一氧化氮对岛状肌皮瓣缺血再灌注损伤的影响

目的　观察NO对岛状肌皮瓣I/R损伤的影响并探讨其作用机制。方法　选用白色小家猪 15只 ,随机分为I/R组、I/R +NO供体L -arg组及对照组。制作猪腹直肌岛状肌皮瓣I/R模型 ,于再灌注前后给予L -arg ,检测I/R不同时相皮瓣静脉血中NO的间接含量、皮瓣NTR渗出 ,计算再灌注完毕后肌肉存活比例。结果　①I/R +L -arg组再灌注 0 .5小时、1小时NO间接含量 ( 75 .0 7± 12 .5 4 ) μmol/L、( 86.86± 2 0 .15 ) μmol/L ,明显高于I/R组 ( 4 6.75± 11.77) μmol/L、( 4 0 .3 8± 10 .78) μmol/L(P <0 .0 1)。②再灌注 1小时、4小时I/R +L -arg组皮瓣NTR计数 ( 66.5 0± 17.3 3～ 15 3 .80± 3 8.5 3 ) / 2 0个高倍视野明显低于I/R组 ( 171.5 0± 4 4 .5 0 ,3 16.80± 5 2 .85 ) / 2 0个高倍视野 (P <0 .0 1)。③再灌注完毕后 ,I/R +L -arg组皮瓣肌肉的存活比例 ( 83 .70± 15 .60 ) %明显高于I/R组 ( 2 4 .0 7± 12 .3 5 ) % (P <0 .0 1)。结论　于缺血后再灌注前及再灌注早期给予L -arg ,适当增加内源性NO的产生 ,能有效减轻肌皮瓣缺血再灌注损伤。     

一氧化氮对岛状肌皮瓣缺血再灌注损伤的影响

目的观察NO对岛状肌皮瓣I/R损伤的影响并探讨其作用机制.方法选用白色小家猪15只,随机分为I/R组、I/R+NO供体L-arg组及对照组.制作猪腹直肌岛状肌皮瓣I/R模型,于再灌注前后给予L-arg, 检测I/R不同时相皮瓣静脉血中NO的间接含量、皮瓣NTR渗出,计算再灌注完毕后肌肉存活比例. 结果① I/R+L-arg组再灌注0.5小时、1小时NO间接含量(75.07±12.54)μmol/L、(86.86±20.15)μmol/L,明显高于I/R 组(46.75±11.77)μmol/L、(40.38±10.78)μmol/L(P＜0.01).②再灌注1小时、4小时I/R+L-arg组皮瓣NTR计数(66.50±17.33～153.80±38.53)/20个高倍视野明显低于I/R组(171.50±44.50,316.80±52.85)/20个高倍视野(P＜0.01).③再灌注完毕后,I/R+L-arg组皮瓣肌肉的存活比例(83.70±15.60)%明显高于I/R 组(24.07±12.35)%(P＜0.01).结论于缺血后再灌注前及再灌注早期给予L-arg,适当增加内源性NO的产生,能有效减轻肌皮瓣缺血再灌注损伤.     

髂股动脉粥样硬化闭塞症家兔模型的制作

目的　探讨动脉粥样硬化闭塞症 (atherosclerosisobliterans ,ASO)动物模型的制作方法。方法　实验组、对照组各 1 0只新西兰家兔 ,利用机械损伤、免疫损伤和高脂高胆固醇饲养 2 0周 ,观察模型制作前后血脂 (TC)、胆固醇 (TG)、内皮素 (ET)、一氧化氮 (NO)水平及股动脉造影和病理学变化。结果　制作前TC、TG、ET和NO分别为 ( 0 .89± 0 .0 9)mmol/L、( 0 .99± 0 .1 5)mmol/L、( 99.1 3± 1 6.51 )ng/L、( 6.2 6± 0 .80 ) μmol/L ,制作后分别为 ( 8.95± 1 .68)mmol/L、( 8.38± 1 .0 8)mmol/L、( 1 835.81± 2 0 3.62 )ng/L、( 2 .33± 0 .55) μmol/L。前后比较差异有非常显著性 ( P <0 .0 1 ) ;制作后实验组动脉造影显示髂股动脉高度狭窄 ,病理切片显示典型的ASO变化 ,对照组无异常变化。结论　本方法可成功诱导ASO模型     

