ECLIA法定量检测乙肝血清标志物的临床应用

目的：探讨采用电化学发光免疫分析（ECLIA）法检测某院医务人员乙型肝炎（乙肝）血清标志物（HBV‐M）及HB‐sAg临界或弱反应标本进行ElecsysHBsAg确证试验的临床应用价值。方法对1847例血清标本经RocheModularE170进行HBV‐M半定量分析,并对所有HBsAg处于临界或低浓度的标本进行了确证试验分析。结果检出HBsAg阳性标本共52例,其中HBsAg、HBeAg、HBcAb结果有反应性3例,检出率0．16％;HBsAg、HBeAb、HBcAb结果有反应性47例,检出率2．54％;HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb结果有反应性1例,检出率0．05％;HBsAg、HBcAb结果有反应性1例,检出率0．05％。HB‐sAg阴性标本共1795例,其中单HBsAb结果有反应性538例,检出率29．13％;HBsAb、HBeAb、HBcAb结果有反应性330例,检出率17．87％;HBsAb、HBcAb结果有反应性276例,检出率14．94％;HBsAb、HBeAb结果有反应性2例,检出率0．11％;HBe‐Ab、HBcAb结果有反应性14例,检出率0．76％;单HBcAb结果有反应性60例,检出率3．25％;HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBe‐Ab、HBcAb结果均无反应性575例占受检人数的31．13％。将HBsAg处于临界或低浓度的标本进行了确证试验,半定量试验COI结果为0．80～0．99的8例标本,经ElecsysHBsAg确证试验结果均为无反应性;1例半定量试验COI结果为3．81的标本,经ElecsysHBsAg确证试验结果为阳性;5例半定量试验COI结果分别为9．13、10．86、11．15、11．11、10．42的标本,经ElecsysHB‐sAg确证试验结果均为阳性。HBV‐M半定量检测与ElecsysHBsAg确证试验的符合率为100％。结论ECLIA法在HBV‐M半定量检测及确证试验过程中具有重要临床应用价值,为乙型肝炎临床诊断及病情的治疗监测提供了科学的实验室依据。     

Elecsys HBsAg COI灰区标本再分析探讨

目的探讨电化学发光免疫分析(ECLIA)法乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)cut off指数(COI)灰区标本再次进行确证分析的临床价值。方法被检血清标本均来自2014年1月至2015年3月该院就诊的门诊和住院患者,应用Elecsys HBsAg确证试验对213例ECLIA法检出HBsAg COI灰区标本进行再分析并对受检标本HBV血清标志物两对半(以下简称乙肝两对半)模式进行回顾性分析。结果 213份标本中ECLIA法检测HBsAg COI结果为0.80~0.99 31例,经Elecsys HBsAg确证试验阳性2例[6.45%(2/31)];HBsAg COI结果为1.0~1.99弱反应性标本93例,经Elecsys HBsAg确证试验阳性92例[98.92%(92/93)];HBsAg COI结果为2.0~6.99 89例,经Elecsys HBsAg确证试验均为阳性,阳性率为100.00%(89/89);213例ECLIA法检出HBsAg COI灰区标本经Elecsys HBsAg确证试验阳性183例,检出6种乙肝两对半模式,其中HBsAg、HBV e抗体(HBeAb)、HBV核心抗体(HBcAb)阳性模式155例,占大多数[72.77%(155/213)];经Elecsys HBsAg确证试验阴性30份标本中检出7种乙肝两对半模式,其中HBeAb、HBcAb阳性模式16例,检出率为7.51%(16/213)。结论 ECLIA法乙肝两对半定量检测HBsAg临界或较低水平的弱反应性标本、乙型肝炎感染模式不常见的标本时需经Elecsys HBsAg确证试验再分析以防止假阴性或假阳性结果的出现。     

