乙型肝炎病毒酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸基序变异加重4例

拉米夫定是全球和我国第一个被批准作为抗乙型肝炎病毒（HBV）的核苷类药物,它可以有效地抑制HBV的复制,但是随着疗程的延长,HBV出现酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸基序（YMDD）变异的概率增加,HBV变异后产生对拉米夫定耐药,其中仅少数患者病情加重,现对拉米夫定治疗的4例乙型肝炎患者出现YMDD变异后加重的原因进行具体分析。     

乙型肝炎病毒YMDD变异的研究进展

近年来,拉米夫定成为临床上抗乙型肝炎病毒(HBV)最常用的药物,越来越多的报道显示长期应用拉米夫定可诱发HBV P区变异,从而形成拉米夫定耐药株,其主要表现形式为酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸基序(YMDD),这将使病人对拉米夫定产生耐药,甚至病人病情恶化[1].因此,HBV P区YMDD变异日益受到关注.本文根据近年来对HBV YMDD变异的研究报道,从对HBV YMDD的检测方法、其与HBV基因型的关系、以及与肝功能损伤程度的关系等方面对HBV YMDD变异研究做以综合性论述,相信对HBV YMDD变异的进一步研究起到积极作用,对防治HBV病毒也有着重要的意义.     

嘉兴地区拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者YMDD变异率分析

拉米夫定是有效的抗乙型肝炎病毒(HBV)药物,已在临床广泛应用,但可因YMDD变异而耐药。对拉米夫定的耐药机制,国外学者从不同的角度进行了研究:有些学者认为拉米夫定治疗过程中出现     

乙型肝炎病毒YMDD变异相关因素分析

核苷类似物拉米夫定作用于乙型肝炎病毒（HBV）多聚酶（HBVP）活性部位YMDD基序（酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸,YMDD）,抑制HBVDNA复制,抗病毒效果显著。但长期应用可使HBV发生YMDD变异,影响拉米夫定的疗效。为了解YMDD变异是由抗病毒药物所致,抑或是在治疗前变异株即存在,我们观察研究了拉米夫定治疗前后患者血清HBV YMDD变异及相关指标。     

未经抗病毒治疗的乙型肝炎病人的乙肝病毒YMDD变异分析

目的探讨未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者中HBV多聚酶YMDD变异情况及与乙肝血清标志物等之间的相关性。方法在进行HBV-DNA定量检测基础上,根据HBV-DNA含量不同随机选取89例未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者,同时进行YMDD变异及乙肝三系检测。结果89例未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者YMDD变异率达13.5%,YM-DD变异株以YIDD为主,占12.4%,YVDD占1.1%,并且其变异主要发生在HBeAg阳性患者中,HBeAg阳性变异株占10.1%,HBeAb阳性占3.4%。结论未经抗病毒治疗的乙肝患者中仍存在较高的YMDD变异率,变异者中以YIDD变异株为主,且主要发生在HBeAg阳性患者当中。     

乙型肝炎病毒YMDD变异检测的临床意义

目的探讨酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸（YMDD）变异对拉米呋定治疗慢性乙型肝炎效果的影响。方法对临床344例慢性乙肝患者进行HBV-DNA定量、YMDD变异及ALT检测,比较患者进行拉米呋定治疗前后各测定值的变化。结果拉米呋定治疗1年后有53例患者出现YMDD变异,2个变异株之间HBV-DNA含量差异无统计学意义;变异组治疗前后的丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平差异无统计学意义,而变异组与未变异组的ALT水平差异有统计学意义。结论拉米呋定是目前普遍使用的治疗慢性乙肝的核苷类似药物,但用药后易引起HBV基因组突变而使HBV产生耐药性,降低治疗的效果,建议临床上检测YMDD变异株,及时调整治疗方案。     

慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗后出现YMDD变异的相关因素分析

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者在服用拉米夫定治疗后发生YMDD变异的相关因素.方法 选择应用拉米夫定治疗后产生YMDD变异和未产生YMDD变异的CHB患者各50例,分析两组治疗前血清病毒载量水平、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、HBeAg状态与发生YMDD变异的关系.结果 YMDD变异组治疗前HBV DNA水平高于未...     

