胃癌及癌前病变组织中端粒酶RNA表达及其临床意义

目的 探讨胃癌及癌前病变胃粘膜端粒酶RNA与端粒酶活性检测及临床意义。方法 分别采用原位逆转录－PCR、端粒重复序列扩增法（TRAP）检测114例胃粘膜组织标本端粒酶RNA与端粒酶活性,其中包括慢性浅表性胃炎（CSG）32例、不典型增生（AH）34例、胃癌（GC）48例。结果 原位逆转录－PCR检测胃粘膜活检标本的端粒酶RNA阳性率为57．9％（66／114）,显著高于TRAP法检测端粒酶活性检出率（44．7％,51／114,P＜0．05）。在不同胃粘膜病变中,AH及GC组的端粒酶RNA阳性率分别为52．9％、100％,而CSG组胃粘膜中未检出端粒酶RNA;AH及GC组的胃粘膜端粒酶RNA阳性率分别显著高于CSG（P＜0．05）,而GC组端粒酶RNA阳性率亦明显高于AH组（P＜0．05）。端粒酶RNA主要分布于胃粘膜癌细胞及癌前病变上皮细胞的胞核内。结论 端粒酶RNA表达与胃癌的发生密切相关。原位逆转录－PCR检测胃粘膜端粒酶RNA可能是较端粒酶活性更灵敏的生物学指标,对胃粘膜癌变的预测和早期诊断有重要价值。     

胃癌组织中端粒酶活性的研究及其临床意义

目的检测胃癌组织及癌旁非癌组织中端粒酶活性的表达,探讨端粒酶活性与各临床病理因素之间的关系.方法采用PCR-ELISA(聚合酶链反应-酶联免疫反应)方法,定量检测68例胃癌组织及40例癌旁非癌组织中端粒酶活性表达.分别按计数和计量资料统计.结果68例胃癌组织中,60例端粒酶活性表达(88.24%),而40例癌旁非癌组织中,6例端粒酶低活性表达(15%),两组差异极显著(P＜0.01).胃癌组织中端粒酶活性表达与淋巴结的转移呈正相关(χ2＝4.87u＝2.01P＜0.05);与组织分化呈负相关(χ2＝4.34u＝2.17P＜0.05);与其他临床病理因素统计学无明显相关性.结论端粒酶的激活与胃癌的发生发展关系密切,端粒酶活性的检测有可能成为临床胃癌诊断的辅助方法,且可能具有一定的指导术式及预后评估的意义.定量检测端粒酶活性可能更有利于揭示其在恶性肿瘤中的角色.     

诱捕受体3在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨诱捕受体3（DcR3）基因在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理特征之间的关系。方法采用PT—PCR方法检测41例胃癌组织和41例癌旁正常组织中DcR3的表达，分析其与多种临床病理特征之间的关系。结果41例胃癌组织中DcR3阳性表达率为56％（23／41）。41例癌旁正常胃组织中发现3例DcR3的阳性表达。癌组织DcR3mRNA的表达水平明显高于正常胃黏膜组织（P〈0．01）。DcR3的表达与胃癌的分化程度（X）、淋巴结转移（X2）及TNM分期（X3）显著相关，与患者肿瘤部位及浸润深度等无相关性（P〉0．10）。其多元化线性回归方程为Y=0．432—0．208X1＋0．098X2＋0．086X3。结论DcR3在胃癌组织中具有较高的表达率，其异常表达可促进胃癌的发生、发展。DcR3的基因检测可作为判断胃癌分化、浸润、转移、分期的重要参考指标。     

胃癌组织中IL-8基因的表达及临床意义

目的　探讨趋化因子IL 8与胃癌的浸润深度、转移能力和临床分期的关系。方法　采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)半定量的方法 ,检测IL 8mRNA在胃癌组织及其相应的正常胃粘膜组织和转移淋巴结中的表达。结果　 2 9例胃癌组织和2 0例转移淋巴结中 ,分别有 2 6例 (89.7% )和 17例 (85 .0 % )IL 8mRNA的表达较相应正常胃粘膜组织强 ;IL 8在胃癌组织中的表达与胃癌TNM分期有关 (P <0 .0 1) ,与肿瘤浸润深度呈正相关 (γ =0 .5 6,P <0 .0 1) ,IL 8基因在转移淋巴结中的表达与肿瘤浸润深度也呈正相关 (γ =0 .5 2 ,P <0 .0 1)。结论　IL 8mRNA的高表达与胃癌的浸润深度、临床分期相关 ,可能成为胃癌生物学恶性行为及判断淋巴结转移的新的标志物     