HBsAg阴性及弱反应性标本的检测及临床意义

目的探讨ELISA两步法、化学发光法、荧光定量PCR定量技术对HBsAg阴性及弱反应性标本的检测及其临床意义,为提高临床检测准确率提供借鉴。方法收集医院门诊和住院受检者经ELISA一步法检测的乙肝两对半4种模式标本(模式1:仅HBeAb阳性;模式2:仅HBcAb阳性;模式3:HBcAb阳性和HBeAb阳性;模式4:HBsAg均为弱反应性的标本),用ELISA两步法及化学发光法检测,再对经化学发光法检测HBsAg结果为阳性的标本用FQ-PCR检测乙肝病毒DNA载量。结果仅HBeAb阳性的标本,共2例,ELISA两步法结果显示HBsAg均为弱反应性,化学发光法结果为阴性;仅HBcAb阳性的标本121例,ELISA两步法结果示HBsAg呈弱反应性者为26例(占21.5%),化学发光法结果阳性8例(占16.7%);HBcAb阳性和HBeAb阳性的标本55例,ELISA两步法HBsAg结果呈弱反应性的为25例(占45.4%),化学发光法结果阳性14例(占25.5%),其中7例用常规PCR方法检测结果拷贝数均小于5.0*102;HBsAg为弱反应性的标本59例,ELISA两步法弱反应性的结果均在临界值附近,化学发光法结果均为阳性。结论对于HBsAg阴性及弱反应性的临床标本,最好采用化学发光法检测或者进行确证试验。     

ELISA法检测HBsAg灰区和单试剂反应性样本的确认结果分析

目的 探讨ELISA法检测HBsAg结果判定灰区设置的必要性,以及中和试验对HBsAg灰区和单试剂反应性样本的确认情况.方法 采用两个不同厂家生产的ELISA HBsAg试剂对献血者标本分别进行检测,对检测结果在0.7≤S/CO＜1或单试剂为反应性的标本,再用同种试剂进行双孔复试,双孔中至少有1孔结果仍在灰区内或仍为反应性,留取标本做HBsAg中和试验确证.结果 136例灰区标本中HBsAg中和试验检测出阳性标本10例,阳性率为7.35％,结果异常标本14例;159例单试剂反应性标本中HBsAg中和试验检测出阳性标本19例,阳性率为11.95％,结果异常标本16例.灰区与单试剂反应性样本阳性率的差异没有统计学意义;S/CO值在0.70～0.79区间、0.80～0.89区间、0.90～0.99区间的阳性率有逐渐升高的趋势,但差异无显著性;双试剂灰区的阳性率高于单试剂灰区的阳性率,但差异无统计学意义.结论 对HBsAg灰区和单试剂反应性标本,ELISA检测漏检率较高,应结合自己实验室实际设置合适的灰区,最大限度地检出这些可疑标本,并进行确认实验,进一步减少HBsAg漏检和误检率,以提高输血安全,同时避免血源的浪费.     

ECLIA和ELISA检测血清HBsAg的结果比较

目的 比较电化学发光免疫分析(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HBsAg结果。方法 采用ECLIA一步法和KLISA一步法、二步法测定定值血清中的HBsAg:用ELISA一步法和二步法检测经ECLlA筛选的190例HBsAg模式如下的临床标本：①HBsAg光放射强度(COI)在1-20，20例；②HBsAg COI在21-4000、160例；③HBsAg COI大于4000、6例；④HBsAg阴性(其COI值小于1)，HBeAg和HBcAb阳性4例；结果 ELISA一步法灵敏度为1ng／ml．二步法灵敏度为0．2ng／ml、ECLIA灵敏度为0．05ng／m1；在190例临床标本中。ELISA一步法阳性检出率为84．2％，二步法阳性检出率为92．6％．ECLIA阳性检出率为97，4％：结论 ELISA一步法受钩状效应(hook effect)影响明显，敏感度低。HBsAg漏检明显：ELISA二步法能较好地避免钓状效应，敏感度较高，HBsAg漏检率较低，但费时：而ECLIA灵敏度高．受HOOK效应影响较小、HBsAg漏检率低，且自动化程度高，检测时间短。     