小鼠肝缺血再灌注后Toll样受体2在缺血肝组织中的激活及其意义

目的　探索小鼠肝缺血再灌注后缺血肝组织中Toll样受体 2 (TLR2 )的激活及其与肝功能损伤之间的关系。方法　缺血再灌注损伤组 (I/R组 ),假手术对照组 (S组 )均采用实时荧光定量多聚酶链反应检测肝组织中TLR2mRNA及TLR2蛋白的表达,同时检测门静脉血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肿瘤坏死因子α(TNF α)及门静脉血清内毒素 (endotoxin, EN)水平。结果　肝脏部分缺血1h再灌注 4h后,I/R组与S组小鼠缺血肝组织TLR2 mRNA的表达 (ΔCt值 )分别为 1. 0 6±0. 9 1和5. 0 8±1. 3 2, 两组间差异有显著性 (P < 0. 0 1 ),I/R组缺血肝组织TLR2 蛋白的表达 (OD值 )( 4 3 3. 9 1±2 5. 5 3 )水平较S组 ( 1 0 2. 8 6±1 3. 5 8 )显著升高 (P< 0. 0 1 )。I/R组门静脉血清TNF α[ ( 1 1 2. 5 2±1 4. 4 1 )pg/mL]较S组 [ ( 5. 9 6 ±4. 4 3 )pg/mL]显著升高 (P < 0. 0 1 );I/R组ALT[ ( 8 4 8. 3 3±2 7 1. 3 7 )U/L]较S组 [ ( 4 2. 3 9±1 4. 7 5 )U/L]显著升高 (P < 0. 0 1 );而门静脉血清内毒素水平组间差异无显著性 (P> 0. 0 5 )。结论　TLR2mRNA及蛋白在肝脏缺血再灌注过程中缺血肝组织的表达增强, 此变化伴有TNF α的升高及肝功能的损伤。     

肝缺血再灌注损伤中乌司他丁对核因子-κB活化的影响及对损伤的保护作用

目的探讨乌司他丁及核因子(NK)-κB在肝缺血再灌注(I/R)损伤中的作用。方法制作大鼠部分肝I/R模型,分为:A假手术组,B肝缺血90min组,C肝缺血90min、再灌注120min组,D肝缺血90min、再灌注120min加乌司他丁组。光镜观察肝脏组织学改变,测定血清酶学水平和肝组织中髓过氧化物酶(MPO)含量,sABC免疫组织化学方法测定肝组织中NF-κB的活化程度。结果A组肝细胞索排列有序,肝细胞形态正常;B组肝小叶结构紊乱,肝血窦和中央静脉有轻度淤血,内皮细胞和肝细胞水肿变性;C组肝细胞坏死较明显,D组上述改变明显减轻;B组的血清ALT、AST和MPO分别为454.1±26.2、819.1±18.2I U/L和0.908±0.189U/g,肝组织NF-κB活化程度为1.89±0.12(与A组比较,P<0.05);C组分别为1156.9±216.3、2150.5±209.8I U/L和2.126±0.160U/g,肝组织NF-κB活化程度为2.86±0.20(与A组比较,P<0.01);D组分别为553.6±19.4、897.6±23.9I U/L和1.128±0.162U/g,肝组织NF-κB活化程度为2.04±0.16(与C组比较,P<0.01)。结论乌司他丁能减轻NF-κB活化,减轻肝I/R时中性粒细胞通过释放蛋白酶造成的肝损伤。     