乙型肝炎病毒YMDD变异与基因分型及临床关系的研究

目的了解青岛市乙型肝炎患者乙型肝炎病毒（HBV）基因变异特征,探讨HBV YMDD变异与基因分型、DNA载量及临床分型的关系。方法应用实时荧光聚合酶链反应（PCR）技术对820例乙肝患者血清进行基因变异检测,HBV DNA定量监测及基因分型检测。结果 820例HBV感染者中检出YMDD变异154例,变异率18.78%;各基因型间YMDD变异的差异有统计学意义,P〈0.05;患者HBeAg阳性与否与YMDD变异差异有统计学意义（P〈0.05）,HBeAg阳性者更易发生变异;HBV感染者临床分型各组间YMDD变异的差异有统计学意义（P〈0.05）,其中以LC（36/113）、CHB（97/368）为主;病毒变异在性别、年龄及DNA载量各组间的差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论 HBV YMDD变异的监测对乙肝患者的治疗、病情预测和转归都有重要临床意义。     

Taqman MGB双探针方法检测慢性乙型肝炎病毒YMDD变异的研究

目的:探讨Taqman MGB双探针方法检测慢性乙型肝炎病毒YMDD变异的可靠性。方法:采用荧光定量PCR法检测HBV-DNA含量,Taqman MGB双探针方法和测序方法检测其YMDD变异,以测序方法为参考方法,评价Taqman MGB双探针方法的可靠性。结果:246例HBV DNA阳性患者血清标本中,TaqmanMGB双探针方法阳性检出率100%,100例正常对照全部为阴性;YMDD无突变106例,YMDD有突变(YIDD变异 YVDD变异)140例,与核酸测序方法比较,符合率100%。该方法经过敏感度实验,最低检出下限为1×103copies/ml。结论:Taqman MGB双探针方法能便捷、灵敏、特异地检测YMDD基序变异情况,适用于临床检测慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗的YMDD基序变异。     

乙型肝炎病毒YMDD变异与原发性肝癌相关性研究

目的探讨原发性肝癌与乙型肝炎病毒(HBV)YMDD变异的关系。方法应用实时荧光聚合酶链反应(PCR)技术检测HBV YMDD变异情况,结合血清生化指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)及天门冬氨酸氨基转移酶(AST),分析慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)和肝细胞癌(HCC)各组变异与肝癌有无相关性。结果 HCC组、LC组、CHB组HBV YMDD变异率分别为11.67%(7/60)、31.67%(19/60)、26.67%(16/60)。HCC组、LC组及CHB组中ALT活性分别为56(25～113)、61(23～301)、58(31～267)U/L,而AST活性分别为105(39～137)、64(25～109)和55(33～214)U/L。60例HCC患者中有HBV YMDD突变7例,突变率为11.67%。结论肝癌发生与HBV YMDD变异不存在明显相关性。AST比ALT更能反应HBV引起肝脏损伤的严重程度,而ALT是与HBV YMDD变异有关的较为敏感的肝功能指标,有利于病情监测。     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎诱发YMDD变异相关因素分析

目的探讨拉米夫定治疗慢性乙型肝炎(简称乙肝)诱发乙肝病毒(HBV)发生YMDD(酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸)变异的相关因素。方法采用PCR结合Taqman探针技术检测YIDD/YVDD变异,并对120例服用拉米夫定的慢性乙肝患者治疗前的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、HBVDNA水平进行分析。结果 120例患者经拉米夫定治疗72周,有34.17%(41/120)的慢性乙肝患者血中HBV发生YMDD病毒变异。拉米夫定联合干扰素治疗组YMDD变异率低于单用拉米夫定治疗组,HBV发生YMDD病毒变异与患者的治疗方案有关,差异有统计学意义(P0.01),与HBVDNA水平呈正相关;与ALT水平呈负相关。结论服用拉米夫定治疗前严格根据患者的HBVDNA载量和ALT水平选择最佳治疗方案和治疗时机,是减少耐药、提高疗效的关键。     