两种抗凝剂对血液免疫项目ELISA法检测结果的影响

目的探讨两种抗凝剂对血液免疫项目ELISA法检测结果的影响。方法留取EDTA-K2和肝素钠抗凝标本126人份，用两种试剂同时对血液免疫四项ELISA检测，对其中11人分HBsAg检测结果呈反应性标本进行血液辫子确认。结果EDTA—K2和肝素钠抗凝标本126人份中，EDTA．K2抗凝标本HBsAg检测结果新创试剂有4人份呈反应性（S／CO〉1）占3．17％（4／126），万泰试剂呈反应性标本7人份占5．55％（7／126），肝素钠抗凝标本均为阴性，经留血液辫子对11人份呈反应性标本用两种试剂重新检测HBsAg，结果为阴性．结论EDTA-K2抗凝剂对ELISA法检测HBsAg结果有影响。     

MEIA确证HBSAg的方法学及其应用评价

目的：建立简便、快速、价廉的MEIA确证HBsAg的方法。方法：采用国产多抗HBsAb及标准阴性血清依据中和试验的原理建立MEIA确证HBsAg的方法。同时采用Abbott确证HBsAg试剂盒分别对80例血清标本进行确证并评价其结果。结果：该法能够对在线性范围内的HBsAg“阳性”标本（2．1－3000S／N）进行确证,对＞300S／N以上的HBsAg“阳性”标本应当进行适当稀释。然后再进行确证;采用两种方法对80例HBsAg“阳性”标本同时进行确证试验,两法符合率为100％。结论：该法操作简便、成本低廉、结果易判断,在常规检测中可以替代Abbott确证HBsAg试剂盒。     

三种梅毒螺旋体抗体检测方法的比较分析

目的比较化学发光法（TP-CLIA）、酶联免疫吸附试验（TP-ELlSA）和梅毒螺旋体明胶颗粒凝聚试验（TPPA）对梅毒螺旋体特异性抗体（TP-Ab）检测的意义。方法分别用CLIA、ELISA和TPPA检测患者的1797份血清样本,收集CLIA／ELISA／TPPA／法检测均阳性但临床未明确诊断的标本及结果不一致标本以重组免疫印迹法（RIBA）最终确认。结果三种方法共筛选69例阳性及可疑血清标本。CIIA／EIISA／TPPA法均阳性标本63例,其中52例有临床明确诊断。另11例3种方法检测均阳性但未明确诊断标本和6例检测结果不一致标本用RIBA确证。CLIA法确认阳性66例,阳性率3．67;ELISA法确认阳性65例,阳性率3．62;TPPA法法确认阳性61例,阳性率3．39;CLIA、ELISA及TPPA法敏感性分别为98．51％、97．02％和91．05％;特异性均为99．88;诊断效率分别99．83％、99．78和99．66％。结论CLIA法和ELISA法敏感性均高于TPPA法,不管用何种方法检测对于临床诊断不符的标本均应慎重,必要时用RIBA法补充确认,以排除假阳性。     

乙型肝炎病毒表面抗原弱反应性样本的确认与分析

目的对酶联免疫吸附试验（ELISA）定性的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）弱反应性样本进行确认及分析。方法收集经ELISA检测HBsAg的S／CO值为0．7～3．0的样本共613例,以中和试验确认,同时进行微粒子酶免疫方法（MEIA）检测,不确定病例继续随访。结果经确认共41例与ELISA判定结果不符,假阳性率4．9％,假阴性率10．7％;其中S／CO值0．9～1．2范围产生的假阴性率或假阳性率最高。中和试验和MEIA法检测结果基本一致,仅4例不符。结论ELISA检测HBsAg呈弱反应性,尤其是“灰区”结果应予以确认,中和试验和MEIA都是有效的方法,个别病例还需参考病史长期随访。     