缺血预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护机制

目的验证缺血预处理(IPC)对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(I/R)的保护作用,探讨一氧化氮(NO)与蛋白激酶C(PKC)在IPC过程中的作用.方法在原位灌流的大鼠肝脏缺血再灌注模型上,观察IPC的保护作用.同时经肠系膜上静脉注射NO前体L-精氨酸和蛋白激酶C特异性激动剂1,2-二辛酸甘油(DOG)以及两者的特异性阻滞剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(NAME)和多粘菌素B,来检测NO和PKC在IPC中的关系.结果预处理可阻止血清谷丙转氨酶(ALT)[(200.86±40.30)U/Lvs.(257.65±20.18)U/L],谷草转氨酶(AST)[(211.06±13.59)U/Lvs.(309.17±24.79)U/L],乳酸脱氢酶(LDH)[(824.73±127.11)U/Lvs.(1118.60±82.21)U/L]及脂质过氧化物(LPO)[(0.414±0.069)mmol/mgvs.(0.531±0.054)mmol/mg]水平升高(P＜0.05),而使组织超氧化歧化酶(SOD)保持在较高水平[(10.33±0.88)U/mgvs.(6.01±0.91)U/mg],(P＜0.05).NO与PKC均可模拟预处理的保护效应.结论缺血预处理对大鼠肝脏I/R有明确的保护作用,NO与PKC发挥IPC保护作用的途径不同.     

小肠缺血再灌注后氧自由基和肝超微结构改变及凋亡相关基因的表达

目的:研究大鼠小肠缺血再灌注(I/R)后血中氧自由基的改变以及肝组织中bax、bcl-2、p53的表达及肝组织超微结构的变化,以探讨小肠I/R后肝绢织的损伤及其机制.方法:建立小肠I/R模型,分对照组、I/R后0 min、30 min、1 h、2 h、1 d、3 d及7 d共8组,于各时点检测血中一氧化氮(NO)和超氧化物岐化酶(SOD)的浓度,用免疫组织化学SP法观察肝组织中bax、bcl-2及p53的表达情况,透射电镜观察肝组织细胞超微结构变化.结果:大鼠小肠I/R后NO浓度在冉灌注0 min时升高,至冉灌注2 h时明显降低.其后又持续升高,至冉灌注7 d时达高峰.SOD的浓度变化则相反.再灌注0 min时肝组织中bax、bcl-2及p53阳性细胞率增高,再灌注30 min时阳性细胞率升高更为明显,但bcl-2表达高于bax,二者差别显著(P＜0.01).再灌注2 h时3种基因均有所降低,其后又开始升高,至再灌注7 d时阳性细胞率达高峰.bax表达明显高于bcl-2.二者差别显著(P＜0.01).透射电镜显示肝组织细胞超微结构损伤改变.结论:血中NO和SOD浓度的变化及肝组织中超微结构的改变表明,小肠I/R可引起肝组织细胞凋亡和损伤;而I/R后bax、bcl-2及p53阳性细胞在肝组织中的表达明显改变,可能与引起细胞凋亡和损伤有关.     

一氧化氮和内皮素在肝脏再灌注损伤和缺血预处理中作用的研究

目的 :观察缺血预处理一氧化氮 (NO)和内皮素 (ET)的变化及其与再灌注损伤和微循环变化的关系。方法 :建立大鼠肝脏 70 %缺血再灌注损伤模型 ,分为对照组、缺血组、缺血预处理组、L 精氨酸组、L NAME组 ,观察各组肝功能变化 ,检测肝组织和血清中NO和ET及透明质酸 (HA)的水平 ,以HA代表肝脏微循环情况。结果 :再灌注损伤后微循环的破坏和NO和ET的变化相关 ,缺血预处理可减少NO水平的下降和血浆ET升高 ,减少微循环破坏和肝功酶的升高 (P <0 .0 5 )。外源性给予NO合成前体L 精氨酸在升高NO水平降低ET水平的同时 ,可达到类似预处理的保护作用。结论 :血管活性介质NO的减少和ET水平增加是导致再灌注损伤微循环变化的原因之一。缺血预处理可诱导增加NO和减少ET ,并可能是其改善微循环和减少再灌注损伤的因素之一。给予外源性NO可起到类似缺血预处理的保护效果 ,而抑制NO产生并不能加重再灌注损伤。     