FAF1 mRNA在人胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:分析FAF1mRNA的表达水平与胃癌临床指标的关系.方法:用荧光实时定量聚合酶链反应(Real time PCR)技术定量检测40例胃癌患者癌组织、癌旁组织及正常组织中FAF1mRNA的表达情况.结果:FAF1mRNA在癌组织中的表达水平(0.27±0.12)明显低于癌旁(0.40±0.06)和正常组织(0.48±0.08)(P＜0.01).FAF1mRNA在胃癌中的表达水平与癌细胞分化程度、远处转移有关,而与年龄、性别、浸润深度、临床分期、有无淋巴结转移及肿瘤大小无关.结论:FAF1可能与胃癌的发生与发展有关.FAF1异常表达在胃癌细胞分化过程中可能发挥重要作用.     

胃癌组织Survivin基因上调对Caspase-3表达影响的相关性研究

目的:分析胃癌组织中Survivin过表达对Caspase-3表达的影响及其与临床病理特征相关性.方法:采用RT-PCR法检测Survivin和Caspase-3 mRNA在79例胃癌及30例癌旁正常组织中的表达,分析Survivin和Caspase-3 mRNA表达与胃癌临床病理因素之间的关系.结果:Survivin和Caspase-3 mRNA在胃癌组织中阳性率分别为46.8%(37/79)和29.1%(23/79),癌旁正常组织中分别为16.7%(5/30)和53.3%(16/30),差异均有统计学意义,P<0.01.Survivin mRNA表达与组织学分型、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期显著相关,Caspase-3 mRNA表达与浸润深度、淋巴结转移及TNM分期显著相关,差异均有统计学意义,P<0.05;Survivin和Caspase-3 mRNA在胃癌组织中表达呈负相关,P<0.01.结论:Survivin表达与胃癌的发生发展密切相关,Survivin的表达上调可能通过抑制Caspase-3促进胃癌的演进.     

FAF1 mRNA在人胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:分析FAF1 mRNA的表达水平与胃癌临床指标的关系。方法:用荧光实时定量聚合酶链反应(Real time PCR)技术定量检测40例胃癌患者癌组织、癌旁组织及正常组织中FAF1 mRNA的表达情况。结果:FAF1 mRNA在癌组织中的表达水平(0.27±0.12)明显低于癌旁(0.40±0.06)和正常组织(0.48±0.08)(P<0.01)。FAF1 mRNA在胃癌中的表达水平与癌细胞分化程度、远处转移有关,而与年龄、性别、浸润深度、临床分期、有无淋巴结转移及肿瘤大小无关。结论:FAF1可能与胃癌的发生与发展有关。FAF1异常表达在胃癌细胞分化过程中可能发挥重要作用。     

基质金属蛋白酶-7mRNA在胃癌组织中表达的研究

目的 :检测基质金属蛋白酶 -7(MMP 7)基因在胃癌组织及癌旁组织中的表达 ,探讨MMP 7在胃癌发生发展中的作用。方法 :应用逆转录—聚合酶链反应 (RT PCR)检测胃癌组织及相应癌旁组织中MMP 7基因的表达。结果 :3 0例胃癌组织中有 2 3例表达MMP 7基因 ,阳性率为 76 7% ,相应的 3 0例癌旁组织均未检测到MMP 7基因表达。统计学分析表明 ,MMP 7基因在胃癌组织和癌旁组织中的表达差异有统计学意义 ,χ2 =3 7 2 97,P <0 0 0 1。结论 :胃癌组织中MMP 7基因具有高表达率 ,且表达具有高度肿瘤特异性 ,提示MMP 7在胃癌的生长和侵袭转移过程中有非常重要的作用     

人端粒酶逆转录酶mRNA在胃癌组织中的定量表达及其与胃癌预后的关系

目的 探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA在胃癌组织中的表达,及其与胃癌生物学行为和根治术后患者预后的关系.方法 应用荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测89例胃癌根治性切除术后患者的肿瘤组织和阴性切缘组织中hTERT mRNA的表达量,对hTERT mRNA表达量与患者的临床病理参数(年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、病理类型、组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移情况、pTNM分期及生存期)进行单因素分析,采用Cox模型进行胃癌患者生存的多因素分析.结果 hTERT mRNA在阴性切缘组织中的表达量为11.37±2.15,在胃癌组织中的表达量为16.98±3.56,差异有统计学意义(P<0.05).胃癌组织中hTERT mRNA的表达量与组织学分级、浸润深度、pTNM分期及淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与胃癌患者的生存期呈负相关(P<0.01).结论 胃癌组织中hTERT mRNA高表达表明胃癌恶性程度较高且病期较晚,检测胃癌组织中hTERTmRNA的表达水平有助于对胃癌患者的预后做出更准确的判断.胃癌组织中hTERT mRNA的表达量、肿瘤浸润深度和pTNM分期是影响胃癌患者预后的重要因素.

