酶法糖化血红蛋白试剂盒方法学比对评价

目的评估一种酶法测定糖化血红蛋白（HbAlc）试剂盒的性能。方法酶法测定HbAlc,评价的方法学指标为试剂盒的线性范围、不精密度、抗干扰性、回收率,并分别与免疫法和高效液相（HPLC）法进行相关及偏倚分析。结果该试剂盒的检测在4．3-12．9％呈线性;不精密度测定低、中、高值批内及批间CV在0．89％～1．43％之间,总CV在1．77-2．16％;HbAlc标准为5．5％和10．5％其回收率分别为99．0％、102．1％;干扰实验：维生素C〈500mg／L、胆红素〈400mg／L、溶血素〈5000mg／L、乳糜〈2％时,对结果无明显干扰（干扰率（±5％）。酶法HbAlc与免疫法和HPLC法的测定结果比较其回归方程分别是：Y=1．0417X-0．7187和Y=0．9881X-0．0944,相关系数均为r=0．99,P〈0．05,检验方法之间具有显著的统计学意义,经验证酶法测定HbAlc与免疫法和高效液相法的偏倚都在允许范围内。结论酶法HbAlc试剂盒在不精密度、抗干扰性、线性范围均符合临床要求,与常规方法比较相关良好偏差较小,可完全满足临床对HbAlc检测需求。     

胶乳增强免疫比浊法测定血清Ⅳ型胶原蛋白的使用评价

目的对胶乳增强免疫比浊法定量测定血清Ⅳ型胶原蛋白的方法进行临床实验评价。方法实验评价包括精密度、线性测定、前带反应、相关性、回收实验以及干扰实验。结果胶乳增强免疫比浊法测定血清Ⅳ型胶原蛋白批内精密度测定CV％为2．47％～3．48％,批间精密度测定CV％为3．46％～4．07％,回收率为96．2％～99．3％。线性测定良好,可接受范围为800ng／mL,回归方程为Y=1．0118X-1．7883,不同质量浓度的标准品检测相关性r2—0．9999,Y=1．0031X-1．2362。对胆红素、血红蛋白、甘油三酯均具有很好的抗干扰能力。结论利用胶乳增强免疫比浊法在全自动生化仪上测定血清Ⅳ型胶原蛋白的结果符合临床使用的要求。     

胶乳增强免疫透射比浊法测定血清胱抑素C的方法学评价

目的对胶乳增强免疫透射比浊法测定血清胱抑素C进行方法学评价。方法用免疫透射比浊法测定血清胱抑素C,依据美国临床实验室标准化委员会EP9-A2文件要求进行精密度、线性关系、回收试验、干扰试验以及与颗粒增强的免疫散射比浊法比较等系列试验。结果胶乳增强免疫透射比浊法在0.64～8.05mg/L范围内线性良好,相关方程为Y=1.024 8 X-0.094 3;批内、批间平均变异系数均小于5%;平均回收率为94.7%;5.0g/L和10.0g/L血红蛋白、3.5mmol/L和8.0mmol/L三酰甘油、79.3μmol/L胆红素干扰物对测定干扰均小于3%;与颗粒增强散射免疫比浊法比较,回归方程为Y=1.00 7 X-0.016 4,r=0.993 7,两种方法具有高度相关性(P<0.01)。结论胶乳增强免疫透射比浊法法干扰因素少、重复性好、线形范围较宽并与颗粒增强散射免疫比浊法有很好的相关性,操作简单,完全符合实验室常规检测的需要。     

乳胶增强免疫比浊法测定髓过氧化物酶试剂盒性能验证评价

目的：评价血浆髓过氧化物酶（MPO）乳胶增强免疫比浊法试剂盒在AU2700全自动生化分析仪使用的性能验证。方法根据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的评价方案对北京九强公司生产的乳胶增强免疫比浊法髓过氧化物酶测定试剂盒进行了回收试验、干扰试验、临床可报告范围及精密度验证。结果北京九强生产的MPO乳胶增强免疫比浊法试剂盒的两个浓度水平质控品的实验室精密度CV为8．9％;回收率95．7％～108．3％。线性评价的相关系数r＝0．997,线性回归方程为Y＝1．033X-25．092;干扰试验中不同程度的标本溶血均对测定MPO造成严重干扰。抗坏血酸6．3～100mg/L,三酰甘油小于7．8mmol/L内无明显干扰,相对偏差小于10％,三酰甘油浓度大于7．8mmol/L对试验有明显干扰,相对偏差为11．5％～11．9％。结论九强公司在国内首次推出的髓过氧化物酶（MPO）乳胶增强免疫比浊法试剂盒在抗干扰、线性、正确度及精密度等方面的性能达到临床需求,值得在临床心脑血管危险因子检测中推广应用。     