重症急性胰腺炎患者血和腹水一氧化氮的动态变化

目的　研究诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)活性在重症急性胰腺炎 (SAP)患者中的变化。方法　动态观察 30例重症急性胰腺炎患者发病后血性腹水和外周血一氧化氮 (NO)代谢产物NO2 - /NO3- 的变化。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测外周血单个核细胞iNOSmRNA的变化。结果　SAP患者血性腹水NO2 - /NO3- 含量为 (385 .0± 92 .3) μmol/L与对照组 (41 .3± 1 9.5)μmol/L比较显著升高 (P <0 .0 0 1 )。起病后第 1、7、1 4天外周血NO2 - /NO3- 含量分别为(1 38.8±30 .2 ) μmol/L、(1 2 6 .4± 35 .4) μmol/L和 (77.8± 37.1 ) μmol/L ,随病情好转逐渐下降(P <0 .0 1 )。外周血单个核细胞iNOSmRNA表达在病情严重时显著增强。结论　iNOS活性增强产生过量NO参与重症急性胰腺炎全身病理生理的改变     

梗阻性黄疸患者血浆可溶性P-选择素与内毒素、D-二聚体的关系及其意义

目的　研究梗阻性黄疸 (梗黄 )患者血浆可溶性P -选择素 (sP selectin ,sP s)与内毒素 (ET )及D -二聚体 (D d)的关系及其意义。方法　应用ELISA和鲎试剂比色法测定梗黄组、急性胆囊炎组和健康人组血浆sP s ,D d和ET含量。结果　健康人组血浆sP s含量为 (93 .43± 17.65 )ng/ml ,ET (0 .0 0 3 0± 0 .0 0 0 4)EU /ml ,D d(0 .3 9± 0 .2 1)mg/L ;急性胆囊炎组血浆sP s含量为 (2 3 3 .3 2± 82 .12 )ng/ml ,ET (0 .40 12± 0 .15 0 6)EU /ml ,D d(0 .76± 0 .2 7)mg/L ;梗黄组血浆sP s含量为 (3 5 1.90± 93 .83 )ng/ml ,ET(0 .3 814± 0 .14 3 0 )EU /ml ,D d(2 .14± 0 .3 7)mg/L。急性胆囊炎组和梗黄组sP s ,D d及ET均高于健康人组 (P <0 .0 1) ;梗黄组ET与急性胆囊组差异无显著性 ,但梗黄组sP s和D d较急性胆囊炎组高 (P <0 .0 1) ,梗黄组的以上二物质含量呈正相关性 (P <0 .0 1) ;急性胆囊炎组sP s与ET呈正相关性 (P <0 .0 1)。协方差分析表明 ,在相同ET含量时 ,梗黄组sP s高于急性胆囊炎组 (P <0 .0 1) ,且与D d有相关性 ,二者有相同变化趋势。结论　胆道梗阻是ET致血管内皮细胞损伤和血小板活化的敏感性因素 ,梗黄患者血液高凝状态与继发性纤溶反应处于动态平衡 ,提示动态监测血浆sP s和D d变化 ,     

The TEG® vs the ROTEM® thromboelastography/thromboelastometry systems

We have evaluated the TEG^® thromboelastograph and the ROTEM^® thromboelastometer, two point-of-care devices that measure blood coagulation. During a one-week period, seven consultant anaesthetists, one consultant haematologist, one associate specialist anaesthetist and two senior trainee anaesthetists were trained by the manufacturers and set up, calibrated and used both systems, after which their views were obtained and specific technical/support information was sought from the manufacturers using a questionnaire. Although the devices shared common features, they differed in complexity and aspects of ease of use, and in their purchase and running costs.