Vero细胞在人用狂犬病疫苗中的研究和应用进展

Vero细胞是WHO认可的疫苗生产用细胞,已成为全世界疫苗生产推荐的细胞基质.因其易于生长、可在微载体的发酵罐中大规模扩增、可模式化培养且在限定代次内细胞性状比较稳定的特点,受到疫苗研发与生产工作者的青睐.Vero细胞正式用于人用狂犬病疫苗的生产也有40多年的时间,对狂犬病疫苗的推广使用和狂犬病的预防发挥了重要的作用....     

人用狂犬病疫苗及其应用研究进展

狂犬病是由狂犬病毒引起的人兽共患疾病,尚无有效治疗方法,其预防措施主要为暴露前或暴露后接种人用狂犬病疫苗。随着科技的进步,人用狂犬病疫苗的生产工艺不断发展创新,疫苗质量不断提高,为人类抵抗狂犬病提供了更安全、有效的防控手段。然而,狂犬病免疫预防目前亟待解决疫苗接种依从性差、接种率低等难题。我国须积极探索有效应对策略,加速更新现有免疫程序,切实提高狂犬病疫苗接种率,尽早实现2030年消除狂犬病的目标。     

人用狂犬病疫苗预防接种副反应及处理

目前国内使用的人用狂犬病疫苗,多为狂犬病固定毒适应株,接种于Vero细胞,培养后收获病毒液,经浓缩、纯化、精制并加氢氧化铝制成.副作用小,使用安全,偶尔发生过敏反应,有极个别的人注射后会出现重度过敏或诱发其他疾病.下面就人用狂犬病疫苗接种后常见的副反应及处理原则综述如下.     

人用狂犬病疫苗作为狂犬病毒抗原检测阳性对照的意义

目的探讨人用狂犬病疫苗能否作为目前应用的快速诊断狂犬病毒抗原的ELISA试剂盒的阳性对照。方法在对四川省犬只唾液和脑组织进行狂犬病带毒情况的流行病学调查时,同时加用人用狂犬病疫苗作阳性对照,比较试剂盒中标准阳性对照与抗原阳性对照的差异。结果①人用狂犬病疫苗作为阳性对照的灵敏度、特异度高,为100%,诊断粗符合率和调整一致性也均为100%。②标准阳性对照和抗原阳性对照的阳性率间没有差异。结论人用狂犬病疫苗稳定性较好,可用作ELISA抗原检测试剂盒中的阳性对照。     

浓缩人用狂犬病疫苗致过敏反应22例

我站１９９６年３月～１９９７年４月对被犬等动物咬伤者１５００例用浓缩人用狂犬病疫苗进行预防接种，至今无一例发病死亡，其中２２例接种后发生不同程度的过敏反应（占１．４６％），现报告如下。１疫苗来源及使用方法我站使用卫生部成都生物制品研究所生产的浓缩人用...     

人用狂犬病疫苗免疫预防概况

人用狂犬病疫苗免疫预防概况杨裕华，王际莘，王勤忠据新近报道，目前狂犬病仍在全世界８７个国家和地区的２４亿人群中流行，估计每年因狂犬病而死亡者约有３５０００人［１］。对于狂犬病，人们在力图使狂犬病患者恢复健康所做的努力失败以后，学者们认为能向被咬伤者（...     

人用狂犬病纯化疫苗(Vero细胞)临床观察及免疫学效果研究

目的　研究人用狂犬病纯化疫苗的安全性和保护性。方法　采用狂犬病疫苗暴露后免疫程序接种受试人群 ,I期临床接种 2 0人 ,II、III期临床接种 30 4人 ,观察注射后反应 ,采用小鼠脑内中和试验法测定其中 6 2人中和抗体水平。结果　全部受试者有 13.2 7%出现轻度副反应 ,无中强度副反应 ,中和抗体阳转率为 10 0 % ,中和抗体GMT为 11.89IU/ml。结论　该疫苗对人体安全且具有较好的免疫原性     

人用组织培养狂犬病疫苗皮内免疫的研究进展

人用组织培养狂犬病疫苗皮内免疫的研究进展张永华，张洪赞，耿素云综述黄捷通审校在发展中国家，由于狗咬伤所致的人类狂犬病作为一重要的社会卫生问题多年来一直被ＷＨＯ列入重点预防和控制的疾病。对高危人群和暴露者，注射狂犬病疫苗是预防和控制狂犬病的重要措施之一...     