胶乳增强免疫比浊法测量肌钙蛋白的方法学评价和应用

[目的]探讨肌钙蛋白I（cTnI）胶乳增强免疫比浊法测定的方法学性能及其临床应用。[方法]对胶乳增强免疫比浊法检测cTnI进行相关性、线性范围、精密度和抗凝剂干扰的检测,并对149例体检正常对照人员进行测定,确定参考范围。[结果]胶乳增强免疫比浊法检测cTnI相关性（r^2=0.989）;线性范围为0-25 ng/ml;批内及批间精密度均小于10%;EDTA-K2对测定有负干扰;正常对照组参考范围0-1.45 ng/ml。[结论]该法相关性好、线性范围宽、精密度高、肝素抗凝剂干扰小,具有较高的临床应用价值。     

胶乳增强免疫比浊法定量测定血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的方法学评价及临床应用

目的：对胶乳增强免疫比浊法（LEIA）定量测定血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）进行方法学评价并探讨其初步的临床应用。方法应用美国临床实验室标准化协会（ CLSI）的标准化评价方案评价LEIA测定血浆NGAL的不精密度、回收率、线性范围、抗干扰性、稳定性等指标。同时测定86例2型糖尿病（T2DM）患者（其中包括41例糖尿病肾病（DN）患者）、40名体检健康者（正常对照组）的血浆NGAL水平。结果LEIA测定血浆NGAL 低、高水平的批内变异系数（ CV）分别为3．76％、1．79％;日间 CV 分别为6．62％、3．45％。平均回收率为97．3％～104．6％;在0～5000μg／L内线性良好,线性范围内偏差＜8％。与进口同类试剂盒（粒子增强免疫比浊法）具有高度相关性（R2＝0．9966）,两种检测方法在200和700μg／L处的偏倚分别为3．66和11．79μg／L,均满足厂家规定的要求。总胆红素≤600μg／L、血红蛋白≤10 g／L、维生素C≤0．6 g／L、甘油三酯≤15 mmol／L时对LEIA测定血浆NGAL均无明显干扰;试剂在仪器2～8℃的条件下放置,至少可保存稳定35 d;20名健康体检者血浆NGAL水平均处于厂家声明的参考区间内。正常对照组、T2DM组和DN组血浆NGAL水平呈逐步增高趋势,各组间差异均有统计学意义（P均＜0．01）。血浆NGAL与血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cys C）、肌酐（Cr）呈正相关（相关系数分别为0．58、0．43,P均＜0．01）。结论 LEIA测定血浆NGAL具有较高的灵敏度和精密度,所测结果准确可靠,能直接在自动生化分析仪上使用,操作简便、快速,适用于大批量测定。     

高效液相色谱法与胶乳凝集法测定糖化血红蛋白的比对分析

目的比较HPLC法与胶乳凝集免疫比浊法测定糖化血红蛋白的结果差异。方法使用HPLC法全自动糖化血红蛋白仪与日立7170A全自动生化分析仪用胶乳凝集免疫比浊法分别测定糖化血红蛋白，对结果进行分析比较。结果HPLC法G7糖化血红蛋白仪与胶乳凝集免疫比浊法生化分析仪测定糖化血红蛋的结果有非常显著的差异（P〈0．01），胶乳凝集免疫比浊法较HPLC法结果明显偏高，两法的批内不精密度和日间不精密度分别〈5％，均有较好的精密度。以HPLC法为参考，胶乳凝集免疫比浊法结果的偏倚为17．26％。结论HPLC法与胶乳凝集免疫比浊法测定糖化血红蛋的方法均有较好的精密度，但要注意两方法之间有一定的差异。应以HPLC法作为参考方法，对胶乳凝集免疫比浊法的结果进行校准。     