未经抗病毒治疗的HBV P基因YMDD基因序列变异及与基因型的关系

目的了解有些患者体内HBVP基因酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸（YMDD）基因序列（基序）变异系药物所致，抑或是其本身与野生病毒株共存，以便指导应采用的抗病毒治疗方案。方法应用PCR-微板杂交-ELISA法对未经中西药抗病毒治疗的152例慢性乙型肝炎（慢性乙肝）、18例乙型肝炎肝硬化（乙肝肝硬化）患者共170份血清标本检测了YMDD变异毒株及其基因分型。结果170例患者中有14例（8．24％）检测到YMDD自然变异毒株，14例中慢性乙肝12例、乙肝肝硬化2例，年龄在31～56岁者10例（71．43％）。HBeAg阳性／抗-HBe阴性12例（85．71％），HBeAg阴性／抗-HBe阳性及HBeAg阴性／抗-HBe阴性各1例（各占7．14％），与YMDD自然变异阴性组的性别、年龄、疾病种类及HBeAg阳性／抗-HBe阴性所见相比，差异无统计学意义。ALT大于2倍正常值者9例（64．29％），最高为1072U／L。14例中C型9例（64．29％），9例中有8例为HBeAg阳性／抗HBe阴性，此9例中7例为慢性乙肝，另2例为乙肝肝硬化患者；5例为非B非C（NBNC）型，未见B型和B、C混合型者。HBVDNA定量除1例C型为8．46×10^4拷贝／ml外，余13例（92．86％）均大于1×10^6拷贝／ml，最高为5．70×10^4拷贝／ml，与YMDD自然变异阴性组相比，差异有显著性。结论HBV的YMDD自然变异可在患者体内感染慢性化的过程中发生，与野生毒株同时共存。其发生与性别、年龄、疾病种类及HBeAg是否阳性无关。多见于C型、HBV含量中等以上、有明显肝脏损害者。     

乙型肝炎患者HBV-DNA载量及基因型与YMDD变异的相关性研究

慢性持续性乙肝病毒（mV）感染，可导致严重肝病，并可进一步发展为肝硬化和肝癌。拉米夫定具有抑制HBV复制，使肝功能正常化、肝组织病理学改善、副作用小等优点。但服用拉米夫定后，将诱发HBV-DNA聚合酶活性区酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸（YMDD）发生变异，从而导致机体产生耐药，并且这种变异与服药时间的长短有关。作者对128例经拉米夫定治疗20-96周后的乙肝患者进行回顾性分析，检测治疗前后HBV-DNA水平及基因型分析，以及治疗后YMDD变异情况，旨在探讨病毒变异与血清HBV-DNA水平及基因型的相关性，并初步探讨其临床意义。     

乙型肝炎患者HBV-DNA载量及基因型与 YMDD变异的相关性研究

<正>慢性持续性乙肝病毒(HBV)感染,可导致严重肝病,并可进一步发展为肝硬化和肝癌。拉米夫定具有抑制HBV复制,使肝功能正常化、肝组     

三种方法检测乙型肝炎YMDD变异的比较研究及临床结果分析

目的对检测乙型肝炎病毒(HBV)YMDD变异的3种方法进行灵敏度和特异性比较,并结合患者治疗前HBV DNA载量、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平免疫标志物和YMDD变异后HBV DNA载量等临床信息进行结果分析。方法分别以荧光定量PCR(FQ-PCR)、通用模板信号扩增PCR(UT-PCR)和聚合酶链反应微板核酸杂交-酶联免疫吸附法(PCRmnh-ELISA),对拉米夫定治疗过程中血清出现HBV DNA由阴转阳的52例慢性乙型肝炎患者,进行HBV YMDD变异检测,比较3种方法的敏感性,并对3种方法检测结果不一致的标本进行测序,比较他们的特异性。结果FQ-PCR、UT-PCR和PCRmnh-ELISA对YMDD变异的检出率分别为:53.85%、48.08%、73.07%,FQ-PCR和UT-PCR均与PCRmnh-ELISA差异有统计学意义(P<0.05),FQ-PCR与UT-PCR差异无统计学意义(P>0.1)。检测结果不一致的17例标本进行了测序,FQ-PCR、UT-PCR、PCRmnh-ELISA与检测结果的符合率分别为94.1%、70.6%、29.4%,3者之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论3...     

