿周围脑组织的TNF-α水平、含水量变化及神经功能障碍评分,并与对照组比较。对TNF-α水平与脑含水量、神经功能障碍评分进行相关分析。结果 ICH组术后12～96hTNF-α水平明显高于对照组（均P〈0．05）。ICH组术后各时点神经功能障碍评分与相应时点脑组织TNF-α水平呈负相关（r=-0．678,P〈0．001）,脑含水量与TNF-α水平呈正相关（r=0．541,P〈0．05）。结论 大鼠ICH后腑组织TNF-α水平明显增加,加重脑损伤和脑水肿。     

腺苷对缺氧缺血性脑损伤的保护作用

中枢神经系统缺氧缺血后,不仅导致细胞损伤,还可阻断脑组织的能量供应,阻断不同区域的脑组织及同一组织中亚结构、细胞之间的联系.大量离体和在体的研究资料表明,腺苷通过减少神经介质的释放,抑制神经放电,保持细胞内Ca2+稳定,扩张血管,使内皮细胞内cAMP水平增高等[1],减轻缺氧缺血性脑损伤,发挥其神经保护作用.     

针刺对缺氧缺血性脑损伤大鼠保护作用的实验研究

目的探讨针刺对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的治疗作用及其机理。方法采用结扎左侧颈总动脉合并吸入低氧混合气体制作新生大鼠HIBD动物模型,用生化和免疫组化的方法分别测定针刺对HIBD大鼠脑组织ATP酶活性及神经生长因子含量的影响,并用迷宫实验观察针刺对HIBD大鼠智能的影响。结果针刺可明显提高HIBD大鼠模型海马组织的ATP酶活力和神经生长因子含量,并可明显改善HIBD大鼠的学习和记忆能力。结论针刺对HIBD有保护作用,其机制与其提高脑组织ATP酶活性、增强神经生长因子生物学活性有关。     

Omi/HtrA2在缺氧缺血性脑损伤新生大鼠顶叶皮质中的表达变化

目的 观察缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠顶叶皮质中Omi/HtrA2的表达变化,进而探讨其在HIBD中的可能作用. 方法 将新生7d龄SD大鼠按完全随机数字表法分为假手术组和模型组(制作新生大鼠HIBD模型),并按术后观察时间点不同进一步分为6h、12h、24 h、72 h4个亚组.分别于术前及缺氧后1h对大鼠进行行为学检查;不同时间点处死后观察每只大鼠的脑组织大体形态,并采用免疫组化染色和Western blotting检测病变侧脑组织中Omi/HtrA2蛋白的表达变化. 结果 (1)行为学检查:术前每只大鼠翻身能力、夹尾右旋测定均正常.术后假手术组测定结果同前.模型组大鼠中18只不能翻身,20只出现夹尾右旋,还有14只表现为不能翻身和夹尾右旋同时存在.(2)脑大体形态观察;模型组大鼠结扎侧半球脑组织受损严重,24h时苍白、水肿明显,体积明显大于对侧.假手术组大鼠大脑半球左右对称,未见任何病理变化.(3)Western blotting 结果:模型组Omi/HtrA2蛋白的表达水平在各时间点均较假手术组明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).Omi/HtrA2在HIBD后6h开始表达,24 h达高峰,随后开始下降.(4)免疫组化染色结果:模型组病变侧大脑皮层Omi/HtrA2阳性细胞数在HIBD后24 h达到高峰,随后降低,与假手术组在各时间点比较差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 新生大鼠HIBD后病变侧大脑皮层Omi/HtrA2的表达水平明显升高,并具有时间差异性,表明其参与了HIBD的病理过程,可能在HIBD诱导的细胞凋亡中发挥重要作用.     

肿瘤坏死因子-α对缺血性脑卒中的作用

缺血性脑卒中是中老年常见疾病,因其病理机制复杂,临床体征多变,现临床治疗效果仍不理想,肿瘤坏死因子-α在其发生发展过程中起到重要作用,临床如果能够利用好它的作用,促进其有益作用,抑制其有害作用,将为缺血性脑卒中的防治打开新的思路,因此,本文对肿瘤坏死因子-α在缺血性脑卒中进展中的作用进行了综述。     

神经节苷脂GM1对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤保护作用的实验研究

目的　探讨神经节苷脂GM1对新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE)的保护作用.方法　通过建立新生SD大鼠HIE动物模型,观察动物的死亡率,测量缺血缺氧后24小时脑组织含水量和3周后脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞增生情况,以及GM     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后CIRP表达与意义