胶乳增强免疫比浊法测定降钙素原方法学评价及临床意义

目的：对降钙素原（PCT）胶乳增强免疫比浊检测试剂盒进行性能评估并且探讨在脓毒症评估中的应用价值。方法采用胶乳增强免疫比浊试剂测定 PCT,根据美国临床实验室标准化协会（CLSI）的标准化评价方案对方法进行精密度、回收率、线性、抗干扰等评价及临床应用。结果在0.5μg／L 和2.0μg／L 这2个医学诊断水平,此方法批内和日间变异系数分别为CV＜5.0％和 CV＜2.0％,平均回收率为100.6％。检测线性范围为0.05～60μg／L,判断依据为 r2＝0.996。试剂在开口1个月和37℃水浴8 d 保存过程中,测值偏差小于10％。跟 Roche PCT 试剂（化学发光法）相比具有高度的相关性。抗干扰性强,总胆红素小于或等于600μmol／L,血红蛋白小于或等于400 mg／dL,三酰甘油小于或等于1000 mg／dL,类风湿因子小于或等于200 IU／mL 对试剂盒的测定均无影响。实验组血清 PCT 检测结果为（14.783±5.654）μg／L,与健康对照组（0.237±0.107）μg／L 比较差异有统计学意义（P ＜0.05）。结论胶乳增强免疫比浊法测定血清 PCT 快速、准确、稳定、可靠、适用于临床脓毒症诊断。     

颗粒增强免疫比浊法测定血清同型半胱氨酸的方法学评价

目的：对胶乳颗粒免疫比浊法测定血清同型半胱氨酸（HCY）的方法学进行初步评价。方法：应用胶乳颗粒免疫比浊法测定HCY的精密度、标准曲线、干扰实验、稳定性实验、并与循环酶法测定血清HCY的结果进行相关性分析。结果：颗粒增强免疫比浊法测定HCY的精密度（批内CV为1.87%、0.75%,批间CV为2.29%、5.35%）较高;HCY浓度在0μmol/L～50μmol/L范围内线性良好;当抗坏血酸浓度1107mg/L、胆红素浓度445 umol/L、血红蛋白浓度6.7 g/L;甘油三酯浓度14.6 mmol/L、氨离子浓度75 umol/L时均未对测定结果产生干扰;试剂开瓶后稳定周期也可达到25天;颗粒增强免疫比浊法和循环酶法测定HCY相关性良好（y =0.9904x ＋0.0813,r=0.9981）。结论：颗粒增强免疫比浊法测定血清HCY具有较高的精密度,结果准确可靠,适合临床实验室推广。     

两种方法检测Lp(a)的结果比对及偏差评估

目的通过两种方法检测血清Lp（a）浓度的对比分析，探讨不同检测方法之间血清Lp（a）结果的偏倚。方法依据美国临床实验室标准化委员会EP9-A文件要求，每天留取患者新鲜血清8份，分别用免疫透射比浊法和胶乳增强免疫比浊法测定血清Lp（a）浓度，共测定5d，记录检验结果，对两种方法进行相关分析和偏倚估计。结果在进行患者新鲜血清样本Lp（a）测定时，通过直线相关回归分析r^2—0.96，〉0．95，表明两种方法相关性良好，测定结果的相对偏倚在线性范围内能被接受，其结果具有可比性，但胶乳增强免疫比浊法在线性、稳定性、灵敏度等方面比常规免疫比浊法好；在测定不同的质控品Lp（a）时，两种方法测定结果的相对偏倚可达40.0％以上。结论两种方法在测定血清样本Lp（a）时，测定结果的相对偏倚在线性范围内能被接受；在测定不同的质控品时，其相对偏倚随产品不同而不同，最大可达40．0％。     