乙型肝炎病毒YMDD变异的研究探索

近年来,拉米夫定（Lamivudine）、阿德福韦酯（Adefovir）等已成为临床上抗乙型肝炎病毒（HBV）最常用的药物,但患者长期服用此类药物可诱导HBV发生变异,越来越多的研究也证实了长期应用拉米夫定可诱发HBV基因变异,从而形成拉米夫定耐药株,拉米夫定的耐药情况常常发生在HBV逆转录酶C区上的YMDD基序与保守B区[1].     

海南地区拉米夫定抗乙肝病毒治疗YMDD变异

目的：探讨拉米夫定治疗后乙肝病毒发生YMDD变异情况，及未接受拉米夫定治疗的乙型肝炎患者中是否存在天然变异的情况。方法：采用聚合酶链式反应（PCR）结合Taqman荧光技术对海南地区110例慢性乙肝患者进行HBV YMDD检测，一组80例接受拉米夫定治疗及保肝治疗，另一组30例为对照组只给予保肝治疗，治疗1年对患者HBV多聚酶基因YMDD基序定性检测，观察是否有突变。结果：拉米夫定治疗组在用药1年后有31例发生YMDD突变．其中YIDD变异有15例，YVDD变异有7例，YIDD＋YVDD变异有9例，变异株中有19例伴HEV DNA、ALT水平高于正常水平；而对照组有11例发生YMDD突变．其中YIDD变异有2例．YVDD变异有1例．YIDD＋YVDD变异有8例。结论：在未经抗病毒治疗的慢性乙肝患者中存在YMDD变异株，临床上在应用拉米夫定对慢性乙型肝炎患者进行抗病毒治疗前．应对患者是否存在YMDD变异加以重视。     

PCR-荧光探针法检测乙型肝炎病毒YMDD变异与DNA序列分析法的比较

目的 评估聚合酶链反应(PCR)-荧光探针法用于乙型肝炎病毒基因聚合酶区YMDD变异检测的敏感性、特异性和准确性.方法 采用PCR-荧光探针法和DNA序列分析法,平行比对检测202份标本中HBV YMDD变异情况.结果 以DNA序列检测分析为相对标准,PCR-荧光探针法检测YMDD变异的相对灵敏度为99.06%,相对特...     

Taqman MGB探针分型技术检测HBV YMDD变异及其临床应用

目的:建立一种快速准确的HBV YMDD变异检测方法,用于乙肝患者拉米夫定治疗中耐药性突变的监测.方法:采用三种特异性Taqman MGB探针和一对共同引物,分别针对总HBV、YIDD变异、YVDD变异的三管并行检测,以确定YMDD变异的类型及其在病毒群中的比例.以序列直接测定法作为诊断YMDD变异的金标准,对该方法YMDD变异检测的灵敏度、特异性和诊断符合率作评价.并对112例经拉米夫定治疗的血清HBV DNA持续阳性的乙型肝炎患者检测其YMDD变异情况.结果:该方法检测YIDD、YVDD的最低检测界限为1 000 Copies/mL,能在106 Copies/mL病毒群中检出0.1%的变异株的存在.以直接测序方法为金标准,该方法YMDD变异检测的灵敏度为100%、特异性为96%,诊断符合率为97.5%.该方法检测112例患者37例发生YMDD变异,阳性率为27.2%.结论:该方法能够直接检测HBV YMDD变异的类型及其在病毒群中的比例,具有快速、灵敏、准确、经济实用等优点,适合临床实验室开展拉米夫定耐药性突变的监测.