人乳头瘤病毒、癌基因与宫颈癌关系的研究

用HPV16,HPV18及C-Ha-ras-1,C-myc等多个探针,采用分子杂交技术检测了44例宫颈癌和17例正常宫颈组织。HPV-16-DNA,HPV-18-DNA及C-myc,C-Ha-ras-1癌基因的检出率分别为50%、6.8%及63.3%、68.2%,明显高于正常宫颈组织,提示这4种因素与宫颈癌的发生有关。C-myc癌基因阳性的宫颈癌活组织C-Ha-ras-1同时阳性者占86.7%(26/30),C-myc癌基因阳性宫颈癌活组织中,60%(18/30)HPV-DNA呈阳性,C-Ha-ras-1阳性者中57.1%(16/28)HPV-DNA呈阳性,说明HPV与C-Ha-ras-1及C-myc有关,HPV与癌基因在宫颈癌发生发展中有一定的作用。     

原位杂交检测宫颈活检组织HPV感染的临床意义

目的探讨原位杂交（ISH）检测宫颈活检组织中人类乳头瘤病毒（HPV）感染对宫颈癌早期诊断的临床意义。方法对128例宫颈活检的石蜡标本,分别行常规检测和ISH-HPV检测。结果①二种方法检测慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变（CIN）、宫颈鳞状细胞癌（SCC）HPV感染检出率分别为2.5%与8.9%、37.5%与55.0%和66.6%与90.0%,检出率SCC〉CIN〉慢性宫颈炎,ISH法明显优于常规检测法（χ2=7.5625,P〈0.01）。②在所检测的128例宫颈活检组织标本中,21～30岁患者的HPV感染率明显高于其它年龄组。结论慢性宫颈炎、CIN、宫颈鳞状细胞癌与HPV6/11/16/18/31/33密切相关,随着病变程度的加重,HPV感染的检出率明显升高。ISH方法对早期宫颈HPV感染患者在分子病理学水平作出准确、特异、快速的诊断,同时具有细胞阳性定位功能。通过HPV感染的检测,可以积极预警年轻人群中宫颈癌的发生。     

人巨细胞病毒感染与宫颈癌关系的研究

采用聚合酶链反应 (PCR)检测 30例宫颈癌、 30例宫颈炎、 8例正常宫颈组织标本中 HCMV早期 (IE)、晚期 (L)基因片段、 HCMV79- aa ORF癌基因及 HPV16、 18、 32、 5 2 b、 5 8型 DNA。结果表明 :除 HCMV L 基因外 ,以上各基因在宫颈癌组之检出率均显著高于宫颈炎组 ,且宫颈癌组 IE和 L 基因、HPV高危型和 HCMV同时感染的比值比 (OR)分别高于 IE或 L 基因、HPV高危型或 HCMV单独感染的 OR值之和。提示人巨细胞病毒与宫颈癌的发生有关 ,可通过其 IE基因启动、激活 HPV的致癌作用 ,HCMV79- aa ORF癌基因的整合也可能是致宫颈癌的一个不可忽视的重要因素     

宫颈癌人乳头瘤病毒与人巨细胞病毒感染的病例对照研究

了解宫颈癌患者及对照患者宫颈组织中人乳头瘤病毒（HPV）与人巨细胞病毒（HCMV）的感染状况。应用聚合酶链反应方法检测宫颈新鲜活检组织HPV与HCMV。36例宫颈癌及38例子宫肌瘤患者的宫颈组织中，HPV合并入HCMV感染检测阴性率分别为2．8％和31.6％，HPV单独感染的检出率分别为25.0％和15.8％（P＜0.05），OR＝18.0；HCMV单独感染的检出率分别为83％和289％（P＞0.05），OR＝3．27；HPV合并HCMV感染的检出率分别为63.9％和30.7％（P＜0．01），OR＝30.7。在β-球蛋白基因阳性的27例宫颈癌及30例子宫肌瘤患者的宫颈组织中，HPV合并HCMV感染检测阴性率分别为3.7％和36.7％，HCMV单独感染的检出率分别为11.1％和20.0％（P＜0.05），OR=5．50。结论：HPV感染和江西的宫颈癌密切相关。HCMV感染可能在宫颈癌发生过程中与PIPV感染发生相关作用。     