血清葡萄糖氧化酶法新色原物的实验研究

目的以N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐(HDAOS)为新色原物,建立新的葡萄糖氧化酶(GOD)法检测血清葡萄糖。方法用HDAOS代替4-氯酚生成蓝色醌亚胺,测定波长为600 nm。采用本法、葡萄糖氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林-酚(GOD-PAP)法及高效液相色谱(HPLC)法同时测定脂血、溶血、黄疸及外观正常的血清各24份并比较结果,同时对本法进行方法学评价。结果在测定外观正常血清时,3种方法之间差异均无统计学意义(P>0.05);在测定脂血、溶血、黄疸血清时,本法葡萄糖测定结果与GOD-PAP法比较,差异有统计学意义(P<0.05);与HPLC法比较,差异无统计学意义(P>0.05)。本法批内、批间变异系数(CV)均<3.0%;与HPLC法呈良好相关性(r2=0.995 8);在5 min内均可达到反应终点;线性范围为0.20～28.00 mmol/L;血红蛋白<2.0 g/L、乳糜<2.2%、总胆红素<200μmol/L对本法的干扰误差<3%;参考范围为4.10～6.20 mmol/L(男)、4.04～6.15 mmol/L(女);最大吸收波长为595 nm。结论以HDAOS代替4-氯酚生成蓝色醌亚胺,能通过降低脂血、溶血、黄疸光谱吸收的方法消除脂血、溶血和黄疸的干扰,提高GOD法测定葡萄糖的准确性,其使用方法与原有GOD终点法相同。     

两种检测方法测定C反应蛋白的比较

目的评估速率散射比浊法和免疫透射比浊法检测C反应蛋白(CRP)的分析性能。方法分别采用速率散射比浊法(美国Siemens Healthcare Diagnostica公司BN-Ⅱ特定蛋白仪)和免疫透射比浊法(芬兰OrionDiagnostica公司CRP快速检测仪)对CRP进行测定,方法学评价指标为精密度、线性范围、抗干扰性、相关性及偏倚。结果 CRP浓度为2.0～80.0 mg/L时,BN-Ⅱ特定蛋白仪总变异系数(CV)<6%;CRP浓度为8.0～80.0 mg/L时,CRP快速检测仪总CV<7%;检测线性范围为8.0～70.0 mg/L。血红蛋白(Hb)<10 g/L、胆红素(Bil)<300 mg/L对2种方法检测干扰<10%,在可接受范围内。甘油三酯(TG)<20 mmoL/L时BN-Ⅱ特定蛋白仪不受影响(干扰<10%)。CRP快速检测仪在TG>15 mmol/L时低值血清干扰>10%,高值血清不受干扰。50份血样相关分析的结果显示2台仪器测定结果的相关性良好(r=0.98,P<0.01)。线性回归分析经Cusum检验显示2台仪器间偏倚差异无统计学意义(P>0.05),BN-Ⅱ特定蛋白仪测定结果较CRP快速检测仪结果偏低,Bland-Altman曲线显示2种方法的平均偏倚为-2.1。结论速率散射比浊法和免疫透射比浊法的精密度、抗干扰性、线性范围符合要求。虽然系统间测定结果存在一定偏倚,但也符合临床检测要求。     

酮胺氧化酶法测定糖化白蛋白的评价

目的对酮胺氧化酶法测定糖化白蛋白（GA）进行方法学评价。方法分析及评价Lucica GA-L试剂盒的精密度、稀释线性、回收率、干扰因素以及试剂稳定性。比较GA与糖化血红蛋白（HbA1c）的相关性,GA与果糖胺（GSP,NBT法）的相关性。比较溴甲酚绿法（BCG）和溴甲酚紫法（BCP）测定白蛋白的相关性。结果该试剂精密度高,批内CV〈1.4%,批间CV〈2.4%;稀释线性良好;GA的平均回收率为96.74%,ALB的平均回收率为96.73%;葡萄糖、乳糜、胆红素对酶法检测GA无明显干扰,但是血红蛋白浓度在1.82 g/L以上时,对结果的影响超过10%。试剂可稳定4周以上。GA与HbA1c相关性良好（r=0.8940,P〈0.001）。BCG法测定白蛋白的值（-x±s,37.1±8.4 g/L）较BCP法（-x±s,33.3±10.0 g/L）高,二者相关性良好（r=0.9908,P〈0.001）。当ALB〉30 g/L时,GA与GSP相关良好（r=0.8474,P〈0.001）;当ALB〈30 g/L时,GA与GSP相关性差（r=0.5697,P〈0.05）。结论该方法分析性能良好,能定量分析糖化白蛋白,并计算其与白蛋白的比值,受到的影响因素较少,能较好的监测短期内平均血糖水平。     