Abstract：

Objective By quantitative detection of telomerase expression, we investigated the relationship between telomerase expression and malignant behavior and prognosis in gastric carcinoma.Methods A real-time quantitative RT-PCR (RQ-PCR) was used to quantify the hTERT mRNA copy numbers in 89 samples of gastric carcinoma and corresponding non-cancerous tissues.The clinicopathological data of enrolled patients such as age, sex, tumor size, tumor site, pathologic type, histodifferentiation,infiltration depth, lymph node metastasis, stage and survival were obtained, and were made one factor analysis of variance and COX regression prognostic analysis with those above mentioned markers.Follow-up was completed as of February 28, 2010.The median follow-up was 24 months.Results hTERT from gastric carcinomas and corresponding non-cancerous tissues was 16.98 ± 3.56 and 11.37 ± 2.15, respectively (P<0.05 ),the telomerase activity in gastric cancer was significantly higher than that in non-cancerous tissue ( P < O.05 ).Telomerase activity showed a positive correlation with depth of invasion, tumor differentiation and nodal metastasis ( P < 0.01 ), and negative correlation with survival.Conclusions Gastric cancer with high hTERT mRNA expression indicates a more malignant potential.Detection of hTERT mRNA in gastric cancer may be useful in a better understanding of invasion, metastasis, as well as prognosis of gastric cancer and provide a more efficient therapy.The quantitative expression of hTERT mRNA, infiltration depth and pTNM stage are significant afactors affecting the prognosis of patients with gastric carcinoma.     

胃癌组织Id-1和VEGF表达及其临床意义的探讨

目的:研究分化抑制因子-1(Id-1)和血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理学指标间的关系,探讨其临床病理意义.方法:应用免疫组化SP法检测60例胃癌组织、60例癌旁组织及30例正常胃黏膜中Id-1和VEGF的表达.结果:胃癌组织、癌旁组织和正常胃黏膜组织的Id-1阳性表达率分别为73.3%(44/60)、21.7%(13/60)和6.7%(2/30);VEGF阳性表达率分别为78.3%(47/60)、28.3%(17/60)和13.3%(4/30).在胃癌不同分化程度、TNM分期和有无淋巴结转移,Id-1和VEGF表达有统计学意义,P＜0.05;而与年龄、性别差异无统计学意义,P＞0.05.结论:Id-1和VEGF的表达增多与胃癌的发生发展存在着密切的关系,胃癌组织中Id-1高表达可能是通过VEGF途径来实现对肿瘤血管生成起促进作用.     

凋亡抑制基因Livin在人胃癌组织中的表达及临床意义

目的研究凋亡抑制基因Livin在人胃癌组织中的表达及其与组织分化程度、淋巴结转移等临床病理参数之间的关系。方法应用RT-PCR方法检测Livinα和Livinβ mRNA表达水平,卡方检验分析两组之间表达水平差异。将胃癌临床病理参数与表达水平进行等级相关分析和检验,探讨二者之间的相关性。结果 40例胃癌患者中,Livin表达阳性率52.5%,且Livinα和Livinβ两种异构体均见表达。20例正常胃组织中均未见Livin mRNA表达,阳性率0%（P〈0.05）。Livin的表达与胃癌的分化程度以及是否有淋巴结转移之间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。相关性分析示Livin的表达与胃癌的浸润深度、TNM分期之间呈正相关,但Livin的表达差异无统计学意义（P〉0.05）。Livin的表达与年龄、性别、胃癌的生长部位差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论 Livin在胃癌组织中特异性的表达,可能作为胃癌免疫及基因治疗的一个有效靶点。     

金属蛋白酶抑制剂在喉鳞癌中的mRNA表达及意义

目的探讨TIMP-1和TIMP-2在喉鳞癌中的mRNA表达及其与颈淋巴结转移的关系。方法应用RT-PCR方法检测35例喉鳞癌组织及相应的癌旁非癌组织中TIMP-1和TIMP-2的表达,并观察其表达水平与喉鳞癌淋巴结转移的关系。结果TIMP-1和TIMP-2在喉鳞癌中表达阳性率为74.3%和68.6%,分别高于癌旁非癌组织中表达阳性率5.7%和11.4%(P<0.01)。TIMP-1和TIMP-2的mRNA表达与喉鳞癌淋巴结转移呈明显负相关(P<0.05)。结论TIMP-1和TIMP-2随喉鳞癌进展表达下降,人工上调其表达可能成为喉鳞癌生物学治疗的有效方法。     