宫颈疾患中人乳头瘤病毒核酸的检测

应用HPV_(16,18,11)三个DNA探针,通过斑点杂交技术,对80例宫颈疾患和6例其它组织进行了检测和分析,结果显示HPV_(16、18)和HPV_(11)DNA序列在宫颈癌、宫颈不典型增生和慢性宫颈炎中的检出率分别为44％(22/50),8％(4/50),4％(2/50);15％(2/13),15％(2/13),15％(2/13)和19％(3/16),0％(0/16),13％(2/16);其中有3例标术HPV_(16,18)呈弱交叉杂交。而1例子宫肌瘤、1例阴道癌、1例宫颈息肉、2例膀胱癌和2例正常子宫颈组织中均未测出HPV DNA序列。结果提示:某些HPV类型(特别是HPV_(16))可能与宫颈癌的发生有关。     

阴道镜在宫颈病变诊断中的临床价值探讨

目的探讨阴道镜检查在宫颈病变中的诊断价值。方法对我院2007年1月至2007年12月110例宫颈疾病患者使用阴道镜检查,对有宫颈病变的87例进行分析总结。结果87例病变中,阴道镜检查诊断慢性宫颈炎78例,不典型增生5例,宫颈癌4例;病理诊断慢性宫颈炎77例,不典型增生6例,宫颈癌4例。阴道镜下诊断与病理诊断符合率为98．72％,无明显统计学差异（P〉0．05）。结论阴道镜检查联合病理活检能及时发现宫颈癌和癌前病变,提高宫颈癌及癌前病变的早期检出率。     

C-MYC癌基因与宫颈癌发生发展相关性的初步研究

应用细胞转化和核酸杂交技术研究 c-myc 癌基因与宫颈癌的关系,可见宫颈癌DNA 转染 NIH/3T3细胞,在 G_(418)-DMEM 选择性培养液中形成能持久增殖、呈重叠生长的转化灶,转化灶细胞基因组中 c-myc 癌基因有扩增现象;经斑点杂交检测正常宫颈、慢性宫颈炎和宫颈癌组织DNA 中 c-mye 癌基因,揭示宫颈癌组织中其拷贝数明显增加;宫颈腺癌 DNA 经 Hind Ⅲ单酶切进行Southern Blot 杂交出现两条阳性杂交带,而宫颈鳞癌 DNA 经 EcoRⅠ或 HindⅢ/EcoRⅠ或 EeoRⅠ酶切,均只出现一条阳性杂交带。     

C-myc和hMLH1蛋白在新疆维吾尔族妇女宫颈癌中的表达及临床意义

目的检测新疆维吾尔族妇女宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈癌中C-myc和hMLH1蛋白表达,并探讨其临床意义。方法应用免疫组化SP法检测C-myc与hMLH1在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈癌组织中的表达水平,并探讨宫颈癌组织中C-myc和hMLH1蛋白表达与各临床病理特征的关系。结果 C-myc在慢性宫颈炎、CIN、宫颈癌中的阳性表达率分别为26.7%(8/30)、50.0%(30/60)和69.2%(36/52),差异有统计学意义(P<0.05)。hMLH1在慢性宫颈炎、CIN和宫颈癌组织中的阳性表达率依次为66.7%(20/30)、56.7%(34/60)和30.7%(16/52)差异有统计学意义(P<0.05)。在宫颈癌组织中,C-myc蛋白与肿瘤分化程度、临床分期以及有无淋巴结转移相关;hMLH1蛋白表达下调与宫颈癌分化程度及是否有淋巴结转移密切相关,表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 C-myc和hM-LH1蛋白与宫颈癌的发生、发展可能相关,二者联合检测可能为宫颈癌的早期诊断和治疗提供新的方向。     