人用纯化Vero细胞狂犬病疫苗中硫酸鱼精蛋白残留量的测定

用硫酸鱼精蛋白可去除 vero细胞狂犬病疫苗中残存的细胞基质 DNA,使其残余量小于 10 0 pg/剂量 ,但经一系列处理后的疫苗中硫酸鱼精蛋白应无残留 ,方认为安全可靠。我们采用毛细管电泳法 ,检测该种疫苗中硫酸鱼精蛋白残留量 ,在待检样品中硫酸鱼精蛋白未检出 ,该方法最小检出量为 3ppm。     

人用浓缩狂犬病疫苗人体反应观察

我国现行的地鼠肾细胞培养人用狂犬病疫苗,经多年使用证实免疫效果肯定．反应轻微,但也存在极少数免疫失败病例[1、2]究其原因,除了疫苗的保存、运输、正确使用以及伤口的妥当处理外,疫苗本身的致价及稳定性至关重要。为此,各生研所根据1993年全国人用技犬病疫苗会议纪要,于1994年开始生产浓缩疫苗,浓缩后的抗原量增加,效价明显提高．但有关毒性和致敬成份也相应增加。因此,本观察对浓缩兹及原信苗（以下称浓苗和原苗）作了反应观察比较。结果如下：材料和方法一、疫苗和分组系卫生部武汉生物制品研究所生产的地鼠肾培养人用狂犬病…     

人用地鼠肾细胞狂犬病疫苗纯化工艺中上样量的选择

经过Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ 4ＦＦ凝胶柱层析法〔1〕纯化的人用地鼠肾细胞狂犬病疫苗 ,其杂蛋白去除率可达99 %以上 ,副反应率较现行的 3- 5倍浓缩疫苗明显降低 ,且免疫效价可达 3.7ＩＵ /ｍｌ以上 ,值得大力推广并最终取代浓缩疫苗。在深入研究纯化工艺最佳条件时 ,发现待纯化的浓缩疫苗上样量的多少直接影响纯化后疫苗的质量 ,研究结果表明 ,上样量为柱床体积的 10 %以下时 ,纯化效果最佳。1　材料和方法1.1　细胞与病毒培养　使用 12～ 14ｇ健康金黄地鼠 ,无菌取肾 ,按常规方法制备单层细胞 ,用 3Ｌ转瓶 37℃及 33℃常规培养 ,于接种后第 4…     

人用狂犬病疫苗肌肉注射免疫程序研究进展

狂犬病尚无有效治疗方法,其预防措施主要为暴露前或暴露后接种人用狂犬病疫苗。随着狂犬病疫苗生产工艺的发展,疫苗质量不断提高,其免疫程序也在不断改进。目前,国内普遍采用肌肉注射方法进行狂犬病疫苗接种,暴露前免疫程序为在第0、7、21或28天(0、7、21或28 d)各注射1剂疫苗;暴露后免疫程序为5针法和2-1-1法,再暴露免疫程序则根据第1次暴露后免疫后间隔时间的不同,接种不同剂次的疫苗。2018年《狂犬病疫苗:WHO立场文件》根据狂犬病研究的最新进展,对狂犬病暴露预防免疫程序进行了简化。本文将在新立场文件的基础上,对国内外狂犬病暴露预防处置程序研究进展进行总结,并就我国狂犬病疫苗免疫程序与新立场文件倡导的免疫程序间存在的差异及改进方案加以讨论。     

2005～2010年新疆哈密三道岭人用狂犬病疫苗接种结果分析

目的了解新疆哈密三道岭矿区人用狂犬病疫苗接种状况,分析其原因,提高接种率。方法对2005-2010年三道岭矿区犬科动物咬伤后,人用狂犬病疫苗的接种资料进行分析,探讨相关因素对接种率的影响。结果犬类咬伤后,人用狂犬病疫苗的接种率呈上升趋势。结论提升群众对狂犬病危害的认识水平,提高及时接种率和全程免疫率。     

人用狂犬病疫苗和被动免疫制剂研发进展

狂犬病(Rabies)是由狂犬病毒(Rabies virus)引起的一种人兽共患病。人一旦发病致死率几乎100%。目前预防狂犬病的人用疫苗为狂犬病毒灭活疫苗。随着基因工程技术的进步,新一代以狂犬病毒G蛋白(Glycoprotein)为免疫原的疫苗在开发中,包括不同表达系统的G蛋白亚单位疫苗,G蛋白DNA疫苗,G蛋白病毒载体疫苗等。同时本文还探讨了未来可能取代狂犬病免疫球蛋白的被动免疫制剂(单克隆抗体)的研发进展。     

Vero细胞口服狂犬病疫苗的研究

本试验采用ＣＴＮ－１株经Ｖｅｒｏ细胞传１５代，病毒滴度均在７．０～８．０ｌｏｇＬＤ５０／ｍｌ之间。给８只犬分别口服８．１ｌｏｇＬＤ５０的疫苗３０天的中和抗体几何平均效价为１：１１０，中和抗体的平均国际单位为２．５９ＩＵ／ｍｌ，阳转率为１００％；给４只犬分别口服７．４３ｌｏｇＬＤ５０的疫苗，阳转率为５０％，中和抗体的平均国际单位为２．４８ＩＵ／ｍｌ。选用３５－６０日龄的乳犬１６只口服１０个剂量的疫苗，并在口服后５、１０、２０天、３个月各杀３只犬取脑及唾液腺分别在ＢＨＫ２１细胞上盲传２代，同时在昆明种小白鼠乳鼠脑内盲传２代，进行病毒分离，均为阴性，余下犬观察１２个月均正常。总之该口服狂犬病疫苗对犬具有较好的安全性及口服免疫原性。     