胃癌中抑癌基因Kruppel样因子6 mRNA与蛋白的表达及其意义

目的 研究Kruppel样因子6（KLF6）基因表达与胃癌发生、发展的关系.方法 采用免疫组织化学（SP法）与反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）对73例胃癌及癌旁组织的KLF6蛋白与mRNA表达进行检测,分析KLF6表达与临床病理因素间的关系.结果 KLF6蛋白在胃癌及癌旁组织中的表达率分别为39.7％（29/73）、90.4％（66/73） （P＜0.01）,在低、高-中分化癌组织中的表达率分别为25.0％（10/40）、57.6％（19/33）（P＜0.01）.KLF6mRNA在胃癌及癌旁组织中表达水平（与GAPDH吸光度比值）分别为0.1586±0.1071、0.8899±0.0638 （P＜0.01）.结论 KLF6蛋白与mRNA在胃癌组织中呈低表达,且在低分化胃癌中低于高-中分化胃癌,表明KLF6与胃癌的发生、发展及分化关系密切,可作为判断胃癌生物学行为的重要指标.     

miR-421在胃癌中的表达及对BGC-823细胞增殖的作用

目的探讨miR-421在胃癌细胞中的表达水平及对BGC-823胃癌细胞增殖的作用。方法利用PCR方法分析miR-421在胃癌组织细胞及多种胃癌细胞株中的表达水平,并通过RNA转染技术将miR-421 mimics与miR-421 inhibitors转染BGC-823胃癌细胞;通过CKK-8试剂盒检测转染后BGC-823细胞的增殖情况。结果 miR-421在胃癌组织细胞及多种胃癌细胞株中均表达增强（P〈0.05）;miR-421 mimics转染BGC-823后,癌细胞增殖能力增强（P〈0.05）,而miR-421 inhibitors转染的BGC-823细胞则增殖力受到明显抑制（P〈0.05）。结论 miR-421在胃癌组织细胞及多种胃癌细胞株中均过表达,而miR-421可能直接或间接参与调控BGC-823胃癌细胞的增殖。     

胃癌基质金属蛋白酶7基因表达及与病理特点关系

[目的]探讨基质金属蛋白酶7(MMP-7)基因在胃癌中的表达及与胃癌病理特点的关系.[方法]用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测MMP-7 mRNA在45例胃癌中的表达,并与相应的病理特点进行对照.[结果]随着胃癌分化程度的降低,MMP-7mRNA的表达逐渐升高(从高分化癌至未分化癌阳性率分别为57.1%、60.0%、90.9%、91.7%);随着癌细胞由黏膜层或黏膜下层向深部侵犯肌层和浆肌层时,MMP-7mRNA的表达阳性率大幅度提高(从黏膜层至浆膜外阳性率分别为25.0%、33.3%、84.6%、90.0%、91.7%);有淋巴管、淋巴结及静脉转移MMP-7mRNA表达的阳性率与无转移病例比较差异均有显著性(P＜0.01).[结论]MMP-7 mRNA可作为胃癌侵袭、转移、复发的标志物,对预后评估具有重要意义.     

PCR-SSCP分析法检测胃癌中p27基因突变

目的　对 5例早期胃癌组织和 32例进展期胃癌及其各自的正常胃粘膜组织 ,进行p2 7抑癌基因的突变检测。方法　应用聚合酶链式反应—单链构象多态性分析 (PCR SSCP)技术进行检测。结果　在早期胃癌组织中检出突变率为 2 0 .0 %( 1/5 ) ,在进展期胃癌组织中的突变率为 2 1.9%( 7/32 )。实验结果表明 ,p2 7基因在早期胃癌与进展期胃癌中均有较高突变频率 ,两者差异无显著性 ;p2 7基因突变在胃癌中与性别、年龄以及肿瘤的位置、组织分化程度、Borrmanm分期和有无淋巴结转移无关 ;p2 7基因外显子 1是该基因突变的集中区域 ,且以第 1-90密码子区域突变率最高 ,p2 7基因外显子 2突变率最低。结论　证实了p2 7基因突变发生于早期胃癌形成阶段 ,属于胃癌发生的早期事件。