ECLIA和ELISA检测血清HBsAg的结果比较

目的 比较电化学发光免疫分析(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HBsAg结果。方法 采用ECLIA一步法和ELISA一步法、二步法测定定值血清中的HBsAg；用ELISA一步法和二步法检测经ECLIA筛选的190例HBsAg模式如下的临床标木：①HBsAg光放射强度(COI)在1～20，20例；②HBsAg COI在21～4000，160例；③HBsAg COI大于4000，6例；④HBsAg阴性(其COI值小于1)，HBeAg和HBcAb阳性4例。结果 ELISA一步法灵敏度为1ng／ml，二步法灵敏度为0．2g／ml，ECLIA灵敏度为0．05ng／ml。存190例临床标本中，ELISA一步法阳性检出率为84．2％，二步法阳性检出率为92．6％，ECLIA阳性检出率为97．4％。结论 ELISA一步法受钩状效应(hook effect)影响明显，敏感度低，HBsAg漏检明显：ELISA二步法能较好地避免钩状效应，敏感度较高，HBsAg漏检率较低，但费时：而ECLIA灵敏度高，受HOOK效应影响较小，HBsAg漏检率低，且自动化程度高，检测时间短。     

乙型肝炎病毒表面抗原弱反应性标本的检测及临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)弱反应性标本的临床检测对策及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂Ⅰ、Ⅱ和化学发光法分别检测155例HBsAg初检为弱反应性的标本。结果试剂Ⅰ与化学发光法的阳性符合率为47.1%,阴性符合率为5.2%;试剂Ⅱ与化学发光法的阳性符合率为13.5%,阴性符合率为39.3%;试剂Ⅰ与试剂Ⅱ的阳性符合率为25.2%,阴性符合率为7.1%。结论对于ELISA法检测HBsAg为弱反应性的标本,应分析原因并采用多家试剂及更灵敏的方法进一步复查以确认,最好是进行确认实验。     

电化学免疫发光分析法联合核酸检测定量法在ELISA HBsAg-/NAT+血液样本中的应用价值

目的分析电化学免疫发光法(ECLIA)联合核酸检测(NAT)定量法在ELISA HBsAg-/NAT+血液样本检测中的应用价值。方法选择血站采集的无偿献血者血液样本22843例,酶联免疫吸附法(ELISA)检测为乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阴性的血液样本行NAT检测,先行混合检测,后行拆分检测。选取拆分检测为初检ELISA HBsAg-/NAT+的血液样本行NAT定量检测,NAT定量检测为阳性的血液样本进一步行ECLIA联合NAT定量检测。结果经ELISA检测,22843例血液样本中HBsAg阳性65例,HBsAg阴性22778例。将ELISA检测为HBsAg阴性的22778血液样本进一步行NAT检测,经混合检测,27个混样池为阳性;经拆分检测,29例血液样本呈HBV-DNA阳性。对29例初检ELISA HBsAg-/NAT+血液样本进一步行NAT定量检测,阳性率为65.52%(19/29),其中5例HBV-DNA病毒载量≥20 IU/mL,14例HBV-DNA病毒载量<20 IU/mL。19例ELISA HBsAg-/NAT+血液样本经ECLIA检测,HbsAg、HBeAg全阴,HBsAb阳性3例(15.79%),HBeAb阳性7例(36.84%),HBcAb阳性15例(78.95%),血清模式为全阴5例(26.32%),单纯HBcAb阳性7例(36.84%)。19例ELISA HBsAg-/NAT+血液样本经ECLIA联合NAT定量检测,4例处于窗口期,15例处于隐匿性感染期。结论血站血液样本初检中存在一定的漏检现象,NAT检测可在大量ELISA阴性样本中快速筛检出HBV-DNA阳性标本,ECLIA联合NAT定量检测可帮助献血者明确自身HBV感染状态,值得临床应用和推广。     