宫颈癌组织基因组中C-MYC癌基因同源序列的检测及其临床意义

以α-~(32)p-dCTP标记的C-MYC癌基因为探针,采用斑点杂交法检测38例慢性宫颈炎,49例宫颈癌组织DNA中C—MYC癌基因的同源序列。结果慢性宫颈炎、宫颈癌杂交阳性率分别为26.32％(10/38)、83.67％(41/49)。而以α-~(32)p-dCTP标记的C-MYC重组体作探针进行杂交,结果49例宫颈癌杂交阳性率分别为100％(49/49)。结果提示:(1)分子杂交法检测以C—MYC DNA的同源序列有助于宫颈癌的早期诊断;(2)人体组织基因组中存在有PBR_(322)的同源序列,因此以克隆化重组体作探针进行条交必须注意到载体所产生的假阳性。     

宫颈癌及宫颈上皮内瘤变与人乳头瘤病毒感染的相关分析

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV-DNA)在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(CIN)及浸润性宫颈癌(ICC)中的表达,以及它们之间的相互关系,通过HPV-DNA的检测尽早筛查出患宫颈上皮内瘤变及浸润性宫颈癌的高危人群,以便采取有效的预防措施。方法对本院2006年7月-2007年7月妇科门诊及住院部筛查出的130例宫颈病变患者均采用PCR-HPV荧光定量检测法检测其宫颈分泌物HPV-DNA感染情况,并通过阴道镜对可疑病灶多点活检。结果130例宫颈病变患者中HPV-DNA阳性者52例(40.0%),阴性者78例(60%);病理活检慢性炎症53例(40.8%),宫颈癌及癌前病变77例(59.2%);HPV阳性患者的宫颈癌及癌前病变率为62.3%(48/77)。结论检测高危HPV-DNA不仅可以发现现行的宫颈疾病的患者,还可以发现存在高危风险的人群,是监测CIN及ICC的一个重要的指标;通过检测高危HPV-DNA,有针对性地进行活组织病理检查,可有效地指导临床,有助于探讨CIN及ICC的发病机制。     

用聚合酶链反应检测宫颈癌组织中人巨细胞病毒DNA相关序列

为建立检测人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染的ＰＣＲ方法并探讨ＨＣＭＶ与宫颈癌的关系，从石蜡包埋和活检宫颈癌组织中提取ＤＮＡ，用聚合酶链反应体外扩增ＨＣＭＶＥｃｏＲＩＤ片段上一段长１５２ｂｐ的核酸序列，再用地高辛末端转移酶标记法标记和扩增片段互补的ＨＣＭＶ寡核苷酸探针，用该探针证实扩增片段的特异性。检测宫颈癌标本４３例，阳性率为２５．６％（１１／４３），正常宫颈组织８例，阳性率为０。宫颈癌标本阳性率高于正常宫颈标本，提示ＨＣＭＶ与宫颈癌的发生有关。     

HPV在宫颈炎、宫颈癌前病变、宫颈癌中的检测及意义分析

目的研究人乳头瘤病毒（HPV）在宫颈炎、宫颈癌前病变、宫颈癌中的水平及临床意义。方法随机抽取2009年8月至2012年10月在广州医学院附属深圳沙井医院妇科就诊的宫颈炎、宫颈癌前病变、宫颈癌患者各50例,检测HPV阳性例数、HPV水平及HPV阳性患者中HPV DNA亚型的构成情况。结果 150例患者中,HPV感染98例,阳性率为63.33%,宫颈炎、宫颈癌前病变、宫颈癌的HPV感染率分别为22%（11/50）、78%（39/50）、96%（48/50）;HPV水平呈现宫颈炎组〈宫颈癌前病变组〈宫颈癌组（P〈0.05）;HPV-DNA-16、HPV-DNA-18阳性率最高,分别为89.80%、86.73%;HPV-DNA-52、HPV-DNA-56、HPV-DNA-58阳性率其次,分别为52.04%、57.14%、50%。三组HPV-DNA各亚型的阳性率呈现宫颈炎组〈宫颈癌前病变组〈宫颈癌组（P〈0.05）。结论高危型HPV-DNA类型检测有助于宫颈癌的早期诊断,具有重要的临床价值。     