人用无佐剂狂犬病疫苗全程免疫后抗体水平动态研究

狂犬病是由狂犬病病毒感染温血动物和人的中枢神经系统后引发急性致死性脑脊髓炎的一种人兽共患传染病,狂犬病是迄今为止人类病死率最高的急性传染病之一,无特效的治疗药物,一旦发病死亡率几近100％。我国是狂犬病的高发地区,在狂犬病的预防工作中,能使用安全有效的人用狂犬病疫苗,有着十分重要的意义。     

果子狸咬伤致狂犬病死亡病例报告

目的 分析1例果子狸咬伤致狂犬病死亡病例,为今后狂犬病防控提供参考.方法 对该病例进行流行病学调查和分析.结果 该病例被果子狸咬伤后未进行正规的伤口处置和免疫注射,48 d后出现狂犬病的临床症状和体征,在县级、省级医院均被诊断为狂犬病,于发病第7天死亡.结果 该病例被果子狸咬伤后导致感染狂犬病病毒死亡,被野生动物咬伤抓伤可能会导致狂犬病毒感染,应及时正确处理伤口,接种人用狂犬病疫苗和狂犬病免疫球蛋白.     

BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)在食蟹猴体内的免疫原性

目的 评价BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)在食蟹猴体内的免疫原性。方法 将食蟹猴随机分为对照组、3针组及4针组,经后肢肌肉免疫,1.0 mL/剂。3针组及4针组均接种BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗,3针组于0 d、7 d、21 d各接种1剂,4针组于0 d、3 d、7 d、14 d各接种1剂;对照组接种市售国产同类疫苗,于0 d注射2剂、7 d及21 d各1剂。初免前(0 d)及初免后7 d、14 d、28 d、35 d、49 d、63 d后肢隐静脉采血,分离血清及外周血淋巴细胞。快速荧光灶抑制实验(Rapid Fluorescent focus Inhibition Test, RFFIT)及酶联免疫斑点检测技术(Enzyme-linked Immunospot Assay, ELISPOT)分别检测血清中抗狂犬病病毒中和抗体水平和外周血淋巴细胞中细胞因子IFN-γ、IL-2的表达水平。结果 食蟹猴血清中和抗体水平于免疫前均呈阴性(抗体效价<0.5 IU/mL),3针组和对照组在初免后7～28 d呈上升趋势,于28 d达最高,4针组在14 d...     

地鼠肾细胞狂犬病疫苗的纯化研究

我们应用凝胶过滤及离子交换柱层板法对地鼠肾细胞狂犬病疫苗进行纯化,结果表明,凝胶柱层析法即可使该疫苗效价达到４．８ＩＵ／ｍｌ,小牛血清残留置小于５０ｎｇ／ｍｌ,符合《中国生物制品规程》要求。并经离子交换柱层板后,效力降低至１．９ＩＵ／ｍｌ,病毒损失较大。故只采用凝胶过滤柱层析法做为该苗的纯化工艺,并为大规模生产提供依据。     

狂犬病疫苗免疫人B细胞受体库的高通量测序分析北大核心CSCD

目的对志愿者接种商业化狂犬病病毒疫苗前后的B细胞受体库进行高通量测序,探讨志愿者接种前后B细胞受体库互补决定区3表达谱的变化情况,为了解B细胞生物学作用、评估疫苗作用等提供参考。方法以商业化狂犬病病毒疫苗分别注射4个志愿者,分离外周血单核细胞,提取PBMC总RNA,对总RNA进行逆转录获得cDNA,以cDNA为模板进行多重PCR,后通过Illumina HiseqtmXten(novaseq)平台进行高通量测序和生物信息学分析。结果通过接种RABV疫苗,志愿者BCR的多样性改变但变化无统计学意义。V/J区基因片段的序列使用频率以及V-J基因组合改变,其中IGHJ1基因与IGHV1-3、IGHV3-20、IGVH3-7和IGHV2-26使用频率升高,免疫前后差异有统计学意义;8个V-J组合在免疫前后差异有统计学意义。鉴定了疫苗免疫诱导B细胞克隆后高频扩增(>0.4%)的CDR3氨基酸克隆序列与核苷酸克隆序列,发现同一志愿者中,接种疫苗后与接种疫苗前相比高频克隆序列的大部分频率发生变化,并且不同志愿者之间的序列不同;此外还了解高频序列和对应多肽的性质,如等电点和平均亲水性。结论通过高通量测序对狂犬病病毒疫苗免疫后的人BCR进行了定量分析,发现了狂犬病疫苗免疫人后BCR表达谱的变化情况,为了解B细胞在保护宿主免受RABV感染和改善疫苗反应的生物学作用提供实验性数据。