对乙型肝炎表面抗原弱阳性结果进行确认试验的应用研究

目的评估抗体中和确认试验在乙型肝炎表面抗原（HBsAg）低值弱阳性标本中的应用。方法将由微粒子酶免疫发光法（MEIA）检测的HBsAg结果（S/CO）在1.0-10.0之间的111份弱阳性血清标本进行抗体中和确认试验,并进行乙型肝炎病毒（HBV）酶联免疫吸附试验（ELISA）,对比各试验结果间的差异。结果抗体中和确认试验阳性92例（82.9%）,ELISA检测阳性47例（42.3%）,2项试验检测结果间差异有统计学意义（P=0.033）。结论对HBsAg低值弱阳性标本,ELISA检测漏检率很高,敏感性和特异性均不佳;抗体中和确认试验可做为HBsAg弱阳性标本进一步确认的手段。     

酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒表面抗原临界样本复检范围的探讨

目的探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）检测乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）临界样本的复检范围。方法收集用ELISA初检HBsAg吸光度（A）值在0.07～2.00范围内的样本,用ELISA复检;初、复检结果不符和2次结果均在临界的样本,用微粒子酶免疫法（MEIA）进行复核,并用中和法做确认试验。统计分析结果,选择一个合适的样本复检范围。结果样本初检结果A值在0.070～0.104、0.105～0.300范围内,ELISA复检符合率分别为85.2%、56.9%;MEIA与ELISA复检结果的符合率分别为90.1%、93.9%。A值在0.301～0.500、0.501～1.000、1.001～1.500、1.501～2.000范围内,ELISA复检符合率依次为88.3%、93.8%、99.1%、99.2%,MEIA与ELISA复检结果的符合率为100%。确认试验和MEIA复检结果的符合率样本测定值（S）/阴性对照值（N）在1.50～1.99、2.00～5.00,分别为50.0%和92.7%,其他组均在97.1%以上。结论在操作规范化的实验室内,ELISA初检HBsAg复检范围宜选择样本A值在0.070～0.300范围内;大批量体检时,复检范围应放宽至0.070～0.500;乙肝标志物模式异常的样本也需复检。规定适宜的复检范围既能确保检测结果的准确性,又能避免人力和试剂等物品的浪费。     

HBsAg弱阳性样本的3种测定方法比较

目的比较胶体金免疫层析试验（GICA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）与微粒子化学发光检测技术（MEIA）检测HBsAg弱阳性样本的结果符合率，以了解3种方法的特异性与灵敏度等诊断指标。方法用3种方法平行检测收集的血清标本HBsAg，并相互比较。结果3种方法检测HBsAg的结果符合率为74．3％，其中ELISA与MEIA结果符合率为94．9％；GICA与MEIA结果符合率为76．9％。GICA检测HBsAg弱阳性样本时的各项诊断指标都不甚理想。结论1．GICA的灵敏度和特异性分别为81．3％和81．3％，较ELISA和MEIA低，检测HBsAg弱阳性样本时存在一定程度的漏检率和误诊率，只能起筛查作用，遇到HBsAg弱阳性的血清标本必须与ELISA法并用，实行双检。2．ELISA较MEIA灵敏度和特异性略低，当测定标本的OD值在临界值附近即检测灰区时建议用MEIA复检。     

电化学法确认低浓度乙肝表面抗原的初步应用

目的利用罗氏试剂公司研发的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)确认试剂对低浓度HBsAg标本进行确认试验,并做初步分析,以期对今后的检测工作有一定的指导价值。方法 168例Cutoff-指数(COI)在0.9～20.0血清样本来源于本院住院及门诊患者,经罗氏公司E170仪器对其检测并进行中和试验。结果 94例COI在0.9～5.0低含量HBsAg血清样本,经确认试验确认阳性率72.34%,阴性率26.60%,不确定率1.06%;受试者工作特征曲线(ROC)分析,当COI在4.18时,特异性可达到100%;乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs)阳性组与阴性组的弱阳性组确认试验情况阳性率为45.71%和88.13%,两组比较,差异均有统计学意义(χ2=19.76,P<0.05)。结论如果条件允许,当HBsAg COI值0.9～5.0IU/L,尤其当同时抗-HBs阳性时应做确认试验。     