目的观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)表达的变化情况。方法将40只7日龄新生SD大鼠随机分为假手术组和HIBD组,分别采用real-time PCR及免疫组织化学方法检测假手术组和HIBD后不同时间点(6、12、24和48h)CIRP在大鼠脑皮质与海马表达的变化。结果利用免疫组化和real-time PCR检测发现,大鼠脑皮质的CIRP蛋白和CIRP mRNA表达呈持续降低趋势,HIBD后6、12 h开始减少;24~48h下降更为明显。海马CIRP蛋白和CIRP mRNA表达则表现为6 h先升48h后降。结论CIRP参与了新生大鼠脑缺氧缺血的应激过程,可能与缺氧缺血性脑损伤后的脑水肿及神经元凋亡相关。     

孕酮在脑缺血大鼠TNF-α和IL-6引起脑损伤中的作用

目的 观察孕酮在炎症因子TNF-α和IL-6引起新生鼠缺氧缺血性脑损伤中的作用,进一步探讨孕酮神经保护作用的分子机制.方法 96只7日龄新生Wistar大鼠随机分成4组,正常对照组、假手术组、缺氧缺血组、药物预防组.缺氧缺血组和药物预防组动物先行左侧颈总动脉结扎术,然后将动物置于37℃恒温的密闭容器中,以1.5L/min的速度吸入80ml/L氧气和920ml/L氮气混合气体2.5h建立缺氧缺血脑病动物模型.药物预防组动物于建立模型前30min按8mg/kg腹腔注射0.5g/L孕酮溶液.采用ELISA法检测脑组织中TNF-α和IL-6含量的变化,RT-PCR检测TNF-α和IL-6 mRNA的表达.结果 缺氧缺血组脑组织中炎症因子TNF-α和IL-6含量在缺氧缺血后6h、24h、48h、72h明显高于对照组和假手术组大鼠(P＜0.05),且在缺氧后24h升到最高点,以后逐渐下降,至7d两者差异不显著,药物预防组在缺氧缺血后各时间点均低于缺氧缺血组(P＜0.05).且缺氧24h后缺氧缺血组脑组织TNF-α、IL-6 mRNA的表达明显高于正常对照组和假手术组,药物预防组mRNA的表达明显低于缺氧缺血组(P＜0.05).结论 孕酮可以保护新生鼠缺氧缺血后引起的脑损伤,其作用机制与抑制炎症因子TNF-α和IL-6 mRNA的表达以及抑制TNF-α和IL-6的生成有关.     

鼠神经生长因子对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经修复的作用

目的 探讨鼠神经生长因子(NGF)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后神经修复的作用.方法 新生7日龄(SD)大鼠72只随机分成假手术组、模型组、治疗组,模型组腹腔注射生理盐水,治疗组腹腔注射NGF,采用免疫组化检测术后不同时间点(3 h、12 h、1 d、3 d、7 d、14 d)血管内皮生长因子(VEGF)及神经丝蛋白(NFP)的表达.结果 假手术组VEGF呈持续的低程度表达,HIBD后治疗组各时间点VEGF的表达均高于模型组,3 h～3 d治疗组的VEGF阳性区平均积分光密度(IOD)值大于模型组(P<0.05),且高峰提前至3 h,2组间7 d及14 d VEGF表达无统计学差异.HIBD后,3 h～1 d模型组和治疗组的NFP阳性区平均IOD值均显著低于假手术组(P<0.01),3 d、7 d及14 d治疗组NFP阳性区平均IOD值显著高于模型组(P<0.01).结论 NGF对 HIBD的神经修复机制之一,可能是通过上调VEGF及NFP的表达而实现.     

巴曲酶对围产期缺氧缺血性脑损伤神经保护作用的研究

目的　制备宫内缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)动物模型 ,应用巴曲酶研究其对 HIBD的神经保护作用。方法　宫内窒息 2 0 min为实验组 ,并设立正常对照组 ,实验组随机分为两组 ,1组于生后 3 0 min、2 4h、48h各给予腹腔注射巴曲酶 (8BU/ kg) 1次 ,共 3次 (巴曲酶干预组 ) ,另 1组 (缺氧缺血组 )及正常对照组于相同时间给予腹腔注射等量生理盐水。3组仔鼠生后 72 h、7d、14 d、2 1d断头处死 ,测量脑组织含水量及重量 ,并应用 TU NEL法观察凋亡细胞数。结果　缺氧缺血组 72 h脑含水量明显高于巴曲酶干预组及正常对照组 (P<0 .0 5) ,其余时间点 3组脑含水量无差异。缺氧缺血组 72 h脑重量高于巴曲酶干预组及正常对照组 (P<0 .0 5) ,14 d、2 1d脑重量显著低于巴曲酶干预组及正常对照组 (P<0 .0 5) ;巴曲酶干预组脑重量 14 d、2 1d低于正常对照组 ,差异显著 (P<0 .0 5)。缺氧缺血组72 h～ 14 d各时间点阳性细胞数显著高于巴曲酶干预组及正常对照组 (P<0 .0 5) ,2 1d 3组阳性细胞数无显著差异 ;巴曲酶干预组 72 h～ 7d凋亡细胞数高于正常对照组 (P<0 .0 5) ,14 d降至正常 ;正常对照组各时间点偶见阳性细胞。结论　巴曲酶可明显减轻 HIBD急性期脑水肿及恢复期脑萎缩 ,抑制 HIBD神经细胞凋亡 ,具有神经保护作用     