导流杂交法检测宫颈病变中人乳头瘤病毒的基因型及其感染的临床意义

目的应用导流杂交基因芯片技术(HybriMax)检测宫颈病变人乳头瘤病毒(HPV)基因型及其感染情况,并探讨其临床意义。方法 296例行导流杂交法HPV分型检测的宫颈病变患者分为正常组(58例)、慢性炎症组(32例)、宫颈上皮内瘤变组(66例,该组再分为3个亚组,CINⅠ级组21例、CINⅡ级组19例、CINⅢ级组26例)、宫颈癌组140例,对每个组HPV的阳性率进行比较。结果 296例受检者中191例患者HPV DNA检测为阳性,阳性率为64.53%;正常组HPV阳性率为18.97%(11/58)、慢性炎症组为25.00%(8/32),CINⅠ级组为28.57%(6/21)、CINⅡ级组为73.68%(14/19)、CINⅢ级组为88.46%(23/26)、宫颈癌组为92.14%(129/140),其中正常组与慢性炎症组及CINⅠ级组差异无统计学意义(P>0.05),正常组HPV阳性率较CINⅡ级组、CINⅢ级组及宫颈癌组低(P<0.05),随病变级别增加HPV阳性率逐渐上升(P<0.05)。宫颈病变患者感染率较高的6种HPV病毒为16、18、58、52、53、33型,其阳性率分别为35.47%(105/296)、10.47%(31/296)、6.42%(19/296)、5.41%(16/296)、3.04%(9/296)、2.70%(8/296)。结论宫颈病变与HPV的感染密切相关,高危型HPV感染是宫颈癌变的重要因素之一,导流杂交基因芯片技术检测HPV,对于筛查、治疗及随访CIN及宫颈癌患者有重要意义。     

人肺癌组织中C-Ha-ras,C-myc和C-sis基因扩增的研究

用同位素α－P32dCTP标记癌基因C－Ha－ras，c－myc和V－sis基因片段，通过点杂交和Southern杂交法检测17例鳞癌、9例腺癌、3例其它类型肺癌组织和9例非肺癌组织中C－Ha－ras，C－myc和C－sis基因扩增的情况。结果发现：在所检测的29例肺癌样品中，10例（58．8％）鳞癌，3例腺癌（33．3％）和2例其它类型癌有C－Ha－ras基因扩增，4例（23．5％）鳞癌，3例（33．3％）腺癌出现C－myc基因扩增，4例（23．5％）鳞癌，1例（11．1％）腺癌和1例其它类型癌有C－sis基因扩增。同时我们也发现有5例肺癌组织（4例鳞癌和11例腺癌）出现两种癌基因的扩增。上述结果提示：C－Ha－ras，C－myc和C－sis基因的扩增与肺癌的发生有密切关系，特别是C－Ha－ras基因扩增在肺鳞癌的形成过程中可能起着重要作用。同时也提示：肺癌的发生与两件癌基因的扩增可能有一定关系。     

人宫颈癌中c-Ha-ras-1癌基因表达的研究

为探讨宫颈癌中 c-Ha-ras-I 丧达的情况,通过斑点杂交和 Northern 杂交检测了21例宫颈癌,30例宫颈炎,3例正常宫颈组织中 mRNA 的水平,结果表明:c-Ha-ras-I mRNA 在宫颈癌中为81%阳性,重度宫颈炎为70%,中度宫颈炎为40%,轻度宫颈炎为30%,正常宫颈组织勾阴性。薄层扫描表明宫颈癌及重度宫颈炎与其他宫颈组织的 c-Ha-ras-I mRNA 水平有显著性差异(P<0.01).Northern blot 表明:Ha-ras mRNA 为1.4kb。提示:Ha-ras 癌基因的过量表达在宫颈癌的发生发展过程中可能起重要作用.