HBsAg和抗-HBs双阳性模式分析及临床意义

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)同时阳性的感染模式,探讨此类模式的产生原因及其临床意义。方法应用时间分辨免疫荧光分析法定量检测10 939例血清标本,从中筛选出HBsAg和抗-HBs同时阳性的标本,进而分析其检测结果 ,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测的12000例血清标本得到的HBsAg和抗-HBs同时阳性的结果进行比较。结果定量检测10939例血清标本,其中HBsAg阳性3 338例,阳性率为30.5%,HBsAg和抗-HBs同时阳性者占0.8%(28/3 338);ELISA定性检测12 000例标本,HBsAg和抗-HBs同时阳性者占0.3%(12/12 000),统计学分析两种方法在检测HBsAg和抗-HBs同时阳性的结果 ,差异有统计学意义(P0.05)。该28例表现出4种类型HBV血清学指标的组合方式,以HBsAg、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性模式和HBsAg、乙型肝炎e抗体(抗-HBe)、抗-HBc阳性模式为主,分别有8例和17例;HBsAg、抗-HBs和抗-HBc阳性模式1例;其余2例仅HB-sAg和抗-HBs双阳性。结论 HBsAg和抗-HBs同时阳性虽然少见,但具有一定的临床意义,应当引起实验室和临床的注意。     

体检人群乙型肝炎表面抗原检测弱反应的临床研究

目的探讨体检人群乙型肝炎表面抗原检测中弱反应的原因与应对措施。方法采集2008年12月至2009年5月来本院健康体检人群血清1052例,应用酶联免疫法检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg),吸光度值(A)在0.07至0.2之间判读为弱反应,对弱反应样本作双份复检,复检双孔阴性报阴性,复检双孔阳性报阳性,复检双孔一阴一阳加做确认试验,同时对全部弱反应样本进行HBV-DNA检测。结果体检人群1052例血清标本中有41例标本为弱反应,复检双孔为阴性有15例,复检双孔阳性有17例,需加做确认试验有9例,其中有5例确认试验抑制率大于50%确认为阳性,其余4例抑制率小于50%确认为阴性。复检阳性和确认试验阳性的22例标本HBV-DNA检测中有18例其拷贝数大于103copy/mL,且均在103～104copy/mL之间,其余4例拷贝数小于103copy/mL。复检阴性和确认试验阴性的19例标本HBV-DNA检测其拷贝数均小于103copy/mL。结论影响HBsAg检测因素众多,当HBsAg检测为弱反应时,应进行复查和确认试验排除内外源性干扰因素,临床实验室应重视对HBsAg检验中弱反应性标本的确认及报告,尤其是关系到献血、征兵体检时。     

乙型肝炎病毒前S1抗原检测及临床意义探讨

目的观察乙型肝炎病毒前s1抗原（PreS1Ag）与HBeAg及HBV-DNA的关系,探讨PreS1Ag在乙肝病毒（HBV）检测中的实验室诊断价值及临床意义。方法收集乙型肝炎患者512例,检测HBV标志物、PreS1Ag、HBV-DNA。结果HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性者142例,PreS1Ag、HBV-DNA阳性率分别为95．1％、95．8％;HBsAg、HBeAb、抗HBc阳性者316例,PreS1Ag、HBV-DNA阳性率分别为87．0％、88．9％;HBsAg、抗HBc阳性者54例,PreS1Ag、HBV-DNA阳性率分别为88。9％、92．6％,说明HBsAg阳性时,HBeAg阴性或HBeAb阳性／阴性的患者HBV-DNA阳性率仍然很高。HBV-DNA阳性时,PreS1Ag、HBeAg阳性率分别为98．1％、30．4％,两者检出率差异有显著性（P〈0．01）。结论PreS1Ag较HBeAg更敏感地反映HBV复制状况。