抗肿瘤坏死因子—α单克隆抗体对缺血再灌注大鼠脑损伤？…

目的 探讨ＴＮＦ－α－ｍＡｂ对缺血再灌注在脑损伤的影响。方法 用Ｚｅａ ｌｏｎｇａ报道的大白鼠局灶脑缺再灌注尼龙线栓塞模型,对６ｈ短暂脑缺血／再灌注大白鼠使用抗ＴＮＦ－αｍＡｂ／生理盐水后的脑梗塞体积、脑组织病理学变化及微血管内白细胞聚集及附壁现象进行了观察。结果 抗ＴＮＦ－α ｍＡｂ能减少脑梗塞体积,减轻脑组织变性坏死程度,减少白细胞在微血管内的聚集和粘附。结论 抗ＴＮＦ－αｍＡｂ能起到减轻脑缺     

尼莫地平对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的防治作用

目的 :新生儿缺氧缺血性脑损伤 (hypoxic- ischemic brain damage,HIBD)严重危害新生儿的生命质量和健康 ,我们采用新生大鼠 IHBD模型 ,探讨尼莫地平对新生儿 HIBD的防治作用。材料和方法 :选用 7日龄 SD大鼠 32只 ,随机分为四组 :1伪手术组 ;2 IBD组 ;3HIBD+尼莫地平治疗 A组 ;4 HIBD+尼莫地平治疗 B组。除第一组外 ,其余各组均制成 HIBD模型 ,3、 4组用尼莫地平治疗 ,2 4小时后断头取脑组织 ,进行病理学检查 ,并测定脑组织中水分、钙、兴奋性氨基酸含量。结果 :1.2组与 1组相比 ,脑组织水分、钙、谷氨酸、天门冬氨酸含量均增高 (P<0 .0 1) ,神经细胞数明显减少 ,变性、坏死的细胞数明显增多 ;2 .3、 4组与 2组相比 ,病理学改变明显减轻。结论 :尼莫地平对新生大鼠 HIBD具有显著的防治作用 ,为新生儿 HIBD的防治提供了可靠的理论依据     

促红细胞生成素干预缺氧缺血性脑损伤新生鼠神经干细胞巢蛋白的表达☆

背景: 巢蛋白是一种存在于神经干细胞的特异性抗原,在神经系统发生病变或损伤引起再生时广泛表达,因此巢蛋白表达常用作判定神经系统发生病变或损伤后能否促进神经再生的一种手段。 目的：从神经再生和神经干细胞激活的角度,探讨外源性促红细胞生成素对新生鼠缺氧缺血性脑损伤后神经干细胞巢蛋白表达的影响。 方法：结扎大鼠右侧颈总动脉和8%低氧暴露2 h制备新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型。对照组仅游离右侧颈总动脉,不予结扎和缺氧处理。干预组大鼠缺氧缺血后立即腹腔注射重组人促红细胞生成素5 000 IU/kg,1次/d,连用3 d。缺氧缺血性脑损伤组大鼠缺氧缺血后连续腹腔注射等量生理盐水溶液3 d。每组随机取8只分别于术后4,7,14 d处死。应用免疫组化方法和计算机图像分析技术检测不同时点海马齿状回巢蛋白标记阳性细胞的变化。 结果与结论：各时点缺氧缺血性脑损伤组巢蛋白阳性细胞数较对照组增加(P < 0.05);各时点干预组巢蛋白阳性细胞较对照组和缺氧缺血性脑损伤组均增加(P < 0.05)。3组大鼠海马齿状回区巢蛋白阳性细胞数均于术后 7 d 达高峰。结果提示早期给予重组人促红细胞生成素可促使新生鼠缺氧缺血性脑损伤后海马齿状回区巢蛋白表达增加,促进神经干细胞的增殖再生,在缺氧缺血性脑损伤后神经再生、修复中发挥一定的保护作用。     