HPLC法测定血清甲氨蝶呤浓度的方法建立及其与荧光偏振法的比较

目的建立测定血清甲氨蝶呤（MTX）浓度的高效液相色谱（HPLC）法,并与荧光偏振法（FPIA）作比较,评价其临床实用性。方法血清样本经20%高氯酸沉淀蛋白质,吸取上清液进行HPLC分析。以MTX标准品外标法建立标准曲线,检测62例用药后患者血清MTX浓度,同时以FPIA测定。结果 HPLC法在0.049~25 ng/L内线性关系良好,日内及日间相对标准偏差（RSD）均〈6%,最低检测浓度为0.025 ng/L。HPLC法和FPIA具有良好的相关性（r=0.973,P〈0.01）,2种方法测定值的差异无统计学意义（P=0.705）。结论 HPLC法具有便捷、准确、成本低等特点,与FPIA相关性良好,适用于临床MTX的血药浓度监测。     

酶转换法检测同型半胱氨酸的评价及其对冠心病的早期诊断价值

目的探讨酶转换法检测同型半胱氨酸(Hcy)的意义及其对冠心病的诊断价值。方法对酶转换法检测Hcy的精密度、线性试验、干扰试验、回收试验、灵敏度进行方法学评价,并与高效液相色谱法(HPLC)进行对比。采用酶转换法检测60例冠心病患者、54例血脂和血糖水平正常但有动脉粥样硬化疾病家族史的患者(患者对照组)及55名健康对照者的血浆Hcy,同时检测血糖(Glu)、总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)水平。结果酶转换法检测Hcy的批内不精密度(CV)分别为1.98%、2.34%;批间CV分别为2.13%、1.87%;日间CV分别为2.47%、1.33%;总CV分别为3.85%、2.41%。在2～80μmol/L范围内有良好的线性关系(r2=0.9874);TG<20 mmol/L、总胆红素(TBil)<300μmol/L、血红蛋白(Hb)<10 g/L对酶转换法检测Hcy无明显干扰(P均>0.05);回收率为98.9%～102.4%;分析灵敏度为0.27μmol/L。对2种方法进行直线回归分析,酶转换法与HPLC相关性较好(r=0.935 2),2种方法的结果差异无统计学意义(P>0.05)。Hcy与Glu、TG呈正相关(r分别为0.447、0.416,P<0.01),与TC无相关性(r=0.146,P>0.05)。冠心病组、患者对照组血浆Hcy水平均明显高于正常对照组(P均<0.01)。冠心病组TG、Glu水平高于患者对照组及正常对照组(P均<0.01)。结论酶转换法具有精密度良好、灵敏度较高、线性范围较宽、抗干扰能力强、结果准确等特点,适合基层临床实验室推广。血浆Hcy水平升高对于冠心病具有重要价值。     

总胆红素氧化酶法检测系统的性能评价

目的评价氧化酶法测定血清总胆红素（TBil）的性能。方法用氧化酶法测定血清TBil,探讨氧化酶法的精密度、线性、分析灵敏度、抗干扰性和回收率,并与改良J-G法进行比较。结果 TBil的高、低浓度样本批内CV分别为0.38%、0.78%,日间CV分别为1.78%、2.73%;平均回收率为101.2%;分析灵敏度为1.23μmol/L;线性范围为1.23～574.40μmol/L;2种方法相关性良好,直线回归方程为Y=1.105X-1.11,r=0.998。血红蛋白、维生素C和脂肪乳分别为4.8 g/L、500 mg/L和5%时对氧化酶法测定血清TBil不产生干扰。结论氧化酶法具有良好的精密度、线性范围和抗干扰能力,与改良J-G法具有很好的一致性,适用于临床常规检测。     