褪黑素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经元特异性烯醇化酶的影响

目的研究褪黑素(melatonin,MT)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的神经保护作用以及MT的用药时间窗。方法选用7日龄的SD大鼠,随机分为假手术组、模型组(HIBD组)、MT治疗组(按给药时间分为HIBD前组、0h组、1h组和2h组),即治疗组在各不同时间给予腹腔注射1次MT10mg/kg,各组动物分别在术后6h、12h、24h、48h、72h处死。用酶联免疫吸附法检测血清中神经元特异性烯醇化酶(NSE)的水平,用免疫组化法检测脑组织NSE的表达变化。结果HIBD模型组血清NSE水平显著高于MT各治疗组(P<0.01),HIBD模型组皮质NSE阳性细胞数显著低于MT各治疗组(P<0.01或P<0.05);MT治疗组各组间比较,HIBD前组、0h组、1h组血清NSE和皮质NSE阳性细胞数的变化差异性不明显(P>0.05),但它们与后2h组在血清NSE和皮质NSE阳性细胞数的变化上有显著性差异(P<0.05);脑组织中NSE的变化与血清中NSE的变化显著负相关(r=-0.92)。结论褪黑素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤有预防和治疗作用,能有效地保护NSE的活性。褪黑素在HIBD的治疗上存在时间窗,预防用药和HIBD后2h内给药效果明显,而且HIBD后1h内给药优于HIBD后2h给药。     

麻黄碱对缺氧缺血性脑损伤后新生大鼠脑组织Nogo-A和突触素表达的影响

背景：围产期窒息所致的新生儿缺氧缺血性脑损伤（hypoxic ischemic brain damage HIBD）是严重威胁新生儿生命和健康的常见病之一,而髓鞘相关蛋白Nogo-A等抑制神经生长的因子的存在,形成了一个不利于神经再生与修复的微环境。新近研究表明,Nogo-A主要存在于髓磷脂和少突胶质中,调控着脑缺血损伤后神经锥再生抑制的病理发展过程,在中枢神经系统再生修复中起着重要作用。然而对于Nogo-A在缺氧缺血性脑组织中表达的干预尚需深入研究。 目的：探讨髓鞘相关蛋白Nogo-A和突触素在缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织的表达特点及麻黄碱对其表达的影响。 设计,时间和单位：完全随机设计,实验于2008年8月至2009年3月在重庆医科大学附属儿童医院儿研所免疫组化实验室完成,为重庆市重点实验室。 材料：Sprague-Dawley (SD) 妊娠大鼠由重庆医科大学附属儿童医院实验动物中心提供,分笼单独喂养,提供水和实验室饲料。96只自然分娩新生鼠由母鼠喂养。 方法：健康SD新生大鼠96只,随机分为假手术组,HIBD组和麻黄碱治疗组,每组32只。于7日龄行左侧颈总动脉结扎,吸入8%O2+ 92%N2混合气体行缺氧处理2小时,制成HIBD模型。假手术组只作左颈总动脉分离而不结扎,不作缺氧处理。麻黄碱组于建模成功后腹腔注射麻黄碱1.5 mg•kg-1,假手术组和HIBD组大鼠腹腔注射等量生理盐水。上述各组干预均为每日1次,共7日。 主要观察指标：术后1、2、3、4周,各组大鼠均随机抽取8只,于麻醉下处死取脑,HE染色观察脑组织病理变化,免疫组化法检测髓鞘相关蛋白Nogo-A和突触素表达情况。 结果：假手术组各时间点大鼠脑组织Nogo-A表达无明显变化,差异无统计学意义( P > 0.05);与假手术组相比,HIBD组术后各时间点脑组织Nogo-A表达均增高,差异有统计学意义( P < 0.01);与HIBD组相比,麻黄碱治疗组第2,3,4周Nogo-A表达明显减少,差异有统计学意义( P < 0.01)。与假手术组相比,HIBD组术后各时间点脑组织突触素表达均减少,差异有统计学意义( P < 0.01);与HIBD组相比,麻黄碱治疗组第1,2,3周突触素表达明显增加,差异有统计学意义( P < 0.01)。 结论：新生大鼠HIBD后脑组织Nogo-A表达增高,可能是中枢神经损伤后再生障碍的重要因素之一。麻黄碱可下调脑组HIBD后Nogo-A 的表达,促进突触素的表达,从而有利于新生动物HIBD后神经轴突的再生。