血清肌酐二步酶法检测新技术研究

目的探讨二步酶法测定肌酐的实验方法。方法以肌酐酰氨基水解酶为试剂Ⅱ,以N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐(HDAOS)和4-氨基安替比林(4-AAP)色原物作为试剂Ⅰ,建立二步酶法测定血清肌酐。通过内空白法消除内源性肌酸和改变光谱吸收方法消除脂血、溶血、黄疸干扰。采用二步酶法测定36例患者血清肌酐,并与高效液相色谱(HPLC)法和一步酶法比较;同时测定200名健康体检者血清肌酐,以建立参考范围。结果患者组肌酐二步酶法结果[(84.2±26.6)μmol/L]明显低于一步酶法[(116.6±29.6)μmol/L,t=32.12,P<0.01];与HPLC法测定结果[(83.9±26.8)μmol/L]差异无统计学意义(t=0.541 6,P>0.05),且呈良好相关性(Y二步酶法=1.042XHPLC法-0.182 1,r2=0.982 4)。二步酶法测定血清肌酐的线性范围达4 500μmol/L,平均回收率为100.8%,批内和批间变异系数(CV)分别为2.91%～4.20%和3.20%～4.60%,应用二步酶法每天测定室内质控定值血清[低(78.0μmol/L)、中(206.0μmol/L)、高(900.0μmol/L)],共测定180 d,其日间总CV分别为4.46%、5.27%、7.24%。二步酶法试剂至少能稳定180 d。健康人群血清肌酐的参考范围男性为56～132μmol/L,女性为41～109μmol/L。结论以肌酐酰氨基水解酶为试剂Ⅱ和以HDAOS、4-AAP为色原物(试剂Ⅰ)的二步酶法可以消除肌酸和脂血、溶血、黄疸血的干扰,可用于临床肌酐常规测定。     

高压液相色谱检测糖尿病患者尿白蛋白的应用

目的探讨高效液相色谱法（HPLC）测定糖尿病（DM）患者尿白蛋白的应用。方法收集85例DM患者及40名健康体检者（正常对照组）尿液,分别用HPLC和免疫比浊法检测尿白蛋白,并将检测结果使用回归和Bland—Ahman进行一致性分析。结果HPLC线性方程为Y=2．9482X＋38．601,r2=0．9944;标准品和样本的保留时间（RT）均为2．42min;尿白蛋白浓度为40．1和152．6mg／L的样本其批内和批间变异系数（CV）分别为4．1％、4．8％和5．6％、6．5％;最低检测限为2mg／L。DM组尿白蛋白HPLC结果为2t．0（3．4～678．9）mg／L,高于免疫比浊法[8．2（2．0—442．2）mg／L]（P〈0．01）,但偏高的倍数不一致（1．3～6．1倍）;但正常对照组2种方法测定结果差异无统计学意义（P〉0．05）。将2种方法的测定结果用回归分析和Bland—Ahman进行一致性分析,显示2种方法的一致性较差。85例DM患者中用HPLC和免疫比浊法检测达到微量蛋白尿诊断标准[尿白蛋白排泄率（AER）〉30mg／24h]的阳性例数分别为48例（56．5％）和27例（31．8％）。结论HPLC能检测尿中的包括免疫性和非免疫性的总的尿白蛋白,与免疫比浊法相比更能早期检出尿白蛋白。     

钒酸氧化法测定血清胆红素的实验评价

目的对钒酸氧化法测定血清胆红素进行方法学评价。方法收集40例高、中、低浓度的血清样本进行钒酸氧化法与重氮法的比对，分析钒酸氧化法的精密度、灵敏度、稳定性并做干扰实验。结果钒酸氧化法测定血清总胆红素（TBil）批内变异系数（CV）为1．58％，批间CV为2．94％；血清直接胆红素（DBil）批内CV为1．23％，批间CV为2．7％；平均回收率TBil为101．1％，DBil为100．1％。维生素C（Vit C）≤0．5g/L时对钒酸氧化法和重氮法均无干扰，三酰甘油≤6mmol／L时对钒酸氧化法无干扰，对重氮法有明显干扰。血红蛋白浓度≤8g/L时对钒酸氧化法无干扰，对重氮法有较大干扰。结论钒酸氧化法测定TBil和DBil是较理想的方法。